CC BY
102
удк 619:616.98 Рациональная
антибиотикотера-пия респираторных заболеваний свиней и птицы
O.E. Зуев, московское представительство АО Хювефарма
Борьба с респираторными заболеваниями птицы по-прежнему остается одним из приоритетных направле ний в развитии современного промышленного птицеводства и свиноводства. Хозяйствам все сложнее удерживать под контролем эпизоотическую обстановку, поскольку современная наука просто не успевает разрабатывать новые средства борьбы с патогенами животных. В этих условиях как никогда становится актуальным вопрос о рациональном применении уже существующих ветеринарных препаратов для того, чтобы максимально долго поддерживать их эффективность без развития резистентности со стороны бактерий. Что же сегодня можно рекомендовать производству, учитывая зарегистрированные на российском рынке продукты?
Не вызывает сомнения тот факт, что по-прежнему самым распространенным инфекционным заболеванием свиней и птицы невирусной этиологии является микоилазмоз. Он играет ключевую роль в развитии хронической респираторной болезни птиц и респираторного симптомокомплекса свиней. Основными требованиями к антибактериальному препарату для контроля микоплазмоза являются: способность накапливаться в высокой концентрации внутри клетки, обладать механизмом действия, подходящим для уничтожения бактерий без клеточной стенки, а также отсутствие неблагоприятного воздействия на само животное. Сейчас общепризнано, что препаратами выбора для контроля и лечения микоплазмоза являются макролиды и плевромутилины.
Компания Хювефарма предлагает российским потребителям препараты обеих групп. Ветеринарным врачам хорошо знаком легендарный антибиотик Фармазин. В ближайшее время на рынке появится Фармазин 1000. Действующее вещество этих препаратов, тилозин тартрат, производит болгарская компания Биовет. По качеству (а следовательно и по эффективности) болгарский тилозин превосходит аналога, производимые в странах Азии. Благодаря новому оборудованию и сертифицированному процессу производства Фармазин уже завоевал рынки Европы и США. Также приобретает все большую популярность препарат из группы плевромути-линов Родотиум. Помимо высокой активности против ми-коплазм данный продукт на сегодняшний день считается лучшим выбором для контроля орнитобактериоза.
И, наконец, новое лекарственное средство — Тилмовет, содержащее в качестве действующего вещества тилмикозин. Это один из последних представителей группы макролидов, обладающий высочайшей активностью как против микоплазм, так и против ряда других патогенных бактерий (возбудителей пасте-реллеза, гемофилеза, актинобациллеза и др.). Отличительной особенностью Тилмовета является его иммуномодулирующее и противовоспапителыюе действие. В опытах на свиньях доказано, что он проявляет непрямую противовирусную активность. Накапливаясь в высоких концентрациях в макрофагах,
действующее вещество этого препарата принимает непосредственное участие в процессе фагоцитоза.
11мея в своем арсенале сразу три высокоактивных проти-вомикоплазмозных препарата, ветеринарный врач может построить эффективную программу ротации этих средств, для того, чтобы максимально долго поддерживать чувствительность к ним возбудителей. Можно также чередовать применение препаратов в различных производственных группах. I ¡апример, использовать в родительском стаде родотиум, а для бройлеров — Фармазин, или Тилмовет. Тилмоветом следует обрабатывать поросят в послеотъемный период (когда они особенно остро нуждаются в поддержке иммунной системы), а Родотиумом — при необходимости в период откорма. Соблюдая инструкции производителя, ветеринарный врач может быть полностью уверен в достижении желаемого результата.
O.E. Zuev. Rational antibioticotherapy respiratory diseases of swines and poultry.
tj HUVEPHARMA Спонсор перевода
« We add performance to your business КОМПЭНИЯ ЛЮВефЭрМа
УДК 619:616.98:578.831.31:636.34
Комплекс респираторных болезней свиней:
обзор. II. Диагностика1
И. Бочев, Тракийский университет (г. Стара Загора, Болгария)
Ключевые слова: актинобациллез, вакцинация, диагностика, микоплазмоз, репродуктивный и респираторный синдром, респираторные болезни, свинья, цирковирус, синдром послеотъемного мультисистемного. истощения
Сокращения: ИФА — иммуноферментный анализ; КРБС — комплекс респираторных болезней свиней; ПЦР — полимеразная цепная реакция; РРСС — репродуктивный и респираторный синдром свиней; СПМИ — синдром послеотъемного мультисистемного истощения
Впервой части этого обзора дана детальная характеристика этиологии, эпизоотологии, симптоматики и па томорфологии КРБС — полиэтиологическому заболеванию, имеющему большое экономическое значение. Перевод второй части обзора, посвященной диагностике, КРБС, мы публикуем в этом номере журнала.
1 Первая часть статьи опубликована в РВЖ СХЖ, 2008, №1. Продолжение обзора, посвященное лечению и профилактике болезни, будет напечатано в следующем номере журнала.
Общие принципы диагностики
Симптоматика и патологоанатомические изменения КРБС неспецифичны в силу участия в патогенезе этой болезни различных инфекционных агентов. Поэтому диагностика КРБС носит комплексный характер и должна включать все доступные методы. В первую очередь собирают подробную клинико-эпизоотологнческую информацию (данные о системе выращивания свиней неблагополучного стада, источниках сто комплектования, возрасте, в котором животные заболевают, состоянии здоровья свиней родительского стада, применяемой на ферме схеме вакцинации, заболеваемости и смертности, результатах лечебно-профилактических обработок) [6].
Патологоанатомическая диагностика
Патологоанатомическое исследование занимает основное место среди иелабораторных методов диагностики КРБС. Наиболее информативен осмотр внутренних органов (легких и лимфатических узлов). Чем больше удается обследовать тяжелобольных животных постмортально, тем выше вероятность постановки точного диагноза из-за вариабельности па-томорфологических изменений при КРБС [13]. Если поражения обнаруживают более чем в 15 % легких, то высока вероятность наличия в стаде энзоотической пневмонии. В свободных от инфекции М. hyopneumoniae хозяйствах поражения легких у более чем 1 % свиней отмечают редко [7, 8].
Клиническая диагностика
Полиэтиологическая природа болезни делает ее симптоматику вариабельной и неспецифпческой. Поэтому точный диагноз нельзя поставить по одной только клинической картине болезни. Как и при патологоанатом ическом исследовании, следует стремиться к клиническому обследованию максимально возможного количества животных. Микоплазмоз наиболее часто проявляется кашлем, интенсивность и инцидентность которого в стаде оценивают в баллах: 0 — отсутствие кашля во время движения у откармливаемых свиней; 1 — спорадически проявляющийся кашель менее чем у 10% свиней; 2 — кашляют 10...15 % откармливаемых свиней во время движения; 3 — персистентный кашель более чем у 50 % животных [15|. В тех случаях, когда хозяйство неблагополучно по РРСС, респираторная патология сочетается с нарушениями воспроизводства. Высокая инцидентность абортов может быть также обусловлена инфекцией вируса гриппа свиней.
Лабораторная диагностика
Лабораторные исследования обеспечивают информацией о спектре и видах патогенных агентов, вызвавших болезнь, а также об иммунном статусе стада. Для ее проведения при жизни у животных у берут пробы носового п трахеального секретов, крови и молозива. Серологические тесты обеспечивают точность диагноза. При смешанной системе содержания исследуют сыворотку крови свиней разных возрастных групп, даже если заболевание проявляется только в некоторых из них (чем выше заболеваемость в группе, тем большее число животных обследуют).
Выявление инфекции М. hyopneumoniae. Изоляция М. hyopneumoniae из органов остается «золотым стандартом» диагностики этой инфекции [13]. Для ее проведения необходимы специальные питательные среды, обогащенные антисывороткой к М. hyorhinis. Эта микоплазма широко распространена среди свиней и колонизирует питательные среды быстрее, чем М. hyopneumoniae. Последняя растет медленно, ее бывает трудно изолировать, а порой это вообще не удается [12]. Поэтому в настоящее время для диагностики данной инфекции у больших ipvnn подвергаемых убою свиней предпочитают не изоляцию возбудителя, а выявление вызываемых им поражений легких, серологические (преимущественно ИФА) и генетические (ПЦР) тесты, число которых неуклонно растет.
Чувствительность ИФА недостаточна для диагностики инфекции в первые 3...6 нед после заражения. Не пригоден он и для исследования сывороток крови вакцинированных свиней. Блокирующий вариант ИФА чувствительнее непрямого, но их показания специфичны в равной степени. При использовании блокирующего ИФА стадо свиней признают неблагополучным по инфекции М. hyopneumoniae, если уровень серопо-зитивности >10%. В тех случаях, когда данный показатель ниже, ставится лишь предположительный диагноз [1]. Реакция иммунофлюоресценции и иммунопероксидазный тест дают очень много неспецифических положительных показаний. Наибольшее распространение среди рутинных методов диагностики энзоотической пневмонии свиней получила од-ноэтаиная ПЦР- Этот тест выявляет М. hyopneumoniae только в пробах трахеи и легких, но не в носовом секрете [11]. Из применяемых в настоящее время методов диагностики данного микоплазмоза наибольшей чувствительностью обладает количественный гнездовой вариант ПЦР: он дает положительный результат при наличии в исследуемой пробе всего четырех клеток микоплазм. Хотя тест не нашел широкого применения из-за практически повсеместного распространения микоплазм среди свиней 111], тем не менее на его показания (в отличие от серологических методов диагностики) не оказывают влияние антитела, образованные в ответ на вакцинацию.
Обнаружение патогенных бактерий. Диагностировать инфекцию Р. multocida относительно просто. Для этого бывает достаточно изолировать бактерию на обычных питательных средах — кровяном агаре и агаре МакКонки.
Бактерии, участвующие в патогенезе КРБС, идентифицируют преимущественно по биохимическим свойствам. У S. suis дополнительно определяют серотип. Сложнее всего диагностировать инфекцию А. pleuropneumoniae, поскольку в посевах патологического материала (носовой слизи и миндалин) на обычных питательных средах ее рост, как правило, приглушается банальной микрофлорой. Вот почему для диагностики данной инфекции рекомендуется применять иммуномагнитную сепарацию, нуадеазныи анализ и ПЦР (по чувствительности ПЦР превосходит иммуномагнитную сепарацию в 1000 раз [3].
Обнаружение вируса РРСС. Для серологической диагностики РРСС применяют реакцию иммунофлюоресценции, иммунопероксидазный монослойный анализ, ИФА и реакцию нейтрализации. Перечисленными методами можно диагностировать инфекцию, но они не пригодны для оценки системного иммунного ответа животных. Серологические исследования проводят до вакцинации стада, т.к. они не позволяют дифференцировать естественно инфицированных и привитых животных [2|. Преимущество ИФА состоит в том, что с его помощью можно быстро тестировать большое количество проб сыворотки крови, а также диагностировать инфекцию как американских, так и европейских штаммов возбудителя РРСС (в отличие от реакции иммунофлюоресценции и монослойного иммунопероксидазного анализа). Сложность изоляции вируса РРСС сделала ПЦР основным способом диагностики этой инфекции. Тест позволяет быстро получать результаты, проявляет высокие чувствительность и специфичность. В нем можно исследовать патологический материал вне зависимости от его состояния. Кроме того, ПЦР дает положительный результат на 9 дн раньше после заражения свиней вирусом РРСС, чем ИФА. Автоматизация постановки ПЦР значительно снижает стоимость диагностических исследований.
Диагностика инфекции вируса гриппа свиней. Изолировать вирус гриппа свиней значительно проще, чем возбудителя РРСС. С этой целью носовым секретом свиней, полученным на лихорадочной стадии болезни, заражают 9... 10-дневные куриные эмбрионы [4]. Вирус гриппа свиней можно обнаружить п с помощью реакции гемагглютинации. Тип вирусных гемагтлютининов определяют в реакции ингибиции гемагглютинации, гтроводи-
РВЖ СХЖ №2-2009
19
мой с референтными антисыворотками, а тин нейраминидазы в гесте ингибиции активности этого фермента. Следует иметь в виду, что и некоторые варианты вируса гриппа птиц способны инфицировать свиней, не вызывая у них антительного ответа [5]. Из числа современных методов наиболее нифоко для диагностики инфекции РРСС применяют ИФА, П11Р, а также ускоренный мембранный иммунный анализ.
Для диагностики РРСС можно также пользоваться биохимическим анализом крови, в частности определять концентрацию сывороточного гантоглобина — протеина острой фазы воспаления, содержание которого в крови значительно возрастает при респираторных болезнях, хромоте, диарее, а также в результате каннибализма 1101.
Диагностика инфекции цирковируса свиней типа 2 (РСУ-2). Как и вирус РРСС, цирковирус свиней типа 2 вызывает симптомы поражения органов дыхания и замедляет рост молодняка |9]. Выявление гистологических изменений и иммуногистохимические методы служат «золотым стандартом» диагностики этой инфекции. В настоящее время их постепенно вытесняет ПЦР.
БИБЛИОГРАФИЯ
1. Ala-Risku V., Kananen М., Tuovinen V. National eradication of enzootic pneumonia in Finland. In: Proc. 18th Intern Pig Vet Soc Congress, Hamburg, Germany, 2004, 1, 237.
2. Benfield D.A., Collins J.E., Dee S.A. et al. Porcine reproductive and respiratory syndrome. In: Taylor D.J. (Ed.) Diseases of Swine. Iowa State Univ Press, 1999, 201—224.
3. Chiers K. Contagious pleuropneumonia control. Pig progress, special (respiratory diseases). 2002, 22—23.
4. Easterday B. C., van Reeth & K., 1999. Swine influenza. In: Taylor D.J. (Ed.). Diseases of Swine. Iowa State Univ Press, Ames, Iowa, USA, 2003, 277—290.
5. Hinshaw V.S., Webster R.G., Rodriguez R. J. Influenza A viruses: Combinations of hemagglutinin and neuraminidase subtypes isolated from animals and other Arch Virol, 1981, 67, 191—201.
6. Honnold C. Porcine respiratory disease complex, http://www.ces.purdue.edu/ pork/health/ca ryhonnold.html.
7. Motovski A. Enzootic (mycoplasmal) pneumonia of pigs. VM News, 2003, 11—12, 8, 10.
8. Motovski A. Enzootic (mycoplasmal) pneumonia of swine. Veterinarna Sbirka. 2004, 7—8, 8—9.
9. Neumann E.J., Sorden S., Halbur P. Swine health fact sheet: Circovirus infection in swine. http://www.pork.org/PorkScience/Documents/circovirus.pdf.
10. Petersen H., Nielsen J. Objective evaluation of health status: Haptoglobin serum concentrations as marker of clinical signs in finishing pigs. In: Proc 17th Intern Pig Vet Soc Congress, Ames, Iowa, USA, 2002, 258.
11. Pijoan C. M. hyopneumoniae — new diagnostic tools. In: Swine Mycoplasmal Pneumonia Technical Workshop, FDACVM. Kansas City, Mo. www.fda.gov/ ohrms/dockets/dailys/02/Mar02/031902/02N-0027_ts00009_01 _vol2.doc.
12. Ross R.F. Mycoplasmal pneumonia of swine. In: Taylor D.J. (Ed.) Diseases of Swine. Iowa State Univ Press, 1999, 495—501.
13. Thacker E.L, Thanawongnuwech R. Porcine respiratory disease complex (PRDC). Thai J Vet Med, 2002, 32, 126—134.
14. Thacker E.L. Diagnosis of Mycoplasma hyopneumoniae. Anim Health Res Rev, 2004, 5, 317—320.
15. Yeske P. Vaccination against EP. Pig Progress, Special (Respiratory Diseases), 2003, 10—11.
I. Bochev. Porcime respiratory disease complex (PRDC): A review. II. Diagnostics, treratment and prevention. Bulg J Vet Med, 2008, 11,4, 219—234.
0 2 6364 Коронавирусные
гастроэнтериты свиней. Обзор
O.B. Сергеев, НПО Нарвак (г. Москва)
Ключевые слова: коронавирусы,свинья
Сокращения: ИФА — иммуноферментный анализ; ТГС/ВТГВ — трансмиссивный гастроэнтерит свиней/вирус ТГС; РКВС — респираторный коронавирус свиней; ЭДС/ВЭДС — эпизоотическая диарея свиней/вирус ЭДС
Коронавирусные гастроэнтериты (ТГС и ЭДС) приносят промышленному свиноводству значительный ущерб. Оба заболевания сходны но характеру течения, клиническим проявлениям и патоморфологическим изменениям. Много общего имеет их эпизоотология. Фактически они — болезни-двойники, вызываемые двумя кишечными коронавнрусами свиней, не имеющими антигенного родства. Они характеризуются высокими заболеваемостью и смертностью новорожденных поросят. Поскольку поросята заболевают и гибнут в первые дни жизни, их невозможно активно иммунизировать.
Этиология
Возбудители ТГС и ЭДС относятся к группе 1 рода Coronavirus семейства Coronaviridae. Геном обоих вирусов представлен одной полиаденилированной +РНК, размер которой несколько превышает 28 тысяч нуклеотидов |19]. Их вирионы содержат 3 структурных белка: N, М и S. У ВТГС также имеется дополнительный мембранный белок Е [19, 21]. Оба агента устойчивы к кислой среде (pH 4,0) и трипсину. У каждого из них выявлено только по одному серотипу, что зна-
чительно облегчает лабораторную диагностику и специфическую профилактику вызываемых ими заболеваний. По структуре вирионов, механизму репликации и морфогенезу оба вируса обладают всеми характеристиками, присущими представителям семейства Согопа\'тс]ае.
Диаметр вирионов ВТГС варьирует от 60 до 160 нм (211, а ВЭДС — от 95 до 190 нм [ 19]. На поверхности их двухслойной липидной оболочки имеются булавовидные шипы (пепломе-ры) длиной 12...25нм, формирующие характерную «корону». Созревание в!грионов происходит путем почкования через мембраны эндонлазматического ретикулума [19, 21].
Пепломеры, находящиеся на поверхности внриона, сформированы гликопротеином Б, играющим важную роль в начале инфекционного процесса, проникновении вируса в клетку и развитии иммунитета (индукции специфических антител и нейтрализации вируса) [27]. Различия в гликопро-теине Б вирусов ТГС и ЭДС обусловливают отсутствие антигенного родства двух вирусов и перекрестного иммунитета у переболевших и вакцинированных животных.
В конце 80-х годов прошлого столетня установили наличие двух модификаций ВТГС. Кроме вирулентного вируса ТГС, вызывающего массовые энтериты у новорожденных поросят, существует природный слабовирулентный мутант агента (РКВС), обладающий тропизмом к респираторным органам. У РКВС обнаружили делецию в 5'-концевой части гена 5 размером 621...681 нуклеотидов, с которой связывают его отличия от вирулентного вируса ТГС: меньший размер гликопротеина Б (170...190 кД по сравнению с 220 кД) и измененный тканевый тропизм [21].
