CC BY
22
Биология
Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского, 2014, № 2 (1), с. 133-139
УДК 612.73+612.118.2+612.172.1+612.181.5
М-ХОЛИНОБЛОКИРУЮЩАЯ АКТИВНОСТЬ СЫВОРОТКИ КРОВИ ЧЕЛОВЕКА В ОПЫТАХ С КОЛЬЦЕВЫМИ СЕГМЕНТАМИ КОРОНАРНОЙ АРТЕРИИ СВИНЬИ
© 2014 г. Е.А. Чулкина, 1,2 С. Ф. Гуляева, 2 В.И. Циркин, 3 А.А. Костяев 4
Вятский государственный гуманитарный университет, Киров 2Кировская государственная медицинская академия 3Казанский государственный медицинский университет 4Кировский НИИ гематологии и переливания крови
Поступила в редакцию 01.04.2013
Исследованы 10-, 50-, 100-, 500-, 1000-кратные разведения сыворотки венозной крови здоровых женщин, здоровых мужчин и мужчин с ишемической болезнью сердца в опытах со 195 кольцевыми сегментами правой коронарной артерии свиньи. Сыворотка крови человека оказывает М-холиноблокирующее действие, что объясняется наличием в ней неселективного эндогенного блокатора М-холинорецепторов. Его содержание зависит от пола, а также от наличия ишемической болезни сердца.
Ключевые слова: коронарная артерия, сыворотка крови, ацетилхолин, холинорецепторы, ишемиче-
ская болезнь сепдтта
Введение
Вопрос об участии парасимпатических влияний в регуляции коронарного кровотока остается открытым. Это связано с противоречивостью данных литературы о влиянии ацетил-холина (АХ) на миоциты коронарной артерии в условиях in vivo и in vitro. Так, по одним данным АХ в опытах с гладкими мышцами коронарной артерии свиньи (КАС) вызывает конст-рикцию [1], по другим - дилатацию [2], а по нашим данным АХ (10-10—10-4 г/мл) может вызывать три типа реакции: устойчивую конст-рикцию (УК), устойчивую дилатацию (УД) или транзиторную констрикцию (ТК), в которой фаза сокращения сменяется фазой расслабления [3]. Существование трех типов реакции мы объясняем наличием в КАС двух популяций мио-цитов: миоцитов-констрикторов, которые содержат М1-, М2- и МЗ-холинорецепторы (ХР), и миоцитов-дилататоров, содержащих М4-ХР. Вероятно, соотношение этих популяций в сегментах КАС и определяет характер ответа на АХ в условиях in vitro: при активации констрикторов возникает либо УК, либо фаза сокращения ТК, а при активации дилататоров — либо УД, либо фаза расслабления ТК [3]. Это означает, что в условиях in vivo парасимпатические воздействия могут вызывать как констрикцию, так и дилатацию коронарной артерии. Ранее было показано, что 10-, 50-, 100-, 500-, 1000-кратные разведения сыворотки крови человека
способны блокировать тонотропный эффект АХ в опытах с миоцитами матки крысы [4], желудка крысы [5], трахеи коровы [6] и отрицательный инотропный эффект в опытах с миокардом крысы [7]. Эта способность объяснялась наличием в сыворотке эндогенного блокатора М-холинорецепторов (ЭБМХР) [4-7]. Природа этого фактора и его селективность по отношению ко всем типам М-ХР не ясна. Не исследована и способность ЭБМХР изменять реакцию обеих популяций миоцитов коронарной артерии на АХ, хотя это может иметь важное клиническое значение, так как показано, что у пациентов, перенесших острый коронарный инцидент, содержание ЭБМХР в сыворотке крови повышено [8].
Цель данной работы - изучение в опытах с кольцевыми сегментами коронарной артерии свиньи М-холиномодулирующей активности сыворотки крови человека в зависимости от пола и наличия ишемической болезни сердца (ИБС) (с учетом кратности ее разведения).
Методика
Исследовали 10-, 50-, 100-, 500-, 1000-кратные разведения сыворотки венозной крови 34 человек, которые были разделены на 3 группы. В группу 1 вошли 12 здоровых женщин в возрасте 22-45 лет (34.2±7.9), в группу 2 - 12 здоровых мужчин в возрасте 40-55 лет (47.8±3.9). Все они являлись донорами крови. В группу 3 вошли 10 мужчин в возрасте 61-84 года
(68.0±6.4) с ИБС (длительностью 5—15 лет), но не имевших в анамнезе инфаркта миокарда. На момент взятия крови они поступили в кардиологическое отделение дневного стационара с целью коррекции лечения, которое в амбулаторных условиях проводилось стандартизировано в зависимости от выраженности стенокардии, в том числе бета-блокаторами, ингибиторами АПФ и статинами.
Забор венозной крови (в объеме 7—8 мл) из локтевой вены проводили с личного согласия исследуемых. Сыворотку получали путем 15минутного центрифугирования (при 1000 об/мин) свернувшейся крови. До момента исследования она хранилась 1—4 часа при 2—40С. Перед опытом сыворотку разводили раствором Кребса в 10, 50, 100, 500 и 1000 раз.
В работе использованы 195 кольцевых сегментов (шириной до 2 мм, диаметром до 3 мм) правой КАС от 34 свиней. Сокращения сегментов регистрировали по методике [9] на миоци-тографе, содержащем механотроны 6МХ1Б, самопишущие приборы Н3020, термостати-рующее устройство и шприцевые дозаторы оригинальной конструкции, обеспечивающие постоянную перфузию раствором Кребса (при 38°С и пассивной аэрации) рабочих камер объемом 1 мл со скоростью 0.7 мл/мин. Влияние разведений сыворотки на сокращение сегментов, вызванное АХ (5.5*10-5 М, фирма «Acros organics», Бельгия), исследовали по методике [9]. Она предусматривала 3-кратное воздействие АХ, то есть до, во время перфузии сегмента соответствующим разведением сыворотки крови и после его удаления.
Учитывая, что кольцевые сегменты исходно имели низкий базальный тонус, все их тестирования проводили на фоне тонуса, повышенного гиперкалиевым (25 мМ KCl) раствором Кребса (ГРК). Опыты проводили по представленной на рисунке схеме (панели А-Г): раствор Кребса ^ ^ ГРК ^ ГРК + АХ, 10-5 г/мл ^ ГРК ^ ГРК + сыворотка в одном из разведений (Сыв.) ^ ГРК + + Сыв + АХ ^ ГРК^ ГРК + АХ ^ ГРК, при длительности этапа в пределах 10 минут.
Результаты исследования подвергнуты статистической обработке с использованием программы BioStat 2009 Professional. 5.8.4 (фирма Аnalyst Soft). В тексте и таблице они представлены в виде средней арифметической и ошибки средней (M±m). Различия оценивали по критерию Манна—Уитни и считали значимыми при р < 0.05 [10].
Результаты исследования
На 1-м этапе замена стандартного раствора на ГРК вызывала развитие устойчивого тонуса
(рисунки а-г). Его величина варьировала от 4.1±0.3 до 4.4±0.4 мН.
На 2-м этапе замена ГРК на ГРК, содержащий АХ в концентрации 5.5*10-5 M (1-е тестирование АХ), в отдельных опытах вызывала УК (рисунок в) или УД (рисунок г), но чаще всего транзиторную констрикцию (ТК, рисунки а и б), которая характеризовалась фазой сокращения (ФС), переходящей в фазу расслабления (ФР). Величина ФС варьировала от 8.5±0.5 до 9.5±0.8 мН, или от 202.3±1б.5 до 218.7±20.3% от ГРК-вызванного тонуса (таблица). Величина ФР варьировала от 4.9±0.4 до 5.4±0.7 мН, или от 113.9±12.3 до 129.б± 15.3% от ГРК-вызванного тонуса (таблица).
На 3-м этапе замена ГРК, содержащего АХ, на ГРК без АХ сопровождалась восстановлением исходного ГРК-вызванного тонуса (рисунки а-г), что указывает на обратимость действия АХ.
Учитывая, что в наших опытах преимущественно наблюдалась ТК, исследование влияния сыворотки крови (этапы 4-В) на эффекты АХ были изучены, в основном, при этом типе реакции.
На 4-м этапе замена ГРК на ГРК, содержащий одно из разведений сыворотки (1:10, 1:50, 1:100, 1:500, 1:1000), как правило, не оказывала существенного влияния на ГРК-вызванный тонус (таблица, рисунки а-г). Это означает, что содержащийся в сыворотке крови так называемый эндогенный активатор сократимости миоцитов [11] не влияет на тонус миоцитов КАС.
На 5-м этапе замена ГРК, содержащего исследуемое разведение сыворотки крови, на ГРК, содержащий это же разведение и АХ (2-е тестирование АХ), либо не влияла на проявление ТК (рисунок а), либо приводила к полной или частичной ее блокаде (рисунок б), что зависело от кратности разведения сыворотки, пола исследуемого и наличия ИБС (таблица). В частности, сыворотка крови здоровых женщин (группа 1) полностью блокировала ФС в разведениях 1:10 и 1:50, частично блокировала ФС в разведении 1:100 и не влияла на проявление ФС в разведениях 1:500 и 1:1000. Так, в опытах с 10-кратным разведением сыворотки крови группы 1 (таблица) АХ при 1-м его тестировании повышал ГРК-вызванный тонус до 218.7% от исходного уровня, а при 2-м тестировании не изменял его - он составил 103.2% (различие с 1-м тестированием АХ статистически значимо, р < 0.05). Сыворотка крови здоровых мужчин (группа 2) полностью блокировала ФС в разведениях 1:10 и 1:50, частично блокировала ФС в разведениях 1:100 и 1:500 и не влияла на ФС в разведении 1:1000 (рисунок а). Сыворотка крови мужчин с ИБС (группа 3) полностью блокировала ФС в разведениях 1:10 и 1:50 и частично блокировала ФС
а
АХ"5
б
в
г
Рис. Механограммы кольцевых сегментов коронарной артерии свиньи, демонстрирующие М-холино-блокирующее действие 1000-кратного разведения сыворотки (Сыв. 1:1000) группы 2 (панель а) и группы 3 (панель б), а также 100-кратного разведения (Сыв. 1:100) группы 2 (панель в) и 50-кратного разведения группы 1 (панель г) в опытах с ацетилхолином (5.5*10'5 М, АХ) на фоне тонуса, вызванного гиперкалиевым раствором Кребса (ГРК, 25 мМ КС1). Панели отражают влияние сыворотки крови в условиях транзиторной констрикции (а и б), устойчивой констрикции (в) и устойчивой дилатации (г), вызываемых АХ. Горизонтальные линии под механограммами означают период воздействия ГРК, АХ и сыворотки. Калибровка - 5 мН, 5 мин
в разведениях 1:100, 1:500 и 1:1000 (рисунок б). Изменение ФР под влиянием сыворотки зависело от характера ее влияния на ФС. При полной ее блокаде ФР не наблюдалась, при частичной блокаде ФР наблюдалась, но была снижена ее величина, а при отсутствии блокады - ФР оставалась такой же, как и при 1-м тестировании АХ, то есть не изменялась. Таким образом, результаты 5-го этапа опытов показали, что сыво-
ротка крови (в зависимости от кратности ее разведения) способна блокировать обе фазы транзиторной констрикции (ФС и ФР).
На 6-м этапе замена ГРК, содержащего сыворотку крови и АХ, на ГРК без сыворотки и АХ, вызывала постепенное восстановление ГРК-вызванного тонуса до уровня, наблюдаемого на 3-м этапе тестирования, то есть до воздействия сыворотки и АХ. Это указывает на спо-
Величина тонуса (М±т) кольцевых сегментов коронарной артерии свиньи на различных этапах эксперимента с ацетилхолином (10-5 г/мл, АХ) и 10-, 50-, 100-, 500- и 1000-кратными разведениями сыворотки крови человека (Сыв.) в процентах к тонусу, вызванному гиперкалиевым (25 мМ КС1) раствором Кребса
Кратность разведения Этапы эксперимента
1-й 2-й 3-й 4-й 5-й 6-й 7-й 8-й
КС1 КС1+АХ КС1 КС1+Сыв. КС1+Сыв.+АХ КС1 КС1+АХ КС1
ФС ФР ФС ФР ФС ФР
Группа 1. Здоровые женщины (п = 12)
10 100 218.7±20.31 127.7±10.4 *," 100 102.7±9.7 103.2±6.52 101.5±7.92 100 129.8±16.42',° 107.0±14.7 100
50 100 193.9± 16.61 115.7±6.9 *," 100 93.2±14.7 108.3±8.42 100.2±4.82 100 139.1±29.72,6 105.0±20.4 100
100 100 202.3±16.51 120.4±11.4 *," 100 102.1±6.6 134.8±12.92-4 102.3±10.3" 100 148.4±39.36 102.0±12.2 100
500 100 211.3±10.21 121.7±10.4 ‘,* 100 118.1±7.33 189.3±10.33,4 110.3±12.4" 100 141.9±20.92,6 109.2±19.3 100
1000 100 209.1±12.31 119.6±13.7 ‘,* 100 94.2±10.6 182.9±14.33,4 120.2±12.43’4’" 100 138.9± 14.72,6 105.3±15.9 100
Группа 2. Здоровые мужчины (п = 12)
10 100 203.7±18.41 118.4±10.6 ‘,* 100 103.4±13.0 101.6±4.82 95.1±6.42 100 116.9±9.826 100.8±6.2 100
50 100 213.1±17.01 115.9± 10.3 ‘,* 100 105.9±10.4 110.6±9.32 96.9±7.7 100 137.3±11.52,6 119.8± 18.6 100
100 100 207.3±13.91 129.6±15.3 ‘,* 100 97.6±13.1 128.0±10.62-4 95.8±9.32," 100 154.2±12.7Д6 116.2±9.6°," 100
500 100 218.0±12.41 121.4±13.1 ‘,* 100 108.1±4.7 140.8±16.62-4 108.4±15.7" 100 132.9±19.62',° 112.9± 15.1 100
1000 100 216.2±13.41 116.7±11.7 ‘,* 100 98.1±15.1 186.9±15.83,4 117.6±12.83" 100 134.8±18.32,6 109.2±14.2 100
Группа 3. Мужчины, больные ИБС (п = 10)
10 100 209.8±19.61 125.8±11.0 ‘,* 100 92.1±16.3 104.9±4.52 100.7±5.22 100 120.5±10.82,6 100.9±7.12 100
50 100 203.7±4.5‘ 118.9±12.0 ‘,* 100 98.7±11.3 109.6±10.42 94.4±5.12 100 126.3±25.72,6 99.3±17.6 100
100 100 208.9±18.81 126.3±17.4 ‘,* 100 105.2±15.1 110.5±13.62 86.5±21.1 100 119.8± 11.120 103.0±10.2 100
500 100 210.4±12.41 120.3±12.1 ‘,* 100 106.7±18.1 128.2±13.42,3 88.2±18.3" 100 137.6±27.12,6 103.3±18.2 100
1000 100 207.1±15.61 119.0±13.8 ‘,* 100 98.0±21.1 139.0±20.52,3 96.1±26.2 100 129.3±24.4А° 94.2±20.3 100
Примечание: ФС - фаза сокращения, ФР - фаза расслабления, * - различие с фазой сокращения достоверно (р < 0.05 по критерию Манна-Уитни), 1...6 - различие с соответствующим этапом эксперимента достоверно (р < 0.05 по критерию Манна-Уитни).
собность миоцитов КАС к восстановлению их исходной тонической активности после воздействия АХ и сыворотки.
На 7-м этапе замена ГРК на ГРК, содержащий АХ (3-е тестирование АХ), во всех опытах приводила к развитию ТК. При этом (таблица, рисунки а и б), как правило, величина ФС была ниже, чем при 1-м тестировании АХ, и это не зависело от характера влияния сыворотки на констрикторный эффект АХ (полное или частичное блокирование, либо отсутствие признаков блокады). Так, в опытах с 10-кратным разведением сыворотки крови женщин (группа 1) величина ФС при 1-м, 2-м и 3-м тестировании составила, соответственно, 218.7, 102.7 и
129.8% от исходного уровня ГРК; в опытах со 100-кратным разведением она составила, соответственно, 202.3, 134.8 и 148.4%, а в опытах с 1000-кратным разведением - соответственно 209.1, 182.9 и 138.9%. Это означает, что даже после удаления сыворотки наблюдается эффект последействия, причем ее способность блокировать констрикторный эффект АХ не снижается, а даже возрастает, что, в частности, установлено для разведений 1:500 и 1:1000. Выраженность ФР на этом этапе также была снижена (ее величина составила 94.2-119.8%). Об этом свидетельствует тот факт, что различия между тонусом, наблюдаемым в ФС и в ФР, были, как правило, статистически незначимы. Следовательно, после удаления сыворотки из раствора ее последействие отражается не только в снижении констрикторного эффект АХ, но и его дилататорного эффекта.
Нами также проанализированы те единичные случаи, в которых кольцевые сегменты КАС в ответ на АХ развивали либо УК (п = 5), либо УД (п = 2). В опытах, в которых первоначально АХ вызывал устойчивую констрикцию, сыворотка крови (1:100 и 1:500) изменяла характер ответа на АХ - вместо УК наблюдалась ТК. При этом величина констрикторного ответа была ниже исходной, что отмечено в опытах со 100-кратным разведением сыворотки крови здоровых мужчин (рисунок б). При 3-м тестировании сегмента способность АХ повышать ГРК-вызванный тонус была минимальна. В тех двух опытах, в которых кольцевые сегменты КАС при 1-м тестировании АХ развивали УД (рисунок г), при 2-м тестировании, то есть на фоне 50-кратного разведения сыворотки крови (группы 1 или 2), АХ вместо УД вызывал УК, следовательно, сыворотка блокировала дилати-рующую реакцию на АХ. При 3-м тестировании АХ в обоих опытах ГРК-вызванный тонус не изменялся. В целом, результаты этих единичных опытов подтверждают наш вывод о том,
что сыворотка крови человека при определенных разведениях способна блокировать оба эффекта АХ (констрикторный и дилататорный), независимо от того, какие популяции миоцитов доминируют в исследуемом сегменте.
Обсуждение результатов
Нами впервые показано, что сыворотка крови человека блокирует все три типа реакции (ТК, УК и УД) кольцевых сегментов КАС на АХ (5.5*10-5 М), в том числе она блокирует обе фазы ТК. Ранее нами показано [3], что УК и фаза сокращения ТК обусловлены активацией М3-ХР и, частично, М2-ХР и М1-ХР, а УД и фаза расслабления ТК - активацией М4-ХР. Это означает, что способность сыворотки крови блокировать все три типа реакции на АХ связана с наличием в крови ЭБМХР, который, вероятно, является неселективным блокатором, подобно атропину. Ранее нами установлено, что атропин в концентрации 10-6 г/мл полностью блокирует все три типа реакции кольцевых сегментов КАС на АХ (5.5*10-5 М). В целом полагаем, что ЭБМХР блокирует не только миоциты матки крысы [4], желудка крысы [5], трахеи коровы [6], миокардиоциты крысы [7], но и миоцитов КАС.
Нами впервые установлено, что М-холино-блокирующий эффект сыворотки крови человека развивается с определенной скоростью, при этом блокирование М4-ХР (дилатация) происходит с большей скоростью, чем М1-, М2- и М3-ХР (констрикция). Для этого эффекта характерно длительное последействие, судя по отсутствию реакции на АХ при 3-м его тестировании.
Нами впервые выявлено, что ЭБМХР-активность сыворотки крови зависит от кратности ее разведения: для сыворотки крови здоровых женщин и мужчин полная блокада ТК в ответ на АХ наблюдается при воздействии ее 10- и 50-кратных разведений, а для сыворотки крови мужчин с ИБС - при воздействии 10-, 50-и 100-кратных ее разведений. Это говорит о том, что при ИБС содержание ЭБМХР повышено в 2 раза. Частичное блокирование ТК под влиянием сыворотки крови у женщин наблюдается для разведения 1:100 (1:500 и 1:1000 не влияют), у здоровых мужчин - для разведений 1:100 и 1:500 (1:1000 не влияет), а у мужчин с ИБС - для разведений 1:500 и 1:1000. Эти данные говорят о том, что содержание ЭБМХР при ИБС повышено в 2 раза, и указывают на половые различия в отношении его содержания в крови - у мужчин оно в 5 раз выше, чем у женщин.
Вопрос о природе ЭБМХР остается открытым. Мы не исключаем, что его компонентом
может быть лизофосфатидилхолин (ЛФХ), так как известно, что он блокирует влияния АХ на миоциты желудка [5] и миокардиоциты крысы [7]. Для ЛФХ, как и для сыворотки крови, характерно длительное последействие [7]. Известно также, что при ИБС содержание ЛФХ в сыворотке крови возрастает [12]. Это коррелирует с данными С.В. Мальчиковой и соавт. [8] о повышении содержания ЭБМХР в сыворотке крови у пациентов, перенесших острый коронарный инцидент, и с нашими данными о 2-кратном повышении ЭБМХР у пациентов с ИБС. Очевидно, что ЭБМХР, содержащийся в крови здорового человека, уменьшает избыточное влияние вагуса на висцеральные системы, то есть выполняет защитную функцию. Полагаем, что повышение содержания ЭБМХР при ИБС снижает М-холинореактивность миоцитов коронарной артерии больных и тем самым блокирует констрикторную реакцию на АХ. Иначе говоря, рост содержания ЭБМХР носит компенсаторный характер. Однако при этом снижается способность парасимпатической системы регулировать коронарный кровоток, в том числе снижать его в условиях покоя (за счет констриктор-ной реакции) и увеличивать его при физических нагрузках (за счет дилататорной реакции).
Выводы
В опытах с кольцевыми сегментами правой коронарной артерии свиньи показано, что на фоне тонуса, вызванного ГРК, ацетилхолин, как правило, вызывает транзиторную констрикцию.
Сыворотка крови здоровых женщин (группа 1), здоровых мужчин (группа 2) и мужчин, больных ИБС (группа 3), в разведениях 1:10, 1:50, 1:100, 1:500 и 1:1000 не влияет на ГРК-вызванный тонус, но при определенных разведениях полностью (в группах 1 и 2 - 1:10 и 1:50, в группе 3 - 1:10, 1:50, 1:100) или частично (в группе 1 - 1:100, в группе 2 - 1:100 и 1:500, в группе 3 - 1:100, 1:500 и 1:1000) блокирует транзиторную констрикцию, которая реализуется за счет активации М1-, М2- и М3-холинорецепторов (фаза сокращения) и М4-холинорецепторов (фаза расслабления).
Способность сыворотки крови человека оказывать М-холиноблокирующее влияние объясняется наличием в крови неселективного эндогенного блокатора М-холинорецепторов. Его содержание зависит от пола (у мужчин в 5 раз выше, чем у женщин), а также от наличия ИБС (у больных мужчин в 2 раза выше, чем у здоровых). Полученные данные могут быть основанием для дальнейшего изучения гендерных особенностей адаптаций организма к стрессу,
установления роли ЭБМХР в патогенезе ИБС, а также разработки реабилитационных мероприятий при ИБС.
Список литературы
1. Weirich J., Dumont L., Fleckenstein-Grun G. Contribution of capacitative and non-capacitative Ca2+-entry to M3-receptor-mediated contraction of porcine coronary smooth muscle // Cel. Calcium. 2005. V. 38. № 5. Р. 457-461.
2. Chen C., Conklin B., Ren Z., Zhong D. Homocysteine decreases endothelium-dependent vasorelaxation in porcine arteries // J. Surg Res. 2002. V. 102. № 1. Р. 22-30.
3. Березовчук Е.А., Циркин В.И. Роль М-холи-норецепторов в реакции коронарной артерии свиньи на ацетилхолин // Вестник Нижегородского университета им. Н.И. Лобачевского. 2012. № 3. С. 51-60.
4. Сизова Е.Н., Циркин В.И., Дворянский С.А. Изменение p-адренореактивности миометрия крысы после 20-минутного воздействия на него различных разведений сыворотки крови человека как источника эндогенных модуляторов в-адренореактивности прямого действия // Вятский медицинский вестник. 2005. Вып. 3-4. С. 65-70.
5. Куншин А.А., Циркин В.И., Проказова Н.В. Влияние лизофосфатидилхолина, фосфатидилхолина и куриного яичного желтка на сократительные эффекты ацетилхолина в опытах с гладкими мышцами желудка крысы // Бюл. экспериментальной биологии и медицины. 2007. Вып. 143. № 6. С. 4-7.
6. Циркин В.И., Кононова Т.Н., Сизова Е.Н. и др. О возможной роли эндогенных модуляторов в-адрено- и М-холинореактивности в патогенезе бронхиальной астмы // Пульмонология. 2007. № 5. С. 46-50.
7. Коротаева К.Н., Вязников В.А., Циркин В.И., Костяев А.А. Влияние сыворотки крови человека на сократимость и в-адренореактивность изолированного миокарда человека // Физиология человека. 2011. Т. 37. № 2. С. 1-9.
8. Мальчикова С.В., Сизова Е.Н., Циркин В.И. и др. М-холиноблокирующая активность сыворотки крови при остром коронарном инциденте и влияние на нее физических тренировок // Российский физиологически журнал им. И.М. Сеченова. 2003. Т. 89. № 5. С. 556-563.
9. Циркин В.И., Дворянский С.А. Сократительная деятельность матки (механизмы регуляции). Киров, 1997. 270 с.
10. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика, 1998. 459 с.
11. Циркин В.И., Ноздрачев А.Д., Хлыбова С.В., Демина Н.Л. Содержание в сыворотке крови эндогенных модуляторов адренореактивности и эндогенного активатора сократимости миоцитов как отражение их участия в регуляции артериального давления // Вестник Санкт-Петербургского университета. Сер. 3 (Биология). 2008. Вып. 2. С. 69-82.
12. Matsumoto T., Kobayashi T., Kamata K. Role of lysophosphatidylcholine (LPC) in atherosclerosis // Curr. Med. Chem. 2007. V. 14. № 3. Р. 3209-3220.
M-CHOLINOBLOCKER ACTIVITY OF HUMAN BLOOD SERUM IN THE EXPERIMENTS WITH PORCINE CORONARY ARTERY RING SEGMENTS
E.A. Chulkina, S.F. Gulyaeva, V.I. Tsirkin, A.A Kostyaev
10-, 50-, 100-, 500-, and 1000-fold dilutions of venous serum of healthy women, healthy men and men with coronary heart disease were studied in the experiments with 195 ring segments of the porcine right coronary artery. Human serum provides M-cholineblocking activity that can be explained by the presence of an endogenous non-selective M-cholinoreceptor blocker whose content depends on the gender and the presence of coronary heart disease.
Keywords: coronary artery, blood serum, acetylcholine, cholinoreceptors, coronary heart disease.
References
1. Weirich J., Dumont L., Fleckenstein-Grun G. Contribution of capacitative and non-capacitative Ca2+-entry to M3-receptor-mediated contraction of porcine coronary smooth muscle // Cel. Calcium. 2005. V. 38. № 5. R. 457-461.
2. Chen C., Conklin B., Ren Z., Zhong D. Homocysteine decreases endothelium-dependent vasorelaxation in porcine arteries // J. Surg Res. 2002. V. 102. № 1. R. 22-30.
3. Berezovchuk E.A., Cirkin V.I. Rol' M-holi-noreceptorov v reakcii koronarnoj arterii svin'i na acetil-holin // Vestnik Nizhegorodskogo universiteta im. N.I. Lobachevskogo. 2012. № 3. S. 51-60.
4. Sizova E.N., Cirkin V.I., Dvoryanskij S.A. Izme-nenie p-adrenoreaktivnosti miometriya krysy posle 20-minutnogo vozdejstviya na nego razlichnyh razvedenij syvorotki krovi cheloveka kak istochnika ehndogennyh modulyatorov p-adrenoreaktivnosti pryamogo dejstviya // Vyatskij medicinskij vestnik. 2005. Vyp. 3-4. S. 6570.
5. Kunshin A.A., Cirkin V.I., Prokazova N.V. Vliya-nie lizofosfatidilholina, fosfatidilholina i kurinogo yaichnogo zheltka na sokratitel'nye ehffekty acetilholina v opytah s gladkimi myshcami zheludka krysy // Byul. ehksperimental'noj biologii i mediciny. 2007. Vyp. 143. № 6. S. 4-7.
6. Cirkin V.I., Kononova T.N., Sizova E.N. i dr. O vozmozhnoj roli ehndogennyh modulyatorov p-adreno- i M-holinoreaktivnosti v patogeneze bronhial'noj astmy // Pul'monologiya. 2007. № 5. S. 46-50.
7. Korotaeva K.N., Vyaznikov V.A., Cirkin V.I., Kos-tyaev A.A. Vliyanie syvorotki krovi cheloveka na sokrati-most' i p-adrenoreaktivnost' izolirovannogo miokarda che-loveka // Fiziologiya cheloveka. 2011. T. 37. № 2. S. 1-9.
8. Mal'chikova S.V., Sizova E.N., Cirkin V.I. i dr. M-holinoblokiruyushchaya aktivnost' syvorotki krovi pri os-trom koronarnom incidente i vliyanie na nee fizicheskih trenirovok // Rossijskij fiziologicheski zhurnal im. I.M. Sechenova. 2003. T. 89. № 5. S. 556-563.
9. Cirkin V.I., Dvoryanskij S.A. Sokratitel'naya deyatel'nost' matki (mekhanizmy regulyacii). Kirov, 1997. 270 s.
10. Glanc S. Mediko-biologicheskaya statistika. M.: Praktika, 1998. 459 s.
11. Cirkin V.I., Nozdrachev A.D., Hlybova S.V., Demina N.L. Soderzhanie v syvorotke krovi ehndogen-nyh modulyatorov adrenoreaktivnosti i ehndogennogo aktivatora sokratimosti miocitov kak otrazhenie ih uchastiya v regulyacii arterial'nogo davleniya // Vestnik Sankt-Petergburskogo universiteta. Ser. 3 (Biologiya). 2008. Vyp. 2. S. 69-82.
12. Matsumoto T., Kobayashi T., Kamata K. Role of lysophosphatidylcholine (LPC) in atherosclerosis // Curr. Med. Chem. 2007. V. 14. № 3. R. 3209-3220.
