CC BY
6IV БeЛYK. ТАЖЫРЫйБАЛЫК
иэилдеелер
РАЗДЕЛ 4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
КОРРЕКЦИЯ ВНОВЬ СИНТЕЗИРОВАННЫМИ ПРЕПАРАТАМИ ПИПЕРИДИНОВОГО РЯДА МЕТАЛЛИНДУЦИРОВАННОй ИММУНОДЕПРЕССИИ
М.К. Балабекова - к.м.н., доцент кафедры патологической физиологии Казахского национального медицинского университета имени С.Д. Асфендиярова
Металлиндуцияланган иммунодепрессияны кайрадан синтезделген пиперидиндик катардагы
препараттар менен коррекциялоо
М.К.Балабекова
С.Д. Асфендияров атынд. Казак улуттук медициналык университети, Казакстан, Алматы ш.
Корутунду: Металлдардын кошулуу таасиринен организмдин иммунологиялык реактивдYYЛYГY начар-лайт жана опыт жYргYЗYЛгeн жаныбарларды полиоксидоний жана МХФ-2 препараты менен дарылоо аны кврYHYктYY оцдойт. Ушуну менен бирге МХФ-2 препаратынын эффективдYYЛYГY жалпыга белгилYY полиоксидоний препаратынан кем калбайт, ал эми айрым бир керсет^чтер боюнча эи жакшы натыйжа кврсвтвт.
Correction of metal-induced immunosuppression with newly synthesized piperidine drugs
Balabekova M.K.
Republican Centre of Quarantine and Especially Dangerous Infections, Bishkek, Kyrgyz Republic
Abstract. Metal compounds suppress immunologic reactivity and the treatment of experimental animals with polyoxidonium and МХФ-2 significantly correct it. The effectiveness of МХФ-2 is not inferior to the commonly known polyoxidonium and is more effective for some criteria.
Одной из основных экологических проблем является проблема изменения окружающей среды под влиянием антропогенной деятельности человека. В Казахстане предприятия добывающей и металлургической промышленности выбрасывают во внешнюю среду большое количество отходов, содержащих различные соединения металлов, в том числе ванадий и хром, которые являются токсичными для животных и человека. Непрерывное воздействие неблагоприятных факторов окружающей среды угнетает иммунологическую реактивность организма с последующим развитием иммунодефицитных состояний [1,2].
Для коррекции иммунного статуса широко используются иммуномодуляторы. В последнее
время большее внимание исследователей уделяется препаратам синтетического происхождения, которые оказывают благоприятное влияние на организм, стабилизируя и приводя в норму функции как иммунной, так и других систем. В связи с этим актуальным является поиск новых иммуномодуля-торов, применение которых давало бы минимум побочных эффектов, стимулировало бы не только иммунные реакции, но и сбалансированность иммунной системы в целом и ее адаптационные возможности при интоксикации тяжелыми металлами [3]. В АО «Институт химических наук им.А.Б. Бектурова» синтезирован 1-(2-этоксиэтил)-4-(диме-токсифосфорил)-4-гидроксипиперидин [4], который под лабораторным шифром МХФ-2 использован для лечения металлиндуцированных нарушений
МЕДИЦИНА ежемесячный научно-практический медицинский журнал
Кыргызстана
Таблица 1
общее количество лейкоцитов и лейкограмма (М±m)
Общ.лейк лимф п/я с/я Э моноц Лимф.абс
Контроль 9,7+0,29 78,9+0,93 1,7+0,16 14,7+0,86 1,0+0,18 3,7+0,2 7,6+0,25
Металл 5,8+0,64* 59,7+2,22* 2,5+0,48 31,1+2,3 1,8+0,38 4,2+0,48 3,4+0,37*
М+МХФ-2 6,5+0,44 76+2,48** 1,6+0,28 17,4+2,21 0,9+0,25 3,6+0,3 5+0,44**
М+ПО 7,2+0,82 74,2+2,36** 2,6+0,42 17,1+2,26 2,0+0,39 4,2+0,39 5,3+0,62**
Примечание: * - р>1,96 по отношению к контролю ** - р>1,96 по отношению к опыту
Таблица 2
поглотительная и метаболическая активность нейтрофилов крови у крыс (М±m)
показатель контроль соли металлов М+по М+МхФ-2
НСТ (%) спонт. 16,6±0,52 18±1,62 22±0,95** 21,04±0,68**
НСТ (%) индуц. 36,3±0,95 39,6+2,18 44,5±1,76** 44,4±1,06**
%ФГ спонт 15,3±0,54 17±2,02 19,8±0,93** 19,9±0,85**
%ФГ индуц 35,3±1,07 38,3±2,01 43,5±1,83** 42,8±1,35**
ИСН (у. е.) 0,54±0,01 0,54±0,01 0,50±2,33 0,53±0,01
ИПА спонт. 1,105±0,04 1,07±0,03 1,13±0,03 1,08±0,03
ИПА индуц. 1,037±0,02 1,04±0,03 1,03±0,02 1,05±0,02
КС 2,19±0,02 2,22±0,06 2,04±0,05 2,14 ±0,05
ИИР 23,4±1,81 17,49±2,51* 22,26±2,44** 25,5±3,41**
ЛИ 5,18±0,65 1,93±0,19* 4,95±0,58** 6,27±1,34**
Примечание: * - р>1,96 по отношению к контролю ** - р>1,96 по отношению к опыту
в сравнении с известным иммуномодулятором полиоксидонием [5].
Материал и методы исследования
Работа выполнена на 104 белых крысах-самцах массой 180-220 г., содержавшихся в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе. Проведены 4 серии эксперимента: 1 серия - контрольные животные; 2 серия - животные, получавшие ванадат аммония (ВА) и бихромат калия (БК); 3 серия - животные, получавшие ВА и БК на фоне введения МХФ-2; 4 серия - животные, получавшие ВА и БК на фоне введения полиоксидония (ПО). В каждой серии было по 26 крыс. У опытных животных интоксикацию солями металлов вызывали путем введения ВА и БК в дозе по 5 мг/кг перорально в течение двух недель. Коррекцию препаратами МХФ-2 и полиоксидоний начинали в начале второй недели в дозе по 5 мг/кг. Исследуемые препараты ежедневно вводили, растворяя в физиологическом растворе, подкожно в объеме 0,5 мл в течение недели. Контрольные животные получали равный объем 0,9% раствора NaCl.
Иммунный статус крыс оценивали в конце второй недели затравки и лечения; определение его параметров проводили в медицинском центре «Иммунодиагностика». Определяли следующие параметры иммунного статуса: общее количество лейкоцитов, абсолютное и относительное содержание лимфоцитов, лейкоформулу (по общепринятой методике), тест ППН (прямое повреждение нейтрофилов) по методике Фрадкина (1985) [6], концентрацию циркулирующих иммунных комплексов (ЦИК) с помощью набора реагентов «Микроанализ
ЦИК» производства А/О «НПО СИНТЭКО», НСТ - тест (тест восстановления нитросинего тетра-золия) [7], по данным которых проводили расчет индексов, отражающих фагоцитарную активность нейтрофилов: стимуляции нейтрофилов (ИСН), поглотительной активности (ИПА), коэффициента стимуляции (КС), % фагоцитоза [8], а также индекса иммунореактивности (ИИР), лимфоцитарный индекс (ЛИ) [9]. Полученные цифровые данные математически обработаны по ^критерию Стъ-юдента.
результаты и обсуждение Результаты проведенных исследований представлены в табл.1-3.
У опытных животных, получавших ВА и БК, отмечалось достоверное снижение в крови общего количества лейкоцитов в 1,7 раза (табл.1). Подобная резко выраженная лейкопения, наблюдаемая у опытных животных, происходила за счет уменьшения относительного и абсолютного количества лимфоцитов в 1,3 и 2,2 раза соответственно. Выявленные изменения иммунологических показателей характеризовали дестабилизацию иммунной системы. Оказалось, что ИИР, а также ЛИ у животных, получавших соединения металлов, достоверно снижались в 1,5 и 2,7 раза соответственно (табл.2). Лечение МХФ-2 и полиоксидонием животных, получавших ВА и БК, привело к возврату до исходных величин относительного количества лимфоцитов и достоверному увеличению абсолютного их числа в 1,5 раза. Следует отметить, что, судя по показателям ИИР и ЛИ, которые практически не отличались от контрольных данных, иммунономодулирующее
КОРРЕКЦИЯ ВНОВЬ СИНТЕЗИРОВАННЫМИ ПРЕПАРАТАМИ ПИПЕРИДИНОВОГО РЯДА
Таблица 3
Данные теста ППН (М±т)
контр хром индекс ппн ванадий индекс ппн
Контроль 5,5±0,25 8,1±0,38 0,026 9,0±0,45 0,035
Металлы 8,5±0,44* 21,0±1,05* 0,125 18,8±1,06* 0,103
М+МХФ-2 6,9±0,45** 16,3±1,19** 0,094 14,9±0,94** 0,08
М+ПО 6,1±0,31** 12,4±0,5** 0,063 14,2±0,68** 0,081
Примечание: * - р>1,96 по отношению к ** - р>1,96 по отношению к опыту
Рисунок 1.
действие МХФ-2 по сравнению с полиоксидонием было более выраженным.
Данные исследования поглотительной и метаболической активности нейтрофилов крови у крыс методами фагоцитоза и НСТ-теста приведены в таблице 2.
Фагоцитоз и НСТ-тест в процессе лечения препаратами МХФ-2 и полиоксидоний претерпевали существенные изменения. Под влиянием металлов как спонтанная, так и индуцированная пирогеналом активность нейтрофилов в НСТ-тесте, а также КС и ИС существенно не изменялись, что свидетельствует об отсутствии поглотительной активности нейтрофилов. При этом фагоцитарная активность, как спонтанная, так и индуцированная латексом, а также ИПА нейтрофилов под влиянием ВА и БК достоверно не отличались от контроля. Тогда как ИИР и ЛИ соответственно снижались на 32,4% и 63% по сравнению с контролем.
Лечение опытных животных полиоксидонием, не существенно изменяя ИС и КС, повышало спонтанный и индуцированный НСТ соответственно на 32,5% и 19,2% по сравнению с контрольными величинами. При этом спонтанная и индуцированная фагоцитарная активность нейтрофилов также увеличивалась на 29,4% и 23,2%. ИИР и ЛИ по сравнению с данными не леченных животных был выше в 1,2 и 2,1 раза.
Лечение животных, получавших соединения металлов, МХФ-2 оказало аналогичное влияние (табл.2). Вместе с тем, следует обратить внимание на то, что под влиянием МХФ-2 ИИР и ЛИ были более выраженными по сравнению с полиокси-донием.
Результаты исследований ППН показали, что в пробах крови контрольных животных добавление
хрома и ванадия in vitro не вызывало повреждений, превышавших норму (10%). Однако в пробах опытных животных повреждение нейтрофилов от добавления металлов превышало контрольные значения более чем в 2 раза. Лечение животных, получавших ВА и БК, МХФ-2 существенно уменьшало процесс разрушения нейтрофилов. Так, при добавлении in vitro хрома, как и при добавлении ванадия, индекс ППН уменьшался в 1,3 раза, чем у нелеченных животных. Однако этот показатель улучшался в большей степени у опытных животных, пролеченных полиоксидонием, причем индекс ППН для хрома понижался почти в два раза, тогда как для ванадия в 1,3 раза.
Трехкратное уменьшение содержания ЦИК в крови под влиянием соединений металлов (рис.1) полностью корригировалось до нормальных величин при лечении МХФ-2, тогда как лечение полиоксидонием повышало этот показатель лишь в 1,2 раза.
Приведенные экспериментальные данные позволяют заключить, что под влиянием соединений металлов угнетается иммунологическая реактивность организма и лечение опытных животных препаратами полиоксидоний и МХФ-2 существенно корригируют ее. При этом эффективность препарата МХФ-2 не уступает общеизвестному препарату полиоксидонию, а по некоторым показателям оказывает лучший эффект.
литература
1. Тегжанова А.Р., Хабдулина З.К. и др. Влияние факторов среды обитания на состояние здоровья населения //Экология и здоровье детей: Сб.науч.тр. VI респ.конф.-Актобе, 2005. - С.223-226.
2. Величковский Б.Т. О патогенетическом направлении изу-
МЕДИЦИНА
ежемесячный научно-практическии медицинскии журнал
Кыргызстана
чения влияния факторов окружающей среды на здоровье населения //Вестник Российской академии мед. наук. - Москва. - Медицина. - 2003. - №3.- С.
3. Черешнев В.А. Экология, иммунитет, здоровье // Изв. Уральского государственного университета. - 2000.- № 16. - С
4. Предпатент РК№ 5011. Гидрохлорид 1-(2-этоксиэтил)-4-(диметоксифосфорил)-4-гидроксипиперидина, обладающий стимулирующей рост растений активностью / Ю В.К., Пралиев К.Д. 1997, Бюлл. РК, № 3.
5. Манько В.М., Петров Р.В. и др. Иммуномодуляторы - современное состояние и перспективы //Аллергология, астма и клиническая иммунология. - Москва. - 2001. - №1. - с.
3-15.
6. Фрадкин В.А. Диагностика аллергии реакциями нейтрофилов крови. - М.: Медицина. - 1985. - 170 с.
7. Информативность тестов оценки иммунного статуса при инфекционных и аллергических заболеваниях // Методические рекомендации. НИИ эпидемиологии, микробиологии и инфекционных болезней Минздрава Казахской ССР. - Алма-Ата, 1989. - с. 14-16.
8. Тотолян А. А. и др. Метод постановки НСТ-теста // Лабораторное дело. - 1987. - №11. - С. 63 -866.
9. Шабалов Н.П., Иванов Д.О. Сепсис новорожденных //Санкт-Петербургская педиатрическая медицинская Академия. 2005.
ИСПОЛЬЗОВАНИЕ ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНЫХ СВОЙСТВ ПРЕПАРАТА КОРНЯ СОЛОДКИ - РУВИМИНА ПРИ ЛЕЧЕНИИ АСЕПТИЧЕСКОГО ВОСПАЛЕНИЯ, ВЫЗВАННОГО НА ФОНЕ ИНТОКСИКАЦИИ ВАНАДИЕМ И ХРОМОМ
Балабекова М.К. - к.м.н., доцент кафедры патологической физиологии Казахского национального медицинского университета имени С.Д. Асфендиярова
Сезгенууге каршы кызыл мыя тамырынан жасалган препараты-рувиминди ванадий жана хромдон келип чыккан уулануудан болгон асептикалык сезгенууге каршы дарылоодо колдонуу
Балабекова М.К
С.Д. Асфендияров атынд. Казак улуттук медициналык университети, Казакстан, Алматы ш.
Use of drug anti-inflammatory properties of licorice root - ruvimina treatment aseptic inflammation caused by the on the background of intoxication vanadium and chromium
Balabekova M.K.
Актуальность проблемы загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами объясняется прежде всего широким спектром их действия на организм человека. Тяжелые металлы влияют практически на все системы организма, оказывая токсическое, аллергическое, канцерогенное, гонадотропное действие. По мнению ряда авторов, влияние факторов как внешней, так и внутренней среды могут снижать иммунологическую реактивность населения, приводя к развитию вторичных иммунодефицитов [1]. В связи с чем, остро встает вопрос о поиске препаратов, обладающих иммуномодулирующими свойствами.
Использование высокоэффективных, безопасных и доступных лекарственных препаратов растительного происхождения является весьма актуальным направлением современной медицины. Флора Казахстана привлекательна богатейшими сырьевыми запасами уникального лекарственного растения - солодки, известной своими целебными свойствами со времен глубокой древности. Благодаря уникальным биологическим свойствам в медицине используют противовоспалительную [2], противовирусную [3], противомикробную [4], антиагрегантную [5], антиоксидантную [6-10], антиаллергенную [11] активность препаратов корня солодки и это далеко не полный список, который продолжает расширяться.
В связи с этим, целью настоящего исследования явилось изучение иммунокоррегирующих свойств ру-вимина на течение экспериментального воспаления на фоне интоксикации соединениями металлов.
Материал и методы исследования
Эксперименты выполнены на 90 белых крысах-самцах массой 180-220 г., содержавшихся в стандартных условиях вивария на обычном пищевом рационе.
Проведены 3 серии экспериментов 1 серия - экспериментальное воспаление у интактных животных; 2 серия -животные с воспалением на фоне интоксикации ванадатом аммония (ВА) и бихроматом калия (БК); 3 серия - животные, леченные рувимином на фоне интоксикации солями металлов. У опытных животных (2 и 3 группы) интоксикацию солями металлов вызывали введением ВА и БК в дозе по 5 мг/кг м.т. перорально в течение двух недель. По окончании двухнедельной затравки ВА и БК у животных вызывали асептическое воспаление путем подкожного введения 0,3 мл скипидара на вазелиновом масле в межлопаточную область [12], после чего начинали лечение рувимином в дозе 50 мг/кг, растворяя в
