CC BY
7
конденсата в весе составляют 83%, тогда как нагрев до 50° соответствует потере в весе всего 7 %. Это дает основание считать оптимальной температурой ввода пробы в хроматограф 250°, поскольку при этом (кривая ТГ) испаряется большая часть анализируемого вещества. Кроме того, при таких условиях заметного разложения пробы не наблюдается.
Количество вещества, выделяющееся при нагреве конденсата в пределах 50—250°, составляет основную массу анализируемого продукта. Вместе с тем, как показали газохроматографические исследования конденсата обувной резины (Ю. С. Другов, 1972), большую часть газовыделений, попадающих при вулканизации резины в воздух рабочих помещений, составляют алкилбензолы (60—70%) С7—СХ1 с температурами кипения 110— 180°. Можно предположить, что потери конденсата в весе в этих условиях происходят в основном за счет выделения алкилбензолов. В этом случае такое соответствие результатов, полученных методом термогравиметрии и газовой хроматографии, может оказаться полезным для качественного и количественного анализа подобных объектов (Ю. С. Другов, 1973).
Можно привести и другой пример, когда термогравиметрия явилась неотъемлемой частью исследования термической стойкости хелатов при определении в воздухе ультрамалых количеств бериллия, алюминия и хрома в виде трифторацетиацетонатов (Ю. С. Другов и соавт.).
Таким образом, дериватография имеет важное значение в исследовании поведения различных полимеров при их нагревании в лабораторных условиях; можно не сомневаться в том, что в практике санитарно-промыш-ленной химии этот метод может найти широкое применение при решении самых разнообразных задач.
ЛИТЕРАТУРА. Балашов В. Е., Бартенев В. Д., Савицкий И. В. и др. Токсикологическая оценка летучих веществ, выделяющихся из синтетических материалов. Киев, 1968.— Другов Ю. С., Муравьева Г. В. Производство шин, резиново-техническ. изделий и асбестово-техническ. изделий. Научи, техн. сб., 1971, № 4, с. 23. — Д р у г о в Ю. С. Там же, 1972, № 6, с. 33. — О н же. Там же, 1973, №9, с. 30.— Другов Ю. С., Муравьева Г. В., Гринберг КМ. Завод, лабор., 1972, № 11, с. 1305.
Поступила II/II 1974 г.
УДК «12.015.в1577.164.]-087.4
О. В. Перов, В. Я. Перейма
КОЛИЧЕСТВЕННОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ АСКОРБИНОВОЙ КИСЛОТЫ В СУСПЕНЗИИ КЛЕТОК
Кафедра гигиены Тернопольского медицинского института
Существующие методы определения количества аскорбиновой кислоты в органах и тканях (И. Б. Гольдштейн и соавт.; Н. Н. Пушкина) основаны на весовых отношениях и характеризуют орган в целом. Между тем для суждения о функциях клеток, составляющих ткань, в частности о состоянии окислительно-восстановительных процессов, часто необходимо определить последние на клеточном уровне, в избранном участке ткани или органа. Приближением к этому может явиться измерение количества аскорбиновой кислоты в суспензии изучаемых клеток с последующим расчетом на избранное число клеточных тел. Нами разработана модификация такого определения.
В основу модификации положено изменение и приспособление к новым условиям способа Chayen для растительных объектов, при котором количество восстановленной аскорбиновой кислоты узнают по УФ-сорбции экстракта. Сущность определения количества аскорбиновой кислоты заключается в следующем.
Животное (белую крысу) умерщвляют путем перерезки спинного мозга. Выделяют изучаемый орган и промывают с целью освобождения от примеси крови перфузией физиологического раствора комнатной температуры или простым обмыванием. В избранном для исследования участке ткани делают разрез острым скальпелем. Место среза споласкивают в физиологическом растворе. Глазным скальпелем с поверхности среза производят соскоб ткани, который переносят в пробирку, содержащую 0,5 мл физиологического раствора. Соскобы производят до достижения содержимым пробирки средней степени опалесценции. Полученную суспензию тщательно перемешивают стеклянной палочкой с оплавленным концом.
Часть жидкости с клетками забирают капилляром и помещают в камеру Горяева для счета форменных элементов крови. Количество клеток сосчитывают так же, как количество эритроцитов. Число клеток изучаемой ткани в 1 мм3 раствора вычисляют по формуле:
а
х= б-в •
где х — количество клеток в 1 мм3; а — количество клеток, подсчитанных в камере; б — количество сосчитанных квадратов сетки; в — объем камеры над квадратом. Делают пересчет на 0,5 мл физиологического раствора.
К содержимому пробирки после подсчета числа клеток прибавляют 4,5 мл 5% раствора уксусной кислоты, хорошо перемешивают и оставляют на 30 мин при комнатной температуре. По истечении времени контакта жидкость центрифугируют при 5000 оборотах в течение 5—6 мин. Надосадоч-ную жидкость сливают и исследуют на спектрофотометре СФ-4А при Атах= = 248 нм. Определяют величину оптической плотности исследуемого раствора. Затем к пробе прибавляют 1 каплю 0,05% раствора Си504 и оставляют при комнатной температуре на 2 ч.
Производят повторное измерение оптической плотности при той же длине волны. Разницу между первым и вторым значением оптической плотности умножают на 5 и с помощью калибровочной кривой находят количество аскорбиновой кислоты в микрограммах, содержащееся в подсчитанном числе клеточных тел.
Калибровочную кривую получают следующим образом. Готовят определенной концентрации раствор аскорбиновой кислоты в смеси, состоящей из 1 части физиологического раствора и 9 частей 5 % раствора уксусной кислоты. Затем делают ряд разведений (шкалу) небольших концентраций (от 1 до 10 мкг/мл). Через 30 мин измеряют на спектрофотометре при длине волны 248 нм оптическую плотность каждой пробы. Прибавляют по 1 капле 0,05% раствора Си504, взбалтывают и спустя 2 ч повторно измеряют оптическую плотность при тех же параметрах. Разница между первой и второй величиной будет критерием для дозы аскорбиновой кислоты, находящейся в пробе.
При построении калибровочной кривой на оси абсцисс откладывают содержание аскорбиновой кислоты в микрограммах на 1 мл, на оси ординат — разницу между оптической плотностью первого и второго определения. Полученный график служит основой для установления содержания аскорбиновой кислоты в исследуемой клеточной суспензии. В итоге делают пересчет на какое-то определенное количество клеток изучаемой ткани.
Мы провели сравнительное определение количества аскорбиновой кислоты в клеточной суспензии, приготовленной из ткани легких, сердца и почек. Разрезы с последующими со-скобами производили всегда в одних и тех участках перечисленных органов:
Содержание аскорбиновой кислоты в суспензии клеток различных органов (М±т)
Органы Содержание аскорбиновой кислоты (в мкг па. 10 млн. клеток)
Легкие 8,96—0,9
Сердце 17,8—0,96
Почки 8,7—0,4
легкие—нижняя доля правого легкого; сердце—стенка левого желудочка; почки — корковый слой верхней половины левой почки. Во всех случаях содержание аскорбиновой кислоты пересчитывали на 10 млн. клеток.
Результаты исследования представлены в таблице. Как видно, наибольшее количество аскорбиновой кислоты содержится в клетках ткани сердца. Клетки легких и почек содержат приблизительно одинаковое количество аскорбиновой кислоты, причем в легких отмечается незначительное преобладание его.
Таким образом, предложенный метод определения аскорбиновой кислоты позволяет объективно судить о функциональном состоянии интересующих исследователя клеточных групп. Метод достаточно чувствительный и тонкий, не требует сложного оборудования и дефицитных реактивов, вполне применим в условиях любой лаборатории.
ЛИТЕРАТУРА. Гольдштейн Б. И. и др. Биохимия, 1950, в. 5, с. 414.— Пушкина H.H. Биохимические методы исследования. М., 1963. — С h а у е n J.. Int. Rev. Cytol., 1953, v. 2, p. 78.
Поступила 5/VI 19 r.
УДК 615.9 57.031.15
Н. 77. Яхимсвич, Ю. Д. Пальгуев
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ УСТАНОВКА ДЛЯ ИНГАЛЯЦИОННОЙ ЗАТРАВКИ ЖИВОТНЫХ АЭРОЗОЛЯМИ КОНДЕНСАЦИИ
Свердловский научно-исследовательский институт гигиены труда и профзаболеваний
Создавая экспериментальную установку для ингаляционной затравки животных аэрозолями конденсации селена и теллура, мы взяли за основу уже известную схему подобной установки, успешно примененной М. С. Са-диловой и Л. М. Петиным в эксперименте с фтористыми соединениями. Поскольку мы стремились как можно более приблизить условия эксперимента к натурным, для затравки были избраны аэрозоли конденсации двуокисей селена и теллура, которые чаще всего поступают в среду обитания человека при выполнении технологических процессов на предприятиях цветной металлургии, целлюлозно-бумажной промышленности и других производствах.
Для получения возгона использовали трубчатые печи Марша, обогреваемые 4 силитовыми стержнями (по 2 на каждую печь). Электроснабжение печей осуществляли через масляный трансформатор РНО-250-10. Трансформатор включали магнитными пускателями ПМЕ-222. Температуру измеряли и регулировали электронными автоматическими самопишущими потенциометрами КСП-4 и КСП2-005. Датчиком изменения температуры в печах служили термопары «хромель — капель». В силитовые печи вставляли трубки из молибденового стекла, куда помещали керамические «лодочки» с 5еОг и ТеОг. Через трубки пропускали чистый воздух, образовавшийся аэрозоль направляли в холодильник для охлаждения до комнатной температуры. Отсюда аэрозоль поступал в смесители с чистым воздухом, а затем — в затравочные камеры. Количество воздуха, проходящего через печи, и количество чистого воздуха, подаваемого в смесители, измеряли с помощью реометров. В печах для возгона Бе02 поддерживали температуру 220° и для возгона Те02 — 500°. Воздух подавали компрессорами СО-7А, установленными за пределами помещения для камер. Для бесперебойной подачи воздуха использовали 2 одинаковых компрессора, которые были сблокированы так, что по выходе из строя одного из них автоматически включался второй.
