CC BY
23
Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»
Инфекция и иммунитет
Матрично-активированная лазерная десорбция/ ионизация времяпролетная масс-спектрометрия (MALDI-TOF MS) показала себя надежным инструментом идентификации бактерий на видовом уровне. Метод основан на получении уникального набора белковых масс-спектров (MSP) исследуемого микроорганизма. Однако идентификация штаммов Leptospira с помощью MS затруднена отсутствием эталонных MSP в существующих международных таксономических базах.
Цель данного исследования — получение MSP патогенных штаммов Leptospira spp. из коллекции лаборатории зооантропонозных инфекций НИИЭМ им. Пастера.
Экстракты клеток 9-ти штаммов Leptospira, относящихся к 3-м геномовидам L. interrogans, L. borg-petersenii, L. kirschneri и 7-ми серогруппам получали этанольно-муравьинокислотным методом. Образцы экстрактов наносили 6-ти кратно по 1 мкл в лунки MALDI мишени. В качестве матрицы использовали раствор циано-коричной кислоты в 50% ацетонитри-ле и 2,5% трифторуксусной кислоте. Масс-спектры были получены на масс-спектрометре Microflex и преобразованы в MSP для каждого штамма с помощью программы MALDI Biotyper 3.0 (Bruker Daltonik, Германия). Как сравнительный контроль использовали эталонный MSP спирохеты Brachyspira murdochii из таксономической библиотеки Bruker. Сравнение MSP осуществляли визуализацией в виде построения дендрограмм.
Все штаммы Leptospira spp. дали специфические белковые профили, кластеризация которых на ден-дрограмме четко отличалась от MSP контроля сравнения. При этом не выявлена группировка MSP референсных штаммов на кластеры согласно таксономическим видам, но наблюдалась кластеризация MSP по серотипам Sejroe, Ballum, Icterohaemorrhagiae.
Полученные результаты свидетельствуют о возможности использования метода MALDI-TOF MS для серотипирования патогенных лептоспир.
СОВРЕМЕННЫЕ ФАКТОРЫ ПЕРЕДАЧИ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ОСТРЫХ КИШЕЧНЫХ ИНФЕКЦИЙ
И.В. Лихачев, Л.А. Кафтырева
ФБУН НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера, Санкт -Петербург
Острые кишечные инфекции (ОКИ) имеют глобальное распространение, регистрируются среди детского и взрослого населения и имеют широкий спектр этиологии. Такая тенденция отмечается практически во всех странах.
Цель исследования: оценить значимость продуктов, ранее не рассматриваемых как факторы передачи ОКИ (так называемые «нетрадиционные»).
Задачи: анализ вспышек ОКИ, зарегистрированных в последнее десятилетие в ряде стран, выявление ведущих факторов передачи пищевых вспышек и оценка эпидемиологической значимости различных пищевых продуктов в структуре ОКИ.
Материалы и методы: отечественная и зарубежная статистика регистрации вспышек ОКИ, вызванных нетрадиционными с точки зрения эпидемиологии пищевыми продуктами.
Результаты. Bacillus cereus был причиной 46% пищевых вспышек, обусловленных зерновыми, бобовыми и растительными продуктами и не более 25% — мясомолочными. Причиной вспышек, вызванных
энтерогеморрагическими (E. coli О157) и энтеротокси-генными эшерихиями, продуцирующими экзотоксины (шигатоксины и энтеротоксины соответственно) в 30% были продукты растительного происхождения, в 15% зерновые и бобовые, в 35% — мясные. Доля молочных вспышек не превышала 6%. Микроаэрофильные микроорганизмы, такие как Campylobacter spp. чаще выделялись из мясо-молочных продуктов (58,5%), поскольку вакуумная упаковка способствовала их длительному сохранению. Факторами передачи вирусных кишечных патогенов, таких как Norovirus, Rotavirus, Sapovirus, чаще являлись контаминиро-ванные растительные продукты — от 50% (Sapovirus) до 31% (Norovirus), реже — мясные продукты (16%), и с одинаковой частотой (8—10%) — молочные и яичные, зерновые и бобовые продукты (9—16%), масла и сахара (9—10%). Следует отметить, что такой фактор передачи, как спиртные напитки (вина) нередко были контаминированы различными микроорганизмами (B. cereus — в 6% случаев, Campylobacter — в 7% случаев, Clostridium botulinym — 11% случаев, Clostidium perfringens — 8% случаев, E. coli — от 7 до 11 %, различных сероваров Salmonella — от 2 до 13%, вирусов (Norovirus, Rotairus, Sapovirus) — до 10%).
Таким образом, настоящее время особенностью факторов передачи ОКИ является активная роль продуктов растительного происхождения, зерновых и бобовых продуктов, употребляемых без термической обработки, а также спиртосодержащих напитков. Профилактика ОКИ в настоящее время должна включать лабораторный контроль широкого спектра возбудителей.
ЛОКАЛЬНЫЙ ГУМОРАЛЬНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ К СЕЗОННЫМ, ПАНДЕМИЧЕСКИМ И ПОТЕНЦИАЛЬНО ПАНДЕМИЧЕСКИМ ЖИВЫМ ГРИППОЗНЫМ ВАКЦИНАМ
И.В. Лосев, Г.Д. Петухова, С.А. Донина, С.А. Кузнецова, А.Н. Найхин
ФГБУ НИИ экспериментальной медицины СЗО РАМН, Санкт-Петербург
Локальный иммунитет верхних дыхательных путей — один из важнейших факторов защиты от гриппа. Живые аттенуированные гриппозные вакцины (ЖГВ) вызывают выраженный локальный иммунный ответ. Ранее нами было показано существо -вание прямой зависимости между защитой людей от гриппозной инфекции и уровнем секреторных IgA антител в слюне и носовых секретах. Целью настоящей работы является сравнение формирования локального иммунного ответа на сезонную пандемическую ЖГВ А (H1N1)pdm2009 и потенциально пандемические ЖГВ, приготовленные из птичьих вирусов А (H5N2) и А (H7N3).
Материалы и методы. Здоровые волонтеры 18—20 лет прививались однократно тривалентны-ми сезонными ЖГВ или двукратно моновалентными ЖГВ А/17/Калифорния/2009/38 (H1N1), А/17/ Утка/Потсдам/86/92 (H5N2) и A/17/Дикая утка/ Нидерланды/00/95 (H7N3). Образцы носовых секретов, слюны и сывороток крови собирали до вакцинации, на 28 день после вакцинации и на 28 день после ревакцинации. Титры сывороточных антител измеряли в РТГА. Уровни локальных IgA в носовых секретах и слюне определяли с помощью ИФА. Для изучения авидности антител применялся тест с мочевиной.
2014, Т. 4, № 1
Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»
Результаты. Десятилетние наблюдения за формированием локального иммунитета у людей, прививавшихся сезонными тривалентными вакцинами, показали постепенное снижение процента конверсий титров этих антител. Однако это не отражалось на частоте конверсий данных антител у привитых людей с низкими исходными титрами локальных IgA (< 1:8). Показано существование высоких титров кросс-реактивных IgA антител к вирусу А (H1N1)pdm2009 еще до его вступления в активную циркуляцию. У людей обнаружены локальные кросс-реактивные антитела к птичьим вирусам А (H5N2) и А (H7N3), но в более низкой концентрации. Вакцинация ЖГВ повышала не только титры, но и авидность локальных антител. Кроме того, она стимулировала гетерологичный иммунный ответ к широкому спектру штаммов вируса гриппа А.
Выводы. Сезонные, пандемические и потенциально пандемические ЖГВ способны активно стимулировать продукцию локальных антител. У невак-цинированных лиц выявляются предсуществующие антитела к новым вирусам и иммунный ответ после вакцинации находится в обратной зависимости от уровней антител до вакцинации. Вакинация ЖГВ повышает также и функциональную активность (авидность) антител. Локальные антитела, индуцированные введением ЖГВ, проявляют широкую кросс-реактивность к различным штаммам гриппа А.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТИВНОСТИ ТЕХНОЛОГИИ АЭРОЗОЛЬНОГО РАСПЫЛЕНИЯ ДЕЗИНФЕКТАНТОВ В МИНИМИЗАЦИИ ФАКТОРОВ, ОТВЕЧАЮЩИХ ЗА КОЛОНИЗАЦИЮ ПАЦИЕНТОВ РОДДОМОВ РЕЗИДЕНТНЫМИ ШТАММАМИ А.Е. Макаров, А.П. Ребещенко, А.С. Корначев, А.А. Вакарина, Л.В. Катаева
ФБУН Тюменский НИИ краевой инфекционной патологии Роспотребнадзора
Для повышения результативности биологической безопасности (ББ) роддомов апробирована технология дезинфекции помещений и оборудования с помощью аэрозольного распыления генератором «Ультраспрейер» дезинфектанта на основе перекиси водорода. Объектом исследования являлся роддом № 2 г. Тюмени, где на основе технологии РОУС оказывалась медицинская помощь женщинам с беременностью с 36 недель без соматической патологии. Целью настоящего исследования являлась оценка результативности данной технологии в минимизации угрозы колонизации пациентов роддома резидентными штаммами (РШ) с высокой резистентностью к антибиотикам. В качестве измерителя результативности использовались данные еженедельного микробиологического мониторинга пяти случайно отобранных пар новорожденных и родильниц (мазки со слизистых конъюнктивы, носа, зева, прямой кишки, кожи пупочного остатка новорожденных, рук и молочных желез родильниц). Группа наблюдения включала в себя результаты мониторинга с мая по декабрь 2010 г. Моментом ее создания явилось начало использования в стационаре генератора «Ультраспрейер». Группа контроля охватывала период 2009 г. и первых четырех месяцев 2010 г., когда в стационаре дезинфекция осуществлялась рутинным методом орошения поверхностей. В группе наблюдения было отобрано 1820 проб, а группа контроля 1876 проб.
Установлено, что оцениваемая технология позволила сократить угрозу колонизации РШ пациентов роддома, особенно тех, которые находились в стацио -наре больше четырех дней. Кроме этого отмечено снижение нежелательных клинических исходов в виде случаев инфекционных заболеваний у пациентов, количество которых в группе наблюдения по сравнению с группой контроля, уменьшилось на 32,6% (группа контроля — 58,79, группа наблюдения — 39,6 на 1000 родов или живорожденных новорожденных). Позитивные изменения в качестве медицинского обслуживания отмечались и пациентками, по субъективным ощущениям которых уровень биологической безопасности акушерского стационара вырос, по сравнению с группой контроля в 2 раза.
Таким образом, технология аэрозольного распыления дезинфектантов с помощью аэрозольного генератора «Ультраспрейер» оказалась весьма результативной в части обеспечения биологической безопасности акушерских стационаров.
МОЛЕКУЛЯРНО-ГЕНЕТИЧЕСКИЙ МОНИТОРИНГ В ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКОМ НАДЗОРЕ И КОНТРОЛЕ ЗА ГЕПАТИТОМ С
Ю.В. Михайлова
ФБУН Нижегородский НИИ эпидемиологии и микробиологии им. акад. И.Н. Блохиной Роспотребнадзора
На примере крупного города европейской части России получены новые знания об особенностях эпидемического процесса гепатит С-инфекции (ГС) в современных условиях, проявившиеся в изменении динамики распространенности манифестного и латентного компонентов.
Доля серопозитивных лиц среди групп повышенного риска инфицирования ГС колебалась от 4,3±0,6 до 92,5±2,7%, до 30 раз превышая показатель контрольной группы. Встречаемость РНК у серопозитивных лиц составила в среднем 63%. Среди серонегативных лиц из групп повышенного риска инфицирования РНК обнаружена в 1,1±0,4%. У больных хроническим ГС (ХГС) в 4,4±2,1% РНК обнаружена в мононуклеарах при отсутствии вире-мии в плазме крови.
Выявлены качественные и количественные параметры структуры генотипов вируса ГС (ВГС) в Нижегородской области. Генотипическое разнообразие представлено субтипами 1а, 1Ь, 2, 3а, с одинаковым превалирование в общей популяции населения 1Ь (42,9±2,7%) и 3а (40,1±2,7%). В 4,1±1,1% выявлены ассоциации двух субтипов: Пэ+3а, 1а+1К Структура генотипов ВГС характеризуется региональной неравномерностью. Соотношения субтипов отличаются у отдельных контингентов населения (у медицинских работников, пациентов гематологии, гемодиализа 1Ь достоверно преобладал над 3а; у пациентов наркологических стационаров в 52,2% выявлялся 3а; у больных ГС субтипы 1Ь и 3а обнаружены с одинаковой частотой), в разных возрастных и половых группах, при остром ГС и ХГС, при моно- и микст-вариантах инфекции. Изменения, произошедшие в структуре генотипов за последние 17 лет, проявились в снижении удельного веса 1Ь, росте доли 3а, в появлении с 2006 г. циркуляции ВГС субтипа 1а.
Для совершенствования эпидемиологического надзора за ГС экспериментально доказана целесообразность определения РНК в сыворотке и моно-нуклеарах крови для идентификации источника
