CC BY
72
Inyukina T.A., Gugushvili N.N.
Summary
As a result of investigations it was established, that bactericidal and lysozyme activities raised with the increase of the postnatal life of calves. However, it is necessary to note, that it took place after the cessation of colostrum taking (from 5-7 days), but on the 14-th day their activity recovered. By the 30-th day the indices of bactericidal and lysozyme activities were the highest and amounted 44,40±0,31% and 37,20±0,61%. Low indices of bactericidal and lysozyme activity in the early postnatal life as compared with a late term point out the imperfect immunity system of new-born calves. After a complete colostrum meal IgA and IgG levels constantly raised. By the age of one month a considerable increase of all investigated kinds of immunoglobulin was noticed: IgA - in 2,3 times; IgM - in 1,3 times; IgG - in 1,5 times as compared with the first day. Later there is an adaptation of a new -born organism to the environment , the formation of a natural protection system of an organism.
УДК 619:612.017]:636.2.053
ОЦЕНКА НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ
ОРГАНИЗМА ТЕЛЯТ
Инюкина Т. А., Гугушвили Н.Н.
Кубанский государственный аграрный университет
Ключевые слова: неспецифическая резистентность организма, телята, фагоцитоз, нейтрофильные гранулоциты.
Key words: nonspecific resistance of the body, calves, phagocytosis, neutrophil granulocytes.
В последние годы в Краснодарском крае наблюдается ухудшение экологической обстановки, что влечет за собой угнетение иммунной системы животных.
После рождения, в процессе роста и развития животные живут, как правило, в неблагоприятных условиях воздействия экологического и антропогенного факторов, которые вызывают в организме изменения приспособительного характера. Усиленная мобилизация важнейших систем организма с трудом обеспечивает поддержание гомеостаза в сложившихся условиях (В.Н. Денисенко, 1999; Н.Н. Гугушвили, 2001).
Это нередко приводит к нарушению функций жизненно важных систем и, как следствие, к различным функциональным нарушениям органов, снижению общей резистентности организма и появлению болезней, к повышению отхода новорожденных животных (Р.Х. Вильданов, Р.Х. Вильданова, 2001; Н.Е. Горковенко, Ю.А. Макаров, 2001).
Процесс фагоцитоза осуществляется микрофагами и макрофагами (клетки пульпы селезенки, эндотелия кровеносных сосудов). В целом фагоцитоз можно рассматривать как сложную многоступенчатую реакцию основного механизма защиты организма, начинающуюся с захвата фагоцитами чужеродных субстанций и заканчивающуюся ее перевариванием.
Нами была изучена неспецифическая иммунобиологическая реактивность организма телят в возрастном аспекте. При этом были изучены следующие показатели фагоцитарной активности крови телят: процент фагоцитарной активности нейтрофилов (%ФАН), фагоцитарное число (ФЧ), процент переваримости (%П) в первые сутки, на 14-е и на 30-е сутки после рождения.
В результате исследований нами установлено, что в постнатальный период с развитием организма постепенно активизировались процессы фагоцитоза, что указывало на формирование естественной резистентности организма новорожденных телят. Так, на третьи сутки постнатального периода наблюдалось достоверное увеличение процента фагоцитарной активности нейтрофилов на 11%, поглотительной способности нейтрофильных гранулоцитов - на 2%, переваривающей способности - на 5%. Спустя две недели после рождения телят достоверно повышался процент фагоцитарной активности нейтрофилов на 17%, поглотительная способность нейтрофильных гранулоцитов - на 8%, переваривающая способность - на 14% относительно первых суток постнатального периода. К месячному возрасту достоверно повышался процент фагоцитарной активности нейтрофилов на 29%, поглотительной способности нейтрофильных гранулоцитов - на 15%, переваривающей способности - на 20% относительно первых суток постнатального периода (табл. 1).
1. Показатели активности бактериального фагоцитоза крови телят (М±ш;п=15)
Показатели 1-е сутки 3-е сутки 14-е сутки 30-е сутки
%ФАН 36,60±0,20 40,59±0,44* 42,82±0,29** 47,33±0,48***
ФЧ 4,32±0,14 4,38±0,13 4,67±0,18 4,97±0,05***
%П 51,96±0,27 54,68±0,56* 59,30±0,51*** 62,31±0,34***
*Р<0,05 **Р>0,01; ***Р>0,001. %ФАН - процент активно- ) агоцитирующих
нейтрофилов; ФЧ - фагоцитарное число; %П - процент переваривания
Результаты нитросини-тетразолиевого теста (КВТ-тест) показали, что коэффициент мобилизации фармазанпозитивных клеток повышался с возрастом телят (рис. 1).
2 и
1,8 - --------------------------------------------------------------------------------------------
1,6 - ____________________________________________________________________
1,41,2 -1 -0,8 -0,6 -0,4 -0,2 -
0 -I-------------------------,-----------------------,------------------------,-------------------
1-е сутки 3-е сутки 14-е сутки 30-е сутки
□ ФПН
1. Коэффициент мобилизации фармазанпозитивных нейтрофилов у
телят
Результаты спонтанного теста указывали на степень активизации кислородзависимых механизмов фагоцитоза под влиянием внутренних причин, происходящих в организме, а стимулированного теста дали представление о способности нейтрофилов к активизации in vitro под воздействием стимуляторов (бактерий Staphylococcus aureus, лабораторный штамм 209 Р).
Так, коэффициент мобилизации фармазанпозитивных клеток на третьи сутки постнатального периода повышался средний цитохимический индекс с 1,46±0,09 до 1,48±0,08 единиц, к двухнедельному возрасту - с 1,46±0,09 до 1,51±0,07 единиц (на 4%), к месячному возрасту - с 1,46±0,09 до 1,78±0,10 единиц (на 23%).
Изучение интралейкоцитарной системы имеет особое значение для теоретической и клинической ветеринарии в связи с важной ролью этих клеток в осуществлении защитных реакций организма.
С целью диагностики иммунного статуса организма новорожденных телят нами изучены микробицидные свойства нейтрофильных гранулоцитов.
Изучение активности кислой и щелочной фосфатаз цитохимическим способом в нейтрофильных гранулоцитах имеет важное диагностическое значение для установления иммунного статуса организма телят.
Кислая фосфатаза участвует в процессах переваривания бактерий,
подвергая их кислотному гидролизу, при этом разрушаются мукопептидные структуры большинства бактериальных клеток. Кислая фосфатаза присуща молодым клеткам и по повышению или понижению ее активности можно судить о патологическом процессе в организме животных.
Щелочная фосфатаза нейтрофильных гранулоцитов оказывает влияние на поглощение фагоцитируемых частиц, переход гранулярных ферментов, первичных гранул в фагоцитарные вакуоли и высвобождение гистамина под влиянием антигенов. Изменение активности щелочной фосфатазы в определенных пределах является следствием повышения защитных реакций организма. Повышение активности щелочной фосфатазы при различных заболеваниях и патологических процессах отражается на функционировании системы нейтрофильных лейкоцитов, что следует рассматривать как проявление защитно-приспособительных процессов.
Активность миелопероксидазы присуща молодым клеткам. Обычно активность фермента в клетках крови у клинически здоровых животных высокая, у больных - снижена.
Определение миелопероксидазы (пероксидазы) является одним из звеньев выявления микробицидных свойств системы крови. Простетическая группа в пероксидазе представлена гемом. Фермент катализирует окисление различных веществ с помощью перекиси водорода, который поступает из тканей (жировых) в форменные элементы крови и локализуется в их цитоплазме в виде гранул (лизосом).
Катионные белки относятся к неферментным системам, играют важную роль в реализации фагоцитарной функции клеток, не вызывают привыкание к себе микроорганизмов, увеличивают проницаемость клеточных мембран и сосудистой стенки. Кроме того, они вызывают дегрануляцию тучных клеток, тем самым повышают содержание
гистамина. Катионные белки проявляют активность против грамположительных и грамотрицательных бактерий, грибков и вирусов. В основе антибактериального действия лежит их электростатическое
взаимодействие с анионными компонентами бактериальной стенки. Катионные белки - амфотерные электролиты, состоящие из
полипептидных цепей с разнородными концевыми группами КН2+ и СООН- и вместе с перекисью и галоидами образуют мощную
бактерицидную систему нейтрофила.
Результаты исследований по изучению интралейкоцитарных
систем в возрастном аспекте новорожденных показали, что у телят наблюдалось колебание уровня активности кислой фосфатазы в зависимости от возраста.
При анализе изменения активности щелочной фосфатазы было выявлено, что у новорожденных телят активность данного фермента была
более высокой относительно кислой фосфатазы во всех изучаемых возрастных периодах, хотя происходило снижение ее активности к месячному возрасту.
Активность щелочной фосфатазы на 3-е сутки у телят в постнатальный период, относительно первых суток, повысилась на 2%, затем достоверно снижалась к 14-м суткам на 7%, к месячному возрасту -на 13% (табл. 2).
2. Цитохимические показатели крови телят до месячного возраста (М±ш;п=15)
Показатели 1-е сутки 3-е сутки 14-е сутки 30-е сутки
ЩФ 1,49±0,01 1,52±0,01 1,39±0,01*** 1,30±0,01***
КФ 1,35±0,01 1,38±0,01* 0,45±0,01*** 0,51±0,01***
МП 2,36±0,02 2,49±0,01*** 2,34±0,02 2,53±0,03***
КБ 1,19±0,01 1,26±0,01*** 1,22±0,01*** 1,67±0,02***
*Р<0,05; ***Р>0,001. ЩФ - щелочная фосфатаза; КФ - кислая фосфатаза; МП - миелопероксидаза; КБ - лизосомально-катионные белки
Изменения активности щелочной и кислой фосфатаз с первых до трех суток достоверно были высокими, а затем наблюдалась обратная корреляция между этими ферментами, однако к месячному возрасту происходило возрастание кислой фосфатазы. Кроме того, необходимо отметить, что средний цитохимический индекс щелочной фосфатазы выше кислой.
Так, на третьи сутки постнатального периода у телят наблюдалось повышение среднего цитохимического индекса кислой фосфатазы на 2% (с 1,35±0,01 до 1,38±0,01 единиц), а затем происходило резкое снижение в 3 раза относительно первых суток. Однако, к месячному возрасту наблюдалось повышение среднего цитохимического индекса кислой фосфатазы в 1,1 раза относительно 14-х суток (табл. 2).
Диагностическое исследование активности щелочной и кислой фосфатаз лейкоцитов позволяет установить развитие защитных механизмов у телят до месячного возраста.
С возрастом наблюдалась активизация фермента
миелопероксидазы. Так, к 3-м суткам ее активность достоверно увеличилась на 6% относительно первых суток, затем к 14-м суткам наблюдалось некоторое снижение, в сравнении с первыми сутками, а относительно третьих суток - на 6%. К месячному возрасту вновь наблюдалось повышение на 7% относительно первых суток, а относительно 14-х суток - на 8% (табл. 2).
Данное обстоятельство свидетельствует о повышении реактивности организма телят к 3-м суткам после потребления молозива, и дальнейшее
снижение к 14-м суткам после его прекращения. В более поздние сроки постнатального периода развиваются механизмы защиты организма и, в связи с этим, происходит активизация кислородзависимой системы фагоцитоза, в частности, фермента миелопероксидазы (табл. 2).
Результаты анализа неферментной кислороднезависимой системы уровня лизосомально-катионных белков показали, что при изучении других систем фагоцитоза происходили аналогичные изменения. Однако необходимо отметить, что изменения уровня лизосомально-катионных белков происходили более пластично, чем активность кислой фосфатазы и миелопероксидазы. Так, на 3-и сутки постнатального периода у телят отмечалось достоверное увеличение уровня лизосомально-катионных белков (на 6%) относительно первых суток. Затем к 14-м суткам происходило некоторое снижение уровня лизосомально-катионных белков (на 3%) относительно 3-х суток, однако, относительно первых суток оно было выше на 3%. К месячному возрасту происходило достоверное повышение уровня лизосомально-катионных белков с 1,19±0,01 до 1,67±0,02 единиц (Р>0,001) в 1,4 раза по сравнению с первыми сутками.
Таким образом, проведенные исследования позволили установить динамику изменений фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов в зависимости от сроков постнатального периода у телят. Активизация фагоцитоза наблюдалась на протяжении всего исследуемого периода (с момента рождения до месячного возраста). Однако необходимо отметить недостоверное повышение этого процесса после прекращения приема молозива к 14-м суткам. Данный период можно характеризовать временем покоя, затем к 30-м суткам был период дальнейшей активизации фагоцитоза, следовательно, и коэффициент мобилизации
фармазанпозитивных клеток увеличивался. Данное обстоятельство свидетельствует о формировании иммунитета телят в зависимости от возраста. Уровень активности ферментных и неферментных систем следует рассматривать как надежный индикатор функционального напряжения системы нейтрофильных лейкоцитов, играющей важную роль в развитии защитно-приспособительных процессов при самых различных заболеваниях.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Вильданов Р.Х. Использование целебных трав при заболеваниях органов дыхания телят /Р.Х. Вильданов, Р.Х. Вильданова //Материалы науч.-произв. конф. по актуал. пробл. ветеринарии и зоотехнии. - Казань, 2001. - Ч. 2. - С. 25-26. 2. Горковенко Н.Е. Фармакокоррекция иммунонедостаточности у крупного рогатого скота /Н.Е. Горковенко, Ю.А. Макаров //Новые фармакол. средства для животноводства и ветеринарии: Материалы конф. - Краснодар, 2001. - Т.
2. - С. 41-42. 3. Гугушвили Н.Н. Влияние иммуностимуляторов на фагоцитарную активность нейтрофилов у телят в возрастном аспекте /Н.Н. Гугушвили //Новые фармакологические средства для животноводства и
ветеринарии: материалы науч.-практ. конф., посвященной 55-летию ГУ Краснодарской НИВС. Том 1. - Краснодар, 2001а. - С. 71-73. 4. Г угушвили Н.Н. Иммунологические методы исследования в ветеринарии.: //Метод. рекомендации. /Н.Н. Гугушвили. - Краснодар, 2001 б. - 95 с. 5. Денисенко В. Н. Иммунодефицитные состояния и особенности иммунокоррекции организма телят: автореф. дис. ...д-ра ветеринар. наук. /В.Н. Денисенко. -М., 1999. - 50 с.
ОЦЕНКА НЕСПЕЦИФИЧЕСКОЙ РЕЗИСТЕНТНОСТИ ОРГАНИЗМА ТЕЛЯТ
Инюкина Т. А., Гугушвили Н.Н.
Резюме
Результатами исследований нами установлена динамика изменений фагоцитарной активности нейтрофильных гранулоцитов в зависимости от сроков постнатального периода у телят. Активизация фагоцитоза наблюдалась на протяжении всего исследуемого периода (с момента рождения до месячного возраста). Однако необходимо отметить недостоверное повышение этого процесса после прекращения приема молозива к 14-м суткам. Данный период можно характеризовать временем покоя, затем к 30-м суткам был период дальнейшей активизации фагоцитоза, следовательно, и коэффициент мобилизации
фармазанпозитивных клеток увеличивался. Данное обстоятельство свидетельствует о формировании иммунитета у телят в зависимости от возраста.
THE estimation of nonspecific resistance of calf organism
Inyukina T.A., Gugushvili N.N.
Summary
As a result of investigations we established the dynamics of changes in a phagocytic activity of neutrophilic granulocytes depending on a postnatal life period of calves. The activation of phagocytosis is observed during the whole period of investigation (from birth till a month age). However, it is necessary to note the unauthentic raise of this process after the cessation of colostrums feeding by the 14-th day. The given period can be characterized as a repose one, then by the 30-th day it was a period of a further phagocytosis activation, and consequently an impressment coefficient of pharmasan-positive cells increased. This circumstance proves the immunity formation of calves depending on their age.
