CC BY
5
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
217
ядер флуоресцентным красителем Hoechst33342, пролиферацию оценивали при помощи набора Click-iT™ EdU Cell Proliferation Kit. Также оценивался митохондриаль-ный потенциал клеток при помощи TMRM Assay Kit.
В результате было продемонстрировано, что модификация аминослоем поверхности поликапролактона значимо повышает заселение скаффолда эндотелиаль-ными клетками. Причем импульсный режим нанесения полимера позволяет формировать полимерный слой, значимо больше стимулирующий пролиферацию и образование полноценного слоя эндотелиальных клеток.
Таким образом представленная в работе модификация поверхности инертных синтетических волокон аминогруппами позволяет значимо повысить скорость заселения их эндотелиальными клетками от пациента, тем самым повысить качество импланта, снизить риск тромбообразования и повысить успешность шунтирования. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского Фонда Фундаментальных Исследований (№ 20-52-26020).
Литература:
1. Goh E.T., Wong E., Farhatnia Y., Tan A., Seifalian A.M. Int. J. Mol.
Sci., vol. 16, 1, pp. 597-627, 2015.
МЕМБРАННЫЕ ВЕЗИКУЛЫ МЕЗЕНХИМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК СО СВЕРХЭКСПРЕССИЕЙ TRAIL ИНДУЦИРУЮТ АПОПТОЗ В ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТКАХ У КСЕНОГРАФТНОЙ МОДЕЛИ МЫШЕЙ С АДЕНОКАРЦИНОМОЙ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ
В.В. Соловьева, Т.В. Пухальская, Д.С. Чулпанова, А.А. Ризванов
Казанский федеральный университет, Казань, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: мезенхимные стволовые клетки, TRAIL, внеклеточные везикулы, апоптоз, рак молочной железы, терапия онкологических заболеваний.
Лиганд, индуцирующий апоптоз, связанный с фактором некроза опухоли (TRAIL) является одним из наиболее перспективных среди терапевтических цитокинов, которые избирательно индуцирует апоптоз в опухолевых клетках. Доставка TRAIL в очаг опухоли с помощью мембранных везикул мезенхимных стволовых клеток (МСК) представляет интерес в качестве нового метода бесклеточной терапии онкологических заболеваний.
В настоящей работе индуцированные мембранные везикулы (иМВ) из генетически модифицированных МСК-TRAIL получали путем обработки клеток цитоха-лазином В (Sigma-Aldrich, США). Противоопухолевый эффект иМВ-TRAIL исследовали на ксенографтной модели мышей с аденокарциномой молочной железы. Эксперименты проводили в соответствии с протоколами, утвержденными локальным этическим комитетом Казанского (Приволжского) федерального университета (КФУ). Для создания опухолей иммунодефицитным мышам подкожно вводили клетки аденокарциномы молочной железы человека линии MCF-7. При достижении опухоли размера 100 мм3 животным вводили 50 мкг на-тивных иМВ или иМВ-TRAIL в 20 мкл физраствора, либо 20 мкл физраствора в качестве контроля. Инъекции иМВ осуществляли в область опухоли в течение 12 дней
с интервалом в два дня. Уровень экспрессии апоптотиче-ских генов CAS8, BCL-2 и BAXи уровень белка САБЭ в го-могенатах опухоли определяли с помощью ПЦР в режиме реального времени и вестерн блот анализом.
Было показано увеличение уровня мРНК гена CAS8 в 1,8 раз в группе мышей, получавших инъекции иМВ-ТПАЩ по сравнению с контролем. Экспрессия анти-апоптотического гена BCL-2 в этой же группе животных не изменилась, в то время как уровень мРНК проапоп-тотического гена BAX был увеличен в 1,4 раза, что указывает на активацию апоптотического каскада и индукцию гибели опухолевых клеток. Вестерн блот анализ выявил увеличение уровня ключевого белка апоптоза САБЭ в 1,7 раз у животных, получавших инъекции иМВ-ТПАЩ по сравнению с контролем.
Полученные результаты указывают на то, что иМВ-ТПА11_ способны активировать внешний сигнальный путь апоптоза и индуцировать гибель опухолевых клеток у мышей с ксенографтной моделью аденокарциномы молочной железы. Таким образом, использование иМВ-ТПА1_ может стать эффективным инструментом для терапии рака молочной железы. Работа выполнена за счет средств программы стратегического академического лидерства Казанского (Приволжского) федерального университета (ПРИ0РИТЕТ-2030) и гранта Российского научного фонда № 18-74-10044.
МУТАЦИЯ В ГЕНЕ GLUD2 ПРИВОДИТ К СНИЖЕНИЮ КОЛИЧЕСТВА АКТИВНЫХ МИТОХОНДРИЙ В НЕЙРАЛЬНЫХ ПРОИЗВОДНЫХ ИПСК ПАЦИЕНТА С БОЛЕЗНЬЮ ПАРКИНСОНА
Д.А. Сорогина1, 2, Е.С. Дроздова1, 2,
Е.В. Григорьева2, С.В. Павлова2, А.А. Малахова2,
С.П. Медведев2, С.М. Закиян2
1 Новосибирский государственный университет, Новосибирск, Россия
2 Институт цитологии и генетики Сибирского отделения РАН, Новосибирск, Россия
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: индуцированные плюрипотентные стволовые клетки, нейральная дифференцировка, болезнь Паркинсона, глутаматдегидрогеназа 2-го типа.
Болезнь Паркинсона (БП) — нейродегенеративное заболевание, обусловленное гибелью дофаминерги-ческих нейронов черной субстанции среднего мозга. Наследственная форма БП может быть вызвана мутациями в различных генах, одним из которых является ген GLUD2. Этот ген кодирует митохондриальный фермент глутаматдегидрогеназу 2-го типа, участвующую в окислительном дезаминировании глутамата. Мутация d492T>G в гене GLUD2 ведет к усилению работы фермента, что в свою очередь приводит к гибели дофаминер-гических нейронов [1].
Для изучения фенотипического проявления мутации d492T>G в гене GLUD2 были получены линии ИПСК путем репрограммирования мононуклеарных клеток периферической крови пациента мужского пола, гемизи-готного по данной мутации. Для получения релевантного типа клеток была проведена направленная дифференци-ровка ИПСК пациента и условно здоровых людей в астро-глиальные клетки и дофаминергические нейроны.
Оценка фенотипического проявления данной мутации проводилась с помощью конфокальной микроскопии
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
