Научная статья на тему 'Концентрации некоторых цитокинов и лактоферрина в крови и супернатантах культур клеток у больных аутоиммунным тиреоидитом'

Концентрации некоторых цитокинов и лактоферрина в крови и супернатантах культур клеток у больных аутоиммунным тиреоидитом Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
407
136
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ЦИТОКИНЫ / СУПЕРНАТАНТЫ / МОНОНУКЛЕАРЫ / МТОГЕННАЯ СТИМУЛЯЦИЯ / АУТОИММУННЫЙ ТИРЕОИДИТ / MITOGEN STIMULATION / AUTOIMMUNE THYROIDITIS / CYTOKIN / SUPERNATANTS / MONONUCLEARS

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Зорина Раиса Михайловна, Янышева А. В., Маклакова Т. П., Рябичева Т. Г., Зорина В. Н.

Исследовали сыворотку и супернатанты суточных культур клеток крови больных аутоиммунным тиреоидитом (АИТ) и здоровых женщин на содержание цитокинов (интерферона у, фактора некроза опухоли α, интерлейкинов 6, 1β, 10, 17) и лактоферрина с использованием тест системы «Цитокин-Стимул-БЕСТ». Установлено, что у больных АИТ снижен пролиферативный ответ клеток на митогенную стимуляцию in vitro: уровни фактора некроза опухоли α, интерлейкина 6, лактоферрина и индекс стимуляции фактора некроза опухоли α, интерлейкинов 6, 1β, 10 и интерферона γ были статистически достоверно ниже в супернатантах митогенстимулированных культур клеток больных АИТ по сравнению с показателями у здоровых обследованных.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Зорина Раиса Михайловна, Янышева А. В., Маклакова Т. П., Рябичева Т. Г., Зорина В. Н.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

THE CONCENTRATIONS OF CERTAIN CYTOKINS AND LACTOFERRIN IN BLOOD AND SUPERNATANTS OF CELL CULTURES IN PATIENTS WITH AUTOIMMUNE THYROIDITIS

The analysis was applied to serum and supernatants of day cultures of blood cells of patients with autoimmune thyroiditis and healthy women to determine the content of cytokins (IFN-γ, TNF-α, IL-1β, IL-6, IL-10, IL-17) and lactoferrin. The test-system "CytokinStimul-Best" was applied. It is established that in patients with autoimmune thyroiditis the proliferative response of cells to mitogen stimulation is lowered in vitro: the levels of α-tumor necrosis factor, interleikin-6, lactoferrin. The stimulation index of α-tumor necrosis factor, interleikin-6, 1β, 10 and interferon was statistically reliably lower in supernatants of mitogen stimulated cultures of cells of patients with autoimmune thyroiditis as compared with indicators of healthy women.

Текст научной работы на тему «Концентрации некоторых цитокинов и лактоферрина в крови и супернатантах культур клеток у больных аутоиммунным тиреоидитом»

Эта тест-система была испытана на тех же сероконверси-онных панелях сыворток в сравнении с аналогичными тест-системами — Abbott Labs EIA Rubazyme-G и Gull Labs ELISA RUBELLA IgG.

Тест-системы в этих испытаниях дали практически одинаковую картину как дифференциации сывороток на положительные и отрицательные, так и динамика нарастания концентрации IgG-антител в сыворотках обеих панелей, т. е. их использование для оценки динамики содержания IgG-антител к вирусу краснухи у одного и того же больного было практически равноценно.

Внутренние верификационные испытания тест-системы «ИФА-Краснуха-IgM-capture" были проведены на предприятии ЗАО "ЭКОлаб" на 218 образцах. В качестве тест-системы сравнения была использована тест-система EIA-Rubella IgM (DSL, США). Специфичность на сыворотках (в количестве 218) составила 96%, чувствительность — 98%.

В ГИСК им. Л. А. Тарасевича были приведены государственные испытания диагностической эффективности тест-систем "ИФА-Краснуха-IgM-capture" и "ИФА-Краснуха-IgG" по программе, утвержденной Комитетом МИБП.

Материалом для исследования служили образцы сыворотки крови больных с клинически выраженной краснухой, пациентов, контактных с больными краснухой, больных с другими инфекционными заболеваниями, сопровождающимися сыпью и здоровых людей.

Препараты оценивали по трем показателям: чувствительности, специфичности, воспроизводимости.

Чувствительность оценивали по проценту положительных реакций при исследовании образцов сыворотки больных краснухой и пациентов, вакцинированных против краснухи.

Специфичность оценивали по проценту отрицательных реакций при исследовании сывороток здоровых людей и больных с другими заболеваниями.

Воспроизводимость оценивали по величине коэффициента вариации оптической плотности при исследовании отрицательных, слабоположительных и сильноположительных образцов.

Оценка специфичности и чувствительности тест-системы «ИФА-Краснуха-IgM-capture" была проведена на 190 образцах в сравнении с тест-системой отечественного производства, изготовленной с использованием рекомбинантных белков.

Согласно заключению специалистов ГИСК им. Л. А. Тарасевича, тест-система "ИФА-Краснуха-IgM-capture" в этих испытаниях по чувствительности превосходила набор сравнения, а по специфичности практически не отличалась от нее.

Воспроизводимость результатов, полученных с тест-системой "ИФА-Краснуха-IgM-capture", была высокой; коэффициент вариации не превышал 8%.

Высокая чувствительность и специфичность тест-систем "ИФА-Краснуха-IgM-capture" и "ИФА-Краснуха-IgG" подтверждена также испытаниями, проведенными Экспертной лабораторией ГУЗ "Городской диагностический центр (вирусологический)" Комитета по здравоохранению правительства Санкт-Петербурга, в которых в качестве референсных использовались тест-системы Rubella IgM EIA recomb Rubella IgG EIA recomb фирмы Roche (Швейцария).

Заключение. Результаты испытаний двух новых тест-систем для лабораторной диагностики краснухи — "ИФА-Краснуха-IgM-capture" и "ИФА-Краснуха-IgG" — показали, что по своим характеристикам эти тест-системы не уступают известным зарубежным аналогам, изготовленным с использованием натуральных вирусных антигенов, и могут быть рекомендованы для широкого использования в клинико-диагностических лабораториях учреждений здравоохранения при определении антител классов G, M к вирусу краснухи как для диагностики заболевания, так и для массового серологического изучения иммунного статуса населения и оценки эффективности вакцинации.

ЛИТЕРАТУРА

1. Бектимиров Т. А. // Вакцинация. — 2004. — № 6. — С. 36.

2. Семенов В. М., Астапов А. А., Дмитраченко Т. М. Краснушная инфекция. — М., 1994.

3. Grangeot-Keros L., Pillot J., Daffos F., Forester F. // J. Infect. Dis. — 1988. — Vol. 158. — P. 138—143.

4. Valoup-Fellous C., Grangeot-KerosL. // Clin. Vac. Immunol. — 2007. — Vol. 14. — P. 644—647.

5. WilsonK. M, Camillo C. D., Doughty L., DaxE. M. // Clin. Vac. Immunol. — 2006. — Vol. 13. — P. 380—386.

Поступила 18.04.11

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012

УДК 616.441-002-092:612.017.1]-078.33

Р. м. Зорина, А. В. Янышева, Т. П. маклакова, Т. Г. Рябичева*, В. Н. Зорина

концентрации некоторых цитоКинов и лактооеррина в крови и супернатантах культур клеток у Больных аутоиммунным тиреоидитом

ГОУ ДПО Новокузнецкий ГИУВ Росздрава, ЗАО «Вектор-Бест»*, Новосибирск

Исследовали сыворотку и супернатанты суточных культур клеток крови больных аутоиммунным тиреоидитом (АИТ) и здоровых женщин на содержание цитокинов (интерферона у, фактора некроза опухоли а, интерлейкинов 6, ip, 10, 17) и лактоферрина с использованием тест системы «Цитокин-Стимул-БЕСТ». Установлено, что у больных АИТ снижен про-лиферативный ответ клеток на митогенную стимуляцию in vitro: уровни фактора некроза опухоли а, интерлейкина 6, лактоферрина и индекс стимуляции фактора некроза опухоли а, интерлейкинов 6, ip, 10 и интерферона у были статистически достоверно ниже в супернатантах митогенстимулированных культур клеток больных АИТ по сравнению с показателями у здоровых обследованных.

Ключевые слова: цитокины, супернатанты, мононуклеары, мтогенная стимуляция, аутоиммунный тиреоидит

R.M. Zorina, A.V. Yanysheva, T.P. Maklakova, T.G. Rybitcheva, V.N. Zorina THE CONCENTRATIONS OF CERTAIN CYTOKINS AND LACTOFERRIN IN BLOOD AND SUPERNATANTS OF CELL CULTURES IN PATIENTS WITH AUTOIMMUNE THYROIDITIS The analysis was applied to .serum and supernatants of day cultures of blood cells ofpatients with autoimmune thyroiditis and healthy women to determine the content of cytokins (IFN-y, TNF-а, IL-ip, IL-6, IL-10, IL-17) and lactoferrin. The test-system "Cytokin-

иммунология

Stimul-Best" was applied. It is established that in patients with autoimmune thyroiditis the proliferative response of cells to mitogen .stimulation is lowered in vitro: the levels of a-tumor necrosis factor, interleikin-6, lactoferrin. The .stimulation index of a-tumor necrosis factor, interleikin-6, lß, 10 and interferon was statistically reliably lower in supernatants of mitogen stimulated cultures of cells ofpatients with autoimmune thyroiditis as compared with indicators of healthy women.

Key words: cytokin, supernatants, mononuclears, mitogen stimulation, autoimmune thyroiditis

Ведущая роль в патогенезе аутоиммунного тиреоиди-та (АИТ) принадлежит факторам адаптивного иммунитета, включающим дефекты антигенспецифической супрессорной функции цитотоксических/супрессорных лимфоцитов (CD8+), функциональной альтерации естественных киллерных клеток, а также участию Т-хелперов 1-го типа, продуцирующих интерферон у (ИФН-у), интерлейкин (ИЛ) 2, фактор некроза опухоли а (ФНОа) и другие цитокины, способствующие реализации опосредованных клетками иммунных реакций [2, 3]. Существуют, однако, достаточно большие разногласия в оценке роли различных факторов в механизмах развития АИТ По одним данным, при АИТ не выявляются значительные нарушения субпопуляционного состава лимфоцитов и их связей с функциональным состоянием щитовидной железы, однако отмечается снижение пролиферативной активности лимфоцитов в ответ на стимуляцию в реакциях in vitro [1, 6]. По другим сведениям, стимулированная фитогемагглютинином пролиферация мононуклеаров периферической крови (7 дней культивирования) при АИТ сопровождается значительным повышением в супернатантах концентрации ИЛ-2 [5]. В стимулированных конкавалином А культурах мононуклеаров, по сравнению с нестимулированными при АИТ, также установлено повышение уровней ИЛ-2 и ФНОа [4].

Одной из причин подобных разногласий может служить тот факт, что при АИТ функциональное состояние щитовидной железы и серологические показатели в разное время могут значительно различаться даже на фоне ремиссии [2]. Нельзя исключать и влияние различных методов исследования на результаты анализов. Так, для оценки экспрессии цитокинов и их мРНК используют методы проточной цитометрии и по-лимеразной цепной реакции в режиме реального времени, отличающиеся высокой себестоимостью и вариабельностью результатов, а для оценки функционального состояния моно-нуклеарных клеток в норме и при патологии применяют метод спонтанной и индуцированной (специфической и неспецифической) пролиферации, который в целом достаточно точен, но трудоемок и длителен. Кроме того, все перечисленные выше методы предполагают наличие дорогостоящего оборудования, реактивов и нередко доступны только в условиях научно-исследовательских лабораторий. В то же время своевременная оценка функциональной активности мононуклеаров в условиях клиники могла бы повысить эффективность назначаемого лечения путем его оптимизации в соответствии с индивидуальной оценкой состояния клеточного иммунитета пациента. В этой связи перспективным методом представляется новая тест-система для оценки функциональной активности моно-нуклеарных клеток крови по спонтанной и митогенстимули-рованной продукции цитокинов «Цитокин-Стимул-БЕСТ» (ЗАО «Вектор-Бест»/, Новосибирск), относительно простая в техническом исполнении и позволяющая проводить анализ супернатантов культур клеток крови после кратковременного (суточного) культивирования.

Таким образом, целью настоящей работы было изучение функциональной активности мононуклеарных клеток цельной крови в реакции in vitro по суточной спонтанной и ми-тогенстимулированной продукции цитокинов (ФНОа, ИЛ-6,

Для корреспонденции:

Зорина Раиса Михайловна, вед. науч. сотр. НИЛ иммунологии Адрес: 654005, Новокузнецк Кемеровской обл., пр. Строителей, 5 Телефон: 7 (3843) 458418 E-mail:macroglobuHn@yandex.ra

ИЛ-ф, ИФН-у, ИЛ-10, ИЛ-17) лактоферрина (ЛФ), а также определение перечисленных выше показателей в сыворотке крови больных АИТ до назначаемого лечения для оценки возможности применения данного подхода в целях оптимизации диагностики и прогнозирования состояния клеточного иммунитета при АИТ.

Материалы и методы. Обследованы 14 женщин в возрасте от 40 до 65 лет с установленным впервые верифицированным диагнозом гипотиреоза в исходе АИТ без предварительного специфического лечения и приема тиреоидных гормонов, а также при отсутствии других аутоиммунных заболеваний. Кроме того, обследованы 10 практически здоровых и сопоставимых по возрасту женщин, отобранных по результатам плановой диспансеризации (контрольная группа). На момент исследования обследование не получали лечения тиреоидными гормонами. Первичной обследование включало исследование фонового уровня тиреотропного гормона и свободного тироксина в крови, а также наличие антител к ТПО и ультразвуковое исследование щитовидной железы. Уровень гормонов и АТ-ТПО определяли иммуноферментным методом с использованием тест-систем ЗАО «Вектор-Бест».

Для оценки функциональной активности мононуклеар-ных клеток цельной крови в реакции in vitro по суточной спонтанной и митогенстимулированной продукции цитокинов (ФНОа, ИЛ-6, ИЛ-ф, ИФН-у, ИЛ-10, ИЛ-17) и ЛФ у всех обследуемых производили забор крови из вены (утром натощак). Для проведения анализов использовали набор для культивирования и митогенной активации клеток крови «Цитокин-Стимул-БЕСТ». Согласно рекомендациям производителя, 1 мл цельной крови от каждого больного вводили во флакон № 1, содержащий 4 мл стерильной питательной среды с гентамицином и гепарином в концентрациях 2,5 Ед/ мл и 100 мкг/мл соответственно. Далее 1 мл разбавленной в 5 раз крови из флакона № 1 переносили во флакон № 2, содержащий стерильный лиофилизированный комплексный митоген — 2 мкг липополисахарида и по 4 мкг фитогемагглю-тинина и конванавалина А. После аккуратного, но тщательного перемешивания флаконы помещали в термостат (37oC) на 1 сутки, после чего клетки крови осаждали центрифугированием при 1,5 тыс. оборотов, а в надосадочной жидкости (супернатанты) определяли концентрации цитокинов и ЛФ.

Для определения концентрации цитокинов и ЛФ в образцах сыворотки 5 мл крови центрифугировали при 1500 об/ мин в течение 15 мин.

Уровни ФНОа, ИЛ-6, ИЛ-ф, ИФН-у, ИЛ-10, ИЛ-17 и ЛФ в сыворотке крови и супернатантах клеточных культур определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием соответствующих коммерческих тест-систем (ЗАО «Вектор Бест», Новосибирск). Индекс стимуляции (ИС) рассчитывали как отношение концентраций исследуемых цитокинов и ЛФ в митогенстимулированных супернатантах к спонтанной продукции.

Результаты и обсуждение. Согласно полученным данным, средние показатели уровня тиреотропного гормона составили 15,3 ± 3,83 пмоль/л у обследованных с установленным диагнозом АИТ и 1,05 ± 0,16 пмоль/л у практически здоровых женщин. Содержание свободного тироксина Т4 составляло 10,46 ± 0,66 и 15,3 ± 1,08 пмоль/л соответственно. У всех обследованных с диагностированным АИТ, уровень АТ-ТПО составлял более 300 мМЕ/л против менее 30 мМЕ/л в контрольной группе. Средний объем щитовидной железы у больных АИТ составил 18,5 ± 3,83 см3, а в контрольной группе — 15,4 ± 2,06 см3.

Изучение общих сывороточных концентраций провоспа-лительных цитокинов (ФНОа, ИЛ-ф, ИЛ-6), а также ИЛ-10, ИФН-у, ИЛ-7 и такого быстрореагирующего острофазового реактанта, как ЛФ, при АИТ продемонстрировало, что среднестатистические концентрации этих показателей у больных АИТ и здоровых обследованных достоверно не различались (см. таблицу). Анализ индивидуальной вариабельности полученных результатов исследования в целом также не выявил заметных различий: нулевые значения ФНОа отмечены как у здоровых, так и у больных АИТ; колебания уровня ИЛ- ф у здоровых находились в пределах от 0 до 3,2 пкг/мл, у больных АИТ — от 0 до 4,8 пкг/мл; содержание ИЛ-6 у здоровых колебалось от 0 до 4,6 пкг/мл, у больных АИТ — от 0 до 10,3 пкг/ мл; содержание ИЛ-17 в сыворотке крови здоровых и больных АИТ было в пределах 0—29 пкг/мл, ИЛ-10 — 0—8 пкг/мл, ИФН-у — 0—1,0 пкг/мл. При этом повышенные уровни острофазового ЛФ (более 1,5 мкг/мл) определялись только в 22% случаев у здоровых обследованных и 78% случаев у больных АИТ.

Спонтанная продукция некоторых цитокинов (ФНОа, ИЛ-6, ИФН-у) мононуклеарными клетками у ряда больных АИТ была заметно выше, чем у здоровых женщин (в среднем различаясь в 7,4 и 10 раз соответственно), но за счет большой индивидуальной вариабельности показателей статистический анализ не выявил достоверных различий между среднестатистическими показателями в группах (см. таблицу). Спонтанная продукция ИЛ-ф, ИЛ-17, ИЛ-10 и ЛФ после суточной культивации образцов крови здоровых женщин и больных АИТ также не различалась.

Стимуляция клеток крови здоровых женщин и больных АИТ митогеном из набора «Цитокин-Стимул-БЕСТ» in vitro показала, что все больные АИТ ответили на клеточную стимуляцию, но концентрации провоспалительных цитокинов (ФНОа, ИЛ-ф, ИЛ-6) и острофазового ЛФ в митогенсти-мулированных супернатантах культур у больных АИТ были существенно ниже, чем в контрольной группе (статистически значимо только ФНОа, ИЛ-6 и ЛФ). Практически неизменными оставались концентрации ИЛ-17. При этом уровни ИЛ-10 и ИФН-у тоже были несколько ниже при АИТ, но достоверно не различались с показателями в контрольной

группе. Необходимо отметить, что у больных АИТ колебания индивидуальных значений уровней ИЛ в митогенстимулиро-ванных супернатантах были, как и в случае со спонтанной продукцией, намного существеннее, чем у здоровых обследованных.

При сопоставлении ИС отдельных цитокинов и ЛФ в митогенстимулированных супернатантах культур клеток больных АИТ и здоровых обследованных оказалось, что ИС ФНОа, ИЛ-ф, ИЛ-6, ИЛ-10. ИФН-у у больных резко снижены (статистически значимо) по сравнению с показателями у здоровых женщин. В то время как ИС ЛФ и ИЛ-17 у больных и здоровых обследованных не различались.

Новый использованный нами метод функциональной оценки лимфоцитов подтвердил опубликованные ранее данные, свидетельствующие о повышении спонтанной пролиферации лимфоцитов у больных АИТ при одновременном снижении ответа Т-клеток на неспецифическую и специфическую стимуляцию (фитогемагглютинин, митоген лаконоса, анти-СБ3+) в 5—6 раз [1, 3, 6]. Особенно выраженным это снижение было у больных АИТ с гипотиреозом по сравнению с больными АИТ с эутериозом. Мы полагаем, что констатированное нами отсутствие статистически значимого повышения продукции ряда цитокинов в спонтанных супернатантах культур обусловлено лишь небольшим количеством наблюдений и большим индивидуальным разбросом в концентрациях и в случае продолжения подобных исследований достоверное повышение продукции будет подтверждено. Вместе с тем мы не выявили даже тенденций к различиям сывороточных концентраций ци-токинов у больных АИТ и у здоровых женщин, что не согласуется с данными отдельных авторов, которые обнаруживали повышенные уровни ФНОа, ИФН-у, ИЛ-10, ИЛ-4 и других цитокинов в крови больных при АИТ и болезни Грейвса [7]. Мы также не установили зависимости изученных показателей от возраста и уровня АТ-ТПО. Возможно, причина кроется в уже упомянутых ранее колебаниях функционального состояния щитовидной железы и серологических показателей на фоне сходного общего состояния больных АИТ [2]. Так или иначе, использованный метод в целом подтвердил свою перспективность и достаточную эффективность при изучении функциональной активности иммунокомпетентных клеток при АИТ.

Содержание цитокинов и лФ в сыворотке крови и супернатантах культур больных Аит и здоровых обследованных (X ± т)

Здоровые обследованные Больные АИТ

Показатель сыворотка супернатанты, пролиферация сыворотка супернатанты, пролиферация

спонтанная митогенстимулированная спонтанная митогенстимулированная

ИФН-у, пкг/мл 0 0 963,0 ± 246,0 0 10,5 ± 4,4* p = 0,05 789,6 ± 323,9

исифн-у 950,8 ± 247,2 219,2 ± 81,5** p = 0,040

ИЛ-10, пкг/мл 0 5,6 ± 3,1 57,2 ± 17,1 3,42 ± 1,27 6,4 ± 1,4 39,5 ± 15,3

исил,0 42,6 ± 18,6 4,9 ± 1,9** p = 0,019

ФНОа, пкг/мл 0 3,0 ± 0,8 1421 ± 300,6 0 20,8 ± 10,5 564,9 ± 99,3* p = 0,004

исфноа 664,6 ± 202,6 136,3 ± 63,2** p = 0,020

ИЛ-6, мкг/мл 2,1 ± 0,6 147 ± 48,7 22 150 ± 5898 3,9 ± 1,0 583,7 ± 232,9 10 104 ± 2632* p = 0,043

исил-6 854,9 ± 483,0 58,3 ± 23,6** p = 0,034

ИЛ-Щ пкг/мл 0,74 ± 0,39 13,5 ± 4,9 755,5 ± 335 2,00 ± 0,5 26,6 ± 8,9 407 ± 86

исил,р 87,9 ± 19,7 31,4 ± 10,2** p = 0,010

ИЛ-17, пкг/мл 5,8 ± 3,9 8,3 ± 3,2 52,1 ± 8,3 1,7 ± 1,0 7,3 ± 2,4 29,1 ± 6,1

исил,7 26,6 ± 11,9 12,9 ± 5,2

ЛФ, мкг/мл 1,4 ± 0,3 0,4 ± 0,1 2,2 ± 0,4 2,1 ± 0,3 0,6 ± 0,3 1,3 ± 0,2* p = 0,01

ислф 6,1 ± 2,1 3,7 ± 1,9

Примечание. * - достоверность различий (р < 0,05) средних уровней изученных показателей у больных АИТ и здоровых обследованных; ** - достоверность различий (р < 0,05) ИС у здоровых обследованных и больных АИТ

микробиология

При этом большую диагностическую ценность представляют данные по индуцированной пролиферации, а также ИС, меньшую — по спонтанной стимуляции. Вероятно, дальнейшие исследования в этом направлении с вовлечением большего числа обследованных позволят внести ряд уточнений в механизмы патогенеза АИТ и помогут в поисках адекватных методов лечения указанной патологии. При этом использование таких наборов, как «Цитокин-Стимул-БЕСТ», не требующих выделения мононуклеаров и предполагающих кратковременную культивацию образцов цельной крови, позволяет широко внедрить описанный метод в клиническую практику. Полагаем, что в качестве маркеров для оценки функциональной активности клеток крови при различных аутоиммунных заболеваниях наиболее оптимально использовать определение в суперна-тантах культур ИЛ-6, ФНОа, ИЛ-ф, ИФН-у.

Выводы

1. Спонтанная продукция ФНОа и ИЛ-6 клетками крови в реакции in vitro у больных АИТ с гипотиреозом повышена в сравнении с показателями у здоровых обследованных.

2. У больных с гипотиреозом на фоне АИТ снижена функциональная активность клеток крови в ответ на стимуляцию, что выражается в резком снижении ИС некоторых цитокинов (ФНОа, ИЛ-ф и ИЛ-6, ИЛ-10, ИФН-у) в митогенстимулиро-ванных супернатантах культур.

3. Предлагаемый метод может быть использован для оценки функционального состояния клеток крови — продуцентов цитокинов и ЛФ при аутоиммунных заболеваниях в условиях не только научно-исследовательских, но клинико-диагностических лабораторий.

ЛИТЕРАТУРА

1. Кузьменок А. И., Романовский А. А., Данилова Л. И. и др. // Иммунология. — 2000. — № 2. — С. 44—48.

2. Роберт Вольпе // Болезни щитовидной железы / Под ред. Р. Бра-вермана. — М., 2000. — С. 140—174.

3. Рустембекова С. А., Аметов А. С., Василенко И. А., Метелин В. Б. // Тер. арх. — 2008. — № 10. — С. 31—33.

4. Drugarin D., Negru S., Koreck A. et al. // Immunol. Lett. — 2000. — Vol. 71, N 2. — P. 73—77.

5. Guillen C., Prieto A., Alvarez-Escola C. et al. // Immunopharmacol. Immunotoxicol. — 1999. — Vol. 21, N 1. — P. 15—39.

6. Matsubayashi S., Aka.suF., Kasuga Y. et al. // Clin. Exp. Immunol. — 1990. — Vol. 82, N 1. — P. 63—68.

7. Nielsen C. H., Hegedus L., Rieneck K. et al. // Clin. Exp. Immunol. — 2007. — Vol. 147, N 2. — P. 287—295.

Поступила 22.03.11

микробиология

© КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2012 УДК 579.842.17.083.18

м. м. меджидов, Э. Д. Степанова, Р. Ю. Юнусова, В. Г. Горелова, С. м. Омарова

оценка диагностической эффективности алгоритма выделения и ускоренной идентификации условно-патогенных энтеробактерий с использованием отечественных хромогенных питательных сред

Филиал ФГУП НПО «микроген» минздравсоцразвития РФ, НПО «Питательные среды», Дагестанская государственная медицинская академия, махачкала

Проведены испытания специфичности и диагностической эффективности новых отечественных хромогенных питательных сред, и предложен алгоритм выделения и ускоренной идентификации клинически значимых и санитарно-показательных условно-патогенных энтеробактерий с использованием хромогенных питательных сред.

Ключевые слова: хромогенные питательные среды, условно-патогенные энтеробактерии, биохимические тесты, лабораторная диагностика

M.M. Medjidov, E.D. Stepanova, R.Yu. Yunusova, V.G. Gorelova, S.M. Omarova THE EVALUATION OF DIAGNOSTIC EFFECTIVENESS OF ALGORITHM OF ISOLATION AND EXPRESS IDENTIFICATION OF OPPORTUNISTIC ENTEROBACTERIA USING NATIONAL CHROMOGENIC

GROWTH MEDIUMS

The testing of specificity and diagnostic effectiveness was applied to new national chromogenic growth mediums. The algorithm was developed to isolate and express identify the clinically significant and sanitary demonstrative opportunistic enterobacteria using chromogenic growth mediums.

Key words: chromogenic growth mediums, opportunistic enterobacteria, biochemical test, laboratory diagnostics

Для корреспонденции:

Степанова Элеонора Давыдовна, канд. биол. наук, рук. лаб. кишечных инфекций

Адрес: 367025, Махачкала, ул. Леваневского, 24 Телефон: (8-8722) 67-05-75

Условно-патогенные энтеробактерии (УПЭ) привлекают к себе большое внимание ученых и практических бактериологов в связи с доминированием в структуре этиологических факторов кишечных, а также вне- и внутрибольничных гнойно-септических инфекций различной локализации [1, 2].УПЭ

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.