6. Калашников, В.В., Храброва JI.A., Зайцев А.М. и др. Изучение полиморфизма сателлитной ДНК лошадей заводских и местных пород // Доклады РАСХН. - 2010. - № 6. - С. 48-50.
7. Храброва JI.A. Мониторинг генетической структуры пород в коневодстве // Доклады РАСХН. - 2008. -№3. - С.42-44.
8. Храброва JI.A., Блохина Н.В., Устьянцева АВ. Инбридинг и степень гомозиготности микросателлитных локусов у лошадей орловской рысистой породы // Сельскохозяйственная биология. -2014.-№4.-С.35-41. '
9. Храброва JI.A. Стратегия использования генетических маркеров и геномной селекции в коневодстве. -Дивово, 2015.-81 с.
10. Nicolas F.W., Hobbs М. Mutation discovery for Mendelian traits in non-laboratory animals: a review of achievements up to 2012 / F.W Nicolas., // Animal Genetics. - 2014. - Vol. 45. - N 2. -P.157-170.
УДК 636.393.9 Канд. биол. наук В.Б. ЛЕЙБОВА
(ВНИИГРЖ, leibl406(o!yandex.ru) Доктор с.-х. наук И.Ш. ШАПИЕВ (СПбГАУ, shapievism®)bk.rii) Доктор биол. наук Н.В. ХАЙЦЕВ (СПбГП МУ, nvhl95725(S)gmail.com)
МЕТАБОЛИЧЕСКОЕ СОСТОЯНИЕ У КОЗ ЗААНЕНСКОЙ ПОРОДЫ В ПЕРВУЮ ТРЕТЬ СУКОЗНОСТИ
Козы, первая треть беременности, критический период, адаптация
Отраслевая целевая программа «Развитие овцеводства и козоводства в Российской Федерации на плановый период до 2020 года» предполагает увеличение поголовья коз до 2,6 млн. гол. Из них молочных - до 1,4 млн. гол. Для реализации намеченной цели необходима разработка современных технологий воспроизводства коз на основе знаний биологии, в частности, особенностей биохимических процессов, сопровождающих внутриутробное развитие у коз.
Известно, что одной из актуальных проблем высокопродуктивного молочного скотоводства является способность адаптироваться к изменениям, происходящим в организме животных во время беременности [1,2]. Все этапы репродуктивной функции обусловлены как генетически наследуемыми причинами, так и влиянием внешней среды, и обеспечивают для каждого периода свой уровень обменных процессов. Однако адаптационные процессы, позволяющие поддерживать состояние метаболического гомеостаза в организме высокопродуктивных коз зааненской породы в период сукозности, изучены недостаточно, что вызывает затруднения при анализе причин, приводящих к эмбриональной смертности, абортам и появлению нежизнеспособного потомства. По данным исследований, проводимых в течение 8 лет ветеринарными диагностическими лабораториями Калифорнии [3], инфекционное начало как причина абортов у коз было обнаружено в 37% случаев, ещё у 4% абортированных животных предполагалось присутствие бактериального агента. Нарушение минерального обмена и аномалии развития плода составляли 4% и 6% соответственно, в 49% случаев аборта причина не была установлена. Всё это дает основания полагать, что изменение состояния обмена веществ у высокоудойных коз может быть фактором, негативно влияющим на поддержание беременности. В этой связи определялись биохимические показатели крови, которыми обычно пользуются в хозяйствах для контроля кормления и состояния здоровья животных. Динамика этих показателей позволяет судить о течении обменных процессов в период беременности и выявить критические моменты, при которых стрессовые ситуации любой этиологии могут спровоцировать функциональные срывы, проявляющиеся различными видами акушерской патологии.
Исследования проводили в ЗАО ПЗ «Приневское» Ленинградской области в зимний период. Объектом исследования служили козы в возрасте 2-5 лет со среднегодовой продуктивностью 780 кг за 305 дней лактации. Кровь отбирали однократно через 10-56 дней после осеменения и спустя 3-4 часа после кормления. В пробах сыворотки крови определяли содержание белка и его фракций (альбумина и глобулина), глюкозы, мочевины, креатинина, холестерина, активность ферментов аспартатаминотрансферазы (ACT), аланинаминотрансферазы (АЛТ). гаммаглутамилтрансферазы (ГГТ) и креатинкиназы (КК), а также концентрацию прогестерона.
Биохимические показатели крови исследовали на автоматическом анализаторе RX Daytona при
использовании наборов реагентов фирм «DIALAB» и «Randox». Концентрацию прогестерона определяли на иммуноферментном анализаторе Stat Fax 2100 с использованием наборов фирмы
«Хема».
После рождения жизнеспособного потомства животные были разделены на группы согласно стадиям сукозности на момент взятия крови [4]: эмбриональный период (10-27 дней) - 3 гол., предплодный период (40-46 дней) - 7 гол. и первая половина раннеплодного периода (47-56 дней) - 5
Полученные данные обрабатывали методом дисперсионного анализа при помощи программы SigmaStat. Достоверность различия сравниваемых средних значений оценивали с помощью критерия Тьюки, при уровне значимости р<0,05. При вычислении корреляционных отношений использовали коэффициенты Пирсона.
Результаты проведенных исследований показали, что по мере увеличения срока беременности в крови животных произошли достоверные изменения содержания прогестерона, креатинина и активности ACT и КФК (табл.).
Таблица. Биохимические показатели крови коз в первую треть сукозности
Показатели Периоды сукозности
эмбриональный (Ю-24 да.) предплодный (40-46 да.) раннеплодный (49-56 да.)
Об. белок, г/л 76,6 ± 2,0 75,9 ±2,3 74,6 ± 1,4
Глюкоза, ммоль/л 3,16 ±0,46 3,41 ±0,13 3,32 ±0,13
Альбумин г/л 38, 6 ± 1,4 38,4 ± 1,9 37,4 ±2,2
Глобулины г/л 37,9 ±3,4 37,5 ±2,4 37,2 ± 1,8
Креатинин, мкмоль/л 64,3 ± 0,33а 77,7 ± 3,1ь 78,0 ± 1,9 е
Мочевина, ммоль/л 6,26 ± 0,72 7,14 ±0,29 6,81 ±0,42
Холестерин, мкмоль/л 2,07 ±0,12 2,43 ±0,13 2,12 ±0,19
АСТ, ед./л 128 ±22,6" 85,9 ± 4,9 е 99,0 ± 13,6
АЛТ, ед./л 24, 0± 1,16 19,6 ±2,1 22,0 ± 2,2
АСТ/АЛТ 5,36 ±0,97 4,84 ± 0,80 4,55 ± 0,58
ГГТ, ед./л 39,7 ±5,8 47,3 ±3,2 44,8 ±3,5
КК, ед./л 198 ±25,8* 128 ±108 142 ± 12
Прогестерон, нг/мл 6,74 ±2,5411 14,3 ± 1,8' 15,6 ±3,9
Примечание. Достоверные различия между группами животных:
Креатинин а'Ьр<0,05; а<ср < 0,01;ЖТ4ер < 0,05; КФК^р < 0,05; Прогестерон ^р < 0,05.
Для млекопитающих период формирования плаценты принято считать критическим, то есть повышенно чувствительным как к регуляторным сигналам, так и к воздействиям внешней среды. В этот период происходит формирование системы «мать-плацента-плод». Результаты наших исследований показывают, что концентрация прогестерона в предплодный период увеличивается по сравнению с эмбриональным периодом в 2,1 раза (р<0,05). Наши исследования согласуются с данными Л.С. Малаховой [5], которая, наблюдая волнообразную изменчивость уровня содержания прогестерона в период беременности зааненских коз, отмечает пик концентрации прогестерона в первую треть беременности на 42-46 день.
Исследования показали, что наиболее значительные изменения биохимических параметров крови в первой трети беременности также происходят к 40-46 дню после осеменения, то есть в период окончания формирования плаценты.
Стоит отметить, что адаптивные возможности наблюдаемых животных позволили сохранять метаболический гомеостаз в отношении белкового, липидного и углеводного обменов, о чем свидетельствуют достоверно не изменившиеся показатели: уровни общего белка, альбуминов и глобулинов, глюкозы и холестерина крови (табл.).
Однако стоит указать на определенную напряженность в механизмах адаптации к исследуемому критическому периоду. Так, концентрация креатинина в предплодный и раннеплодный периоды повысилась по сравнению с эмбриональной стадией на 20,8% и 21,3% соответственно (р<0,05 и р<0,01). Активность КК, наоборот, снизилась в предплодный и раннеплодный периоды на 35,4% (р<0,05) и 28,3%.
В норме креатинин активно продуцируется в ходе работы мышечных волокон и выводится почками, поэтому определение его количества в крови имеет диагностическое значение, позволяющее выявить ряд патологий мышечной и мочевыводящей системы. Одной из физиологических причин повышения уровня креатинина в крови являются беременность и лактация. Вместе с мочевиной и прочими простыми, небелковыми соединениями азота креатинин формирует особый показатель - остаточный азот. В наших исследованиях отмечено небольшое увеличение содержания в крови мочевины на фоне достоверного повышения уровня креатинина (р<0,05). Выделение в кровь повышенного количества креатинина наблюдается и при повышенной секреции щитовидной железы, что вполне допустимо для гормонального профиля периода плацентации.
Полученные данные показывают, что снижение активности КК должно сопровождаться понижением уровня креатинфосфата, который путём необратимой дегидратации и дефосфорилирования превращается в креатинин. По-видимому, повышенное расходование креатинфосфата, депонирующего макроэргические связи, обусловлено модификацией энергетического обмена в ответ на изменение гормонального статуса. Корреляционный анализ данных выявил наличие отрицательной зависимости между активностью КФК и содержанием креатинина в первую треть сукозности (г=-0,618 при р<0,05 и п=15).
Результаты наших исследований показали отсутствие достоверных изменений в уровне активности ГГТ и АЛТ. Однако относительно эмбрионального периода снижалась активность ACT на 32,9% (р<0,05) в предплодный период, на 22,7% в раннеплодный период (табл.) и негативно коррелировала с концентрацией холестерина в сыворотке крови (г= -0,681при р<0,05 и п=15). Аминотрасферазы играют центральную роль в обмене белков и взаимосвязи с обменом углеводов. Корреляционная взаимосвязь ACT с холестерином может свидетельствовать об изменении профиля стероидных гормонов, синтезируемых из холестерина, в частности, глюкокортикостероидов. Этот пул гормонов играет важную адаптивную роль при стрессе.
Таким образом, время окончательного формирования плаценты (40-46 день), в силу активно протекающей адаптации метаболизма к изменению гормонального статуса, является одним из критических периодов беременности у коз.
Литература
1. Сафонов В.А. О метаболическом профиле высокопродуктивных коров при беременности и бесплодии //
Сельскохозяйственная биология. - 2008,- № 4. - С. 64-67.
2. Мисайлов В.Д., Нежданов А.Г., Коцарёв В.Н. и др. Проблема гестоза у беременных животных в
молочном скотоводстве и свиноводстве // Российский ветеринарный журнал. -2007. - Спец. вып. - С. 13.
3. Robert В. Causes of caprine abortion: diagnostic assessment of 211 cases (1991-1998) / B. Robert, Jr. Moeller //
J Vet Diagn Invest, 2001. 13(3): 265-270.
4. Шевченко Б.П., Гончаров А.Г., Сеитов M.C. Оренбургская пуховая коза: возрастная морфология. - М.:
Изд. «Академия Естествознания», 2012. - 235 с.
5. Малахова Л.С., Криворучко C.B., Никитина Е.М. Уровень и динамика прогестерона у коз зааненской
породы в различные периоды репродуктивного цикла // Ветеринарная патология. - 2012. - № 3. - С. 16-18