CC BY
43
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2686-6838-2019-21-10-42-52
КОРРЕКЦИЯ ЦИТОКИНОВОГО БАЛАНСА И МИКРОБИОЦЕНОЗА ПОЛОСТИ РТА ПАЦИЕНТОВ С ХРОНИЧЕСКИМИ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫМИ ЗАБОЛЕВАНИЯМИ ПАРОДОНТА ПРИ ПОМОЩИ ПРОБИОТИКОВ
Багдасарян1'2Н.П., Еричев2В.В., Овчаренко2 Е.С., Аксенова2 Т.В., Ермо-
шенко2 Л. С., Карапетов2 С.А.
1ФГБОУ ВО Кубанский государственный медицинский университет МЗ РФ, г. Краснодар, Российская Федерация
2ГБУЗ «Стоматологическая поликлиника № 1», г. Краснодар, Российская Федерация
CORRECTION OF CYTOKINE BALANCE AND MICROBIOCE-NOSIS OF THE ORAL CAVITY OF PATIENTS WITH CHRONIC INFLAMMATORY DISEASES OF PERIODONT WITH THE
HELP OF PROBIOTICS
Bagdasaryan1'2 N.P., Erichev1 V. V., Ovcharenko1 E.S., Aksenovа1 T. V., Ermo-
shenko1 L.S.' Karapetov1 S.A.
1Kuban State Medical University, Krasnodar, Russian Federation 2Dental clinic № 1, Krasnodar, Russian Federation
Аннотация. Цель исследования - оптимизировать комплексную схему лечения воспалительных заболеваний пародонта путем включения пробиотика и оценки микробиоценоза и цитоки-нового профиля полости рта. Было обследовано 100 пациентов, из них 40 больных с хроническим генерализованным катаральным гингивитом и 40 пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести. Всем пациентам была проведена клиническая, микробиологическая, микологическая и иммунологическая оценка состояния тканей пародон-тального комплекса до и через 3, 6 и 12 месяцев после лечения. 50% пациентов из каждой группы получали лечение по традиционной методике, а 50% - по усовершенствованной схеме с применением пробиотика «Бифидум бактерин форте». Установлено, что у пациентов с хроническим генерализованным катаральным гингивитом и хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести определяется
Annotation. The aim of the study is to optimize a complex treatment regimen for inflammatory periodontal diseases by including a probiotic and evaluating the microbiocenosis and cytokine profile of the oral cavity. 140 patients were examined. 60 patients had chronic generalized catarrhal gingivitis, 60 patients had chronic generalized moderately severe periodon-titis. All patients underwent clinical, microbiological, mycological, and immunological assessment of the state of the periodontal complex tissues before treatment and in 3, 6, and 12 months after treatment. 50% of patients from each group received treatment according to the traditional method, and 50% of patients received treatment according to the improved scheme using the probiotic "Bifidumbacterin Forte ". It was found that patients with chronic generalized catarrhal gingivitis and patients with chronic generalized moderately severe periodontitis had a high degree of dissemination of periodontal pockets of yeast-like Candida genus and bacterial opportunistic microflora, which correlates with a significant increase of pro-
высокая степень обсеменённости пародонталь-ных карманов дрожжеподобными грибами рода Candida и бактериальной условно-патогенной микрофлорой, что коррелирует со значительным повышением провоспалительных цитоки-нов (TNF-a, IL—8), понижением концентрации INF-y, и увеличением уровня противовоспалительного цитокина IL-4.
Динамическое изучение изменения клинико-лабо-раторных показателей на фоне комплексной усовершенствованной терапии с использованием пробиотика и традиционного метода те-риапии позволяет констатировать повышение эффективности лечения хронического катарального гингивита на 45%, а хронического генерализованного пародонтита на 40%.
Ключевые слова: гингивит, пародонтит, биопленка, цитокины, пробиотики.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК
[1] Ковалевский A.M., Ушакова A.B., Ковалевский В.А., Прожерина Е.Ю. Бактериальная биопленка пародонтальных карманов: переосмысление опыта пародонтологии // Паро-донтология. 2018. №2. С. 15 - 21.
[2] Еричев И.В., Рисованная О.Н., Еричев В.В., Рисованный С.И. Применение бактериоско-пической светотерапии в комплексном лечении воспалительных заболеваний паро-донта // Кубанский научный медицинский вестник. 2016. № 4. С. 102-106.
[3] Baeza M., Garrido M., Hernandez-Rios P., De-zereda A., Garcia-Sesnich J., Strauss F., Aitken J. P., Lesaffre E., Vanbelle S., et al. Diagnostic accuracy for apical and chronic periodontitis biomarcers in gingival crevicular fluid an exploratory study // J.Clin.Periodontal. 2016. № 43. P. 34 - 45.
[4] Булгакова AÄ, Васильева H.A., Имельба-ева ЭА., Хайбуллина Э.М. Клинико-имму-нологическая характеристика локального иммунитета у больных с хроническим катаральным гингивитом // Пародонтология. 2018. №2. С. 29-35.
inflammatory cytokines (TNF-a, IL — 8) lowering of concentration of INF-y, and increasing the level of the anti-inflammatory cytokine IL-4. The dynamic study of changes in clinical and laboratory indices in the course of complex improved therapy using probiotics and the traditional method of treatment allows stating the increase in the effectiveness of treatment of chronic catarrhal gingivitis by 45%, and chronic generalized periodontitis by 40%.
Keywords: gingivitis, periodontitis, biofilm, cyto-kines, probiotics.
REFERENCES
[1] Kovalevsky A.M., Ushakova A.V., Kovalevsky V.A., Progerina E.Yu. Bacterial biofilm of periodontal pockets: rethinking the experience of periodontology // Parodontologiya. 2018. №2. P. 15-21.
[2] Yerichev I.V., Risovannaya O.N., Yerichev V.V., Risovannyy S.I. Primeneniye bakteri-oskopicheskoy svetoterapii v kompleksnom lechenii vospalitel'nykh zabolevaniy parodonta // Kubanskiy nauchnyy meditsinskiy vestnik. 2016. № 4. P. 102-106.
[3] Baeza M., Garrido M., Hernandez-Rios P., De-zereda A., Garcia-Sesnich J., Strauss F., Aitken 11. J. P., Lesaffre E., Vanbelle S., et al. Diagnostic accuracy for apical and chronic periodontitis biomarcers in gingival crevicular fluid an exploratory study // J.Clin.Periodontal. 2016. № 43. P. 34 - 45.
[4] Bulgakova A.I., Vasilyeva N.A., Imelbaeva E.A., Khaibullina E.M. Clinical and immuno-logical characteristics of local immunity in patients with chronic catarrhal gingivitis // Parodontologiya. 2018. №2. P. 29-35.
[5] Мирсаева Ф.З., Закирьянов М.М., Ханов Т.В., Губайдуллин Р.Н. Состояние иммунитета при хроническом генерализованном пародонтите у больных сирингомиелией // Пародонтология. 2018. №3. С. 44 - 47.
[6] Цепов Л.М., Николаев А.И., Петрова Е.В., Нестерова М.М. Патогенетическое обоснование клинического применения медикаментов в комплексной терапии при воспалительных заболеваниях пародонта // Паро-донтология 2018. № 2. С. 4-9.
[7] Лукичев М.М., Ермолаева Л.А. Использование бактериофагов и пробиотиков в комплексном лечение воспалительных заболеваний пародонта // Институт стоматологии . 2018. №1. С. 84 - 87.
[8] Ардатская М.Д., Логинов В.А., Минушкин О.Н. Новые возможности диагностики и коррекции микроэкологических нарушений кишечника // Гастроэнтерология. 2013. № 2. С. 51 -58.
[9] Захаренко С.М. Представление врачей о современных пробиотиках // Consilium medicum. Приложение. Гастроэнтерология. 2011. № 8. С. 51 - 56.
[10] Ардатская М.Д. Пробиотики, пребиотики и метабиотики // Медицинский совет. 2015. №13. С. 94 - 99.
[11] Stadler A.F., Angst P. D., Arce R.M., Gomes S.C. , Oppermann R.V.< Susin C. Gingival crevicular fluid levels of cytokines/ chemo-kines in chronic periodontitis: A meta-analysis // J.Clin.Periodontal. 2016. № 43. P. 34 - 45.
[12] Рисованная О.Н., Рисованный С.И., Майчуб И.Ю., Борисова Б.Г. Клинико-морфометри-ческие результаты комплексного лечения гипертрофического гингивита при дисталь-ном глубоком прикусе у подростков // Кубанский научный медицинский вестник. 2016. № 4. С. 102-106.
[5] Mirsaeva F.Z., Zakiryanov M.M., Khanov T.V., Gubaidullin R.N. Immunity in chronic generalized periodontitis in patients with syringomyelia //Parodontologiya. 2018. №3. P. 44 - 47.
[6] Tsepov L.M., Nikolaev A.I., Petrova E.V., Nesterova M.M. Pathogenetic rationale for the clinical use of drugs in the treatment of inflammatory periodontal diseases // Parodontologiya 2018. №. 2. P. 4-9.
[7] Lukichev M.M., Ermolaeva L.A. The use of bacteriophages and probiotics in the complex treatment of inflammatory periodontal diseases // Institute of Dentistry. 2018. №1. P. 84 - 87. [9] Ar-datskaya M.D., Loginov V.A., Minushkin O.N. New possibilities of diagnostics and correction of microecological intestinal disorders // Gastroenterology. 2013. №. 2. P. 51 -58.
[8] Ardatskaya M.D., Loginov V.A., Minushkin
0.N. New possibilities of diagnostics and correction of microecological intestinal disorders // Gastroenterology. 2013. №. 2. P. 51 -58.
[9] Zakharenko S.M. The presentation of doctors on modern probiotics // Consilium medicum. Application. Gastroenterology. 2011. №. 8. P. 51 -56.
[10] Ardatskaya M.D., Probiotics, prebiotics and metabiotics // Medical Council. 2015. №13. P.94 - 99.
[11] Stadler A.F., Angst P. D., Arce R.M., Gomes S.C. , Oppermann R.V.< Susin C. Gingival crevicular fluid levels of cytokines/ chemokines in chronic periodontitis: A meta-analysis // J.Clin.Periodontal. 2016. № 43. P. 34 - 45.
[12] Risovannaya O.N., Risovannyy S.I., Maychub
1.YU., Borisova B.G. Kliniko-morfometrich-eskiye rezul'taty kompleksnogo lecheniya giper-troficheskogo gingivita pri distal'nom glubokom prikuse u podrostkov // Kubanskiy nauchnyy meditsinskiy vestnik. 2016. № 4. P. 102-106.
Введение. Центральным звеном приложения научных усилий современных учёных в отношении вопросов этиологии и патогенеза воспалительных заболеваний пародонта по-прежнему остаётся изучение микробного фактора, входящего в состав биопленок, являющегося одной из главных причин развития патологии пародонта [1, 2, 3]. Но традиционно актуальными остаются исследования в области иммунологии, позволяющие раскрыть механизмы
местного и общего ответа на местное тканевое повреждение протеолитическими ферментами и эндотоксинами микроорганизмов тканей пародонта, которые провоцируют выброс про- и противооспалительных цитокинов, вызывающих индукцию остеокластов, которые принимают активное участие в процессе резорбции костной ткани [4, 5, 6].
При длительном течение хронических воспалительных процессов в полости рта, нерациональном лечении пациентов с патологией пародонта при помощи антибактериальных препаратов происходит нарушение баланса между отдельными видами грибково-бактериальных ассоциаций, что сопровождается возникновением дисмикробиоценоза полости рта. В связи с этим происходит активное размножение условно-патогенных микроорганизмов, которые являются представителями нормофлоры: Candida, St. Oralis, St. Uberis [7] и в минимальных дозах могут входить в состав современных бактерийных препаратов и подавляют рост болезнетворных бактерий. Результаты современных микробиологических исследований указывают на особую роль в развитии пародонтита и гингивита условно-патогенных микроорганизмов [2].
В связи с этим восстановление баланса между микробным пейзажем и местным иммунитетом полости рта относится к важным условиям терапии воспалительных заболеваний па-родонта. Современные пробиотики, которые применяются в стоматологической и гастроэнтерологической практике, решают широкий круг задач [8]: 1) эффекты общего характера: синтез антиоксидантов, модуляция ответа Th1/Th2; контроль потенциально-патогенных микробов; снижение продукции эндотоксинов; 2) гуморальные эффекты: ингибирование синтеза IgA; модулирование цитокинового ответа; 3) клеточные эффекты: стимуляция работы макрофагов; способствуют росту и регенирации клеток.
На сегодняшний день большое количество авторов весьма неоднозначно относятся к концепции применения пробиотиков для длительной колонизации слизистой оболочки полости рта и экосистемы кишечника [9]. Но это не умаляет достоинств препаратов этой группы в связи с их выраженными другими полезными эффектами, особенно у пробиотиков 4-ого поколения, к которым относят иммобилизованные на сорбентах бифидосодержащие препараты («Бифидумбактерин форте» и «Пробифор»), так как сорбированные пробиотики более эффективно колонизируют слизистую оболочку полости рта и кишечника, оказывая более выраженное протективное действие, чем несорбированные аналоги. «Бифидумбактерин форте» обладает иммуномодулирующим действием - регулирует функции гуморального и клеточного иммунитета, препятствует деградации секреторного иммуноглобулина А, стимулирует интерфе-ронообразование и выработку лизоцима [10].
Для оценки эффективности предлагаемого усовершенствованного метода лечения воспалительных заболеваний пародонта с использованием пробиотика «Бифидумбактерин форте» в настоящем исследовании было изучено изменение уровня провоспалительных (INF-Y, TNF-a, IL—8), противовоспалительных (IL—4) цитокинов и коэффициент цитокинового баланса в сосочковой крови, содержимом зубодесневого желобка (ЗДЖ) у больных с хроническим генерализованным катаральным гингивитом (ХГКГ) и пародонтальных карманов (ПК) у пациентов с хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести (ХГП-ССТ).
Цель исследования: оценить изменения состояния микробиоценоза и цитокинового баланса полости рта больных с хроническим генерализованным катаральным гингивитом и пародонтитом средней степени тяжести на фоне применения пробиотика.
Материалы и методы исследования. Настоящее исследование проводилось с 2017 по 2019 год на клинической базе кафедры стоматологии ФПК и ППС ФГБОУ ВО КубГМУ. В данной работе приняли участие 100 пациентов с воспалительными заболеваниями пародонта, которые подписали информированное согласие о характере исследования: открытое, рандомизированное. В зависимости от метода проводимой терапии все пациенты были распределены на контрольную, основную и группу сравнения. В контрольную группу вошли 20 пациента с клинически здоровым пародонтом, в основную - 40 больных с хроническим генерализованным пародонтитом средней степени тяжести (ХГРССТ), группу сравнения составили 40 пациентов с хроническим генерализованным катаральным гингивитом (ХГКГ) в возрасте от 20 до 50 лет (лица мужского пола).
Всем пациентам была проведена оценка пародонтологического статуса с подсчетом индексов гигиены Grine-Vermillione(OHI-S), нуждаемости в лечении (CPITN) и кровоточивости сососков (PBI) по Saxer и Muhlleman.
Для оценки эффективности применяемого усовершенствованного метода лечения был изучен уровень провоспалительных (INF-y, TNF-a, IL—8) и противовоспалительных (IL—4) цитокинов в сосочковой крови и содержимом ПК и ЗДЖ у больных ХГПССТ и ХГКГ до лечения, через 6 и 12 месяцев после его завершения и у здоровых лиц. Количественное определение цитокинов проводили на базе отдела клинической и экспериментальной иммунологии ЦНИЛ ФГБОУ ВО КубГМУ методом твёрдофазного иммуноферментного анализа с использованием наборов реагентов ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск) для определения цитокинов. Забор материала осуществлялся при помощи бумажных штифтов для высушивания корневых каналов 50- ого размера, которые помещались в ДЖ или ПК на 2-3 сек. Пропитанные жидким содержимым, штифты помещали в стерильные пробирки Эмпиндорфа, заполненные физиологическим раствором в объёме 1,5 мл. Также осуществлялся забор крови из ДЖ и ПК, которая помещалась в пластиковые стерильные пробирки (V=1,5 мл). Собранный материал хранили при температуре 18оС. Все этапы исследования проходили в термостатируемых условиях на шейкерах-инкубаторах ST-3 (Латвия). Учёт реакции, построение калибровочных графиков и определение концентрации аналитов проводили на фотометре вертикального сканирования ANTHOS 2010 (Австрия) с помощью программного обеспечения Auswerte Softwere anthos labtec, версия 2.3.0.7.
Для микробиологического анализа биоптата осуществляли забор содержимого ЗДЖ и ПК при помощи стандартных сорбирующих бумажных штифтов 50- ого размера с последующим помещением их в стерильную стеклянную пробирку. Не позднее чем через 2 часа после забора проводили посев материала в баклаборатории секторальным методом на 5% кровяной или шоколадный агар. Культивирование проводили при температуре 37 С° в течение 24 часов. После термостатирования осуществляли количественный подсчёт колоний каждого вида. Идентификация всех выделенных штаммов микроорганизмов осуществлялась с использованием бактериологического анализатора mini API (Франция) фирмы Biomerieux.
Для проведения микологического обследования пациентов забор клинического материала осуществляли с ЗДЖ и ПК до процедуры чистки зубов, после чего осуществляли высев материала на селективную среду Candiselect 4 Bio-rad (Франция) методом секторальных посевов с последующей её инкубацией в термостате в условиях бактериологической лаборатории в течение 2 суток при температуре 37 С°. После термостатирования осуществляли подсчёт колоний Candida: albicans, tropicalis, glabrata, krusei.
Лечение пациентов группы сравнения осуществляли по традиционной методике, а больных основной группы лечили по усовершенствованной схеме. Традиционная схема лечения больных группы сравнения состояла из удаления зубных отложений, устранения травматической окклюзии, временного и постоянного шинирования подвижных зубов, открытого кюретажа. ПК орошали слабыми растворами антисептиков, перорально назначали десенсибилизирующие, общеукрепляющие и нестероидные противовоспалительные препараты. Пациенты выполняли инструкции по индивидуальной гигиене полости рта.
Усовершенствованная схема лечения пациентов основной группы включала в себя все выше перечисленные лечебные мероприятия, которые были дополнены включением в общую и местную схему лечения пробиотика «Бифидумбактерин форте» (Партнёр, Россия), который назначали по 10 доз (2 пакета) 2 раза в сутки в течение 14 дней при активной фазе лечения и по 5 доз (1 пакет) в день в течение 1 месяца во время поддерживающей терапии. Содержимое пакета растворяли в 30 - 50 мл кипячёной воды комнатной температуры. Полученную взвесь использовали в виде ротовых ванночек после чистки зубов два раза в день в течение 2-3 минут. По такой же схеме препарат назначали внутрь.
Результаты исследований подвергались статистической обработке с подсчетом коэффициента достоверности t - Стьюдента. Статистическую обработку результатов проводили с использованием программы «Excel» и «Statist^a 5.0» для WinXP, SPSS 10.0 for Windows на персональном компьютере.
Результаты исследования. По результатам клинического обследования и оценки показателей индекса Grine-Vermillione (OHI-S) установлено, что у 85% пациентов с ХГКГ и у 90% больных с ХГПССТ выявляется неудовлетворительная гигиена полости рта, а также высокие показатели индекса CPITN и индекса кровоточивости сосочков (PBI) по Saxer и Muhlleman (таблица 1).
Таблица 1
Распространенность показателей пародонтальных индексов пациентов контрольной группы и больных с хроническим генерализованным катаральным гингивитом до и
после лечения (М±m) (%).
Индексы/Диагноз ИГ CPITN PBI
Контрольная группа 0,25±0,006/95 0/100 0,16±0,07/100
(п=20)
ХГКГ(п=40) 2,1±0,08/85 1,2±0,04/70 0,7±0,07/70
Через 3 месяца (п=40) 1,2±0,07/90 0,6±0,03/75 0,3±0,06/70
Через 6 месяцев(п=38) 0,6±0,07/90 0,3±0,02/75 0,1±0,04/70
Через 12 месяцев 0,3 ± 0,7(n=40)/90 0,13 ± 0,05/90 0,16± 0,08/90
(п=38)
ХГПССТ (п=40) 4,9 ± 0,7/90 3,5±0,1/90 2,3±0,12/90
Через 3 месяца (n=40) 2,5± 0,08/90 2,5 ± 0,07/90 1,5 ± 0,16/90
Через 6 месяцев (n=40) 1,9 ± 0,08/90 1,85 ± 0,1/90 0,17 ± 0,008/90
Через 12 месяцев (n=38) 1,5 ± 0,08/90 1,35 ± 0,1/90 0,16 ± 0,008/90
Примечание: коэффициент достоверности Стьюдента (р<0,05) указывает на достоверные показатели между контрольной группой пациентов и больными с ХГКГ.
По результатам исследований положительная динамика клинического состояния полости рта у пациентов ХГКГ и ХГПССТ после проведённого лечения определяется уже через 3 месяца у пациентов основной группы и группы сравнения. У больных ХГКГ в 87% случаев и ХГПССТ в 85% случаев после лечения по усовершенствованной методике определяется отсутствие жалоб и стабилизация воспалительного процесса в тканях пародонта. При обследовании больных ХГКГ и ХГПССТ через 3 месяца после лечения по традиционной методике в 80 % случаев наблюдается положительная динамика состояния тканей пародонта (таблица №1).
Результаты микробиологических и микологических исследований представлены в таблице № 2 и указывают, на тяжелую степень колонизации и высокую распространенность в ПК грибково-бактериальных ассоциаций.
Таблица 2
Качественные (КОЕ/1мл) и количественные показатели (%) микробиологических и микологических исследований больных XГКГ и ХГП средней степени тяжести на наличие условно-патогенных и грибково-бактериальных ассоциаций до лечения и пациентов
контрольной группы.
Виды микроорганизмов КОЕ/1мл / % ХГКГ (n=40) ХГП средней степени (n=40) Контрольная группа (n=20)
l.Streptococcus oralis 6±0,8 / 17,5 6,6±0,5 / 35 ** 1,7±0,9 / 60 р<0,001 *
2. Streptococcus sanguis 5,3±0,5 / 52,5 р<0,05 *** 7,2±0,7 / 70 р<0,05 ** 1,7±0,9 / 40 р<0,001 *
3.Stomatococcus mucilaginosus 6,7±0,6 / 17,5 6,6±0,5 / 17,5 ** 1±0 / 0 р<0,001 *
4. Streptococcus mitis 5,7±0,5 / 35 р<0,001 *** 7,6±0,5 / 70 р<0,001 ** 2,3±0,9 / 40 р<0,001 *
5. Streptococcus anginosus 5±0,8 / 17,5 5,4±0,5 / 17,5 ** 1±0 / 0 р<0,001 *
6. Staphylococcus hominis 5,7±0,5 / 52,5 р<0,05 *** 7,2±0,5 / 70 р<0,05 ** 1,7±0,9 / 40 р<0,001 *
7. Streptococcus salivarius 5,3±0,5 / 52,5 5,2±0,4 / 70 ** 1,7±0,9 / 40 р<0,001 *
8. Euterococcus casseliflavus 6,6±0,5 / 17,5 5,4±0,5 / 35 ** 1±0 / 0 р<0,001 *
9. Candida albicans 2,3±0,5 / 32,5 1,6±1,94/ 22,5 1, 5±0,8 / 26,6
10. Candida tpopicalis 4 ± 0,9 / 75 6,6±1 / 75 2 ±0,9 / 46,6
р<0,05 р<0,05 р<0,05
** ** *
Примечание:
* - различия достоверных показателей между контрольной группой и ХГКГ
** - различия достоверных показателей между контрольной группой и ХГП средней степени тяжести
*** - различия достоверных показателей между группами пациентов с ХГКГ и ХГП средней степени тяжести
По результатам микологичеких и микробиологических исследований установлено, что у пациентов с ХГКГ и ХГПССТ, получавших комплексное лечение по усовершенствованной схеме с применением пробиотика «Бифидумбактерин форте» через 6 месяцев наблюдается достоверное снижение степени обсеменённости ПК С. tropicalis до 1,7±0,9 (р<0,01) и соответственно до 2,5±1,3 КОЕ/1мл (р<0,05), что составляет 32,5% и 60% случаев встречаемости данного вида флоры в биотопе ПК, а через 12 месяцев колонии С. tropicalis вообще не выявлялись, а количественный и качественный состав бактериальной флоры существенно изменился: такие представители бактериальной микрофлоры как Strept. oralis и Strept. mitis встречаются до 2,2±1,1 КОЕ/1мл (р<0,05) в 57%, что в 3 раза меньше, чем до лечения.
У больных ХГКГ и ХГПССТ, лечение которых осуществлялось по традиционной методике, через 6 месяцев наблюдается достоверное снижение колониеобразования всех видов микроорганизмов бактериальной природы в 2 раза (р<0,05) и С. tropicalis до 2,0±1 и соответственно 4,8±0,7 КОЕ/1мл (р<0,01), что составляет 50% и 100% случаев, а через 12 месяцев снова выявляется умеренная степень обсеменённости ПК до 4,0±0,7 КОЕ/1мл (р<0,01) в 100% случаев у больных с ХГ, и активное колониеобразование дрожжеподобных грибов рода Candida в ПК с повышением показателей у пациентов с ХГПССТ до 6,3±1,2 КОЕ/1мл -в 100% случаев и грибково-бактериальных ассоциаций - в 65% случаев, что свидетельствует о восстановлении первоначального микробного пейзажа полости рта через 1 год.
Результаты иммунологических исследований по изучению содержания провоспали-тельных (INF-y, TNF-a, IL-8) и противовоспалительных (IL-4) цитокинов в сосочковой крови и содержимом ПК больных ХГПССТ и ЗДЖ - у больных с ХГКГ указывают на достоверно низкие показатели концентрации INF-y и достоверно высокий уровень TNF-a, IL-8, IL-4 у данной категории пациентов по сравнению со здоровыми лицами (Таблица 3).
Таблица 3
Показатели про- и противовоспалительных цитокинов в сосочковой крови и содержимом пародонтальных карманов пациентов контрольной и итоговой группы исследования до лечения.
INF-y FNO-a IL-4 IL-8
Кровь Содер- Кровь Содер- Кровь Содержи- Кровь Содержи-
жимое жимое мое ЗДЖ и мое ЗДЖ и
ЗДЖ и ЗДЖ и ПК ПК
ПК ПК
Контроль 37,7±0,9 2,0± 14,6± 0,5± 1,64± 1,45± 113,2± 23,6±
ная р<0,001 0,05 0,7 0,01 0,016 0,01 0,45 1,18
группа * р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,01 р<0,001 р<0,001 р<0,001
n=20 * * * * * * *
ХГКГ 2,1± 1,41± 47± 10,8± 1,43± 1,24± 754,4± 157,1±
n=40 0,03 0,008 0,9 0,05 0,08 0,06 1,3 1,3
р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,00 р<0,005 р<0,001
** ** ** ** 1 ** р<0,001 **
** **
ХГПССТ 16,5± 1,33± 30,4± 2,5± 3,5± 1,28± 992,9± 275,4±
n=40 0,9 0,07 0,8 0,09 0,015 0,08 0,5 0,9
р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,00 р<0,05 р<0,001 р<0,001
*** *** *** *** 1 *** *** ***
***
Примечание:
* - различия достоверных показателей между контрольной группой и ХГКГ
** - различия достоверных показателей между контрольной группой и ХГПССТ
*** - различия достоверных показателей между группами пациентов с ХГКГ и ХГПССТ
Установлено, что после лечения больных ХГКГ по усовершенствованной методике показатели INF- у в сосочковой крови через 6 месяцев - 37,6±0,9 pg/ml (р<0,01) и 12 месяцев -63,5±0,9 (р<0,01), и в содержимом ПК через пол года - 6,2±0,08 pg/ml (р<0,01) и 1 год -12,4±0,6 (р<0,01), достоверно 1,5 раза выше, чем пациентов, которых лечили традиционным методом. У пациентов с ХГПССТ концентрация INF- у в сосочковой крови через 6 месяцев -36,0±0,9 pg/ml (р<0,01) и 12 месяцев - 63,8±1,14 (р<0,01), и в содержимом ПК через пол года - 4,54±0,1 pg/ml (р<0,01) и 1 год - 15,1±0,6 (р<0,01) достоверно увеличивается по сравнению с показателями пациентов, которых лечили по традиционной методике.
У пациентов с ХГПКГ и ХГПССТ, через 6 месяцев выявляется достоверное понижение показателей - FNO-a в сосочковой крови - 15,6±0,8 (р<0,01) и 10,1±0,7 т в основной группе и группе сравнения, но через 12 месяцев -у больных, получавших лечение по усовершенствованной методике с включением наблюдается стабильное понижение показателей FNO-a до 6,5±0,8 (р<0,01) и 11,4±0,9 (р<0,01), а у пациентов, которых лечили традиционным методом определяется достоверно значимое повышение уровня FNO-a до первоначальных единиц-48,1±0,8 (р<0,01).
Доказано, что у пациентов с ХГКГ и ХГПССТ, которых лечили по усовершенствованной методике через 6 ( 2,5 ± 0,3) и 12 (1,5 ±0,8) месяцев наблюдается достоверное понижение уровня IL-4 в сосочковой крови и в содержимом ПК (р<0,01), в отличие от пациентов лечение которых проводили по традиционному методу( IL-4 =3,54 ± 0,04 ).
По результатам исследований установлено, что уровень IL-8 в сосочковой крови и содержимом ПК и ЗДЖ у больных ХГКГ и ХГПССТ средней степени тяжести, получавшим лечение по усовершенствованной терапии с применением пробиотика «Бифидумбактерин форте» через 6 и 12 наблюдается достоверное пониже уровня IL-8 в 2 раза (297,8 ± 0,8) по сравнению с пациентами, которых лечили традиционным методом ( 697,8 ± 0,3 р<0,01).
Для оценки эффективности лечения при помощи усовершенствованной методики был рассчитан коэффициент цитонового баланса (КЦБ) путем деления суммы показателей провос-палительных цитокинов -(IL-8 + INF- у + FNO-a) на уровень IL-4 (КЦБ = IL-8 + INF- у + FNO-a / IL-4). Уменьшение или увеличение коэффициента у больных по сравнению со здоровыми свидетельствует о нарушении баланса про- и противовоспалительных цитокинов, чем сильнее нарушается это соотношение, тем тяжелее протекает заболевание.
Из таблицы 3 и 5 можно увидеть значительное повышение КЦБ у больных ХГКГ и ХГПССТ КЦБ до лечения свидетельствует о преобладающем влиянии провоспалительных ци-токинов над противовоспалительными, обеспечивающими ликвидацию патологического процесса. Через 6 и 12 месяцев после проведения курса усовершенствованной терапии наблюдается достоверное снижение показателей КЦБ до уровня нормы, что свидетельствует о нормализации КЦБ (таблица 4), в отличие от больных, получавших лечение по традиционной методике, где наблюдается снижение КЦБ относительно показателей коэффициента контрольной группы, что указывает на нарушение соотношения про- и противовоспалительных цитокинов ещё сильнее на фоне традиционной терапии. Исключение составляет нормализация КЦБ больных ХГПССТ до уровня нормы (таблица 5).
Таблица 4
Соотношение (KЦБ) про- и противовоспалительных цитокинов хроническим генерализованным катаральным гингивитом и хроническим генерализованным паро-донтитом средней степени тяжести после лечения по усовершенствованной методике.
Изучаемый материал Норма n=20 ХГКГ ХГПССТ
До лечения 6 мес. 12 мес. До лече- 6 мес. 12 мес.
n=60 n=55 n=55 ния п=60 n=55 n=55
Сосочковая 101±0,7 542±0,8 155±0,7 101±0,7 297±0,7 146±0,7 104±0,7
кровь р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001
* ** **** * ** р<0,001
р<0,001 р<0,001 ****
*** ***
Содержимое 18±0,7 136,5±0,7 48,7±0,4 20,7±0,07 204±0,7 28±0,4 18±0,4
ЗДЖ и ПК р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001
* ** **** * ** ****
р<0,001 р<0,001
*** ***
Таблица 5
Соотношение (ИЦБ) про- и противовоспалительных цитокинов больных хроническим генерализованным катаральным гингивитом и хроническим генерализованным паро-донтитом средней степени тяжести после лечения по традиционной методике.
Изучаемый Материал Норма n=20 ХГКГ ХГПССТ
До лече- 6 мес. 12 мес. До лече- 6 мес. 12 мес.
ния n=55 n=55 ния n=55 n=50
п=60 п=60
Сосочковая 118±0,7 581±0,4 62±0,7 25±0,7 297±0,4 134±0,4 58±0,7
кровь р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001
* ** **** * ** ****
р<0,001 р<0,001
*** ***
Содержимое 18±0,7 134±0,4 8,9±0,07 5,3±0,07 204±0,4 204±0,4 18,4±0,07
ЗДЖ и ПК р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001 р<0,001
* ** **** * ** ****
р<0,001 р<0,001
*** ***
Примечание к таблице 4 и 5:
* - различия достоверных показателей между контрольной группой и группами пациентов с ХГКГ и ХГПССТ до лечения.
** - различия достоверных показателей между группой пациентов с ХГКГ и ХГПССТ до лечения. *** - различия достоверных показателей между группами пациентов с ХГКГ и ХГПССТ до лечения и через 6 месяцев после лечения.
**** - различия достоверных показателей между группами пациентов с ХГКГ и ХГПССТ через 6 и 12 месяцев после лечения
На основании изложенного можно сделать вывод, что у больных хроническим паро-донтитом и гингивитом развитие патологического процесса сопровождается дисбалансом ци-токинов в сосочковой крови и жидкости ПК и ЗДЖ со значительным повышением уровня про-воспалительных цитокинов(ЮТ-у, TNF-a, IL-8), коррелирующих с тяжестью патологии, и низким содержанием IL-4 как противовоспалительного цитокина. Лечение больных ХГКГ и ХГПССТ при помощи комплексной усовершенствованной терапии с применением бактерийного препарата «Бифидумбактерин форте», характеризуется ускоренными, в сравнении с традиционными методами терапии, темпами нормализации показателей про- и противовоспалительных цитокинов, а также понижение уровня КЦБ до показателей у здоровых лиц, что свидетельствует о модулирующем характере действия препарата и об его противовоспалительной эффективности.
По результатам выполненных исследований и результатам работ ряда авторов [11, 12] можно сделать вывод о ведущей роли дефицита INF-y в развитии хронического пародонтита. Низкое содержание в ЗДЖ и ПК INF-y способствует угнетению фагоцитарной активности макрофагов, что в свою очередь обеспечивает защитный эффект для клеток Candida, предотвращая их поглощение фагоцитами, тем самым давая им возможность выживать при незавершённом фагоцитозе. Снижение концентрации INF-y в ЗДЖ угнетает действие высокоактивной «индуцибельной» синтазы оксида азота макрофагов, что, возможно, способствует сохранению жизнеспособности грибковой клетки на фоне рассогласования провоспалительного иммунного ответа при хроническом пародонтите.
В своих работах авторы сообщают о высокой эффективности применения таблетиро-ванных форм бактерийных препаратов (имудон, ацилакт, бифидумбактерин, лактобактерин) при лечении хронического пародонтита, что связано с антагонистическим действием живых бифидобактерий на широкий спектр условных и условно-патогенных микроорганизмов [5]. Заключение. Использование пробиотика «Бифидумбактерин форте» в комплексе терапевтических мероприятий у больных с ХГПССТ и ХГКГ позволяет достоверно уменьшить степень обсеменённости ПК колониями грибково-бактериальных ассоциаций (Ctropicalis и Str.oralis) в 4 раза (р<0,01) за счёт антагонистического действия препарата в отношении патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и нормализавать цитокиновый профиль в содержимом ПК, ЗДЖ и сосочковой крови, без последующей тенденции к возврату исходного уровня показателей про- (INF-y, TNF-a, IL-8) и противовоспалительных (IL-4) цитокинов в течение 1 года и более, что способствует повышению эффективности лечения больных ХГКГ на 40%, а ХГПССТ - на 37% в отличие от традиционных методов терапии.
