CC BY
100
© С. А. Сельков, О. В. Павлов, Д.И.Соколов
МЕХАНИЗМЫ ИММУНОРЕГУЛЯЦИИ РАЗВИТИЯ ПЛАЦЕНТЫ
НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН
УДК: 618.36-07:612.017
■ В статье критически рассматривается гестационная роль плацентарных макрофагов (клетки Кащенко-Гофбауэра) как с точки зрения их вклада в процессы иммунорегуляции на уровне фето-плацентарного комплекса, так и с точки зрения участия в морфогенезе плаценты. На основании анализа литературных и собственных данных авторами оценивается место плацентарных макрофагов в регуляции механизмов апоптоза, диффе-ренцировки различных клеточных популяций. Особое внимание уделяется роли плацентарных макрофагов в ангиогенезе плаценты, формировании ее сосудистой сети. Обсуждаются вопросы гетерогенности плацентарных макрофагов, смены различных их субпопуляций в разные периоды гестационного процесса и возможная роль в некоторых формах акушерской патологии.
■ Ключевые слова: плацента; плацентарные макрофаги; клетки Кащенко-Гофбауэра; цитокины; ангиогенез; апоптоз; иммунологическая толерантность.
Иммунологические взаимоотношения материнского организма и плода (зародыша) начинаются уже с первых часов после оплодотворения, что обусловлено экспрессией отцовских антигенов на клетках бластоцисты, а также самим фактом пролиферации и диф-ференцировки клеток. При этом иммунная система материнского организма перестраивается таким образом, чтобы создать благоприятный «иммунологический фон» для успешного развития плода. Эта перестройка связана в первую очередь с изменением соотношения и функциональной активности различных популяций регуляторных лимфоцитов — Т-хелперов (Тх) 1-го и 2-го типов, Т-регуляторных лимфоцитов и Тх17 лимфоцитов, а также цитоток-сических лимфоцитов — NK-клеток, NKT-клеток и цитотоксиче-ских Т-лимфоцитов (ранее называвшихся «супрессорами»).
Основные же иммунологические процессы происходят в области фетоплацентарного комплекса. Именно плацента является той «площадкой», где осуществляется контакт материнского организма с плодом, а значит, разыгрываются наиболее важные события, от которых зависит успешное течение беременности или же, напротив, развитие большинства форм акушерской патологии.
Сложность изучения иммунологических процессов, связанных с развитием и функционированием плаценты связана с отсутствием структурных образований (лимфоидных фолликулов), определяющих адаптивные иммунные реакции. Между тем, функциональная роль плаценты — барьерная (антитоксическая и противоинфекционная), экскреторная, обеспечивающая питание плода, невозможна без участия иммунной системы. Да и сами по себе процессы пролиферации и дифференцировки клеток, рост и развитие ткани плаценты, как и все пролиферативные процессы должны находиться под контролем иммунной системы.
Иммунологические взаимодействия материнского организма и плода, особенно связанные со специфическим иммунным ответом опосредуются лимфоидными клетками из кровотока матери. Резидентные иммунокомпетентные клетки маточно-плацентарного комплекса, осуществляющие реакции неспецифического (врожденного) иммунитета представлены, главным образом, макрофагами и децидуальными NK-клетками, причем в отличие от последних, макрофаги присутствуют как в материнской, так и в плодовой частях плаценты [23].
Иммунокомпетентные клетки маточно-плацентарной зоны во многом определяют ход развития беременности, начиная с самых ранних стадий гестации.
К настоящему времени признанным является тот факт, что имплантация бластоцисты сопровождается воспалительной реакцией и для ее успешной реализации необходимо оптимальное присутствие определенных цитокинов — ^1, 1ЕКу, TNFa, ^-6, 1Ы0, ^-15, CSF-1, GM-CSF, TGFp. Примечательно, что в этот список входят цитокины, которые традиционно считаются «абортогенными»: ^1, Т№а [3]. В участках инвазии
трофобласта наблюдается инфильтрация дециду-альными NK-клетками и макрофагами. При этом секреторный потенциал клеток иммунной системы направлен на регуляцию процессов формирования ткани плаценты. В частности, продукция Т№а, ^-1, ^-6, ^-15, ^-17 приводит к усилению активности металлопротеиназ и повышению инвазивной активности клеток трофобласта [6, 9, 11, 18, 29, 33, 38]. В то же время секреция ТОТа, TGFp, ^-11 приводит к подавлению инвазивной активности трофобласта [10, 17, 19, 21, 27, 39].
Концентрация макрофагов и NK-клеток в тех участках, где происходит инвазия трофобласта, и их тесный контакт с клетками вневорсинчатого трофобласта могут означать не столько иммунную реакцию материнского организма (поскольку не приводят к отторжению), сколько участие в создании микроокружения, благоприятного для развития зародыша и адекватной инвазии трофобласта и дальнейшей плацентации.
Этот феномен заставляет пересмотреть представления о воспалении как реакции, направленной лишь на уничтожение генетически чужеродного материала. В последние годы получила развитие гипотеза о разных типах воспалительных реакций, согласно которой активация макрофагов не по «классическому», а по «альтернативному» пути приводит не к разрушительному, а скорее к созидательному результату [28, 37]. Такие клетки играют роль регуляторов различных событий: строго контролируют ход локальных воспалительных процессов, не давая им выйти за определенные рамки и тем самым поставить под угрозу развивающуюся беременность, участвуют в ремоделировании и репарации ткани, удаляя клеточный дебрис и апопто-тические клетки, модулируя процессы ангиогенеза и т. д. И наоборот: ослабление контроля со стороны макрофагов под действием каких-либо экзогенных или эндогенных факторов может приводить к неконтролируемому развитию воспаления в тканях маточно-плацентарного комплекса и, как следствие, к акушерским патологиям или преждевременному прерыванию беременности. По аналогии с классической парадигмой ^1/^2 полярные типы акти-вационных ответов макрофагов обозначены как М1 («классическая» активация) и М2 («альтернативная» активация) с бесконечным множеством промежуточных форм активации [12, 23].
Таким образом, можно констатировать, что «умеренное воспаление» с участием иммунокомпетент-ных клеток маточно-плацентарной единицы является неотъемлемой частью важнейших гестационных процессов. Современный этап развития репродуктивной иммунологии можно охарактеризовать как переход от длительно господствовавшей «конфрон-тационной» парадигмы, рассматривавшей иммун-
ные отношения матери и плода в существенной мере как антагонистические, к теории «конструктивного партнерства» материнских и плодовых тканей, выработанного в процессе эволюции. В рамках этой теории компоненты иммунной системы матери и плода рассматриваются как посредники репродуктивных процессов, действующие не агрессивно, а синергично [26, 30].
Плацентарные макрофаги, описанные впервые Н. Ф. Кащенко в 1885 году [20], являясь основными иммунокомпетентными клетками плацентарных ворсин, обеспечивают защиту плода от инфекций, участвуют в процессах деградации разрушенных клеток, переработки и представления антигенов. Кроме того, секреторная активность плацентарных макрофагов обеспечивает формирование цитокино-вой сети плаценты. Ранее нами были сформулированы представления о роли цитокиновой сети в реализации плацентой своих функций и опосредовании материнско-фетальных взаимоотношений [1].
Следует отметить, что, говоря далее о плацентарных макрофагах, мы имеем в виду клетки моноцитарно-макрофагального ряда, локализованные в ворсинах хориона. В отличие от деци-дуальных макрофагов, принадлежащих материнскому организму, плацентарные макрофаги (клетки Кащенко-Гофбауэра) имеют плодовое происхождение, что было продемонстрировано нами в совместных исследованиях с сотрудником лаборатории пренатальной диагностики НИИАГ им. Д. О. Отта М. В. Ассеевым.
Результаты работы нашей лаборатории, а также результаты, полученные другими исследователями, во многом свидетельствуют о том, что популяция макрофагов в плаценте функционально поляризована скорее в направлении «конструктивного», а не «разрушительного» воспаления, т. е. эти клетки обладают характеристиками, позволяющими им осуществлять регуляторную роль в отношении различных процессов, происходящих в ткани плаценты. При этом снижается их противоинфекционный потенциал, что является частным проявлением общего феномена подавления клеточных реакций иммунитета, наблюдающегося при беременности. Так, по нашим данным, плацентарные макрофаги характеризуются высокой степенью экспрессии маннозного рецептора (CD206), отсутствием продукции 1ККу и Ш-12 и наличием продукции Ш-10, что позволяет отнести их к «альтернативно активированным» (М2) клеткам [23, 37].
Плацентарные макрофаги играют роль и в ангио-генезе плаценты — важнейшем физиологическом процессе, от которого зависит формирование этого органа и выполнение им своих основных функций.
Плацентарные макрофаги за счет секреции ци-токинов могут не только изменять цитокиновый
баланс, действуя на клетки микроокружения эндо-телиальных клеток, но и самостоятельно активно влиять на все этапы ангиогенеза и развития плаценты. Макрофаги влияют на увеличение жизнеспособности эндотелиальных клеток (через секрецию VEGF, bFGF и изменение структуры экстрацеллю-лярного матрикса) или вызывают апоптоз эндотелиальных клеток (через секрецию TSP-1 и TNFa).
Среди факторов, секретируемых плацентарными макрофагами и участвующих в регуляции ан-гиогенеза плаценты следует особо отметить VEGF (позитивная регуляция), sVEGF-R1 (негативная регуляция), ангиогенин Angl (стабилизация и созревание кровеносных сосудов), Ang2 (дестабилизация кровеносных сосудов, ремоделирование), TNFa, (влияние на эндотелиальные клетки). К стимуляции продукции VEGF «причастны» такие секреторные факторы плацентарных макрофагов как iL-lß, YFNy, TNFa [8]. Предполагается, что полифункциональный цитокин IL-11 также обладает ангиогенными эффектами [31]. Согласно нашим данным, продукция факторов, регулирующих ан-гиогенез и модулирующих функциональное состояние сосудов плаценты, находится под контролем плацентарных макрофагов: кроме указанных цито-кинов эти клетки секретируют и факторы, блокирующие их активность, в частности, растворимые рецепторы sVEGF-Rl и sTNF-Rl.
Макрофаги также эффективно участвуют в контроле роста капилляров и регуляции образования грануляционной ткани при хроническом воспалении и заживлении ран. В случае формирования сосудистой сети плаценты макрофаги инициируют процессы ангиогенеза, секретируя проангиогенные факторы, которые влияют на пролиферацию, миграцию и дифференцировку эндотелиальных клеток. Макрофаги секретируют ферменты, разрушающие и изменяющие структуру экстрацеллюлярного ма-трикса, стимулируя рост и развитие сосудистой сети. Затем макрофаги переключаются на секрецию антиангиогенных факторов (TSP-1, TNFa), обеспечивающих терминацию ангиогенеза за счет индукции апоптоза в эндотелиальных клетках.
В течение беременности количество апоптоти-ческого материала, который выделяется из синци-тиотрофобласта в материнское кровообращение, особенно к концу беременности, значительно увеличивается. Антигены плода способны индуцировать или потенцировать иммунный ответ материнского организма. Поэтому своевременное удаление погибших или погибающих клеток трофобласта перед тем, как их содержимое попадет в материнский кровоток, является критическим для избегания повреждения ткани плаценты и отторжения эмбриона. Кроме того, аутоантигены могут образовываться при ремоделировании спиральных артерий матки,
когда происходит апоптотическая гибель эндотелиальных и гладкомышечных клеток сосудов. В норме удаление апоптотических клеток эффективно обеспечивается тканевыми макрофагами или циркулирующими моноцитами в периферической крови. Однако макрофаги в данном случае обеспечивают не только удаление мертвых клеток путем фагоцитоза, но и являются активными участниками ремо-делирования ткани плаценты, индуцируя апоптоз в одних клетках и увеличивая выживание соседних клеток [25]. Показано, что макрофаги способны экс-прессировать на собственной мембране FasL, индуцируя апоптоз клеток-мишеней. Такими мишенями могут быть эндотелиальные клетки спиральных артерий матки, а также нейтрофилы, активирующиеся при внедрении трофобласта в стенку матки [4].
Участие плацентарных макрофагов в ремоде-лировании ткани плаценты связано со сбалансированной продукцией проапоптогенных и анти-апоптогенных молекул. Среди проапоптогенных факторов следует отметить TNFa, LTa, LTß, FasL, TRAIL, TWEAK, LIGHT, относящихся к суперсемейству TNF [26]. Благодаря активности фермента индоламин-2,3-диоксигеназы макрофаги маточно-плацентарного комплекса могут обеспечивать локальную депривацию триптофана, что приводит как к апоптозу клеток вневорсинчатого трофобла-ста (регуляция инвазии), так и к подавлению пролиферации материнских цитотоксических клеток (иммуносупрессия) [16, 22, 24, 34].
Захват и фагоцитоз макрофагами клеток, вошедших в апоптоз, может индуцировать противовоспалительную или иммуносупрессивную реакции. Показано, что после совместного культивирования моноцитов с апоптотическими лимфоцитами происходило ингибирование секреции моноцитами TNFa, тогда как продукция IL-10 и TGFß увеличивалась. В свою очередь IL-10 и TGFß обеспечивают выживание трофобласта, снижая провоспалитель-ные эффекты на границе между плацентой и тканью матки [15]. Кроме того, поглощение апоптотических телец макрофагами, активированными IFNy, TNFa или липополисахаридом, приводит к подавлению их способности индуцировать апоптоз [36]. Кроме этого существуют сведения о том, что плацентарные макрофаги участвуют и в таком малоизученном процессе, как ветвление ворсин, благодаря продукции так называемых sprouty-белков [13].
Поглощение апоптотических телец макрофагами в плаценте обеспечивает не только удаление нежелательного антигенного материала, но и ингибирование провоспалительных процессов в течение всей беременности. Это обеспечивается переключением макрофагов на синтез и секрецию IL-10, IL-4 при поглощении клеток плаценты или стенки матки, вошедших в апоптоз [15, 36].
Обеспечение иммунной толерантности может быть связано также с продукцией плацентарными макрофагами простагландинов E2, F2a, D2 [5, 7, 14, 35]. Такие секреторные продукты, как IL-10 и TGFP во многом определяют переключение иммунного ответа матери с Th1 на Th2 тип [23, 28].
Нами впервые была выявлена способность плацентарных макрофагов к синтезу и секреции IL-11, который может играть важную роль в иммунологической толерантности иммунной системы матери в отношении плода [31]. Поскольку этот цитокин обладает ингибиторными свойствами по отношению к провоспалительным цитокинам, можно предположить, что наряду с IL-10 — «классическим» цитоки-ном Th2 ответа — IL-11 также может обусловливать противовоспалительный фенотип самих макрофагов и других клеток маточно-плацентарной единицы.
В заключение следует отметить, что изучение иммунологических механизмов регуляции развития плаценты отражает междисциплинарный подход к изучению процессов морфогенеза. При этом роль иммунной системы плаценты не ограничивается только защитой плода от инфекций. Важную роль играют компоненты иммунной системы, в частности плацентарные макрофаги, в процессах развития ткани плаценты. Это связано как с контролем пролиферации клеток, так и с регуляцией апоптоза, деградации и ремоделирования ткани плаценты. И в этом плане особенно важна роль иммунной системы в развитии сосудистой сети плаценты. Возможно, именно плацентарные макрофаги во многом определяют формирование иммунологической толерантности организма матери в отношении плода.
Литература
1. Сельков С. А., Павлов О. В., Селютин А. В. Цитокиновая сеть и макрофаги плаценты в регуляции родовой деятельности // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. — 2000. — Т. 129, № 6. — C. 604-610.
2. Сельков С. А., Павлов О. В. Плацентарные макрофаги. — М.: КМК, 2007.
3. A brief review of recent data on some cytokine expressions at the materno-foetal interface which might challenge the classical Th1/Th2 dichotomy / G. Chaouat [et al.] // J. Reprod. Immunol. — 2002. — Vol. 53. — P. 241-256.
4. Brown S. B, Savill J. Phagocytosis triggers macrophage release of Fas ligand and induces apoptosis of bystander leukocytes // J. Immunol. — 1999. — Vol. 162. — P. 480-485.
5. Cyclooxygenase-1 and -2 in human placenta and placental bed after normal and pre-eclamptic pregnancies / B. Wetzka [et al.] // Hum. Reprod. — 1997. — Vol. 12. — P. 2313-2320.
6. Cytokine-mediated regulation of type IV collagenase expression and production in human trophoblast cells / S. Shimono-vitz [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. — 1996. — Vol. 81. — P. 3091-3096.
7. Differential localization of prostaglandin E synthase isoforms in human placental cell types / J. W. Meadows [et al.] // Placenta. — 2004. — Vol. 25. — P. 259-265.
8. Effects of cytokines on VEGF expression and secretion by human first trimester trophoblast cell line // S. J. Choi [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 2002. — Vol. 48. — P. 70-76.
9. Effects of interleukin-6 (IL-6) on cytotrophoblastic cells / A. Meisser [et al.] // Mol. Hum. Reprod. — 1999. — Vol. 5. — P. 10551058.
10. Effects of tumor necrosis factor-alpha on human trophoblast cell adhesion and motility / J. C. Todt [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 1996. — Vol. 6. — P. 65-71.
11. Effects of tumour necrosis factor-alpha, interleukin-1 alpha, macrophage colony stimulating factor and transforming growth factor beta on trophoblastic matrix metalloproteinases / A. Meisser [et al.] // Mol. Hum. Reprod. — 1999. — Vol. 5. — P. 252-260.
12. Gordon S. Alternative activation of macrophages // Nat. Rev. Immunol. — 2003. — Vol. 3. — P. 23-25.
13. Human placental Hofbauer cells express sprouty proteins: a possible modulating mechanism of villous branching / E. Y. An-teby [et al.] // Placenta. — 2005. — Vol. 26. — P. 478-483.
14. Identification by flow cytometry of the prostaglandin-producing cell populations of term human decidua / E. R. Norwitz [et al.] // J. of Endocrinology. — 1991. — Vol. 131. — P. 327-334.
15. Immunosuppressive effects of apoptotic cells / R. E. Voll [et al.] // Nature. — 1997. —Vol. 390. — P. 350-351.
16. Indoleamine 2,3-dioxygenase: distribution and function in the developing human placenta / Y. Kudo [et al.] // J. Reprod. Immunol. — 2004. — Vol. 61. — P. 87-98.
17. Interleukin 11 inhibits human trophoblast invasion indicating a likely role in the decidual restraint of trophoblast invasion during placentation / P. Paiva [et al.] // Biol. Reprod. — 2009. — Vol. 80. — P. 302-310.
18. Invasion of cytotrophoblastic (JEG-3) cells is up-regulated by interleukin-15 in vitro / M. Zygmunt [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 1998. — Vol. 40. — P. 326-331.
19. Karmakar S, Das C. Regulation of trophoblast invasion by IL-1-beta and TGF-beta1 // Am. J. Reprod. Immunol. — 2002. — Vol. 48. — P. 210-219.
20. Kastschenko N. Das menschliche chorionepithel und dessen rolle bei der histogenese der placenta // Arch. Anat. Physiol. Anat. Abt. — 1885. — P. 451-480.
21. LaihoM., Saksela O, Keski-Oja J. Transforming growth factor-beta induction of type-1 plasminogen activator inhibitor. Pericellu-lar deposition and sensitivity to exogenous urokinase // J. Biol. Chem. — 1987. — Vol. 262. — P. 17467-17474.
22. Localisation of indoleamine 2,3-dioxygenase and kynurenine hydroxylase in the human placenta and decidua: implications for role of the kynurenine pathway in pregnancy / P. Ligam [et al.] // Placenta. — 2005. — Vol. 26. — P. 498-504.
23. Macrophage polarization: tumor-associated macrophages as a paradigm for polarized M2 mononuclear phagocytes / A. Man-tovani [et al.] // Trends. Immunol. — 2002. — Vol. 23. — P. 549555.
24. Macrophage-induced apoptosis limits endovascular trophoblast invasion in the uterine wall of preeclamptic women / F. Reister [et
al.] // Laboratory Investigation. — 2001. — Vol. 81. — P. 11431152.
25. Macrophages and apoptotic cell clearance during pregnancy / V. M. Abrahams [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 2004. — Vol. 51. — P. 275-282.
26. MoffettA., Loke Y. W. The immunological paradox of pregnancy: a reappraisal // Placenta. — 2004. — Vol. 25. — P. 1-8.
27. Morrish D. W., Dakour J., Li H. Functional regulation of human trophoblast differentiation // J. Reprod. Immunl. — 1998. — Vol. 39. — P. 179-195.
28. Mosser D. M., Edwards J. P., Exploring the full spectrum of macrophage activation // Nat. Rev. Immunol. — 2008. — Vol. 8. — P. 958-969.
29. Network of cytokines, integrins and hormones in human trophoblast cells / C. Das [et al.] // J. Reprod. Immunol. — 2002. — Vol. 53. — P. 257-268.
30. ParhamP. NK cells and trophoblasts: partners in pregnancy // J. Exp. Med. — 2004. — Vol. 200. — P. 951-955.
31. Pavlov O. V., Kramareva N. L, Selkov S. A. IL-11 expression in human term placental macrophages // Am. J. Reprod. Immunol. — 2011. — Vol. 65. — P. 397-402.
32. Phillips T. A., Ni J., Hunt J. S. Death-inducing tumour necrosis factor (TNF) superfamily ligands and receptors are transcribed in human placentae, cytotrophoblasts, placental macrophages and placen-tal cell lines // Placenta. — 2001. — Vol. 22. — P. 663-772.
33. Prause O., Bozinovski S., Anderson G. P. Increased matrix metal-loproteinase-9 concentration and activity after stimulation with interleukin-17 in mouse airways // Thorax. — 2004. — Vol. 59. — P. 313-317.
34. Prevention of T cell-driven complement activation and inflammation by tryptophan catabolism during pregnancy / A. L. Mellor [et al.] // Nat. Immunol. — 2001. — Vol. 2. — P. 64-68.
35. Prostaglandin D2 production by term human decidua: cellular origins defined using flow cytometry / E. R. Norwitz [et al.] // Obstet. Gynecol. — 1992. — Vol. 80. — P. 440-445.
36. Suppression by apoptotic cells defines tumor necrosis factor-mediated induction of glomerular mesangial cell apoptosis by activated macrophages / J. S. Duffield [et al.] // Am. J. Pathol. — 2001. — Vol. 159. — P. 1397-1404.
37. The chemokine system in diverse forms of macrophage activation and polarization / A. Mantovani [et al.] // Trends. Immunol. — 2004. — Vol. 25. — P. 677-686.
38. The effect of interleukin-17 on the proliferation and invasion of JEG-3 human choriocarcinoma cells / S. Pongcharoen [et al.] // Am. J. Reprod. Immunol. — 2006. — Vol. 55. — P. 291300.
39. Tumor necrosis factor-alpha inhibits trophoblast migration through elevation of plasminogen activator inhibitor-1 in firsttrimester villous explant cultures / S. Bauer [et al.] // J. Clin. Endocrinol. Metab. — 2004. — Vol. 89. — P. 812-822.
MECHANISMS OF IMMUNOREGULATION IN PLACENTA DEVELOPMENT
Selkov S. A., Pavlov O. V., Sokolov D. I.
■ Summary: Gestational role of placental macrophages (Hofbauer cells) is critically reviewed in the context of immunoregulation at the materno-fetal interface and participation in placental morphogenesis. By reference to literature data and own results the authors discuss regulatory roles of macrophages in apoptosis and differentiation of various cell populations in the placenta with particular emphasis on participation of placental macrophages in angiogenesis and development of placental vasculature. Heterogeneity of placental macrophage populations at different gestational stages and proposed roles in some pregnancy complications are also discussed.
■ Key words: placenta; macrophages; Hofbauer cells; cytokines; angiogenesis; apoptosis; immune tolerance.
■ Адреса авторов для переписки-
Сельков Сергей Алексеевич — д. м. н., заведующий лабораторией иммунологии, профессор.
НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН.
199034, Санкт-Петербург, Менделеевская л., д. 3.
E-mail: [email protected].
Павлов Олег Владимирович — к. б .н., с. н. с.
НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН.
199034, Санкт-Петербург, Менделеевская л., д. 3.
E-mail: [email protected].
Selkov Sergey Alekseevich — MD, Professor, laboratory of immunology. D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, RAMS. 3 Mendeleyevskaya Line,199034, St. Petersburg, Russia. E-mail: [email protected].
Pavlov Oleg Vladimirovich — PhD.
D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, RAMS. 3 Mendeleyevskaya Line,199034, St. Petersburg, Russia. E-mail: [email protected].
Соколов Дмитрий Игоревич — д. б. н., в. н. с. НИИ акушерства и гинекологии им. Д. О. Отта СЗО РАМН. 199034, Санкт-Петербург, Менделеевская л., д. 3. E-mail: [email protected].
Sokolov Dmitriy Igorevich — Doctor of Biological Sciences, senior staff scientist.
D. O. Ott Research Institute of Obstetrics and Gynecology, RAMS. 3 Mendeleyevskaya Line,199034, St. Petersburg, Russia. E-mail: [email protected].
