Методические положения
МЕТОДИЧЕСКИЕ ПОЛОЖЕНИЯ ПО ПРИЖИЗНЕННОЙ ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНОЙ ДИАГНОСТИКЕ АСКАРИДОЗА У ОБЕЗЬЯН, ЧЕЛОВЕКА, КАБАНОВ И СВИНЕЙ, ВЫЗВАННЫХ Ascaris lumdricoides и A. suum (ПО МИКРОСТРУКТУРЕ ЯИЦ)
В.Е. ПАСЕЧНИК кандидат ветеринарных наук
Всероссийский научно-исследовательский институт гельминтологии им. К.И. Скрябина, 117218, г. Москва, ул. Б. Черемушкинская, д. 28, e-mail: vigis@,ncport. ru
(Одобрены секцией «Инвазионные болезни животных» Отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии 28 февраля 2013 г., протокол № 1)
Методические положения предназначены для научных работников, аспирантов, студентов ветеринарной, медицинской и биологической специализации, практических ветеринарных врачей вет. станций, рынков, зоопарков, цирков, заповедников и свиноводческих хозяйств.
Обоснование
Ascaris lumbricoides Linnaeus, 1758, вызывающий заболевание человека, обезьян и в ларвальной стадии свиней и Ascaris suum Goese,1782 - возбудитель аскаридоза кабанов и свиней и в ларвальной стадии человека, являются причиной серьёзной болезни - аскаридоза, а иногда могут приводить к их гибели.
Размеры яиц аскарид обоих видов не отличаются и составляют 0,050-0,075 мм.
По данным Мозгового (1953) у A. lumbricoides яйца овальные, желтого или коричневого цвета. Поверхность наружной оболочки яиц бугристая, по Котельникову (1984) у A. suum яйца овальные, покрыты толстой крупнобугристой скорлупой; внутри - округлая зародышевая клетка; окраска темно-коричневая или бурая.
Морфологические признаки структуры яиц, указанные выше, на практике и в научных целях при обнаружении других форм паразитов, крайне недостаточны для дифференциации видов.
В связи с этим нами разработана методика и дифференциальная таблица прижизненной диагностики по микроструктуре яиц аскарид от человека, кабанов и свиней до вида: A. lumbricoides и A. suum.
Оборудование
- Холодильник;
- Центрифуга лабораторная на 12 тыс. об./мин;
- Стаканчики в форме усечённого конуса с делениями на 30 мл;
- Фильтрационные ситечки с металлической или капроновой сеткой с диаметром ячеек 0,25-0,3 мм;
- Металлические петли с диаметром кольца 8-10 мм (при плотности раствора выше 1,5 используют петли с диаметром кольца 6 мм);
- Глазные пипетки; предметные стёкла; стеклянные палочки; покровные стёкла;
- Спиртовые или газовые горелки;
- Денсиметр для проверки плотности флотационного раствора;
- Микроскоп биологический (МБИ).
Растворы и реактивы
- Насыщенный раствор нитрата аммония плотностью 1,3;
123
- Раствор нитрата натрия плотностью 1,4;
- Раствор нитрата свинца плотностью 1,5;
- 98,5%-ный раствор глицерина плотностью 1,256;
- 40%-ный раствор молочной кислоты.
Ход работы
Яйца аскарид, выделенные из проб фекалий спонтанно заражённых людей, обезьян, кабанов или свиней любым из известных методов копроовоскопии петлёй переносят на предметное стекло и по родовым признакам ставят диагноз на аскаридоз. Затем яйца аскарид просветляют в 98,5%-ном растворе глицерина и 40%-ной молочной кислоте в соотношении 1 : 1, накрывают покровным стеклом и просматривают под микроскопом при увеличении х 600 и х 900 (под иммерсией), изучая их микроструктуру. Микроструктурные признаки яиц A. lumbricoides и A. suum показаны в таблице и на микрофотографиях.
Следует подчеркнуть, что яйца этих двух видов аскарид по результатам наших исследований имеют выраженные два варианта (формы)
микроструктуры, что и приведено далее в таблице.
Основные дифференциальные признаки аскарид от человека, обезьян,
кабанов и свиней по микроструктуре яиц
Признак яиц аскарид Ascaris lumbricoides Linnaeus, 1758 Ascaris suum Goese, 1782
1 вариант На одном полюсе А " Имеет стилет и обвитую крестообразнотрубчатой микроструктуру на верхушке полюса яйца: А, 1, 2 (оболочка), 3; Б (зародыш) (х 900) Им бу с в яеет крышечку с двумя горками на верхушке и ремя клыкообразными ыростами в базальной части (х 900)
124
На другом полюсе
Имеет конусообразно Имеет слегка заострённый
искривлённую с метал- полюс (х 600)
лическим блеском крышечку, обвитую концами микроструктуры до её верхушки в виде сухожилия (трубчатого строения), выходящей из второй оболочки с противоположного полюса (х 900)______________________________
Вторая
оболочка
На одной стороне стёртые бугорки (х 600), на другой -плоские, листьевидные бугорки
Невыраженная бугристость и густая волосовидная поверхность (х 600)
125
2 вариант
На одном полюсе
Крышечка имеет вид кисточки (рис., А), соединённой тонкой ножкой (3) с зародышем (Б), через раздвинутый просвет (1, 2) и приподнятый крючковидный затвор второй оболочки; в базальной части желтовато-белого цвета зубовидная пластинка (4) (х 900)
Отверстие не замкнуто на полюсе, роль пробочки выполняет оболочка (х 900); имеет три бугорка
Густо покрыт крупными бугорками (х 900)
Имеет стилет, напоминающий плодоножку (рис., А, х 600) с микроструктурой (Б, х 900), соединённый со второй плотной оболочкой
Вторая
оболочка
Д Е
Состоит из двух соединённых овалов; имеет на одной стороне бахромчатые края (Д, х 900), на другой - бугорки с выемкой (Е, х 600)
Имеет выраженную бугристость на второй оболочке и зародыше (х 600)
126