CC BY
53
УДК 664.959.2
МЕТАБОЛИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ СОСТАВА БИОПОЛИМЕРОВ
ИЗ МОЛЛЮСКОВ
О. Е. Битютская, Т. Н. Овсянникова, Н. С. Красова
METABOLIC VALUE OF BIOPOLYMERS EXTRACTED FROM SHELLFISH
O. E. Bityutskaya, T. N. Ovsyannikova, N. S. Krasova
Современная парадигма фармакологической коррекции многих заболеваний основывается на комплексном преодолении нарушений метаболизма путем искусственного формирования в организме пула субстратов. Это способствует как восстановлению клеточных структур, метаболически затрудненному из-за нарушения пластического обмена, так и подавлению воспалительных процессов, сопровождающих патологии.
В статье приведены результаты исследований биологической ценности высокомолекулярных органических комплексов (биополимеров) черноморских мидий (Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819 [Mytilidae]) и возможных механизмов их участия в метаболизме веществ и корригирующих процессах на клеточном уровне.
В работе исследовалось влияние биополимера из мидий на антиоксидантную ферментативную активность печени и поджелудочной железы животных с экспериментальным сахарным диабетом (СД) 2-го типа. С целью более полной оценки эффективности биополимера из мидий, сравнения его действия с влиянием референтного препарата метформина и для определения перспективности применения комплекса этих средств была измерена активность основных глутатион-зависимых антиоксидантных ферментов печени, дыхательная активность митохондрий печени и гомогенатов поджелудочной железы крыс с экспериментальным СД 2-го типа на фоне 14-суточного приема исследуемых веществ. Установлено, что одним из механизмов защитного действия биополимера из мидий является улучшение глутатион-зависимой антиоксидантной защиты клеток поджелудочной железы и печени (в том числе, ее энергетического аппарата - митохондрий). Максимальную положительную активность биополимер приобретал при комплексном применении с метформином.
Полученные результаты позволяют говорить о целесообразности применения биополимеров мидий в комплексной терапии СД 2-го типа, а также в создании новых нутрицевтиков и парафармацевтиков на их основе.
черноморские мидии, высокомолекулярные органические комплексы (биополимеры), сахарный диабет, антиоксидантная защита, митохондрии
A modern paradigm of pharmacological correction of many diseases is based on all-inclusive overcoming of metabolic disturbances through artificial forming of a pool of substrates in a human body. This contributes to recovery of cellular
structures, hindere metabolically d due to violations of plastic metabolism as well as suppress of inflammatory processes that accompany the disease.
The paper provides research results of the biological value of high-molecular organic complexes (biopolymers) extracted from Black Sea mussels (Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819 [Mytilidae]) and possible mechanisms for their involvement in the metabolism of substances and corrective processes at the cellular level.
In this research the effect of the mussel's biopolymer on the antioxidant enzyme activity of the liver and pancreas of the animals with experimental type 2 diabetes has been studied. In order to more fully assess effectiveness of the biopolymer from mussels, comparing its actions with the effect of the reference drug metformin and to assess whether use of the complex of these means, the state of glutathione-dependent level of the antioxidant system was studied in the liver mitochondria and in the pancreas homogenates of the rats with experimental diabetes type 2 after 14 days intake of the test substances. It has been established that one of the mechanisms of the protective action of the biopolymer is improvement of glutathione-dependent antioxidant defense of pancreas and liver cells (including its power unit - mitochondria). The biopolymer acquired the maximum positive activity through integrated aplication with metformin.
These results show reasonability of application of mussels biopolymers in the complex treatment of type 2 diabetes, as well as creation of new nutraceutical and parapharmaceutical products based on them.
black Sea mussels, high-organic complexes (biopolymers), diabetes, antioxidant protection, mitochondria
ВВЕДЕНИЕ
Современная парадигма фармакологической коррекции многих заболеваний основывается на комплексном преодолении нарушений метаболизма путем искусственного формирования в организме пула субстратов - аминокислот, ненасыщенных жирных кислот и других эссенциальных веществ. Это способствует как восстановлению клеточных структур, метаболически затрудненному из-за нарушения пластического обмена, так и подавлению воспалительных процессов, сопровождающих патологии. Так, успешные случаи противодиабетических эффектов описаны при применении веществ природного происхождения в комплексном лечении СД 1-го и 2-го типов [1-3].
Для реализации антидиабетических эффектов, связанных с антиокси-дантными свойствами, желательно, чтобы перспективный состав обладал свойствами истинного антиоксиданта (связывал высокоэнергетические свободные радикалы кислорода), а также активировал ферментативные глутатион-зависимые антиоксидантные ферменты и способствовал выведению из клеток активных метаболитов кислорода (АМК). В экстрактах растительного происхождения такие требования выполняются, прежде всего, за счет полифенольных соединений [4], а также, вероятно, витаминами, которые восстанавливают окисленный глутатион. В источниках нерастительного происхождения большая роль в формировании антирадикального звена может принадлежать аминокислотам как за счет способности некоторых из них улавливать свободные радикалы, так и за счет участия в качестве субстратов в синтезе de novo пептидов и белков, в том числе с антиоксидантными свойствами [5].
Исследования разных авторов указывают на молекулярные механизмы участия некоторых аминокислот в метаболической коррекции абсолютной и относительной инсулиновой недостаточности. Аргинин, лейцин, изолейцин, глутамин, глутаминовая кислота, аланин усиливают секрецию инсулина благодаря улучшению процессов обмена в митохондриях островков Лангерганса поджелудочной железы, в том числе за счет повышения эффективности образования АТФ [6]. Следует отметить, что исследования in vitro нашли подтверждение и в экспериментах in vivo [7, 8]. Аминокислоты, их фрагменты, производные вводят в качестве перспективных веществ к референтным лекарственным препаратам [9, 10].
Кроме того, участвовать в восстановлении клеточных структур, поврежденных за счет окислительного стресса в условиях СД, вероятно, могут экзогенные полиненасыщенные свободные жирные кислоты [11].
Таким образом, представляется перспективным поиск новых противодиа-бетических средств среди веществ природного происхождения с антиокси-дантными свойствами и химическим составом, обеспечивающим протективный эффект для различных клеточных структур. Важным качеством таких соединений является отсутствие токсичности.
Цель работы - исследование биологической ценности биополимеров из черноморских мидий (Mytilus galloprovincialis Lamarck, 1819 [Mytilidae]) и возможных механизмов их участия в метаболизме веществ на клеточном уровне при экспериментальном сахарном диабете.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ Отбор проб, подготовку к анализу, химический состав продуктов, активную кислотность среды (рН) определяли согласно стандартным методикам; аминокислотный состав белков - с помощью ААА ТТТ 339 ("Микротехна", ЧССР); содержание липидов - методом E. Blight & W. Dyer, методом газожидкостной хроматографии с помощью ГЖХ ("Хром-5", ЧССР); содержание углеводов -с антроновым реактивом с помощью КФК-2МП-УХЛ 4.2; редуцирующие вещества -эбулиостатическим методом, количественное определение моносахаров - фероциа-нидным методом по Хагердону-Иенсену; состав макро- и микроэлементов - атомно-абсорбционным методом на спектрофотометре ASS-30 ("Carl Zeiss Jenl", Германия), ASS-180-50 ("Hitachi", Япония) и колориметрическим методом на ФЭК КФ-2.
Исследования на экспериментальных животных (крысах линии Wistar) проводились в соответствии с «Общими этическими принципами экспериментов на животных» [12], согласующимися с положениями «Европейской конвенции о защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей». Экспериментальная модель СД 2-го типа (относительная инсули-новая недостаточность, связанная с первичной и вторичной инсулинорезистент-ностью) у крыс формировалась финальным введением стрептозотоцина на фоне хронической жировой диеты [13]. Экспериментальным животным биополимер вводили (в виде экстракта) перорально в дозе 400 мг на кг массы тела в течение 14 дней, в качестве препарата сравнения использовали метформин в дозе 50 мг на 1 кг массы тела.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ Способ получения биополимеров (высокомолекулярных органических комплексов) из мидий предусматривал ферментативный гидролиз тканей мол-
люсков, очистку, концентрирование, спиртоосаждение биополимеров [14]. Выделение биополимеров (Бп) осуществляли из гидролизата, сконцентрированного до содержания сухих веществ 48 - 50 %, в два этапа при концентрации спирта в смеси 73 - 75 % (Бп-1) и 85 - 87 % (Бп-2) при температуре от 0 до 6 °С и естественном значении рН 6,4 - 6,6. Биополимерами связывается 57,1 и 39,3 % углеводов и белков гидролизата соответственно (табл. 1).
Таблица 1. Химический состав биополимеров из мидий (х ± Бх; п = 15)
Table 1. Chemical composition of the mussel biopolymers (x + Sx ; n = 15)
Объект исследований Массовая доля, в % сырого/сухого вещества
СВ белок углеводы минеральные вещества жир
Биополимер-1 60,68 + 3,50 20,76 + 0,85 34,21 + 1,10 34,96 + 2,60 57,61 + 0,62 4,24 ± 0,50 6,98 ± 0,22 0,76+0,22 1,25+0,30
Биополимер-2 62,19 + 2,50 37,67 + 1,34 60,57 + 1,60 20,45 + 0,73 32,89 + 1,10 3,47 ± 0,63 5,58 ± 0,90 0,56+0,21 0,90+0,30
Примечание. Различия достоверны при Р < 0,05.
Аминокислотный состав белковых компонентов биополимеров свидетельствовал об их высокой биологической ценности: массовая доля незаменимых аминокислот в Бп-1 составляла 41,2, в Бп-2 - 47,7 % суммарного содержания аминокислот (табл. 2). В биополимерах преобладали лейцин, валин и лизин; аминокислоты, содержащие серу, составляли 7,5 % в Бп-1 против 10,6 % в Бп-2; в обоих биополимерах определено высокое содержание моноаминодикарбоновых аминокислот - соответственно 27,1 и 25,7 %.
Анализ моносахаридного состава показал, что значительная часть моносахаридов биополимеров представлена глюкозой (27,8 и 24,4 % массы углеводов Бп-1 и Бп-2 соответственно), присутствие которой обусловлено специфичностью состава тканей мидий. В то же время, кроме глюкозы в составе Бп-1 отмечено высокое содержание уроновых кислот (21,6 %) и аминосахаров (21,3 %) в соотношении близком к эквимолярному, что может служить косвенным подтверждением наличия гликозоамингликанових звеньев.
Липиды биополимеров характеризуются высоким содержанием ПНЖК -38,3 и 41,0 % массы общих липидов Бп-1 и Бп-2 соответственно. Более 50 % ПНЖК приходится на ш3 жирные кислоты. Состав минеральных веществ биополимеров свидетельствует о присутствии в них большинства жизненно важных макро- и микроэлементов (табл. 3). По результатам исследования острой токсичности биополимера (Бп-1) было установлено, что он относится к практически нетоксичным веществам (пятый класс токсичности).
В работе исследовалось влияние биополимера из мидий (Бп-1) на антиоксидантную глутатион-зависимую ферментативную активность печени и поджелудочной железы у животных с экспериментальным СД 2-го типа, а также -биоэнергетические характеристики этих органов. С целью оценки более эффективного способа использования биополимера из мидий в качестве антидиабетического средства, исследуемые показатели определялись у животных, получавших его в чистом виде, а также у крыс после применения референтного препарата метформина и в группе, где использовался комплекс этих средств.
Таблица 2. Аминокислотный состав биополимеров из мидийного концентрата Table 2. Amino acid composition of the biopolymers out of the copper concentrate
Аминокислоты Содержание аминокислот
Бп-1 Бп-2 в идеальном белке по шкале ФАО/ВОЗ, г/100 г белка
г/100 г белка
Незаменимые
Валин 5,32 6,03 5,0
Изолейцин 4,16 4,18 4,0
Лейцин 7,67 7,90 7,0
Лизин 5,74 5,76 5,5
Метионин + цистин 2,33 + 1,12 4,23 + 3,03 3,5
Треонин 5,23 5,17 4,0
Триптофан 1,88 1,77 1,0
Фенилаланин + тирозин 4,72 + 2,99 4,47 + 5,20 6,0
Заменимые
Аланин 5,08 6,61
Аргинин 5,89 3,08
Аспаргиновая 10,87 12,00
Гистидин 2,95 2,33
Глицин 5,84 7,47
Глутаминовая 16,25 13,69
Пролин 2,59 -
Серин 5,28 3,78
Таурин 4,01 3,32
Таблица 3. Минеральный состав биополимера (Бп-1) мидий Table 3. Mineral composition of the mussels biopolymer (Бп-1)
Массовая доля минеральных веществ на сырое вещество
мак роэлементы, г/кг микроэлементы, мг/кг
Ca Na Mg K P S Fe Mn Ba Cr Ni Co I2
4,80 6,30 0,59 1,95 2,70 2,80 25,45 1,23 0,76 1,38 5,76 0,32 0,04
Примечание. Тяжелые металлы присутствуют в количествах значительно меньших ПДК.
Как свидетельствуют полученные данные, экспериментальный СД 2-го типа приводил к снижению активности глутатионпероксидазы (ГПО) наряду с отчетливым повышением Г^-Т (глутатион^-трансферазы) в гомогенатах печени крыс. Применение биополимера из мидий на фоне диабета восстанавливало антиоксидантные показатели до уровня контрольных величин с некоторым компенсаторным увеличением активности глутатионредуктазы (ГР), в то время как при использовании комплекса средств наблюдалось достоверное увеличение всех исследуемых параметров (табл. 4).
Как показано в табл. 5, в митохондриях печени активность изучаемых ферментов была ниже, чем в гомогенатах, что естественно. Применение биополимера из мидий и препарата сравнения отдельно улучшало показатели ГПО до уровня контрольных величин, причем биополимер в количественном отношении был более эффективным, чем метформин. Комплекс «метформин + биополимер
из мидии» оказался оптимальным относительно восстановления активности исследованных составляющих глутатион-зависимого звена антиоксидантной системы.
Таблица 4. Активность антиоксидантных глутатион-зависимых ферментов печени крыс с СД 2-го типа, ( x + Sx )
Table 4. Activity of glutathione-dependent antioxidant enzymes in the liver of rats with type 2 diabetes, ( x+Sx )
Группа, количество животных ГПО, нмоль НАДФ/ мин/мг белка ГР, нмоль НАДФ/ мин/мг белка Г-S-T, нмоль ДНХБ/ мин/мг белка
Контроль + плацебо, п = 6 132,30 ± 6,57 57,20 ± 5,44 551,32 ± 177,32
Диабет + плацебо, п = 5 88,50 ± 3,55 Pi < 0,02 44,67 ± 4,27 1278,94 ± 155,76 Р1 < 0,02
Диабет + метформин, п = 5 119,60 ± 11,45 Pi < 0,05; Р2 < 0,05 43,69 ± 5,33 1052,84 ± 152,74 Р1 < 0,05
Диабет + биополимер из мидий, п =6 123,73 ± 17,33 Р2 < 0,02 72,07 ± 10,01 0,05 < Р1 < 0,1 664,49 ± 110,58 Р2 < 0,05
Диабет + метформин+ биополимер из мидий, п =6 129,95 ± 8,10 Р2 < 0,02 67,72 ± 7,33 Р2 < 0,05 1048,10 ± 138,11 Р1 < 0,05
Примечание. Значимость относительно показателей групп: 1) Pi -"Контроль + плацебо"; 2) Р2 - "Диабет + плацебо".
Таблица 5. Активность антиоксидантных глутатион-зависимых ферментов в митохондриях печени крыс с СД 2-го типа, ( x ± Sx )
Table 5. Activity of glutathione-dependent antioxidative enzymes in mitochondria of the liver of rats with type 2 diabetes mellitus, ( x ± Sx )
Группа, количество животных ГПО, нмоль НАДФ/мин/мг белка ГР, нмоль НАДФ/мин/мг белка
Контроль + плацебо, п = 6 98,93 ± 2,90 25,43 ± 4,54
Диабет + плацебо, п = 5 78,08 ± 3,92; Р1 < 0,05 15,82 ± 2,67; 0,05 < Р1 < 0,1
Диабет + метформин, п = 5 89,90 ± 8,43 22,89 ± 6,36
Диабет + биополимер из мидий, п = 6 117,38 ± 8,69 Р2 < 0,03; Р3 < 0,05 21,15 ± 1,83
Диабет + метформин+ биополимер из мидий, п =6 98,32 ± 4,16 Р2 < 0,05 27,69 ± 2,62 Р2 < 0,05
Примечание. Значимость относительно показателей групп: 1) Р1 -"Контроль + плацебо"; 2) Р2 -"Диабет + плацебо"; 3) Р3 -"Диабет + метформин".
Исследование антиоксидантных ферментов в поджелудочной железе продемонстрировало, что их активность была невысокой, значительно ниже, чем в печени, что согласуется с литературными данными [6]. В связи с этим окисли-
тельный стресс способен приводить к необратимым трагическим последствиям для этого органа. В условиях экспериментального СД 2-го типа у крыс активность главного защитного фермента клеток - ГПО - восстанавливалась лишь при одновременном использовании метформина и биополимера из мидий (табл. 6).
Таблица 6. Активность антиоксидантных глутатион-зависимых ферментов в поджелудочной железе крыс с СД 2-го типа, (x ± Sx)
Table 6. Activity of glutathione-dependent antioxidative enzymes in the pancreas of rats with type 2 diabetes mellitus, (x ± Sx)_
Группа, количество животных ГПО, нмоль НАДФ/мин/мг белка ГР, нмоль НАДФ/мин/мг белка
Контроль + плацебо, п = 6 8,03±1,37 4,94±0,93
Диабет + плацебо, п = 5 4,55±0,52; Pi < 0,02 3,25±0,64
Диабет + метформин, п = 5 6,93±1,05; 0,05 < Р2 < 0,1 4,48±0,73
Диабет + биополимер из мидий, п = 6 6,87±0,73 0,05 < Р2 < 0,1 7,72±1,50 0,05 < Р1 < 0,1
Диабет +метформин + био-полимер из мидий, п = 6 7,54±1,03 Р2 < 0,05 6,97±1,04 0,05 < Р1 < 0,1; Р2 < 0,05
Примечание. Значимость относительно показателей групп: 1) Р1 -"Контроль + плацебо"; 2) Р2 - "Диабет + плацебо".
В то же время применение комплекса «метформин + биополимер из мидий» не только восстанавливало активность ГПО, но и повышало несколько пониженную активность ГР, создавая дополнительный пул восстановленных эквивалентов в органе.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Проведенные исследования подтверждают протективный эффект биополимеров из мидий для различных клеточных структур. Одним из механизмов защитного действия биополимера из мидий в условиях экспериментально индуцированной инсулиновой недостаточности у крыс является улучшение глутатион-зави-симой антиоксидантной защиты клеток поджелудочной железы и печени (в том числе, ее энергетического аппарата - митохондрий). Максимальную положительную активность биополимер приобретал при комплексном применении с метформином.
Полученные результаты позволяют говорить о целесообразности применения биополимеров из мидий в комплексной терапии СД 2-го типа, а также для создания новых нутрицевтиков и парафармацевтиков на их основе.
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ЛИТЕРАТУРНЫХ ИСТОЧНИКОВ
1. Ríos J.L., Francini F., Schinella G.R. Natural Products for the Treatment of Type 2 Diabetes Mellitus // Planta Med. - 2015. - no. 12-13. - PP. 975-994.
2. Natural Phyto-Bioactive Compounds for the Treatment of Type 2 Diabetes: Inflammation as a Target / Gothai S., Ganesan P., Park S.Y., et al // Nutrients. - 2016. -no. 8. Published online 2016 Aug 4. doi: 10.3390/nu8080461.
3. Dias T.R. Emerging Potential of Natural Products as an Alternative Strategy to Pharmacological Agents Used Against Metabolic Disorders / Dias T.R., Bernardino R.L., Meneses M.J., et al // Curr Drug Metab. - 2016. - Vol. 17, no 6. - Р. 582-597.
4. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е. Б. Меньщикова [и др.]. - Москва: Фирма «Слово», 2006. - 556 с.
5. Moosmann, B. Secretory peptide hormones are biochemical antioxidants: structure-activity relationship / B. Moosmann, C. Behl // Mol. Pharmacol. - 2002. -Vol. 61, no 2. - P. 260-268.
6. Newsholme, P. Amino acid metabolism, P-cell function, and diabetes / P. Newsholme, L. Brennan, K. Bender // Diabetes. - 2006. - Vol. 55. - Р. 39-47.
7. Yu, J. X. Protective effects of bendazac lysine on diabetic peripheral neuropathy in streptozotocin-induced diabetic rats / J. X. Yu, X. X. Yin, J. P. Shen // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. - 2006. - Vol. 33, no. 12. - P. 1231-1238.
8. Amino acid supplements improve native antioxidant enzyme expression in the skeletal muscle of diabetic mice / L. Brocca, G. D'Antona, A. Bachi, M. Pellegrino // Am. J. Cardiol. - 2008. - Vol. 101, no. 11A. - P. 57E-62E.
9. Ashokkumar, N. Effect of N-benzoyl-D-phenylalanine and metformin on insulin receptors in neonatal streptozotocin-induced diabetic rats: studies on insulin binding to erythrocytes / N. Ashokkumar, L. Pari, A. Rao Ch.// Arch. Physiol. Biochem. -2006. - Vol. 112, no. 3. - P. 174-181.
10. The antidiabetic effects of cysteinyl metformin, a newly synthesized agent, in alloxan- and streptozotocin-induced diabetic rats / Z. Liu, J. Li, Z. Zeng et al. // Chem. Biol. Interact. - 2008. - Vol. 173, no. 1. - P. 68-75.
11. Suresh, Y. Differential effects of saturated, mono saturated, and polyunsaturated fatty acids on alloxan-induced diabetes mellitus / Y. Suresh, U. Das // Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids. - 2006. - Vol. 74, no. 3. - P. 199-213.
12. Резников, О. Г. Общие этические принципы экспериментов на животных / О. Г. Резников // Эндокринология. - 2003. - Т. 8, № 1. - С. 142-145.
13. Пат. 38466 Укра'ша МПК G09B 23/28 (2008.01) Споаб моделювання цукрового дiабету 2 типу у щурiв / О. I. Гладких, В. В. Полторак, Н. С. Красова [та ш.] (UA); заявник i патентовласник ДУ «1нститут проблем ендокринно'1 патологи ím. В.Я. Данилевського АМН Украши» (UA). - № u200810259; заявл. 11.08.2008; опубл. 12.01.2009, Бюл. № 1. - 4 с.
14. Битютская, О. Совершенствование технологии производства биологически активной добавки из черноморских мидий / О. Битютская // Товары и рынки. - 2008. - № 2. - С. 49-61.
REFERENCES
1. Ríos J. L., Francini F., Schinella G. R. Natural Products for the Treatment of Type 2 Diabetes Mellitus. Planta Med. 2015, no. 12-13, pp. 975-994.
2. Gothai S., Ganesan P., Park S. Y. et al. Natural Phyto-Bioactive Compounds for the Treatment of Type 2 Diabetes: Inflammation as a Target. Nutrients. 2016, no. 8. Published online 2016 Aug 4. doi: 10.3390/nu8080461.
3. Dias T. R., Bernardino R. L., Meneses M. J. et al. Emerging Potential of Natural Products as an Alternative Strategy to Pharmacological Agents Used Against Metabolic Disorders. 2016, vol. 17, no 6, pp. 582-597.
4. Men'shchikova E. B., Lankin V. Z., Zenkov N. K. i dr. Okislitel'nyy stress. Prooksidanty i antioksidanty [Oxidative stress. Prooxidant and antioxidant]. Moscow, Firma "Slovo", 2006, 556 p.
5. Moosmann B., Behl C. Secretory peptide hormones are biochemical antioxidants: structure-activity relationship. Mol. Pharmacol. 2002, vol. 61, no 2, pp. 260-268.
6. Newsholme P., Brennan L., Bender K. Amino acid metabolism, P-cell function, and diabetes. Diabetes. 2006, vol. 55, pp. 39-47.
7. Yu J. X., Yin X. X., Shen J. P. Protective effects of bendazac lysine on diabetic peripheral neuropathy in streptozotocin-induced diabetic rats. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 2006, vol. 33, no. 12, pp. 1231-1238.
8. Brocca L., D'Antona G., Bachi A., Pellegrino M. Amino acid supplements improve native antioxidant enzyme expression in the skeletal muscle of diabetic mice. Am. J. Cardiol. 2008, vol. 101, no. 11A, pp. 57E-62E.
9. Ashokkumar N., Pari L., Rao A. Ch. Effect of N-benzoyl-D-phenylalanine and metformin on insulin receptors in neonatal streptozotocin-induced diabetic rats: studies on insulin binding to erythrocytes. Arch. Physiol. Biochem. 2006, vol. 112, no. 3, pp. 174-181.
10. Liu Z., Li J., Zeng Z. et al. The antidiabetic effects of cysteinyl metformin, a newly synthesized agent, in alloxan- and streptozotocin-induced diabetic rats. Chem. Biol. Interact. 2008, vol. 173, no. 1, pp. 68-75.
11. Suresh Y., Das U. Differential effects of saturated, mono saturated, and polyunsaturated fatty acids on alloxan-induced diabetes mellitus. Prostaglandins Leukot. Essent. Fatty Acids. 2006, vol. 74, no. 3, pp. 199-213.
12. Reznikov, O. G. Obshchie eticheskie printsipy eksperimentov na zhivotnykh [General prin-ciples of animal experiments]. Endokrinologiya, 2003, vol. 8, no. 1, pp. 142-145.
13. Pat. 38466 Ukraina MPK G09B 23/28 (2008.01) Sposib modelyuvannya tsukrovogo diabetu 2 tipu u shchuriv. O. I. Gladkikh, V. V. Poltorak, N. S. Krasova [ta in.] (UA); zayavnik i patentovlasnik DU "Institut problem endokrinnoi patologii im. V. Ya. Danilevs'kogo AMN Ukraini" (UA). № u200810259; zayavl. 11.08.2008; opubl. 12.01.2009, Byul. № 1, 4 p.
14. Bityutskaya O. Sovershenstvovanie tekhnologii proizvodstva biologicheski aktivnoy dobavki iz chernomorskikh midiy [Perfection of the technology of production of biologically active supplements from Black Sea mussels]. Tovary i rynki, 2008, no. 2, pp. 49-61.
ИНФОРМАЦИЯ ОБ АВТОРАХ
Битютская Ольга Евгеньевна - Керченский государственный морской технологический университет; кандидат технических наук, доцент, зав. кафедрой технологии продуктов питания; E-mail: olha98306@yandex.ru
Bityutskaya Ol'gaEvgen'yevna - Kerch State Maritime Technological University; PhD in Engineering, associate professor, head of the department of food products technology; E-mail: olha98306@yandex.ru
Овсянникова Татьяна Николаевна - Харьковский национальный университет им. В. Н. Каразина, кафедра молекулярной и медицинской биофизики; кандидат биологических наук, доцент; E-mail: tа ov10@mail.ru
Ovsyannikova Tatyana Nikolaevna - Kharkov state national university named after V.N. Karazin; PhD in Biology, associate professor, department of molecular and medical biophysics; E-mail: tа_ov10@mail.ru
Красова Наталья Сергеевна - Институт проблем эндокринной патологии им. В. Я. Данилевского АМНУ; кандидат биологических наук, ведущий научный сотрудник отдела экспериментальной эндокринологии; E-mail: nkrasova@mail.ru
Krasova Natalia Sergeevna - Institute for endocrine disorder research named after V. Y. Danilevskogo; PhD in Biology, leading researcher of the department of experimental endocrinology; E-mail: nkrasova@mail.ru
