CC BY
36
Вестник Челябинского государственного университета. 2013. № 7 (298).
Биология. Вып. 2. С. 38-41.
А. Х. Хасанов, Р. А. Давлетшин, Г. К. Давлетшина, Р. А. Нурмухаметова, В. Т. Гайсина, З. С. Кузьмина, Р. М. Садртдинова, А. X. Якупова
КЛИНИКО-ИММУНОГЕНЕТИЧЕСКИЕ ОСОБЕННОСТИ У БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКОЙ ОБСТРУКТИВНОЙ БОЛЕЗНЬЮ ЛЁГКИХ С СОПУТСТВУЮЩИМ РЕВМАТОИДНЫМ АРТРИТОМ
Обследовано 65 больных с хронической обструктивной болезнью лёгких (ХОБЛ) и 37 больных ревматоидным артритом (РА). Установлено, что для коморбидного течения ХОБЛ и РА характерно нарушение иммунорегуляции, что проявляется в снижении количества CD3-, CD8-, CD16-клеток.
По мере прогрессирования дыхательной недостаточности ХОБЛ и активности РА наблюдалось увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови. Высокая активность гуморального иммунитета выявлена при прогрессировании воспалительного процесса в лёгких и суставах, ассоциированная с наличием ^А-А3, ^А-В5, ^А-В35 и тА^В1*01, тА^В1*17, тА^В1*04.
Ключевые слова: коморбидное течение ХОБЛ и РА, генетический полиморфизм, нарушение иммунорегуляции.
Введение. По данным ВОЗ, в настоящее время около 250 миллионов человек в мире страдают хронической обструктивной болезнью лёгких (ХОБЛ). По общемировой статистике, это второе по распространённости неинфекционное заболевание. Заболеваемость ХОБЛ прогрессивно растёт и является единственной причиной смерти с увеличением количества регистрируемых случаев [1; 2]. ХОБЛ, по прогнозам ВОЗ, станет третьей наиболее распространённой причиной смерти после инсульта и инфаркта миокарда к 2030 г. [3]. Наиболее часто встречающимися коморбидными состояниями при ХОБЛ являются артериальная гипертензия (АГ) (28 %), сахарный диабет (14 %), ишемическая болезнь сердца (10 %) [2; 3].
Вместе с тем недостаточно изучен вопрос ко-морбидности ХОБЛ с аутоиммунными ревматологическими заболеваниями, в частности с ревматоидным артритом (РА). По современным представлениям, в основе развития и прогрессирования РА лежит генерализованный дефект им-мунорегуляторных механизмов, определяющих развитие клеточных и гуморальных иммунных реакций. Это приводит к хроническому прогрессирующему воспалению, затрагивающему различные органы и системы организма человека
[4-6].
Цель. Изучение клинических особенностей состояния иммунной системы у пациентов с ко-морбидным течением хронической обструктивной болезни лёгких и ревматоидного артрита. Определение характера иммунологических нарушений в зависимости от распределения НЬА-антигенов I класса и аллельных вариантов гена DRB1 при ХОБЛ с сопутствующим РА.
Материалы и методы. Обследовано 65 больных ХОБЛ в возрасте от 40 до 87 лет, из них 35 женщин и 30 мужчин. Все больные курили, индекс курящих составлял больше 10 пачек в год. Обследуемые с респираторными симптомами проходили углублённое клинико-функциональное тестирование. Для исследования функции внешнего дыхания (ФВД) использовался спирограф SpiroLab II (Италия). Оценку параметров объёма форсированного выдоха за 1-ю секунду (ОФВ1), форсированной жизненной ёмкости лёгких (ФЖЕЛ) и отношения ОФВ1 / ФЖЕЛ проводили после теста с бронхолитиком (ДАИ саль-бутамол 400 мкг). Диагноз ХОБЛ устанавливался на основании рекомендаций программы «Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики ХОБЛ» [7].
Важный фактор, влияющий на течение и тяжесть ХОБЛ,— это системные коморбидные состояния [8]. По результатам настоящего исследования все пациенты с ХОБЛ имели различные сопутствующие заболевания, в том числе РА 37 (56,9 %) больных. Среди них женщин было 31, мужчин — 6; у всех больных РА выявлен суставной синдром. Наиболее типичным началом болезни было симметричное поражение пястно-фаланговых, лучезапястных, проксимальных межфаланговых, коленных, плюстне-фаланговых суставов. Системный вариант РА диагносцирован у 15 больных, суставной — у 22. С умеренной степенью активности наблюдались 23 человека, с минимальной — 14. При постановке диагноза руководствовались критериями Американской коллегии ревматологов (1987), в соответствии с рабочей классификацией РА (1979).
Исследование аллельного полиморфизма гена DRB1 комплекса HLA проводили методом ДНК-типирования. Генотипирование локуса ОЯВ1 проводили методом амплификации участков этих генов с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР). HLA фенотипирование локусов А и В определяли с помощью стандартного двухступенчатого комплементзависимого лимфоцитотоксического теста.
Комплекс исследований включал также определение основных иммунологических показателей. Методом проточной цитометрии типи-ровали субпопуляции лимфоцитов (СЭ3, СВ4, СЭ8, СЭ16, СЭ22). О функциональной активности нейтрофилов судили по НСТ-тесту, проценту фагоцитирующих клеток. Содержание иммуноглобулинов класса М, G, А в сыворотке крови определяли методом МапсЫш. Циркулирующие иммунокомплексы определяли путём осаждения белков в сыворотке крови полиэтиленгликолем. Статистическую обработку проводили с использованием критерия Стьюдента.
Результаты и обсуждение. Результаты изучения частоты встречаемости ХОБЛ с учётом возраста и пола представлены в табл. 1. Отмечено возрастание частоты распространённости ХОБЛ
с ИК >10 пачка/год как у мужчин, так и у женщин с увеличением возраста пациентов. Так, максимальное количество курящих больных ХОБЛ определялось в группе лиц 60 лет и более (50,76 %, р < 0,001); до 49 лет распространённость ХОБЛ была минимальной — 18,46 %.
Кроме того, чётко не прослеживается влияние пола на частоту ХОБЛ. По нашим данным, ХОБЛ в мужской группе определялась несколько чаще, чем в женской (53,84 % против 46,16 %). После бронходилатационного теста у лиц с респираторными симптомами впервые выявленный диагноз ХОБЛ имели 43 пациента (66,15 %). При этом максимальное количество пациентов обоего пола с впервые установленной ХОБЛ имели 1-11 стадию заболевания.
Согласно данным табл. 2, лёгкая степень тяжести (I стадия) ХОБЛ определялась у 36,93 % пациентов, II стадия — у 29,23 %, III — у 23 %, и лишь 10,76 % обследованных имели IV стадию заболевания. В нашем исследовании ХОБЛ у пациентов в возрасте 40-49 лет была зарегистрирована в 13,8 % случаев; 50-59 лет — в 18,5 %; > 60 лет — в 67,7 % случаев. Представленные результаты свидетельствуют о нарастании числа больных ХОБЛ в старших возрастных группах.
Таблица 1
Распространённость ХОБЛ с учётом пола и возраста с ИК > 10 пачка/год
Возраст, лет Женщины Мужчины Всего
с ХОБЛ, п (%) с ХОБЛ, п (%) с ХОБЛ, п (%)
40-49 7 (10,76) 5 (7,69) 12 (18,47)
50-59 11 (16,92) 9 (13,84) 20 (30,77)
> 60 17 (26,15) 16 (24,61) 33 (50,76)
Всего 35 (53,84) 30 (46,16) 65 (100)
Таблица 2
Распределение больных ХОБЛ по возрасту, полу с учётом стадии болезни
Пациенты ХОБЛ Стадия болезни^\ 40-49 лет 50-59 лет > 60 лет
М Ж М Ж М Ж Всего, п (%)
I 2 1 1 3 10 7 24 (36,93)
II 3 0 1 1 8 6 19 (29,23)
III 1 1 3 1 7 2 15 (23,08)
IV 1 0 2 0 4 0 7 (10,76)
Всего, п (%) 9 (13,85) 12 (18,46) 44 (67,69) 65 (100)
Среди общего числа больных с I стадией ХОБЛ коморбидные состояния установлены у 9,2 % пациентов, со II стадией — у 13,8 %. При тяжёлой и крайне тяжёлой степени тяжести ХОБЛ сопутствующие заболевания имели 33,8 и 43,0 % соответственно.
Комплексная оценка иммунной системы у пациентов с коморбидным течением хронической обструктивной болезни лёгких и РА позволила определить дефицит общего пула Т-клеточного иммунитета (табл. 3), а также субпопуляций СЭ3, СЭ8 и значительную депрессию СЭ16 (р < 0,001; р < 0,002). Указанные тенденции прогрессировали при снижении лёгочной функции больных ХОБЛ и генерализации системных проявлений РА.
Исследование В-лимфоцитов и гуморального иммунитета выявило их активацию при гиперинфляции лёгких у больных ХОБЛ на основании КТ лёгких и манифестации системных проявлений РА. По мере прогрессирования дыхательной недостаточности ХОБЛ и активности РА наблюдалось увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови (р < 0,005; р < 0,001). Вместе с тем при усугублении костно-хрящевой деструкции при РА прослеживается последовательный рост активности CD22.
Анализ полиморфизма HLA антигенов I класса среди больных ХОБЛ с сопутствующим РА показал высокий процент встречаемости ^А-А2, ^А-А10, ^А-В5, ^А-В7, ^А-В35. Проведение сравнительной характеристики меж-
ду показателями клеточного иммунитета и характером распределения указанных HLA антигенов I класса выявило относительный дефицит CD3-клеток преимущественно у носителей ИЬЛ-В35 (р < 0,01), НЬЛ-ЛШ (р < 0,01), НЬЛ-В7 (р < 0,03). Дефицит CD8-клеток преобладал среди носителей НЬЛ-В5 (р < 0,01), НЬЛ-А2 (р < 0,01), ^Л-В7 (р < 0,01), ^Л-А10 (р < 0,025). Недостаточность CD16-клеток была приблизительно одинакова у больных РА с часто встречающимися HLA антигенами I класса.
Распределение продуктов генов комплекса HLA у больных ХОБЛ в сочетании с РА установило, что наиболее часто встречающимися аллелями DRB1 оказались: HLA-DRB1*17, ИЬЛ-DRB1*04, тЛ^В1*01, НЬЛ^В1*13, ^Л-DRB1*15, HLЛ-DRB1*11. Высокая ассоциативная связь дефицита СЭ3-клеточного иммунитета выявлена с HLA-DRB1*04 (р < 0,01), значительный дефицит CD8 и CD16 — с HLA-DRB1*01 (р < 0,01).
Исследование гуморального иммунитета показало высокую активность при прогрессировании воспалительного процесса в лёгких и суставах, ассоциированную с наличием ^Л-Л3, ^Л^5, ^Л^35 и HLA-DRB1*01, HLA-DRB1*17, ^Л-DRB1*04.
Исследование неспецифической резистентности иммунной системы показало метаболическую недостаточность нейтрофилов преимущественно у больных с фенотипом HLЛ-B5, ^Л-А10, ^Л-В7 (р < 0,01) и HLA-DRB1*04.
Таблица 3
Показатели иммунной системы при ХОБЛ с сопутствующим РА
Показатель Контроль (п = 28) ХОБЛ (п = 65) РА (п = 37)
CD3, % 66,96±1,80 65,25±2,08 (р < 0,02) 64,5±0,09 (р < 0,01)
CD4, % 35,56±1,30 37,81±1,90 (р < 0,025) 38,32±0,09 (р < 0,05)
CD8, % 26,92±1,40 23,80±1,07 (р < 0,03) 19,64±0,04 (р < 0,05)
CD16, % 13,0±0,2 9,60±0,09 (р < 0,002) 7,96±0,02 (р < 0,001)
CD22, % 12,69±0,04 13,10±0,09 (р < 0,04) 14,08±0,05 (р < 0,01)
ФЧ, % 58,60±1,02 60,61±3,50 (р < 0,05) 45,62±0,19 (р < 0,01)
НСТ, % 13,6±1,2 12,4±3,6 (р < 0,025) 10,68±0,04 (р < 0,05)
НСТ, % стимулир. 26,4±0,18 25,63±0,17 (р < 0,02) 25,31±0,09 (р < 0,05)
Активность компл. СН50 67,28±2,4 65,2±2,7 (р < 0,002) 53,57±0,14 (р < 0,001)
ЦИК 44,16±0,19 48,32±2,03 (р < 0,005) 97,81±0,40 (р < 0,001)
Активность комплемента также была снижена по мере прогрессирования дыхательной недостаточности больных ХОБЛ и высокой воспалительной активности ревматоидного процесса, ассоциированной с носительством HLA-B7, HLA-B5, HLA-A10, HLA-A9, HLA-A2 (р < 0,01) и HLA-DRB1*01 (р < 0,01).
Выводы и заключение. Установлено, что для коморбидного течения ХОБЛ и РА характерно нарушение иммунорегуляции, что проявляется в снижении количества CD3-, CD8-, CD16-клеток. По мере прогрессирования дыхательной недостаточности ХОБЛ и активности РА наблюдалось увеличение концентрации ЦИК в сыворотке крови. Анализ полиморфизма HLA антигенов I и II класса среди больных ХОБЛ с сопутствующим РА показал высокий процент встречаемости HLA-A2, HLA-A10, HLA-B5, HLA-B7, HLA-B35, наиболее часто встречающимися аллелями DRB1 оказались HLA-DRB1*17, HLA-DRB1*04, HLA-DRB1*01, HLA-DRB1*13, HLA-DRB1*15, HLA-DRB1*11.
Дефицит CD8-клеток преобладал среди носителей HLA-B5 (р < 0,01), HLA-А2 (р < 0,01), HLA-B7 (р < 0,01), HLA-АШ (р < 0,025). Недостаточность CD16-клеток была приблизительно одинакова у больных РА с часто встречающимися HLA антигенами I класса, значительный дефицит CD8 и CD16 — с HLA-DRB1*01 (p < 0,01). Высокая активность гуморального иммунитета выявлена при прогрессировании воспалительного процесса в лёгких и суставах, ассоциированная с наличием HLA-A3, HLA-B5, HLA-B35 и HLA-DRB1*01, HLA-DRB1*17, HLA-DRB1*04.
Список литературы
1. Hurd, S. S. COPD: good lung health is the key. Comment / S. S. Hurd, C. Lenfant // Lancet. 2005. № 366. Р i832-i834.
2. WHO Key Facts COPD [Электронный ресурс]. URL: http: //www. who.int /mediacentre /factsheets/ fs3i5/en/index.html
3. Crisafulli, E. Role of comorbidities in a cohort of patients with COPD undergoing pulmonary reha-bilitation/ E. Crisafulli, S. Costi, F. Luppi [et al.] // Thorax. 2008. № 63. Р 487-492.
4. Emery, P. Early referral recommendation for newly diagnosed rheumatoid arthritis: evidence based development of a clinical guide / P. Emery, F. C. Breedveld, M. Dougados [et al.] // Ann Rheum Dis. 2002. № 6i (4). Р 290-297.
5. Konttinen, Y. T. Current management: Management of rheumatic diseases in the era of biological anti-rheumatic drugs / Y. T. Konttinen, S. Seitsalo, M. Lehto, S. Santavirta // Acta Orthop. 2005. № 76 (5). Р 6i4-6i9.
6. Furst, D. E. Updated consensus statement on biological agents, specifically tumour necrosis factor a (TNFa) blocking agents and interleukin-i receptor antagonist (IL-ira), for the treatment of rheumatic diseases / D. E. Furst, F. C. Breedveld, J. R. Kalden [et al.] // Ann Rheum Dis. 2005. № 64. iv2-ivi4.
7. Чучалин, А. Г. Глобальная стратегия диагностики, лечения и профилактики хронической обструктивной болезни лёгких. Пересмотр 2006 года : пер. с англ. М. : Атмосфера, 2007.
8. Чучалин, А. Г. Хроническая обструктивная болезнь лёгких и сопутствующие заболевания // Пульмонология. 2008. № 2. С. 5-i4.
