Конструирование антигенного эритроцитарного диагностикума на основе термоэкстракта, выделенного из клеток бруцелл в L-форме, для усовершенствования лабораторной диагностики Текст научной статьи по специальности «Ветеринарные науки»

2014, Т. 4, № 1

Материалы научно-практической конференции «От эпидемиологии к диагностике актуальных инфекций...»

чени и селезенки) от четырнадцати самцов макак-резусов в возрасте от 3 до 6 лет, зараженных интраце-ребрально опытным препаратом (штамм «Орлов-В»), препаратом сравнения (штамм Wistar RA27/3), а также контрольных животных (группа плацебо). Для подготовки и проведения метода ПЦР использовали набор реагентов «АмплиСенс RubeIIa virus-FL» (ЦНИИЭ, Москва). Проведенное исследование по индикации РНК вируса краснухи в аутопсийном материале не выявило ни одного положительного случая, что соответствует результатам гистологического исследования и является свидетельством безопасности вакцинных штаммов вируса краснухи. Предложенный метод детекции НК вируса может быть использован в качестве подтверждающего теста при контроле остаточной НВ противовирусных вакцинных препаратов.

КОНСТРУИРОВАНИЕ АНТИГЕННОГО

ЭРИТРОЦИТАРНОГО ДИАГНОСТИКУМА

НА ОСНОВЕ ТЕРМОЭКСТРАКТА, ВЫДЕЛЕННОГО

ИЗ КЛЕТОК БРУЦЕЛЛ В L-ФОРМЕ,

ДЛЯ УСОВЕРШЕНСТВОВАНИЯ ЛАБОРАТОРНОЙ

ДИАГНОСТИКИ

К.Ю. Ястремская, Н.Л. Баранникова, С.Ю. Соловьев, Л.М. Михайлов, Н.М. Андреевская, В.А. Михайлова, С.В. Балахонов

ФКУЗ Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Роспотребнадзора

Бруцеллез — инфекционное заболевание с высокой потенциальной возможностью перехода в хроническую форму. Ранее показано, что в сыворотках крови больных хроническим бруцеллезом людей могут появляться антитела к бруцеллам в L-форме (Михайлов Л.М., 2010). Сложность лабораторной диагностики бруцеллеза, обусловленного возбудителем в L-форме, связана с отсутствием сертифицированных препаратов, в том числе для реакции пассивной

гемагглютинации (РПГА), которая применяется при исследовании сывороток крови на бруцеллез. Поэтому конструирование диагностикумов на основе специфичных антигенных препаратов из бруцелл в L-форме для усовершенствования лабораторной диагностики актуально.

Цель: конструирование антигенного эритроци-тарного диагностикума на основе термоэкстракта, выделенного из клеток бруцелл в L-форме, и оценка его пригодности для обнаружения специфических антител при постановке РПГА.

Материалы и методы. В работе использовали термоэкстракт, выделенный из клеток культуры L-трансформанта штамма Brucella abortus И-206. Антиген адсорбировали на обработанные формалином эритроциты барана. Постановку РПГА проводили с экспериментальными сыворотками, полученными гипериммунизацией кроликов клетками бруцелл в L-форме. Специфичность сконструированного диагностикума проверяли с коммерческими агглютинирующими сыворотками: поливалентной бруцеллезной, туляремийной, холерной О-агглютинирующей, кишечноиерсиниозными О3 и О9.

Результаты. Сконструирован антигенный эри-троцитарный диагностикум на основе термоэкстракта, выделенного из клеток бруцелл в L-форме. Полученный диагностикум выявлял антитела в бруцеллезных кроличьих L-сыворотках в РПГА в разведении 1:640, с сыворотками против бруцелл в S-форме и гетерологичных микроорганизмов — реакция отрицательная, что свидетельствует о его достаточной чувствительности и специфичности.

Заключение. Показана возможность обнаружения антител к бруцеллам в L-форме в сыворотках крови с помощью полученного эритроцитарного диагностикума при постановке РПГА, что свидетельствует о перспективности использования его для усовершенствования лабораторной диагностики бруцеллеза.