CC BY
32
ключевая роль популяций в1-лимфоцитов в иммунном ответе у больных раком желудка
С.в. чулкова1,2, Е.н. Шолохова1, н.в. Грищенко1, д.А. рябчиков1, л.Ю. Гривцова3, и.С. Базин1, н.н. тупицын1
ФГБУ«НМИЦонкологии им. Н.Н. Блохина» Минздрава России; Россия, 115478Москва, Каширское шоссе, 24; 2ФГБОУВО «РНИМУ им. Н.И. Пирогова» Минздрава России; Россия,117997Москва, ул. Островитянова, 1; 3МРНЦим. А.Ф. Цыба — филиал ФГБУ «НМИЦ радиологии» Минздрава России; Россия, 249031 Калужская область,
Обнинск, ул. Маршала Жукова, 10
Введение. В1-лимфоциты — субпопуляция В-клеток, на долю которой в селезенке приходится 5 % от общего числа В-клеток. В1-лимфоциты секретируют преимущественно IgM, который играет важную роль в индукции апоптоза опухолевых клеток. Спленэктомия с целью адекватной лимфодиссекции при раке желудка вызывает выраженные и длительные иммунологические нарушения. Это в первую очередь затрагивает субпопуляцию В1а-лимфоцитов, которая обеспечивает тимуснезависимый иммунный ответ.
Цель исследования — изучить особенности В-клеточного звена иммунитета у больных раком желудка. Материалы и методы. Проанализирован субпопуляционный состав В-лимфоцитов периферической крови больных раком желудка, подвергшихся хирургическому лечению методом проточной цитометрии (Facs Can, программа Lysys II и FacsCanto II, программа Facs Diva). Клетки окрашивались одномоментно тремя моноклональными антителами, меченными различными флуорохромами.
Результаты. Полученные данные демонстрируют нарушение состава субпопуляций В-клеток. В группе больных со стандартной D2-лимфодиссекцией и спленэктомией на дооперационном этапе и спустя 3 мес после операции выявлена достоверная корреляция между относительным количеством В-лимфоцитов (p = 0,018), CD5+В-лимфоцитов (p = 0,012) и количеством CD19+CD38+-клеток (p = 0,035). Кроме того, после хирургического лечения значительно возрос процент CD5+В-лимфоци-тов — с 12,9 до 21,8 %, тогда как суммарное количество CD19+ лимфоцитов и CD19+CD21+ клеток снижалось. Заключение. У больных опытной группы может наблюдаться снижение антителопродукции, ослабление как общего, так и противоопухолевого иммунитета.
Ключевые слова: B-лимфоциты, тимуснезависимые антигены, гуморальный иммунитет, рак желудка, спленэктомия
DOI: 10.17650/1726-9784-2018-17-4-64-70
THE ROLE OF B-1 LYMPHOCYTES IN ANTITuMOR IMMuNITY IN PATIENTS wITH GASTRIC CANCER
S. V. Chulkova1,2, E.N. Sholokhova1, N. V. Grishchenko1, D.A. Ryabchikov1, L. Y. Grivtsova3, I.S. Bazin1, N.N. Tupitsyn1
'N.N. Blokhin National Medical Research Center of Oncology, Ministry of Health of Russia; 24 Kashirskoe Shosse, Moscow 115478, Russia
2Pirogov Russian National Research Medical University; 1 Ostrovitianov St., Moscow 117997, Russia;
3A. Tsyb Medical Radiological Research Center — branch of the National Medical Research Radiological Center of the Ministry of Health of the Russian Federation; 10 Marshal Zhukov St., Obninsk, Kaluga region, 249031, Russia
Introduction. B1-lymphocytes are a subpopulation of B-cells, the proportion of which in the spleen accounts for 5 % of the total number of B-cells. B1-lymphocytes predominantly secrete IgM, which plays an important role in the induction of tumor cell apoptosis. Splenectomy for the purpose of adequate lymph node dissection in gastric cancer causes marked and prolonged immunological disorders. It primarily affects the B1a-lymphocyte subpopulation, which provides a thymus-independent immune response. Objective. To study the features of the B-cell component of immunity in patients with gastric cancer.
Materials and methods. The subpopulation composition of B-lymphocytes of peripheral blood of gastric cancer patients undergoing surgical treatment using flow cytometry (Facs Can, Lysys II and FacsCanto II programs, Facs Diva program) was analyzed. Cells were stained simultaneously with three monoclonal antibodies labeled with different fluorochromes.
Results. The data obtained demonstrate a violation of the composition of B-cell subpopulations. In the group of patients with standard D2 lymph node dissection and splenectomy at the preoperative stage and three months after surgery, a significant correlation was found between the relative number of B lymphocytes (p = 0.018), CD5 + B lymphocytes (p = 0.012) and the number of CD19 + CD38 + cells (p = 0.035). In addition, after surgical treatment, the percentage of CD5 + B-lymphocytes increased significantly from 12.9 to 21.8 %, while the total number of CD19 + lymphocytes and CD19 + CD21 + cells decreased.
Контакты: Светлана Васильевна Чулкова chulkova@mail.ru
Conclusion. In patients of the experimental group, a decrease in antibody production, weakening of both general and antitumor immunity can be observed.
Key words: B-lymphocytes, thymus-independent antigens, humoral immunity, gastric cancer, splenectomy
Введение
Селезенка является одним из важнейших периферических лимфоидных органов, обеспечивающих гуморальный иммунитет. В селезенке происходят сложные процессы селекции и активации В-клеток. Незрелые В-клетки поступают из костного мозга во вторичные лимфоидные органы (селезенку, лимфатические узлы, пейеровы бляшки кишечника), где происходят их дальнейшее созревание, презентация антигена, пролиферация и окончательная дифферен-цировка [1]. В результате созревания на их поверхности появляются молекулы IgD, CD21, CD22 (табл. 1). Антигены CD19, CD81 (иное название ТАРА-1) и CD21 ассоциированы в комплекс, называемый В-клеточ-ным корецептором. Связывание антигена с корецеп-тором усиливает активационный сигнал, передаваемый через BCR [2, 3]. Процесс активации В-клеток может осуществляться в ответ на тимусзависимые антигены или без участия Т-лимфоцита [4]. Большинство зрелых В-клеток располагается в пределах лимфоидных фолликулов селезенки и лимфатических узлов, где они сталкиваются и реагируют на Т-зави-симые антигены, связанные с CD23+ фолликулярными дендритными клетками, пролиферируют, либо дифференцируются в плазматические клетки. Направленность дифференцировки регулируется в апикальной зоне зародышевых центров [5]. Незрелые В-клетки реагируют на Т-клеточные независимые антигены 1-го типа, которые вызывают быстрый ответ антителопродукции.
При контакте В-лимфоцитов с тимусзависимыми антигенами происходит связывание специфического иммуноглобулинового рецептора В-клеток. Затем в фолликулах селезенки и лимфатических узлов запускается дифференцировка наивных В-лимфоцитов в ходе первичных иммунных ответов. При отсутствии антигенной стимуляции В-лимфоциты или мигрируют в лимфатические сосуды и продолжают циркулировать, или погибают [6].
При осуществлении вторичных иммунных ответов на тимусзависимые антигены отмечатся выраженная В-клеточная пролиферация и дифференцировка В-лимфоцитов в плазматические клетки, что происходит в пределах наружной зоны периарте-риолярных лимфоидных муфт [7, 8].
Селезенка является основным местом синтеза ^М [9—11]. Антитела класса М появляются на ранних стадиях фило- и онтогенеза, продуцируются активированными В-лимфоцитами в ходе первичных
иммунных ответов, осуществляемых в периферических лимфоидных органах [12]. Обладают высокими агглютинирующими свойствами и опсонизирую-щим эффектом. Данный иммуноглобулин представляет собой полимер из 5 мономеров, связанных друг с другом ковалентными связями, известными как дисульфидные связи, и составляют около 10 % всех иммуноглобулинов. Время полужизни ^М не более 5 дней. Примерно половина сывороточного ^М се-кретируется В1 летками. Антитела класса М играют ключевую роль в индукции апоптоза опухолевых клеток [13—15].
таблица 1. Молекулы клеточной поверхности, экспрессируемые В-клетками
название оригинальное имя Экспрессия на клетках
CD19 B4 Пан-В-клеточный антиген, FDCs
CD20 B1 Зрелые В-клетки
CD21 B2, HB-5 Зрелые В-клетки, FDCs
CD22 BL-CAM, Lyb-8 Зрелые В-клетки
CD23 FceRII Активированные В-клетки, FDCs, s
CD24 BA-1, HB6 Пан-В-клеточный антиген, грану-лоциты, эпителиальные клетки
CD40 Bp50 В-клетки, эпителиальные клетки, FDCs
CD72 Lyb-2 Пан-В-клеточный антиген
CD79a, b Iga, в Поверхностный В-клеток
CD81 B2 Зрелые В-клетки
Объем хирургического вмешательства при раке желудка при выполнении гастрэктомии или проксимальной резекции включает проведение D2-лимфодиссекции, что подразумевает спленэктомию, которая выполняется для полного удаления лимфатических узлов ворот селезенки [16]. Многочисленные данные литературы сообщают о росте частоты послеоперационных осложнений и летальности в результате спленэктомий [17—21]. Подобные исходы являются результатом дисфункции различных ком-партментов иммунной системы, в числе которых нарушения пропорции популяций В-лимфоцитов и презентации макрофагами чужеродных антигенов Т- и В-лимфоцитам, снижения уровня секреции
66 Оригинальные статьи
иммуноглобулинов [22—24]. Но в первую очередь изменения затрагивают В-клеточный иммунный ответ, в том числе на тимуснезависимые антигены 2-го типа, который обеспечивается особой субпопуляцией В1а-лимфоцитов [25].
Популяция В1-лимфоцитов относится к древней ветви антителопродуцирующих клеток в филогенезе. Впервые популяция В1-лимфоцитов описана в 1983 г. Ли Херценбергом как CD5+-популяция, которая отличается от обычных B (В-2)-клеток фенотипом, анатомической локализацией, способностью к самовосстановлению и производством естественных антител. В-1-популяция лимфоцитов включает 2 субпопуляции: В1а и В1Ь [26, 27].
Цель исследования — оценить особенности В-кле-точного звена у больных раком желудка.
Материалы и методы
Все больные раком желудка, принимавшие участие в исследовании, были разделены на 2 группы: 1-я группа больных получила хирургическое лечение в объеме гастрэктомии, D2-лимфодиссекции с сохранением селезенки; во 2-й группе больные прооперированы в объеме гастрэктомии согласно стандартам D2-лимфодиссекции, которая сопровождалась спленэктомией. Исследование субпопуляций В-лим-фоцитов проводилось на дооперационном этапе и спустя 3 мес после хирургического вмешательства.
Всего в исследовании приняли участие 50 больных. Средний возраст больных составил 59 лет. В нашем исследовании преобладали женщины. У 16 больных установлена I стадия, у 12 больных — II стадия, у 18 больных — III стадия, у 4 больных — IV стадия. Иммуно-фенотипирование популяций В-лимфоцитов периферической крови до операции выполнено у 50 больных, спустя 3 мес после хирургического пособия — у 29 больных.
Субпопуляции В-лимфоцитов периферической крови исследовались в реакции прямой иммунофлу-оресценции с использованием тройной флуоресцентной метки. В работе использованы моноклональные антитела, меченные следующими флуорохромами: FITC — флуоресцеин, РЕ — фикоэритрин, PerCR — пиридининхлорофил, двойной (тандемный) краситель, сочетающий фикоэритрин с цианином 5 (PE-cy5). Проведен анализ экспрессии мембранных антигенов: CD20, CD21, CD23, CD38, HLA-DR, CD71, CD10, CD95, CD25, CD5, CD56, легких цепей иммуноглобулинов IgG-X и IgG-к (табл. 2).
Сбор данных проводился на проточных цитоме-трах (Facs Can, программа Lysys II и FacsCanto II, программа Facs Diva), анализ данных — с использованием приложения WinMDI 2.8 и FCS 3.0. Экспрессия мембранных антигенов оценивалась в гейте CD19+В-клеток. При этом на первом этапе анализа
Рис. 1. По оси абсцисс — экспрессия пан-В-клеточного антигена CD19+; по оси ординат — параметр бокового светорассеяния лазерного луча, отражающий рабочее цитометрическое понятие — гранулярность клетки; а — оценка общего количества CD19+В-клеток в пределах лимфоцитов; б — оценка экспрессии 2 антигенов, ассоциированных с В-клетками в гейте CD19+CD56 и CD21
Таблица 2. Моноклональные антитела и антигены
Антиген Клон антител Изотип антител Производитель Флуорохром
CD19 4G7, HIB19 IgGl-к BD Biosciences PerCP
CD20 2H7 IgGl-к BD Biosciences PE
CD23 LT23 IgGl-к Сорбент, Россия FITC
CD5 L17F12 IgG2a-K BD Biosciences PE
CD21 BL13 IgGl-к BD Biosciences FITC
CD10 HL10a IgG2a-K BD Biosciences PE
CD71 L01.1 IgG2a-K BD Biosciences FITC
CD95 DX2 IgGl-к BD Biosciences PE
CD25 2A3 IgGl-к BD Biosciences FITC
CD56 NCAM 16.2 IgG2a^ BD Biosciences PE
CD3 SK7 IgGl-к BD Biosciences FITC
IgG- X/ IgG-к - - BD Biosciences PE\FITC
цитометрически оценивалось количество CD19+ В-клеток в пределах лимфоцитов (рис. 1а). Далее, в пределах только В-клеток (гейт CD19+) (рис. 1б) проводился анализ экспрессии 2 антигенов, ассоциированных с В-клетками. В приведенных образцах это оценка антигенов CD56 одновременно с CD21 и CD20 одновременно с CD23 (см. рис. 1б). В 42 образцах периферической крови до операции и 23 после операции на гематологическом анализаторе Micros 60 была подсчитана гемограмма, что позволило оценить абсолютное количество В-клеток.
Результаты и обсуждение
На дооперационном этапе у 33 % больных раком желудка выявлено снижение относительного количества
В-клеток (менее 5 %) и у 38 % — снижение абсолютного количества. Через 3 мес после операции в 52 % случаев оказалось сниженным относительное количество В-клеток, у 31 % — абсолютное содержание В-лимфоцитов.
Среднее относительное количество В-клеток, так же как и их среднее абсолютное содержание в 1 мкл периферической крови, спустя 3 мес после оперативного вмешательства оказалось незначительно повышенным по сравнению с данными показателями при оценке до операции. Средний процент В-лимфоци-тов крови после операции был несколько ниже, чем до оперативного вмешательства. Вместе с тем данные различия оказались статистически недостоверными (Т-тест при сопоставлении двух независимых переменных). Это может объясняться значительным разбросом анализируемых показателей у больных как до оперативного вмешательства, так и после.
При анализе популяций В-клеток у больных раком желудка отмечено наличие выраженной пропорции В1-лимфоцитов. B1 рассматриваются как ключевые игроки раннего гуморального ответа против патогенов и считаются первичными продуцентами антител в ответ на T-клеточные независимые антигены типа 2 [28]. Специфический тимуснезависимый ответ реализуется двумя субпопуляциями В1-клеток: В1а и В1Ь.
Субпопуляции В1-лимфоцитов схожи между собой, но для субпопуляции В1Ь характерно отсутствие экспрессии CD5 [29]. Субпопуляция В1а-лимфоцитов имеет фенотип œ19+CD21lowCD23-CD5+IgM++. Число CD19+CD5+ В-клеток периферической крови у больных раком желудка в среднем составило 17,7 %.
В1а-лимфоциты — минорная популяция В-клеток, появляющаяся раньше других субпопуляций В-лим-фоцитов, развивающаяся из клеток-предшественников в печени плода. На раннем этапе онтогенеза предшественники В1а-лимфоцитов мигрируют из эмбриональных кроветворных тканей (фетальной печени, оментума) в брюшную и плевральную полости. Важно то, что данная субпопуляция в пределах селезенки получает информацию об антигенах, не принимая участие в рециркуляции. В1Ь-лимфоциты тоже происходят из фетальных предшественников,
мигрирующих в эмбриональном периоде в серозные полости, где и остаются на протяжении всей жизни организма, а пул их у взрослых может частично пополняться за счет костного мозга [30, 31]. В целом пул В1-популяции поддерживается за счет активности клеток-предшественников, пролиферирующих довольно медленно.
В1-клетки характеризуются «активированным фенотипом»: на их поверхности экспрессируются ко-стимулируюшие молекулы CD80 и CD86. Посредством такого фенотипа В1-лимфоциты осуществляют функции антигенпрезентирующих клеток. В1-лим-фоциты осуществляют тимуснезависимый ответ и преимущественно продуцируют антитела класса М [32]. Антитела ^М являются наиболее ранними в иммуногенезе. Многие из антител полиспецифичны, имеют низкую аффинность и таким образом взаимодействуют с несколькими антигенами, включая аутоантигены. В1-клетки постоянно циркулируют между селезенкой и брюшной полостью, не поступая в фолликулы, поскольку не экспрессируют рецептор хемокина. Поэтому процессы «усовершенствования» гуморального иммунного ответа в виде переключения изотипов и повышения сродства к антигенам, не затрагивают или минимально затрагивают В1-клетки [33].
В норме В1а-субпопуляция лимфоцитов составляет не более 10 % от общего количества В-лимфо-цитов периферической крови. Представляет интерес то, что в ходе исследования у 23 % больных раком желудка в периферической крови обнаружено значительное количество В1а-лимфоцитов, превышающих норму в 2 раза. Более того, следует обратить внимание на то, что у 3 больных наблюдалось более 40 % CD19+CD5+-лимфоцитов.
Изучение субпопуляции В1а-лимфоцитов у больных раком желудка, у которых наблюдалось их более 15 %, выявило выраженную экспрессию СD25+-и СD21+-антигенов (различия достоверны), CD38+-клеток при сравнении с группой, где количество В1а-лимфоцитов менее 15 % (табл. 3).
В группе больных, у которых субпопуляция В1а-клеток составила более 25 %, наблюдалось наличие выраженного числа клеток, экспрессирующих CD38+-
таблица 3. Значительные популяции В-клеток в группах больных раком желудка с CD5+-лимфоцитами (1-я группа >15 %) и их нормальным содержанием (2-я группа <15 %)
Популяция 1-я группа 2-я группа число, 1-я группа/ 2-я группа f-критерий Значимость
CD21 85,3 ± 1,6 79,1 ± 1,9 13 / 27 2,436 0,02
CD25 3,9 ± 2,0 0,7 ± 0,1 11 / 26 2,435 0,02
CD38 ^Ш 27,7 ± 6,5 16,1 ± 2,9 16 / 38 1,858 0,07
68 Оригинальные статьи
и CD23+-affmreHbi (достоверная корреляция для В-клеток с экспрессией CD38- и CD23-aHTnreHOB, R = 0,885; p =0,008). Кроме того, наблюдалась высокая вероятность присутствия субпопуляции CD19+CD5+ CD25+ (R = 0,879; p = 0,05). Однако в подавляющем большинстве случаев количество CD19+CD38 + В-клеток оказалось менее 15 %.
Таким образом, у 17,7 % больных раком желудка в периферической крови отмечается присутствие выраженной пропорции особой субпопуляции, обеспечивающей специфический ответ на тимуснезави-симые антигены 2-го типа, который сопровождается преимущественно синтезом IgM — В1а-лимфоцитов. Для популяции В1а-лимфоцитов отмечен «активированный фенотип», что проявляется в экспрессии на их поверхности активационных антигенов CD38 и CD25.
В селезенке происходят сложные процессы диф-ференцировки, селекции В-лимфоцитов, пополнения пула рециркулирующих В-лимфоцитов. Чтобы оценить особенности В-клеточного звена иммунитета у больных раком желудка после гастрэктомии со спленэктомией, проведено исследование субпопуляций В-лимфоцитов в динамике: до и после операции. Иммунофенотипический профиль В-клеток изучен у 14 больных раком желудка со спленосохранной D 2 - л и м ф о д и с с е к ц и е й и гастрэктомией и у 16 больных раком желудка после гастрэктомии и D 2 - л и м -фодиссекции со спленэктомией (рис. 2).
В 1-й группе больных при попарном сопоставлении (Т-критерий для парных переменных) средних величин до операции и после установлена достоверная корреляция между относительным (доля на лимфоциты и на лейкоциты) и абсолютным (клетки в 1 мкл крови) количеством CD19+ В-клеток (р = 0,015; р = 0,04 и р = 0,05 соответственно). Аналогичная корреляция выявлена для популяции CD19+CD21 +-клеток (р = 0,034).
После операции
До операции
24,4
CD19+CD95+ CD19+CD25+ CD19+CD38+ CD19+CD71 + CD19+CD23+ CD19+CD5+ CD19+
рис. 2. Содержание B-лимфоцитов и их субпопуляций у больных со спленосохранной 02-лимфодиссекцией
Сравнительный анализ, проведенный во 2-й группе больных на дооперационном этапе и спустя 3 мес. после операции, выявил достоверную корреляцию между относительным количеством В-лимфоцитов (р = 0,018), CD5+В -лимфоцитов (р = 0,012) и количеством CD19+CD38+-KneTOK (р = 0,035). Показатели В-клеток в группе больных раком желудка после гастрэктомии со стандартной D 2 - л и м ф од и с с е к ц и е й и спленэктомией представлены на рис. 3.
Любопытные данные были получены в ходе изучения субпопуляции В 1а-лимфоцитов в динамике у больных 2-й группы. После оперативного вмешательства отмечено значительное количество клеток, экспресссирующих СБ5+антиген (t = —6,015, sig.<0,0001, = 0,013), а относительное количество CD19+ лимфоцитов снизилось. Вместе с тем выявлено снижение числа CD19+CD21+ В-лимфоцитов с 83,6 до 73,9 % (р = 0,08). Следует отметить, что наибольшее число зрелых CD19+CD21+ В-клеток
После операции
До операции
С019+С095+ С019+С025+ С019+С038+ С019+С071 + С019+С023+ С019+С05+ СР19+
О 5 10 15 20 25 30 35
рис. 3. Показатели В-клеток в группе больных раком желудка после гастрэктомии со стандартной D2-лимфодиссекцией и спленэктомией
в организме аккумулировано в маргинальной зоне селезенки. При сравнении 1-й и 2-й групп больных раком желудка после проведенного оперативного вмешательства спустя 3 мес. обращает на себя внимание выраженное количество CD19+CD5+В-клеток у пациентов 2-й группы, достигающее 21,7 % (p = 0,049), которые являются предшественниками функционально более совершенных, клонально более разнообразных истинных В-клеток.
Заключение
Полученные результаты по изучению особенностей В-клеточного звена иммунитета у больных раком желудка демонстрируют нарушение состава субпопуляций В-лимфоцитов, которое затрагивает в первую очередь В1а-популяцию. На дооперацион-ном этапе большинство В-клеток периферической крови больных раком желудка слабо экспрессирова-ли антиген CD21, который ассоциирован с другими молекулами в комплексе, называемом В-клеточным
корецептором, связывание антигена с которым усиливает активационный сигнал, передаваемый через BCR. Вместе с тем у больных раком желудка отмечены присутствие выраженного количества CD23+ В-клеток и случаи клональных В-клеток. После хирургического вмешательства в группе больных со стандартной D2-лимфодиссекцией и спленэкто-мией значительно возрос процент CD5+ В-лимфо-цитов с 12,9 до 21,8 %, тогда как суммарное количество CD19+-лимфоцитов и CD19+СD21+-клеток снизилось. Учитывая полученные данные и принимая во внимание, что В1-лимфоциты осуществляют преимущественно тимуснезависимый ответ и в основном продуцируют антитела класса М, у больных раком желудка после спленэктомии может наблюдаться иммунодепрессия, сопровождающаяся снижением образования антител, в том числе ^М, играющего важную роль в индукции апоптоза опухолевых клеток, поскольку подавляющий процент сывороточного ^М секретируется В1-клетками.
ЛИТЕРАТУРА / REFERENCES
1. Tupitsyn N.N. The structure and function of the human immune system. 2nd ed. M.: Medicine, 2007. Pp. 46-65.
2. Abbas A.K., Lichtman A.H., Pober J.S. Cellular and molecular Immunology. W.B. Saunders company, 1996. Pp. 28-32.
3. Koiko R., Sunshine D., Benjamin E. Immunology. M.: Academy, 2008. 362 p.
4. Vos Q., Lees A., Wu Z.-Q. et al. B-cell activation by T-cell-independent type 2 antigens as an integral part of the humoral immune response to pathogenic microorganisms. Immunological Reviews 2000;176:154-70.
PMID: 11043775.
DOI: 10.1034/j.1600-065X.2000.00607.x.
5. Chulkova S.V. Stilidi I.S., Glukhov V.G. et al. The spleen as a peripheral immunity organ. Vestnik RONC im. N.N. Blokhina RAMN 2014;25(1):21.
6. Rabons A., Roit A., Delvz P. Basics
of Medical Immunology. M.: Mir, 2006. 320 p.
7. Liu Y.J. Sites of B lymphocyte selection, activation, and tolerance in spleen (review). J Exp Med 1997;186:625-9. PMID: 9312553.
DOI: 10.1084/jem.186.5.625.
8. Mebius R., Kraal G. Structure and function of the spleen. Nature Rev Immunol 2005;5:606-16.
DOI: 10.1038/nri1669.
9. Roit A., Brostoff J., Mail D. Immunology. Per. from English. M.: Mir, 2000. 581 p.
10. Kruetzmann S., Rosado M.M., Weber H. et al. Human immuglobulin M memory B cells controlling Streptococcus pneumoniae infections are generated in the spleen. J Exp Med 2003;197(7):939-45. PMID: 12682112. DOI: 10.1084/jem.20022020.
11. Di Sabatino A., Rosado M., Ciccocioppo R. et al. Depletion
of immunoglobulin M memory B cells is associated with splenic hypofunction in inflammatory bowel disease. Am J Gastroenterol 2005;100 (8):1788-95. PMID: 16086716.
DOI: 10.1111/j.1572-0241.2005.41939.x.
12. Mikhaylenko A.A., Bazanov G.A., Pokrovsky V.I., Konenkov V. I. Prophylactic immunology. M.: Tver; Triad, 2004. 448 p.
13. Brandlein S., Lorenz J., Ruoff N. Human monoclonal IgM antibodies with apoptotic activity isolated from cancer patients. Hum Antibodies 2002;11(4):107-19. PMID: 12775891. DOI: 10.3233/HAB-2002-11401.
14. Varambally S., Bar-Dayan Y., Bayry J. Natural human polyreactive IgM induce apoptosis of lymphoid cell lines and human peripheral blood mononuclear cells. Intern Immunology 2004;16(3):517-24. PMID: 14978025. DOI: 10.1093/intimm/dxh053.
15. Piao X., OzawaT., Hamana H. TRAIL-receptor 1 IgM antibodies strongly induce apoptosis in human cancer cells in vitro and in vivo. Oncoimmunology
2016;5(5):e1131380. PMID: 27467950. DOI: 10.1080/2162402x.2015.1131380.
16. Glukhov E.V., Chulkova C.V., Grivtsova L.Yu. et al. The role
of splenectomy in cancer of the body and proximal stomach. Bulletin of the Russian Scientific Center for X-ray Radiology of the Ministry of Health of Russia 2018; 1. 17 p.
17. Brady M.S., Rogatko A., Dent L.L., Shiu M.H. Effect of splenectomy on morbidity and survival following curative gastrectomy for carcinoma.
Arch Surg 1991;126(3):359-64. PMID: 1998479. DOI: 10.1001/archsurg.1991. 01410270105017.
18. Csendes A., Burdiles P., Rojas J. et al. A prospective randomized study comparing D2 total gastrectomy versus D2 total gastrectomy plus splenectomy in 187 patients with gastric carcinoma. Surgery 2002;131(4):401-7.
PMID: 11935130. DOI: 10.1016/S0003-3944 (02)00835-0.
19. Fatouros M., Roukos D.H., Lorenz M. et al. Impact of spleen preservation
in patients with gastric cancer. Anticancer Res 2005;25(4):3023-30. PMID: 16080561.
20. Griffith J.P., Sue-Ling H.M., Martin I. et al. Preservation of the spleen improves survival after radical surgery for gastric cancer. Gut 1995;36(5):684-90. PMID: 7797117. DOI: 10.1136/ gut.36.5.684.
lO
Оригинальные статьи
21. Okuno K., Tanaka A., Shigeoka H. et al. Suppression of T-cell function in gastric cancer patients after total gastrectomy with splenectomy: implications of splenic autotransplantation. Gastric Cancer 1999;2(1):20-5. PMID: 11957066. DOI: 10.1007/s101200050016.
22. Vorobev A.A., Kiselevsky M.V.,
Titov K.S. et al. The concept of adoptive immunotherapy in patients with gastric cancer after radical surgical treatment. Bulletin of RAMS 2003;6:16-9.
23. Pavlova I.E., Bubnova L.N. Dynamics of indicators of cellular and humoral immunity in patients undergoing splenectomy in the late postoperative period by trauma. Medline Express 2007;3-4:26-31.
24. Tuguz A.R., Gromova E.G., Anisimova N.Yu. et al. Production
of INF-alpha neutrophils, mononuclear cells and splenocytes of cancer patients with postoperative complications. Herald intensive care 2003;3:48-50.
25. Grivtsova L.Yu., Glukhov E.V., Chulkova S.V. et al. Role of splenectomy in peculiarities of peripheral blood B cell sub populations in patients with gastric cancer. J Immunology 2014;5:279-86.
26. Hardy R.R., Hayakawa K. B-cell development pathways. Ann Rev Immunol 2001;19:595-621. PMID: 11244048. DOI: 10.1146/ annurev.immunol.19.1.595.
27. Hayakawa K., Hardy R.R., Parks D.R., Herzenberg L.A. The "Ly-1 B" cell subpopulation in normal immuno-defective, and autoimmune mice. J Exp Med 1983;157:202-18. PMID: 6600267. DOI: 10.1084/jem.157.1.202.
28. Martin F., Kearney J.F. B-cell subsets and the mature preimmune repertoire. Marginal zone and B1 B-cells as part of a "natural immune memory". Immunol Rev 2000;175:70-9. PMID: 10933592.
DOI: 10.1111/j.1600-065x.2000. imr017515.x.
29. Berland R., Wortis H.H. Origins and functions of B-1 cells with notes
on the role of CD5. Annu Rev Immunol 2002;20:253-300. PMID: 11861604. DOI: 10.1155/2013/827254.
30. Montecino-Rodriguez E., Leathers H., Dorshkind K. Identification of a B-1 B cell-specified progenitor. Nat Immunol 2006;7:293-301. PMID: 16429139. DOI: 10.1038/ni1301.
31. Dorshkind K., Montecino-Rodriguez E. Fetal B-cell lymphopoiesis and
the emergence of B-1-cell potential. Nat Rev Immunol 2007;7:213-9. PMID: 17318232.
DOI: 10.1371/journal.pntd.0001173.
32. LeBien T. W., Tedder T.F. B lymphocytes: how they develop and function. Blood 2008;112:1570-80. PMID: 18725575. DOI: 10.1182/ blood-2008-02-078071.
33. Burmester G.-R., Pecutto A. Visual immunology. M.: Binom. 3rd ed. 2014. 320 p.
ORCID авторов/ORCID of authors
С.В. Чулкова/S.V. Chulkova: https://orcid.org/0000-0003-4412-5019 Н.В. Грищенко/N.V. Grishchenko: https://orcid.org/0000-0002-7515-8182 Н.Н. Тупицын/N.N. Tupitsyn: https://orcid.org/0000-0003-3966-128X
конфликт интересов. Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interest.
