CC BY
7
Сопоставления чувствительности методов определения активности АХЭ для каждого показателя по критерию t (при P<z0,05) отчетливо выявляют преимущество колориметрического метода. Так, чувствительность колориметрического метода при определении активности АХЭ крови (см. таблицу) составила V270 LD50, а меланжерного метода — Vm LD60.
Таким образом, сравнительное определение активности АХЭ в крови свидетельствует о том, что эти методы выявляют различные качества холин-эстераз крови, плазмы и эритроцитов. При выборе теста и метода определения необходимо учитывать их чувствительность.
Выводы
1. Чувствительность колориметрического метода значительно выше чувствительности микроэкспресс-метода в меланжерах.
2. Показана возможность использования номограммы для расчета активности АХЭ эритроцитов.
3. Из исследованных показателей активности холинэстераз крови белых крыс наибольшей чувствительностью при интоксикации армином обладает АХЭ эритроцитов, наименьшей — АХЭ плазмы. Суммарный показатель (АХЭ крови) занимает промежуточное положение.
ЛИТЕРАТУРА. Голиков С. Н. Профилактика и терапия отравлений фосфорорганическими инсектицидами. М., 1968, с. 77. — Кривоглаз Б. А. Клиника и лечение интоксикаций ядохимикатами. Л., 1965, с. 32. — Покровский А. А. Воен.-мед. ж., 1960, № 1, с. 34. — С е п е т л и е в Д. Статистические методы в научных медицинских исследованиях. М., 1968. — Hestrin S., J. biol. ehem., 1949, v. 180, p. 249.
Поступила 5/VIII 1974 г.
УДК 613.63-07: [б 16. Зв+в16.331-091.8-076.5
Канд. мед. наук Т. А. Кочеткова, Г. Я- Караулова
МЕТОД КОЛИЧЕСТВЕННОЙ ОЦЕНКИ ГЕПАТОЦИТОВ И ОБКЛАДОЧНЫХ КЛЕТОК ЖЕЛУДКА ПРИ ГИГИЕНИЧЕСКОМ НОРМИРОВАНИИ НЕКОТОРЫХ ВЕЩЕСТВ
Московский научно-исследовательский институт гигиены им. Ф. Ф. Эрисмана
Изучение морфо-функциональных и патологических изменений в органах при гигиеническом нормировании различных веществ неизбежно вызывает необходимость измерения размеров, площадей и объема различных тканевых структур. Измерение и подсчет количества клеточных элементов в структуре органа не только уточняют и дополняют наши знания о нем, но, кроме того, с новых позиций освещают связь между его структурой и функцией, приобретают особое значение при гигиеническом подходе к решению вопросов, касающихся характера, силы, длительности воздействия различных факторов производственной среды и окружающей человека атмосферы для обоснованного нормирования этих факторов. Поэтому количественное определение структурных элементов организма (органов, тканей) очень важно в патологии, так как помогает подойти к нахождению или выявлению определенных критических уровней компенсации функции исследуемых биологических систем.
Целью морфометрических измерений срезов ткани печени и срезов из области дна желудка контрольных и подопытных крыс-самцов разного возраста являлась выработка единых методических подходов к количественной морфо-функциональной оценке состояния этих органов и их реактивности, в частности по содержанию двухъядерных гепатоцитов печени, отражающих в какой-то степени и реактивность всего организма.
Из литературы известно, что средний размер ядер гепатоцитов с возрастом изменяется от 2,5 до 4 мкм, причем эти изменения носят волнообразный характер; минимальный средний размер и максимальная плотность гепатоцитов наблюдаются у крыс в возрасте 6 мес.
Нами исследовано количество двухъя-дерных гепатоцитов у растущих крыс (контрольных) в сравнении с подопытными животными того же возраста, подвергавшимися воздействию стирола (опыты И. Крас-никовой). Кроме того, определено влияние на содержание обкладочных клеток желудка водных вытяжек, полученных после выдержки пленок фторопласта-4 и кремнийорганического лака К-55 в воде при температуре от 70 до 100° (опыты Р. С. Хамидулина). Для получения объективных количественных материалов проведен подсчет количества двухъядерных гепатоцитов в срезах ткани печени и обкладочных клеток в срезах из области дна желудка с последующей статистической обработкой полученных данных.
Кусочки печени и желудка, взятые для гистологического исследования, фиксировали 10—12 % раствором формалина. Кусочки органов после фиксации подвергали синхронной резке на замораживающем микротоме. Толщина срезов составляла 5—8 мкм. Срезы окрашивали гематоксилином, эозином и Суданом III. С целью морфологической характеристики изменений в срезах производили их просмотр с помощью светового микроскопа при 15-кратном увеличении окуляра и 8- и 40-кратном увеличении объективов. После общего просмотра и морфологического описания состояния клеток срезы органов просматривали повторно в световом микроскопе. При 600-кратном увеличении в 10 полях зрения подсчитывали количество двухъядерных гепатоцитов среза печени, а количество обкладочных клеток в срезах из области дна желудка подсчитывали в 5 полях зрения каждого из 25 срезов.
Число клеток, найденных в каждом из полей зрения, подвергали статистической обработке.
Изменение среднего количества двухъядерных гепатоцитов в печени растущих крыс-самцов (контрольные) и после воздействия стирола (подопытные животные) показано на рисунке. Как видно, кривая снижения реактивности печени подопытных и контрольных животных имеет однонаправленный характер, но проходит на значительно более низких уровнях.
Показательна зависимость реактивности печени и у животных, подвергавшихся действию бензола в концентрациях 2 и 5 мг/кг. Если у контрольных животных средняя величина (Ai) равна 3,4, а у подопытных животных, на которых воздействовали бензолом в концентрации 2 мг/кг, она составляла 3, то при действии бензола в концентрации 5 мг/кг средняя величина (М) равна 6,6, иначе говоря, реактивность печени возрастала почти в 2 раза.
Следовательно, примененный нами метод количественного изучения состояния гепатоцитов печени и обкладочных клеток желудка со статистической обработкой полученного материала позволяет рекомендовать его для характеристики состояния любого органа в условиях воздействия на организм факторов внешней среды малой интенсивности.
Поступила 13/VII 1974 г.
м
201
п\_I_I_I_1_и_I_1_I_1_I_I_)_
1 2 3 4 5 6 7 9 9 ЮН Мисс
Среднее количество (М) двухъядерных гепатоцитов в печени контрольных (I) и подопытных (2) крыс.
