CC BY
54ЛЕЙКОЗ КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА - ПУТИ РЕШЕНИЯ
ПРОБЛЕМЫ.
Мальцева Н.А. (mail@sssu.ru) (1), Баранов В.И.(2), Олийник Е.И. (3),
Животов А.А.(4)
(1)Южно-Российский государственный университет экономики и сервиса, Шахты,
(2)Северо-Кавказский зональный научно-исследовательский ветеринарный институт, Новочеркасск,
(3)Станция по борьбе с болезнями животных, Москва,
(4) Станция по борьбе с болезнями животных, Шахты
Энзоотический лейкоз крупного рогатого скота (ЛКРС) - одно из наиболее распространенных лимфопролиферативных заболеваний сельскохозяйственных животных, наносящих значительный экономический ущерб не только вследствие падежа, недополучения продуктов животноводства, но и опасностью потери уникального генофонда в молочном скотоводстве, т. к. болезнь поражает в первую очередь высокопродуктивных коров, являющихся национальным достоянием. Чаще лейкозом заболевают коровы в возрасте 4-7 лет с ослабленными защитно-приспособительными реакциями организма.
Известно, что возбудителем болезни является РНК-содержащий вирус семейства Retroviridae, ретровирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС), культивирующийся в перевиваемой линии клеток почки эмбриона овцы FLK, хронически инфицированной этим вирусом (5,13,15,25). Многочисленными исследованиями подтвержден горизонтальный путь передачи инфекции, в опытах на телятах и ягнятах подтверждена возможность экспериментального воспроизведения лейкоза КРС (3,19).
Проблема лейкоза крупного рогатого скота (ЛКРС) - одна из наиболее важных проблем не только ветеринарной медицины, животноводства, но и биологии, экологии в целом, имеющая непосредственное отношение к безопасности здоровья человека, так как ВЛКРС имеет близкое морфологическое и эволюционное родство с вирусом Т-клеточного лейкоза человека. Несомненно, одной из важнейших проблем онкологии и лейкозологии является возможная связь между заболеваемостью лейкозами и опухолями животных и человека. Есть данные о способности некоторых онкогенных вирусов преодолевать межвидовые барьеры, а также о тенденции роста этих болезней (10). Большой интерес представляют проблемы потенциальной опасности для человека продуктов питания от животных из стад, неблагополучных по лейкозу, влияния вредных метаболитов, накапливающихся в организме больных коров, на организм человека, а также использования животных для получения биопрепаратов. Имеются данные об экспериментальном заражении обезьян бычьим лейкозом (18). И последнее - высокая степень сходства ВЛКРС с вирусом Т-клеточного лейкоза человека (HTLV-1, Human T-cell leukemia virus), относящемуся также к семейству Retroviridae, что свидетельствует об их общем пути в процессе эволюции (6). Однако, несмотря на многочисленные исследования, проводимые в данном направлении, окончательного ответа на
вопрос о возможности взаимосвязи между заболеваниями лейкозами и другими болезнями опухолевой природы у животных и человека нет.
Установление передачи вируса экзогенным путем практически исключило возможность наследственной передачи лейкоза. Исходя из этого, проявление болезни у родственных животных (т.е. вертикальный путь передачи вируса) можно объяснить только внутриутробным (интраплацентарным) заражением телят от больных лейкозом и ВЛКРС-инфицированных коров, частота которого в большинстве случаев зависит от эпизоотической ситуации в стаде по лейкозу, продолжительности периода неблагополучия стада по ЛКРС и ВЛКРС-инфекции, от заболеваемости лейкозом, в том числе от уровня лейкоцитов в крови, а также от многих пока не установленных причин.
Патоморфологические изменения у крупного рогатого скота при лейкозе очень разнообразны, как по частоте и характеру поражения органов и тканей, так и по формам гистологического проявления. Установлено, что 85% опухолей животных приходится на лимфолейкоз, злокачественные лимфомы, лимфосаркомы. Патологоанатомическая диагностика при ЛКРС имеет важное значение для выяснения эпизоотической ситуации в стаде.
Лейкозные изменения при гистологическом исследовании в ранний период болезни регистрируются в костном мозге, мякотных тяжах, светлых центрах фолликулов, и синусах лимфатических узлов, при содержании в крови 9-20 тыс/мкл лейкоцитов и до 80% лимфоцитов, также на предрасположенность к болезни имеет влияние эндокринная система, т.е. для развития болезни, кроме обязательного присутствия ВЛКРС имеет важное значение состояние желез внутренней секреции, а также контролирующих систем, подавляющих лейкозогенную информацию в клетке.
До настоящего времени основным и единственным методом борьбы с ЛКРС является выбраковка больных и изоляция инфицированных коров, поэтому первостепенное значение имеет своевременная и точная диагностика как болезни, так и инфекции.
Профессор Г. Розенберг (ФРГ, Ганновер) еще в 70-х годах писал, что при ЛКРС «в принципе необходимо поступать так же как при борьбе с туберкулезом и бруцеллезом», как сейчас и поступают в большинстве западноевропейских стран, а также в некоторых странах СНГ (Украина), - забивают серопозитивных коров (9,3).
В Российской Федерации существует иной подход к решению проблемы ЛКРС: выбраковка больных животных (гематологически позитивных) и изоляция инфицированных с последующей постепенной заменой их здоровыми в соответствии с правилами по профилактике и борьбе с ЛКРС (1999 г.) Однако, этот способ оздоровления стад, как показывает практика, малоэффективен еще и вследствие недостаточного количества (два раза в год) и качества (только РИД) иммунологических исследований, по результатам которых проводится оздоровление хозяйств.
В настоящее время в стадах крупного рогатого скота в Ростовской области выявляется 1 -3% гематологически положительных коров, инфицированность поголовья составляет в среднем 30%, а в отдельных регионах доходит до 70% и выше, несмотря на проводимые мероприятия по борьбе с болезнью, заключающиеся в уничтожении больных и изоляции инфицированных
животных. Гематологический анализ позволяет выявить клиническую стадию болезни, тогда как для обнаружения онковирусной инфекции необходим комплекс иммунологических (РИД, РСК, РИА, ИФА) в сочетании с
молекулярно-биологическими (ДНК-зонд, полимеразная цепная реакция -ПЦР) тестами.
Широкое применение на практике получил метод определения антител в сыворотках крови с помощью РИД (реакция иммунодиффузии), как наиболее доступный и технологичный, хотя более чувствительным и специфичным является ИФА (иммуноферментный анализ), (11, 12, 23) однако, в практических целях он не используется.
Разработан метод определения ДНК-провируса ВЛКРС в лейкоцитах крови животных с помощью молекулярной гибридизации, в серии опытов показана его значительно более высокая чувствительность относительно методов иммунологии (8), а также метод полимеразной цепной реакции (ПЦР), позволяющий обнаруживать минимальное количество копий провирусной ДНК в латентном периоде болезни.
Отдельным направлением в решении проблемы ЛКРС, как в нашей стане, так и за рубежом, является разработка профилактических препаратов, как более перспективного и экономичного, чем уничтожение животных. В 1980-87 г. в Институте вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН разработана и испытана на животных экспериментальная партия инактивированной, цельновирионной вакцины против ЛКРС (7). Институтом микробиологии им. А. Кирхенштейна (Латвия) предложены специфические противолейкозные антигены, обладающие высокой иммуногенностью и протективным действием против ВЛКРС-инфекции (3). Особого внимания заслуживает сообщение об испытаниях живой рекомбинантной вакцины против ЛКРС на основе генно-инженерных рекомбинантов вируса осповакцины, экспрессирующих антигены ВЛКРС, предложенной Всероссийским институтом экспериментальной ветеринарии РАСХН (1). Имеются также сообщения и зарубежных авторов о протективных препаратах против ВЛКРС-инфекции, как на основе вируса, так и генноинженерных, обладающих достаточно высокими иммуногенными и защитными свойствами (16, 20 -23). Вакцинопрофилактика так и не нашла применения по многим причинам: высокий уровень инфицированности поголовья, сложность постановки широкомасштабных полевых испытаний, экономические трудности и др.
Однако, несмотря на более чем 30-тилетний стаж отечественной лейкозологии, существующей в системе научно-исследовательских программ и лабораторий, имеющих значение государственной важности, количество больных и ВЛКРС-инфицированных животных остается на прежнем уровне (13% и 30-70% соответственно). Диагностические исследования ВЛКРС-инфекции в нашей стране представлены только реакцией иммунодиффузии в геле (РИД), тогда как в странах Европы и США применяется иммуноферментный анализ (ИФА), как наиболее чувствительный, специфичный, технологичный, экономичный.
Заключение. Совершенно очевидно, что в условиях трудного экономического положения в стране, интерес к проблеме ЛКРС значительно уменьшился,
некоторые хозяйства отказываются проводить диагностические исследования, закрыты многие лаборатории и научные программы.
Следует отметить возрастающую необходимость повышения внимания ветеринарной службы к рассматриваемой проблеме, более тщательного проведения диагностических и оздоровительных мероприятий по искоренению ЛКРС в соответствии с действующими правилами по профилактике и борьбе с ЛКРС, учитывая, что крайне необходимо проводить:
- регулярное гематологическое и иммунологическое обследование животных дойного стада с последующей выбраковкой больных и изоляцией инфицированных;
- обязательное обследование молодняка КРС всех возрастных групп при использовании комплекса диагностических тестов с последующей изоляцией инфицированных;
- диагностическое обследование новорожденных телят на наличие ВЛКРС-инфекции в домолозивный период с последующей изоляцией серопозитивных и выводом их из стада.
Анализ данных литературы и результаты собственных исследований показали, что при современной технологии ведения отрасли в хозяйствах не всегда удается достичь желаемых результатов из-за имеющихся отступлений от требований инструкции по борьбе с ЛКРС (несвоевременная изоляция инфицированных животных, из-за недостатка помещений и работников, слабый учет, низкий уровень селекционно-племенной работы, несоблюдение правил асептики при проведении плановых ветеринарных мероприятий: ректальные исследования, взятия крови, вакцинация и др.).
В этой связи нам представляется необходимым более детально рассмотреть 2 основных направления в решении проблемы ЛКРС:
- методы диагностики;
- меры борьбы и профилактики.
Учитывая специфику заболевания (хроническое течение, горизонтальный и, возможно, вертикальный путь заражения, длительный латентный период,1 00% летальный исход), а также условия расширяющегося частного животноводства предлагаем:
1 . Усилить иммунологический контроль внедрением в широкую практику ветеринарии для диагностики ВЛКРС-инфекции метода иммуноферментного анализа (ИФА), как более чувствительного, специфичного, технологичного, экономичного, чем используемый РИД с обязательным подтверждением диагноза методами молекулярной биологии (ПЦР, ДНК-гибридизации).
2. Рассмотреть вопрос о возможности уничтожения инфицированных животных с целью полного искоренения ЛКРС.
3. Ввести в технологию ветеринарного надзора обязательное иммунологическое и молекулярно-биологическое обследование новорожденных телят в домолозивный период для выявления инфекции, передающейся внутриутробно и вертикальным путем.
4. В неблагополучных по ВЛКРС хозяйствах сократить интервал иммунологических диагностических исследований с 6-ти месяцев до 30 дней.
Литература
1. Альштейн А. Д., Валихов А.Ф. и др. -Биотехнология, -1992, -№6 -с. 12 -18.
2. Бусол В.А., Лиманская О.Ю., Лиманский А.П., и др. -Ветеринария, -1999, -№6 -с.27-30.
3. Валихов А.Ф. -Биологические свойства вируса лейкоза крупного рогатого скота: диагностика и профилактика инфекции. Докт. дисс. -М., ВИЭВ, 1992.
4. Кукайн Р.А. и др. -в сб. Этнология, диагностика, профилактика гемобластозов, проблемы диспансеризации и реабилитации гематологических больных. -Рига, 1987, -с.34.
5. Парфанович М.И., Нымм Э.М., Симоварт Ю.А. и др. -В кн.: Проблемы экспериментальной онкологии и лейкозов человека и животных. -Москва, 1979. -с.200-204.
6. Парфанович М.И. -В сб. Теоретические и практические вопросы ветеринарии -Тарту, 1987, с.30-32.
7. Парфанович М.И., Федорова Н.А., Симоварт Н.А. и др. Там же, с. 21.
8. Рассулин Ю.Ю., Речинский В.О., Парфанович М.И. -В сб. Этнология, диагностика, профилактика гемобластозов, проблемы диспансеризации и реабилитации гематологических больных. -Рига, 1987, -с.47.
9. Розенберг Г. -В кн.: Проблемы экспериментальной онкологии и лейкозов человека и животных. -с. 292-301.
10.Шишков В.П. -Там же, с. 11.
11. Методические рекомендации по определению антител к ВЛКРС методом иммуноферментного анализа. -М., ВИЭВ, 1983.
12.Carli K.T., Batzman H., Sen A., Minbay / Comparison of serum, milk and urino samples in an enzime emmunoassay for bovine leukemia virus infection.// Resaerch in Veterinary Science. -1993. -V.55. - P. 394-395.
13. Kettmann R., Portetelle D., Mammerikx M. et al. -Proc. Nat. Acad. Sci. USA. -1976. -V.73 -P. 1014.
14. Mammerikx M. et al. -Ann. Rech. Vet. -1978 -V.9. -P.885-894.
15.Miller J.M., Miller L.D., Olson C., et al. -J. Nat. Cancer Inst. -1969. -V.43. -P. 1297-1305.
16.Miller, Van der Manten -Ann. Rech. Vet. -1978. -V.9., n.4 -P. 871-877.
17. Miller J.M. et al. -Bibl. Aaematol. -1976. -V.43. -P. 187-189.
18.McClure H.M., Kuling M.E., Custer P.Ph. -Cancer Res. -1974 -V.34 -P.2745-2757.
19.Olson C., Hoss M.E., Miller J.M. et al. -J. Am. Vet. Med. Ass. -1973 -V. 163. -P.355-357.
20.0hishi K., Marujama T., Shida H. et al. -Vaccine -1988 -V.7 -P. 482-432.
21.0numa M., Modastu T., Yamamoto S. et al. -Amer. J. Vet. Res. -1984. -V.45, n.6 -P. 1212-1215.
22.Patrascu L.V., et al. -Rev. Roum: Med. Ser. Vir. -1980 -V.31, n.2 -P.95-102.
23. Portetelle D., Suzuki H., et al. Virus Res. -1990. -V.17. -P. 131-142.
24. Portetelle D. Dtal. -J. Virol. Method. -1983. -V.6, n.1 -P. 146-150.
Van der Maaten M.J., Boothe A.D. -J. Nat. Cancer Inst. -1974. -V. 52. -P.491-497.
