CC BY
29
Педагогико-психологические и медико-биологические проблемы физической культуры и спорта, №4(21) 2011
ISSN 2070 4798
УДК 612.112.91
КОЛИЧЕСТВЕННЫЕ И ФУНКЦИОНАЛЬНЫЕ ИЗМЕНЕНИЯ НЕЙТРАФИЛЬНЫХ ГРАНУЛОЦИТОВ У СТУДЕНТОК С БАКТЕРИАЛЬНЫМ ВАГИНОЗОМ
Н.А. Ильина - профессор, доктор биологических наук Е.А. Цизина - соискатель Ю.Ю. Красноперова - профессор, доктор биологических наук ФГБОУ ВПО «Ульяновский государственный педагогический университет
имени И.Н. Ульянова» Ульяновск
QUANTITATIVE AND FUNCTIONAL CHANGES OF NEUTROPHIL GRANULOCYTE OF WOMEN-STUDENTS WITH BACTERIAL VAGINOSIS
N.A. Iliina - Professor, Doctor of Biological Sciences E.A. Tsizina - Applicant U.U. Krasnoperova - Professor, Doctor of Biological Sciences Ulyanovsk State Pedagogical University named by I.N. Ulyanov
Ulyanovsk
e-mail: [email protected]
Ключевые слова: нейтрофильные гранулоциты, фагоцитоз, бактериальный вагиноз, периферическая кровь, фосфатаза.
Аннотация. Рассмотрено количественное и функциональное состояние нейтрофильных гранулоцитов для оценки характера течения патологических процессов и в качестве критерия резервов защитного потенциала организма. При изучении ферментной системы нейтрофильных гранулоцитов обнаружено повышение активности миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз при увеличении интенсивности роста выделенной вагинальной микрофлоры у студенток с бактериальным вагинозом.
Key words: neutrophil granulocyte, phagocytosis, bacterial vaginosis, peripheral blood, phosphatase.
The quantitative and functional state of neutrocytes for the estimation of character of pathological processes flow is considered and as a criterion of backlogs of protective potential of organism. Studying of the enzymic system of neutrocytes found out the increase of activity of myeloperoxidase alkaline and acid phosphates at the increase of intensity of height of the distinguished vaginal microflora for women with bacterial vaginosis.
ВВЕДЕНИЕ
В обеспечении неспецифической резистентности организма ведущую роль играют нейтрофильные гранулоциты (НГ), обусловливающие формирование как защитных, так и патологических реакций. Определение их состояния можно использовать для оценки характера течения патологических процессов и в качестве критерия резервов защитного потенциала организма [1]. Нарушение фагоцитарной деятельности НГ приводит к персистенции микробной инфекции, нарушению элиминации антигенов и иммунных
комплексов, к деструкции клеточных мембран [2]. При этом важно учитывать не только количественное, но и функциональное состояние клеток [3].
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Обследовано 132 студентки факультета физической культуры и спорта с диагнозом бактериальным вагинозом (БВ) (1-я группа), группу сравнения составили 40 практически здоровых девушек, репрезентативных по возрасту (2-я группа). При учете результатов посева по интенсивности роста выделенных культур всех обследованных делили на четыре группы:
1 группа - очень скудный рост - рост только на жидких питательных средах; на плотной питательной среде рост отсутствует.
2 группа - скудный рост - на плотной питательной среде рост до 10 колоний микроорганизмов определенного вида.
3 группа - умеренный рост, на плотной питательной среде рост от 10 до 100 колоний.
4 группа - обильный рост, на плотной питательной среде рост более 100 колоний
У девушек с БВ тестировали состояние нейтрофильного фагоцитарного звена иммунной системы по определенным показателям. При этом оценивали поглотительную и цитотоксическую способность НГ по количественным и качественным показателям.
У обследованных с БВ выявлено увеличение количества лейкоцитов в периферической крови до 8,2±1,27х109/л (р<0,001) против 6,41± 0,52х109/л в группе сравнения (табл. 1). Подобные изменения обнаружены и при изучении пула нейтрофильных гранулоцитов (НГ). У девушек с БВ выявлен относительный нейтрофилез - 61,2±12,71% (р<0,001) в сравнении с 53,7±14,87% у здоровых девушек. При бактериальном вагинозе наблюдали достоверное увеличение и абсолютного число НГ.
Таблица 1
Количественные показатели фагоцитарного звена защиты у девушек с БВ_
Показатели Обследованные
Здоровые (п=40) с БВ (п=132)
Лейкоциты (• 109/л) 6,41±0,52 8,2±1,27*
Нейтрофилы (%) 53,7±14,87 61,2±12,71*
Нейтрофилы (абс. число) 3451±29,7 4865±256*
Примечание: * - достоверность различий, по сравнению со здоровыми (р<0,05)
У девушек с бактериальным вагинозом изучали фагоцитарную активность нейтрофилов. Активность фагоцитов выражали через фагоцитарный показатель.
Фагоцитарный показатель у девушек с бактериальным вагинозом составил -41,9±6,1%, тогда как у здоровых этот показатель составил 56,7±3,4% (р<0,05).
Одним из важных показателей, характеризующих протективную роль системы фагоцитоза, является фагоцитарное число, отражающее способность клеток к захвату возбудителей. Результаты определения фагоцитарного числа у больных БВ представлены на рисунке 1.
у.е.
14 12 10 8
6 4 2 0
J 14,2
*
9,8
5,1
5,9 5,4
1 группа 2 группа 3 группа 4 группа Здоровые
* - достоверность различий со здоровыми (р<0,05) Рис. 1. Изменение фагоцитарного числа в исследуемых группах
Как видно из приведенных данных показатели фагоцитарного числа у обследованных девушек были выше контрольных значений. Однако статистической значимости это увеличение достигало только у обследованных третьей и четвертой групп (табл. 2).
Таблица 2
Показатели фагоцитарного числа у женщин с БВ в зависимости от интенсивности роста выделенных культур (%)
Показатели фагоцитарного числа у женщин: Группы обследованных по интенсивности роста выделенных культур
1 2 3 4
с БВ 5,1+2,2 5,9+1,3 9,8+1,0 ^14,2+2,
Здоровых 5,4±0,6
Примечание: * - показатель достоверности между девушками с БВ и здоровыми (р<0,05)
Определение показателей завершенности фагоцитоза (ПЗФ), наоборот, выявило значительное снижение переваривающей функции фагоцитов. Так, если у обследованных первой и второй групп ПЗФ был равен 41,9±3,1% и 44,1±5,7% (в группе сравнения -43,5±4,0%; р>0,05), то в третьей и четвертой группах этот показатель был статистически достоверно снижен до 35,2±2,2% и 31,4±3,1% соответственно (р<0,05).
Таким образом, изучение фагоцитарной реакции нейтрофилов периферической крови у девушек с бактериальным вагинозом выявило достоверное снижение значений фагоцитарного показателя при выраженных изменениях микрофлоры влагалища (третья и четвертая группа), что свидетельствует о сокращении количества нейтрофилов с функциями фагоцитов.
С помощью реакции восстановления нитросинего тетразолия (НСТ) изучено функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов у больных. Результаты изучения показателей НСТ-теста у обследованных представлены в таблице 3.
Таблица 3
Показатели НСТ-теста у обследованных с БВ в зависимости от интенсивности роста выделенных культур (у.е.)
Показатели НСТ-теста Группы обследованных по интенсивности роста выделенных культур
1 2 3 4
с БВ 0,021±0,006 0,029±0,004 0,039±0,003* 0,043±0,006*
Здоровых 0,024±0,005
Примечание: * - показатель достоверности между девушками с БВ и здоровыми (р<0,05)
Из данных, представленных в таблице, видно, что в случае отсутствия изменений микробиоценоза влагалища показатели НСТ-теста не изменялись (первая группа), либо их увеличение было статистически не достоверно (вторая группа). Значительное увеличение показателей НСТ-теста отмечалось у пациенток при увеличении интенсивности роста выделенных культур (третья, четвертая группа). Максимальное увеличение показателей отмечалось у девушек 4 группы. Обнаруженные дефекты функции гранулоцитов могут поддерживать вагинальный дисбиоз со свойственным ему нарушением проницаемости эпителия, всасывания белковых макромолекул, что усугубляет сбои в иммунной системе.
Далее изучали ферментную систему фагоцитов, характеризующую их функциональную активность. Для этого определяли уровень миелопероксидазы (МПО), катионных белков (КБ), кислой (КФ) и щелочной фосфатаз (ЩФ) у девушек с бактериальным вагинозом (табл. 4).
Таблица 4
Показатели миелопероксидазной активности (МПА) фагоцитов (у.е.)
Показатели МПО Группы обследованных по интенсивности роста выделенных культур
1 2 3 4
с БВ 2,59±0,23 2,87±0,43 3,31±0,61* 4,83±0,26*
здоровых 2,64±0,27
Примечание: * - показатель достоверности между девушками с БВ и здоровыми (р<0,05)
Как видно из таблицы, активность миелопероксидазы при бактериальном вагинозе повышалась при увеличении интенсивности роста выделенной микрофлоры, достигая у девушек, входящих в третью и четвертую группу, статистической достоверности.
Было также установлено, что бактериальный вагиноз приводит к повышению уровня щелочной и кислой фосфатаз. При определении уровня ЩФ и КФ наблюдалась аналогичная тенденция - увеличение показателей в первые годы заболеваний с последующим снижением ниже значений группы сравнения. Наибольших значений уровень щелочной фосфатазы достигал у девушек четвертой группы - с максимальными изменениями вагинальной микрофлоры. Показатели кислой фосфатазы также максимально изменялись у обследованных этой же группы.
Наряду с изменением показателей активности миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз при бактериальном вагинозе установлено снижение уровня катионного белка (табл. 5). Как видно из представленной таблицы, при незначительных проявлениях бактериального вагиноза достоверная разница уровня КБ не выявлена, статистически достоверных различий с группой здоровых она достигала только у девушек четвертой группы.
Изучение фагоцитарной реакции нейтрофилов периферической крови у девушек с БВ выявило достоверное снижение значений фагоцитарного показателя во всех исследуемых
группах, что свидетельствует о сокращении количества нейтрофилов с функциями фагоцитов.
Таблица 5
Уровень катионного белка фагоцитов обследованных девушек (у.е.)
Показатели КБ Группы обследованных по интенсивности роста выделенных культур
1 2 3 4
с БВ 1,71±0,32 1,54±0,71 1,21±0,26 1,08±0,21*
здоровых 1,69±0,21
Примечание: * - показатель достоверности между девушками с БВ и здоровыми (р<0,05)
Одновременно, среднее число микробов, поглощенных одним активным нейтрофилом, и показатель завершенности фагоцитоза были достоверно снижены при выраженном повышении колонизационной резистентности вагинальной микрофлоры. Функция киллинга фагоцитов у девушек с бактериальным вагинозом по сравнению со здоровыми значительно страдала. Выявлены энзиматические дефекты нейтрофильных фагоцитов, ведущие к дисфагоцитозу. Функциональная активность нейтрофильных гранулоцитов, выявляемая с помощью НСТ-теста, позволяет выявить наличие «метаболического взрыва», который возникает в нейтрофильных гранулоцитах в связи с процессом фагоцитоза. Показано достоверное увеличение показателей НСТ-теста у девушек с бактериальным вагинозом по сравнению со здоровыми, при увеличении интенсивности роста выделенных культур (р<0,05).
При изучении ферментной системы нейтрофильных гранулоцитов обнаружено повышение активности миелопероксидазы, щелочной и кислой фосфатаз при увеличении интенсивности роста выделенной вагинальной микрофлоры у девушек с бактериальным вагинозом.
Литература
1. Нестерова, И.В. Влияние длительного синтетического дипептида Бестима на функциональную активность нейтрофильных гранулоцитов в динамике в эксперименте in vivo / И.В. Нестерова, Н.В. Колесникова, А.С. Симбирцев, Л.В. Ломтадидзе // Иммунология. - 1999. - № 6. - С. 40-43.
2. Радченко, В.Г. Хронические заболевания печени / В.Г. Радченко, А.В. Шабров, В.В. Нечаев. - СПб., 2000. - С. 7-9.
3. Козаченко, Н.В. Проблемы диагностики иммунной недостаточности / Н.В. Казаченко, С.Ю. Старикова // Медицинская иммунология. - 2003. - Т. 5. - № 3-4. - С. 278.
Literature
1. Nesterova, I.V. Influence of long synthetic dipeptide Bestima on functional activity of neutrophilic granulocytes in dynamics in experiment in vivo / I.V. Nesterova, N.V. Kolesnikova, A.C. Cimbirtsev, L.V. Lomtadidze // Immunology. - 1999. - № 6. - P. 40-43.
2. Radchenko, V.G. Chronic diseases of a liver / V.G. Radchenko, A.V. Shabrov, V.V. Nechaev. - St.P., 2000. - P. 7-9.
3. Kozachenko, N.V. Problems of diagnostics of immunodeficiency / N.V. Kozachenko, S.U. Starikova // Medical immunology. - 2003. - T. 5. - № 3-4. - P.278.
Статья поступила в редакцию 15.10.2011 г.
