CC BY
2
ХИРУРГИЯ и онкология _i том 13 / vol. 13
SURGERY and oncology 4' 2023
DOI: https://doi.org/10.17650/2949-5857-2023-13-4-17-37
Клиническое значение экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) при колоректальном раке
Андрей В. Орехва1, 2, Е.А. Шляхтунов2, В.М. Семенов2, И.В. Жильцов2, А.В. Ерушевич1, Г.М. Шаппо2, Я.Н. Лях1, Алина В. Орехва3
Учреждение здравоохранения «Витебский областной клинический онкологический диспансер»; Республика Беларусь, 210038 Витебск, ул. П. Бровки, 33;
Учреждение образования «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»; Республика Беларусь, 210009 Витебск, пр-кт Фрунзе, 27;
3учреждение здравоохранения «Витебский областной клинический диагностический центр»; Республика Беларусь, 210023 Витебск, 1-я ул. Доватора, 2
Контакты: Андрей Владимирович Орехва dr.orehva@yandex.ru
BY 4.0
Цель исследования - оценка клинической значимости экспрессии мРНК сурвивина (В1ЯС5) в циркулирующих опухолевых клетках (ЦОК) и опухолевом материале при колоректальном раке (КРР).
Материалы и методы. Исследование было организовано по принципу сплошного проспективного нерандомизированного исследования. Определение экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК и опухолевом материале произведено при помощи полимеразной цепной реакции в реальном времени.
Результаты. В исследование включено 130 пациентов: группа исследования - 109 пациентов с КРР, группа наблюдения - 21 пациент с аденомами толстой кишки. Всем пациентам выполнено полное удаление опухоли: радикальные операции - 93,6 %, циторедуктивные - 6,4 %. Выявлен высокий уровень экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в колоректальной аденокарциноме в сравнении с аденомами (рМапп-ШЛ1ку < 0,001) М ± SD (1,678 ± 2,45 и 0,023 ± 0,07). В группах исследования и наблюдения экспрессия мРНК сурвивина (ВШ5) в ЦОК как до операции М ± SD (1,175 ± 1,33 и 0,052 ± 0,11), так и через 3 мес М ± SD (1,015 ± 0,93 и 0,018 ± 0,002) значимо отличалась (рМапп-тЛ1ку < 0,001). При проведении адъювантной химиотерапии отмечалось снижение уровня экспрессии сурвивина в ЦОК (р <0,0001). Через 6 и 9 мес после операции ЦОК сохраняются в кровотоке, несмотря на адъювантную химиотерапию (р = 0,015 и р = 0,012). Гиперэкспрессия сурвивина в ЦОК до операции коррелирует с поражением регионарных лимфатических узлов (р = 0,03, г = 0,21), стадией опухолевого процесса (р = 0,01, г = 0,25), степенью дифференцировки опухоли (р = 0,03, г = 0,21). Гиперэкспрессия сурвивина в ЦОК через 9 мес после операции значимо влияет на безрецидивную выживаемость, отношение рисков (ОР) (95 % доверительный интервал (ДИ): ОР 3,1 (95 % ДИ 1,56-6,08, р = 0,0012) и общую выживаемость пациентов: 0Р 6,8 (95 % ДИ 2,65-17,33, р = 0,0001).
Выводы. Гиперэкспрессия мРНК сурвивина при КРР является негативным фактором прогноза заболевания, напрямую зависит от опухолевого поражения регионарных лимфатических узлов, стадии заболевания, степени дифференцировки опухоли, способствует развитию рецидива заболевания, и может использоваться для диагностики минимальной остаточной болезни и оценки прогноза общей выживаемости пациентов.
Ключевые слова: ВШС5, сурвивин, минимальная остаточная болезнь, циркулирующие опухолевые клетки, коло-ректальный рак
Для цитирования: Орехва Андрей В., Шляхтунов Е.А., Семенов В.М. и др. Клиническое значение экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) при колоректальном раке. Хирургия и онкология 2023;13(4):17-37. Э01: https://doi. огд/10.17650/2949-5857-2023-13-4-17-37
Clinical significance of survivin mRNA expression (BIRC5) in colorectal cancer
Andrey V. Orekhva1'2, E.A. Shlyakhtunov2, V.M. Semenov2, I. V. Zhiltsov2, G.M. Shappo2, A. V. Erushevich, Ya.N. Lyakh1, Alina V. Orekhva3
'Health Institution "Vitebsk Regional Clinical Oncology Dispensary"; 33 P. Brovki St., Vitebsk 210038, Republic of Belarus; Educational Establishment "Vitebsk State Medical University"; 27 Frunze prospekt, Vitebsk 210009, Republic of Belarus; 3Health Institution "Vitebsk Regional Clinical Diagnostic Center"; 2 First Dovatora St., Vitebsk, Republic of Belarus
Contacts: Andrey Vladimirovich Orekhva dr.orehva@yandex.ru
Aim. To evaluate the clinical significance of survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells (CTCs) and tumor material from colorectal cancer (CRC).
Materials and methods. The study was organized according to the principle of a continuous prospective non-randomized study. The expression of survivin (BIRC5) mRNA in CTCs and tumor material was determined using RT-PCR. Results. The study included 130 patients (study group - 109 patients with colorectal cancer and observation group -21 patients with colon adenomas). All patients underwent complete tumor removal (radical surgery - 93.6 %), cytore-ductive - 6.4 %).
A high level of survivin (BIRC5) mRNA expression was detected in colorectal adenocarcinoma in comparison with adenomas (pMann-whitney < 0.001) M ± SD (1.678 ± 2.45 and 0.023 ± 0.07). In the study and observation group, the expression of surnvin^mRNA (BIRC5) in CTCs both before surgery M ± SD (1.175 ± 1.33 and 0.052 ± 0.11) and after 3 months M ± SD (1.015 ± 0.93 and 0.018 ± 0.002) was significantly different (pMann-whitney <0.001).
During adjuvant chemotherapy, a decrease in the level of survivin expression in CTCs was observed (p <0.0001) 6 and 9 months after surgery, CTCs remain in the bloodstream even despite adjuvant chemotherapy (p = 0.015 and p = 0.012). Overexpression of survivin in CTCs before surgery correlates with damage to regional lymph nodes (p = 0.03, r = 0.21), stage of the tumor process (p = 0.01, r = 0.25), degree of tumor differentiation (p = 0.03, r = 0.21). Overexpression of survivin in CTCs 9 months after surgery significantly affects relapse-free survival HR (95 % CI HR) = 3.1 (95 % CI 1.56-6,08, p = 0.0012) and overall survival of patients HR (95 % CI HR) =6.8 (95 % CI 2.65-17.33, p = 0.0001). Conclusions. Overexpression of survivin mRNA in colorectal cancer is a negative prognosis factor for the disease and directly depends on the tumor involvement of regional lymph nodes, the stage of the disease, degree of tumor differentiation, promoting the development of disease relapse, and can be used to diagnose minimal residual disease (MRD) and assess the prognosis of overall patient survival.
Keywords: BIRC5, survivin, minimal residual disease, circulating tumor cells, colorectal cancer
For citation: Orekhva Andrey V., Shlyakhtunov E.A., Semenov V.M. et al. Clinical significance of survivin mRNA expression (BIRC5) in colorectal cancer. Khirurgiya i onkologiya = Surgery and Oncology 2023;13(4):17-37. (In Russ.). DOI: https://doi.org/10.17650/2949-5857-2023-13-4-17-37
Введение
В настоящее время хирургическое лечение с последующей адъювантной химиотерапией остается основным методом лечения пациентов с КРР. Однако, несмотря на хирургическое вмешательство, 45 % пациентов в конечном итоге погибают от прогрессирова-ния заболевания; 5-летняя общая выживаемость (ОВ) снижается примерно с 90 % для пациентов с I стадией заболевания до 8 % с IV стадией. Поэтому важно применять новые, усовершенствованные методы выявления минимальной остаточной болезни (МОБ) у пациентов после радикального лечения, что поможет выявить пациентов с ранним рецидивом заболевания и своевременно начать лекарственную терапию [1, 2].
Развитие отдаленных метастазов в значительной степени связано с циркулирующими опухолевыми клетками (ЦОК), которые в ходе эпителиально-мезен-химального перехода гематогенно распространяются по организму. Обнаружение ЦОК и определение их агрессивного фенотипа является возможным решением проблемы в диагностики МОБ при КРР [3].
Метаанализ, проведенный Y Tan и H. Wu, подтвердивший общее прогностическое значение ЦОК при КРР [4], включал 15 исследований с участием 3129 пациентов и выявил высокую смертность (ОВ: отношение рисков (ОР) 2,36, 95 % ДИ 1,87-2,97, p = 0,006), наряду с быстрым прогрессированием заболевания (безрецидивная выживаемость (БРВ): ОР 1,83, 95 % ДИ 1,42-2,36,p <0,00001) для ЦОК-положительных пациентов, независимо от времени взятия крови, методах обнаружения ЦОК и их порогового значения. Авторы
пришли к выводу, что наличие ЦОК является независимым прогностическим фактором плохой выживаемости пациентов с КРР.
Имеющиеся клинические данные наглядно демонстрируют прогностическую значимость ЦОК при КРР. Наибольший диагностический потенциал ЦОК заключается в прямом молекулярном анализе, что позволяет анализировать отдельные ЦОК на наличие клинически значимых мутаций, маркерной экспрессии или профилировать целые геномы на уровне отдельных клеток [5].
Гены-мишени должны быть тщательно отобраны, поскольку они могут слабо экспрессироваться в нормальных клетках крови, что может приводить к лож-ноположительным результатам. Определение агрессивного фенотипа ЦОК при КРР необходимо по причине их низкой концентрации в периферической крови. Частота выявления ЦОК при КРР ниже, чем при раке молочной железы или простаты, и связано это с физиологией кровообращения [6].
В течение последних десятилетий были предприняты обширные усилия по открытию новых тканевых биомаркеров КРР, обладающих высокой чувствительностью и специфичностью. Одним из них является антиапоптотический белок сурвивин, кодируемый геном ВШС5 [7].
Ген сурвивина ВШС5 расположен на длинном плече хромосомы 17, что приводит к кодированию белка из 142 аминокислот. Сурвивин является членом семейства белков-ингибиторов апоптоза (1АР), имеет двойную клеточную функцию как ингибитор
апоптоза и как регулятор митоза. Его антиапоптоти-ческая функция связана с ингибированием активности каспаз путем прямого или косвенного воздействия на каспазы 3, 7, 9. Помимо своей антиапоптотической функции, сурвивин входит в хромосомный пассажирский комплекс, регулируя фазы G2 и М клеточного цикла [8].
Сурвивин экспрессируется во многих эмбриональных тканях, а также в большинстве злокачественных опухолей: легких, толстой кишки, молочной железы, желудка, печени, яичников и простаты. Однако в здоровых дифференцированных тканях он либо не обнаруживается, либо выражен на очень низком уровне, поэтому может использоваться в качестве маркера опухолевой прогрессии [9, 10]. Кроме того, с учетом функциональных свойств антиапоптотических белков сурвивин был предложен в качестве молекулярной мишени для противораковой терапии.
Цель исследования — оценить клиническую значимость экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК и опухолевом материале при КРР.
Материалы и методы
В сплошное проспективное нерандомизированное исследование было включено 130 пациентов: группа исследования — 109 пациентов с резектабельным КРР; группа наблюдения — 21 пациент с аденомами толстой кишки. Все пациенты проходили лечение в УЗ «Витебский областной клинический онкологический диспансер» с 2018-го по 2021 г. Обследование и лечение пациенты проходили согласно приказу Министерства здравоохранения Республики Беларусь от 6 июля 2018 г. № 60 «Алгоритмы диагностики и лечения злокачественных новообразований».
Мониторинг экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК у пациентов, страдающих КРР, проводился каждый триместр в течение 9 мес после оперативного лечения.
Критерием исключения из исследования послужило наличие у пациентов в анамнезе первично-множественных форм злокачественных новообразований. Для участия в исследовании все пациенты предоставили письменное информированное согласие. Пациенты получали лечение в соответствии с имеющимися рекомендациями и с учетом стратификации на группы риска.
После окончания специального лечения пациентов наблюдали в течение 4 лет: ультразвуковое исследование органов брюшной полости и малого таза каждые 3 мес, видеоколоноскопия каждые 6 мес, компьютерная томография органов грудной клетки, брюшной полости и малого таза каждые 6 мес. Другие исследования выполнялись по показаниям (остеосцинтигра-фия, позитронно-эмиссионная томография, магнитно-резонансная томография).
У всех пациентов на этапах лечения забирался образец периферической крови из локтевой вены
утром натощак в объеме 5 мл в стерильную вакуумную пробирку с К2-ЭДТА для последующего обогащения и выделения ЦОК и хранился при 4 °C до исследования. Образцы обрабатывали немедленно или не позднее чем через 4 ч после забора крови.
Обогащение и выделение ЦОК проводилось с использованием технологии экспресс-выделения опухолевых клеток из цельной крови на основе ковалентно-связанных антител для CD326 на немагнитную полимерную матрицу крупных микросфер с последующей изоляцией ЦОК по размеру (S-pluriBead Maxi Reagent Kit and anti-human CD326 S-pluriBead, Германия).
Выделение мРНК из лизированных, обогащенных клеток проводили в соответствии с инструкциями производителя наборов для выделения РНК («СИВитал», Беларусь). Используя технологию обратной транскрипции, синтезировали кДНК, которую использовали в последующем для анализа экспрессии генов в режиме real-time PCR. Для анализа экспрессии гена BIRC5 использовали оригинальные разработанные тест-системы для определения экспрессии Survivin сДНК транскрипции методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в реальном времени (ПЦР-РВ). В качестве ре-ференсного гена во всех случаях использовался ген «домашнего хозяйства» c-ABL.
С учетом уникальности технологии обогащения и выделения ЦОК уже само определение экспрессии референсного гена c-ABL подтверждало наличие в образце клеток, экспрессирующих на своей поверхности EpCAM (CD 326). Качественная оценка и количественная характеристика нормализованной экспрессии гена BIRC5 позволяла идентифицировать ЦОК и оценить их фенотип и функциональную активность.
Исследование экспрессии антиапоптотического белка сурвивина в опухолях толстой кишки было проведено при помощи ПЦР-РВ, была исследована нормализованная экспрессия гена BIRC5, кодирующего белок сурвивин. Образец опухоли толстой кишки, полученный в ходе биопсии или оперативного вмешательства, в объеме до 5 мм3 замораживали, затем измельчали, лизировали. Выделение мРНК из лизированных клеток проводилось в соответствии с инструкциями производителя наборов для выделения РНК («СИВитал», Беларусь). С помощью технологии обратной транскрипции синтезировали кДНК, которую использовали в последующем для анализа экспрессии гена BIRC5 методом ПЦР-РВ.
Все этапы ПЦР-исследования выполнялись на оборудовании Bio Rad, США.
Статистика. Качественные показатели представлены абсолютными и относительными значениями.
При проверке распределения нормальности количественных характеристик по критериям Лилифорса и Шапиро—Уилка выяснилось, что количественные характеристики не подчиняются закону нормального
4'2023
распределения. Количественные характеристики представлены в виде медианы (Me), межквартильного диапазона (LQ /UQ), минимальных и максимальных значений (min, max).
При сравнении показателей до и после операции использовали критерий Уилкоксона, сравнение качественных номинативных данных проводили согласно критерию Пирсона, по качественному бинарному — с использованием двух критериев с поправкой Йейтса и точного критерия Фишера в соответствии с условиями их применимости. ОВ и БРВ определяли методом Каплана—Майера. Критерии различия считались статистически значимыми при уровнер <0,05. Сравнение выживаемости в двух группах проводилось с помощью критерия log-rank, в трех — с помощью критерия Пирсона.
Сравнение групп по отдаленным результатам лечения проводилось также по величинам ОР смерти от любой причины и ОР возврата и прогрессирования заболевания. Рассчитывали ОР, 95 % ДИ и уровень значимости различных рисков. Относительный риск и его 95 % ДИ вычислялись с использованием регрессионной модели пропорциональных рисков Кокса.
Для выявления показателей, влияющих на риск возврата и прогрессирования заболевания, проведен моновариантный анализ по всем отдельным показателям. Показатели, связанные с риском с уровнем статистической значимостир <0,05, включены в качестве предикторов в мультивариантную модель.
Результаты
Средний возраст (M ± SD) пациентов группы исследования составил 64,01 ± 9,26 года, индивидуальные колебания от 32 до 82 лет; средний возраст пациентов группы наблюдения 61,14 ± 11,14 года, индивидуальные колебания от 38 до 82 лет. Пациенты группы исследования имели разную стадию заболевания (I — 22, IIA - 16, IIB - 33, IIIA - 6, IIIB - 18, IIIC - 7, IV -7 пациентов). Всем выполняли полное удаление опухоли: радикальные операции - 102 (93,6 %), циторе-дуктивные - 7 (6,4 %).
Дальнейшая программа лечения и системная химиотерапия проводились с учетом стадии опухолевого процесса, а также с учетом прогрессирования заболевания. Клинико-морфологическая характеристика пациентов группы исследования и наблюдения представлены в табл. 1, 2.
В группе исследования (n = 109) положительная экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в колоректаль-ной аденокарциноме выявлена у 93 пациентов (85,3 %), среднее значение (M ± SD) 1,967 ± 2,55 (min - 0,001; max - 12,039) (рис. 1).
В группе наблюдения (n = 21) положительная экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) была выявлена у 10 (47,6 %) пациентов, среднее значение (M ± SD) 0,049 ± 0,1 (min - 0,001; max - 0,327).
Распределение пациентов и сравнение изучаемых групп в зависимости от клинико-морфологических параметров и экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани представлены в табл. 3, 4.
В результате проведенного анализа сопоставимости групп по наличию экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани установлено, что сравниваемые группы пациентов статистически значимо не отличаются по большинству выбранных параметров: возрасту (p = 0,767), полу (p = 0,241), локализации опухоли (p = 0,840), категории Т (p = 0,526), категории N (p = 0,969), категории М (p = 0,727), стадии заболевания (p = 0,965), категории G (p = 0,219), наличию лимфоваскулярной инвазии (p = 0,834), морфологическому типу опухоли (p = 0,517). Статистически значимые различия в группах выявлены при наличии положительной экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в циркулирующих опухолевых клетках (p = 0,044). При исследовании сопоставимости в группе наблюдения выявлены статистические значимые различия экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в HGD-опухолях в сравнении с LGD (p = 0,004) и по размеру опухоли (p = 0,035).
Результаты экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани и клинико-морфологические параметры пациентов (категория T, N, M, Grade, лимфо-васкулярная инвазия) представлены в табл. 5.
Выявлен достоверно высокий уровень экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани при КРР (pMann - Whitney <0,0001) в сравнении с аденомами. Установлено, что уровень экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) прямо коррелировал с HGD-аденомами толстой кишки и обратно коррелировал с LGD-адено-мами (p = 0,004, r = 0,60).
Также в результате проведенного анализа установлено, что уровень гиперэкспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани >1 отн. ед. прямо коррелировал с глубиной опухолевой инвазии T (р = 0,013, r = 0,26), стадией заболевания (р = 0,001, r = 0,33), гиперэкспрессией мРНК сурвивина (BIRC5) в циркулирующих опухолевых клетках до оперативного лечения (>1 отн. ед.) (р = 0,02, r = 0,30).
В группе исследования положительная экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (перед хирургическим лечением) была выявлена у 83 пациентов (76,1 %), (M ± SD) 1,175 ± 1,33 (min - 0,001; max - 5,401).
В группе наблюдения (n = 21) положительная экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК была выявлена у 6 (28,6 %) пациентов, (M ± SD) 0,052 ± 0,11 (min - 0,001, max - 0,283). Результаты экспрессии представлены в табл. 6.
Выявлен достоверно высокий уровень экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в циркулирующих опухолевых клетках при КРР в сравнении с аденомами ^Mann-Wbitney <0,0001) как до оперативного лечения M ±nSDi(T,175 ± 1,33 и 0,052 ± 0,11 соответственно),
Таблица 1. Клинико-морфологическая характеристика пациентов группы исследования (n = 109)
Table 1. Clinical and morphological characteristics of patients in the study group (n = 109)
Локализация опухоли:
Tumor localization:
Правые отделы ободочной кишки 34 (31,2)
Right colon
Левые отделы ободочной кишки 26 (23,9)
Left colon
Дистальный рак прямой кишки 25 (22,9)
Distal rectal cancer
Проксимальный рак прямой кишки 24 (22)
Proximal rectal cancer
T:
1 9(8,3)
2 16 (14,7)
3 26 (23,8)
4 58 (53,2)
N:
0 72 (66,1)
1 24 (22)
2 13 (11,9)
M:
0 102 (93,6)
1 7(6,4)
Стадия:
Stage:
I 22 (20,2)
IIA 16 (14,7)
IIB 33 (30,3)
IIIA 6 (5,5)
IIIB 18 (16,5)
IIIC 7 (6,4)
IV 7 (6,4)
Морфологическое строение:
Morphological structure:
аденокарцинома 91 (83,5)
adenocarcinoma
муцинозная аденокарцинома 18 (16,5)
mucinous adenocarcinoma
Степень дифференцировки:
Degree of differentiation:
G1 25 (22,9)
G2 67 (61,5)
G3 17 (15,6)
ЛВИ+ 74 (67,9)
LVI+
ЛВИ- 35 (32,1)
LVI-
Размер опухоли, мм:
Tumor size, mm:
<50 38 (34,9)
>50 71 (65,1)
Хроническая кишечная непроходимость:
Chronic intestinal obstruction:
есть 31 (28,4)
there is
нет 78 (71,6)
no
Токсико-анемический синдром: Toxic-anemic syndrome: есть there is нет no 40 (36,7) 69 (63,3)
Хирургическое лечение: Surgery: радикальное radical циторедуктивное cytoreductive 102 (93,6) 7 (6,4)
Лучевая терапия (рак прямой кишки) Radiation therapy (rectal cancer) химиолучевая терапия (РОД 1,8—2 Гр до СОД 46—50,4 + капецитабин) сhemoradiation therapy (SFD 1,8 Gr to TFD 46-50,4 + Capecitabine) предоперационная (РОД 5 Гр до СОД 25 Гр) preoperative (SFD 5 Gr to TFD 25 Gr) 10 (9,2) 12 (11,1)
Химиотерапия: Chemotherapy: CapeOX FOLFOX 34 (31,2) 20 (18,3)
Примечание. ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия; РОД — разовая очаговая доза; СОД — суммарная очаговая доза. Note. LVI — lymphovascular invasion; SFD — single focal dose; TFD -total focal dose.
так и через 3 мес (pMann _ Whitney <0,001) M ± SD (1,015 ± 0,93 и 0,018 ± 0,002 соответственно) (рис. 2).
Распределение пациентов и сравнение изучаемых групп в зависимости от клинико-морфологических параметров пациентов и экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (выявленных до хирургического лечения) представлены в табл. 7, 8.
В результате проведенного анализа наличия экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК до хирургического лечения установлено, что сравниваемые группы пациентов статистически значимо не отличаются: по возрасту (p = 0,499), полу (p = 0,974), локализации опухоли (p = 0,554), категории Т (p = 0,412), категории М (p = 0,194), категории G (p = 0,758), наличии лимфоваскулярной инвазии (p = 0,427), морфологическому типу опухоли (p = 0,901). Статистически значимые различия в группах выявлены при поражении регионарных лимфатических узлов (p = 0,030), стадии заболевания (p = 0,019), наличию положительной экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани (p = 0,044).
Результаты экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК, выявленных перед операцией, и клинико-мор-фологические параметры пациентов группы исследования (категория T, N, M, Grade, лимфоваскулярная инвазия) представлены в табл. 9.
Получены прямые корреляции между наличием у пациентов ЦОК до хирургического лечения и опухолевого поражения регионарных лимфатических узлов
Таблица 2. Клинико-морфологическая характеристика пациентов группы наблюдения (n = 21)
Table 2. Clinical and morphological characteristics of patients in the observation group (n = 21)
Показатель Значения, абс. (%)
Parameter
Дисплазия:
Dysplasia:
low grade 15 (71,4)
high grade 6 (28,6)
Локализация опухоли: Tumor localization: ободочная кишка colon
прямая кишка rectum
Пол: Sex: мужской male женский female
12(57,1) 9 (42,9)
5(23,8) 16 (76,2)
Возраст, лет:
Age, years:
<60 8(38,1)
>60 13 (61,9)
Размер опухоли, мм:
Tumor size, mm:
<50 15 (71,4)
>50 6 (28,6)
Операция:
Operation:
трансанальное удаление опухоли 6 (28,6)
transanal tumor removal
сегментарная резекция ободочной 5 (23,8)
кишки
segmental colon resection
эндоскопическое удаление опухоли 10 (47,6)
endoscopic tumor removal
(р = 0,03, г = 0,21), стадии опухолевого процесса (р = 0,01, г = 0,25), положительной экспрессией мРНК сурвивина (ВШС5) в опухоли (р = 0,04, г = 0,20) и сохраняющимися ЦОК через 3 мес после хирургического лечения (р = 0,00001, г = 0,46). Высокодифференцированные опухоли обратно коррелировали с наличием ЦОК до хирургического лечения (р = 0,03, г = — 0,21).
У прооперированных пациентов с отдаленными метастазами ЦОК сохраняются в кровотоке на протяжении 6 мес наблюдения (р = 0,04). При проведении адъювантной химиотерапии отмечается снижение уровня экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК через 3 и 6 мес (р < 0,0001, г = 0,51 ир = 0,026, г = 0,22 соответственно).
Сравнение групп пациентов по наличию экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения представлено в табл. 10.
Установлено, что сравниваемые группы пациентов статистически значимо не отличаются по выбранным клинико-морфологическим параметрам.
Гиперэкспрессия мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения отражает прогрессирование опухолевого процесса (р = 0,002, г = 0,36), летальный исход заболевания (р = 0,002, г = 0,36), прямо коррелирует со слизеобразующими опухолями (р = 0,015, г = 0,30).
Уровни экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения оказывают значимое влияние на неблагоприятный исход заболевания: при уровне экспрессии до 1 отн. ед. (р = 0,045, г = — 0,25), при уровне экспрессии >2 отн. ед. (р = 0,0001, г = 0,53).
В течение 48 мес наблюдения у 29 (26,6 %) пациентов группы исследования (п = 109) было выявлено прогрессирование заболевания (рис. 3).
Безрецидивная выживаемость пациентов, включенных в исследование, составила 73,4 ± 4,4 % (95 % ДИ
Аденомы / Adenomas
Рак прямой кишки I Rectal cancer
Рак ободочной кишки I Colon cancer
Колоректальный рак I Colorectal cancer
группа / general group
ительная экспрессия / expression
Рис. 1. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани (n = 130), M ± SD Fig. 1. Survivin (BIRC5) mRNA expression in tumor tissue (n = 130), M ± SD
Таблица 3. Экспрессия мРНКсурвивина (BIRC5) в аденокарциноме толстой кишки и клинико-морфологические параметры пациентов (n = 109) Table 3. Survivin (BIRC5) mRNA expression in colon adenocarcinoma and clinical and morphological parameters ofpatients (n = 109)
Экспрессия мРНК сурвивина, абс. (%)
Показатель Survivin mRNA expression, abs. (%)
положительная positive отрицательная p
Пол: Sex: мужской male женский female 40 (36,7) 53 (48,6) 10 (9,8) 6 (5,5) 0,241
Место жительства: Place of residence: город city село village 63 (57,8) 30 (27,5) 11 (10,1) 5(4,6) 0,834
Возраст, лет: Age, years: <60 >60 28 (25,7) 65 (59,6) 6 (5,5) 10 (9,8) 0,767
Нарушение жирового обмена: Fat metabolism disorder: нормальная масса тела normal weight избыточная масса тела overweight 23 (21,1) 70 (64,2) 4(3,7) 12 (11) 0,599
Локализация опухоли: Tumor localization: ободочная кишка colon прямая кишка rectum 52 (47,7) 42 (38,5) 9(8,3) 7(6,4) 0,840
Ободочная кишка: Colon: правая половина right half левая половина left half 30 (50,0) 21 (35,0) 4(6,7) 5 (8,3) 0,482
Прямая кишка: Rectum: дистальный отдел distal section проксимальный отдел proximal section 21 (42,9) 21 (42,9) 4(8,1) 3 (6,1) 1,000
Опухоль: TUM: 1 2 3 4 7 (6,4) 14 (12,8) 21 (19,4) 51 (46,8) 2(1,8) 2(1,8) 5 (4,6) 7 (6,4) 0,526
Лимфатический узел: NOD: 0 1 2 62 (56,9) 21 (19,3) 10 (9,2) 10 (9,2) 3 (2,7) 3 (2,7) 0,969
Метастаз: MTS: нет no есть there is 87 (79,8) 6 (5,5) 15(13,8) 1 (0,9) 0,727
Окончание табл. 3 End of table 3
Экспрессия мРНК сурвивина, абс. (%)
Показатель Survivin mRNA expression, abs. (%)
положительная positive отрицательная negative p
Стадия:
Stage:
I 18 (16,5) 4(3,7) 0,965
II 43 (39,5) 6 (5,5)
III 26 (23,9) 5(4,5)
IV 6 (5,5) 1 (0,9)
Морфологическое строение:
Morphological structure:
аденокарцинома 78 (71,5) 13 (11,9) 0,517
adenocarcinoma
муцинозная аденокарцинома 15 (13,8) 3 (2,8)
mucinous adenocarcinoma
Степень дифференцировки:
Degree of differentiation:
G1 22 (20,2) 3 (2,7) 0,219
G2 58 (53,2) 9 (8,3)
G3 13 (11,9) 4(3,7)
ЛВИ+ 63 (57,8) 11 (10,1)
LVI+ ЛВИ- 30 (27,5) 5(4,6) 0,834
LVI -
Экспрессия мРНК сурвивина в ЦОК:
Survivin mRNA expression in CTCs:
есть there is 74 (67,9) 9 (8,3) 0,044
нет no 19 (17,4) 7 (6,4)
Размер опухоли, мм:
Tumor size, mm: 0,965
<50 60 (55,1) 11 (10,1)
>50 33 (30,2) 5(4,6)
Хроническая кишечная непроходимость:
Chronic intestinal obstruction:
есть there is 27 (24,8) 4(3,7) 0,501
нет no 66 (60,5) 12 (11)
Токсико-анемический синдром:
Toxic-anemic syndrome:
есть there is 34 (31,2) 6 (5,5) 0,835
нет no 59 (54,1) 10 (91,7)
Лучевая терапия (рак прямой кишки):
Radiation therapy (rectal cancer):
химиолучевая терапия 9 (40,9) 1 (4,6) 0,594
chemoradiation therapy
предоперационная 9 (40,9) 3 (13,6)
preoperative
Операции:
Operations:
радикальные 87 (79,8) 15(13,8) 0,727
radical
циторедуктивные 6 (5,5) 1 (0,9)
cytoreductive
Примечание. ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия; ЦОК — циркулирующие опухолевые клетки. Note. LVI — lymphovascular invasion; CTCs — circulating tumor cells.
Таблица 4. Экспрессия мРНКсурвивина (BIRC5) в аденомах толстой кишки и клинико-морфологические параметры пациентов (n = 21) Table 4. Survivin (BIRC5) mRNA expression in colon adenomas and clinical and morphological parameters ofpatients (n = 21)
Экспрессия мРНК сурвивина, абс. (%)
<o
Показатель Survivin mRNA expression, abs. (%) P с a
Parameter положительная positive отрицательная negative о
Пол: Sex: мужской male женский female 2 (9,5) 8(38,1) 3(14,3) 8(38,1) 0,549 аз 3 «о ca e a аз с и и
Возраст, лет: Age, years: <60 >60 2 (9,5) 8 (38,1) 6(28,5) 5 (23,8) 0,119 3 аз е .в с л
Локализация опухоли: Tumor localization: ободочная кишка colon прямая кишка rectum 5(23,8) 5(23,8) 7(33,3) 4 (19,1) 0,425 3 ^ 3 в о
Дисплазия: Dysplasia low grade high grade 4(19,0) 6(28,6) 11 (52,4) 0 (0,0) 0,004
Размер опухоли, мм: Tumor size, mm: <50 >50 6(28,6) 4(19,0) 11 (52,4) 0 (0,0) 0,035
1,175
1,2
КРР / Colorectal cancer
до операции / before surgery через 3 мес / in 3 months
Аденомы / Adenomas
через 6 мес / in 6 months через 9 мес / in 9 months
Рис. 2. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (n = 130), M ± SD Fig. 2. Survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells (n = 130), M ± SD
Печень / Liver
Забрюшинные л/у / Retroperitoneal lymph nodes
Легкие / Lungs
Кости / Bones
Брюшина / Peritoneum
Яичники / Ovaries
Головной мозг/Brain
65,0-81,8). Медиана БРВ составила 38,8 ± 16,2 мес (95 % ДИ 35,8-41,9).
Безрецидивная выживаемость в подгруппах (экспрессия В опухоли <1,0 отн. ед. И гиперэкспрессия Рис. 3. Прогрессирование опухолевого процесса (n = 29) >1,0 отн. ед.) составила 96,0 % (95 % ДИ 87,7-100,0) Fig. 3. Progression ofthe tumorprocess (n = 29)
Таблица 5. Экспрессия мРНКсурвивина (BIRC5) в опухолевой ткани в зависимости от клинико-морфологических параметров пациентов (n = 109) Table 5. Survivin (BIRC5) mRNA expression in tumor tissue depending on clinical and morphological parameters of patients (n = 109)
На. личие экспрес сии Отсутствие экспрессии, абс. (%) Число пациентов в отдельных подгруппах, абс. % положительной
Категория Pre ^■ sence oí express ion экспрессии
Число пациентов, абс. (%) Quantity в отдельных
Category M ± SD min—max Absence expression, abs. (%) Number of patients in separate subgroups, abs. % positive expression in individual subgroups
Т1 Т2 Т3 Т4 7 (7,5) 14 (15,1) 21 (22,6) 51 (54,8) 0,564 ± 1,16 1,829 ± 2,79 1,886 ± 2,58 2,231 ± 2,60 0,001-3,170 0,002-11,020 0,001-9,102 0,001-12,039 2 (12,5) 2 (12,5) 5 (31,2) 7(43,8) 9 16 26 58 77.8 87,5 80,8 87.9
Всего Total 93 (100) 1,967 ± 2,55 0,001-12,039 16 (100) 109 85,3
N0 N1 N2 62 (66,7) 21 (22,6) 10 (10,7) 1,602 ± 1,91 2,629 ± 3,11 2,841 ± 4,15 0,001-9,102 0,002-11,020 0,001-12,039 10 (62,4) 3 (18,8) 3 (18,8) 72 24 13 86,1 87,5 76,9
Всего Total 93 (100) 1,967 ± 2,55 0,001-12,039 16 (100) 109 85,3
M0 M1 87 (93,5) 6 (6,5) 1,937 ± 2,51 2,399 ± 3,25 0,001-12,039 1,003-9,043 15 (93,8) 1 (6,2) 102 7 85,3 85,7
Всего Total 93 (100) 1,967 ± 2,55 0,001-12,039 16 (100) 109 85,3
I II III IV 18 (19,4) 43 (46,2) 26 (27,9) 6 (6,5) 0,810 ± 0,94 1,945 ± 2,14 2,705 ± 3,45 2,399 ± 3,26 0,001-3,170 0,002-9,102 0,001-12,039 0,001-12,039 4 (25) 6(37,5) 5(31,3) 1 (6,2) 22 49 31 7 81,8 87.8 83.9 85,7
Всего Total 93 (100) 1,967 ± 2,55 1,003-9,043 16 (100) 109 85,3
G1 G2 G3 22 (23,7) 58 (62,4) 13 (13,9) 1,314 ± 2,03 2,068 ± 2,56 2,621 ± 3,18 0,001-9,092 0,002-12,039 0,001-9,102 3(18,8) 9(56,2) 4 (25,0) 25 67 17 88,0 86,6 76,5
Всего Total 93 (100) 1,967 ± 2,55 0,001-12,039 16 (100) 109 85,3
Лимфоваскулярная инвазия+ Lymphovascular invasion+ Лимфоваскулярная инвазия— Lymphovascular invasion— 63 (67,7) 30 (32,3) 2,402 ± 2,92 1,053 ± 1,02 0,001-12,039 0,001-3,297 11 (68,8) 5 (31,2) 74 35 85,1 85,7
Всего Total 93 (100) 1,967± 2,55 0,001-12,039 16 (100) 109 85,3
и 67,7 % (95 % ДИ 66,3-84,2) соответственно (р = 0,018) (рис. 4).
Рассчитано ОР прогрессирования у пациентов с гиперэкспрессией >1 отн. ед. мРНК сурвивина (ВШС5) в опухолевой ткани. Он оказался в 4,3 раза выше, чем у пациентов с экспрессией <1 отн. ед. — ОР 4,3 (95 % ДИ 1,08-17,07, р = 0,038).
Безрецидивная выживаемость пациентов с уровнем экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК (через 9 мес после хирургического лечения) до 2 отн. ед. составила 76,2 ± 4,4 % (95 % ДИ 56,3-96,1), в то время
как аналогичная выживаемость пациентов с уровнем экспрессии >2 отн. ед. составила 38,5 ± 5,1 % (95 % ДИ 7,8-69,1, р = 0,0015) (рис. 5).
Рассчитано ОР прогрессирования у пациентов с гиперэкспрессией >2 отн. ед. мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК. Он оказался в 3,1 раза выше, чем у пациентов с экспрессией <2 отн. ед. ОР 3,1 (95 % ДИ 1,56-6,08, р = 0,0012).
Изучено влияние различных факторов на БРВ пациентов группы исследования, проведен моновариантный и многофакторный регрессионный анализ
ХИРУРГИЯ и онкология _i том 13 / vol. 13
SURGERY and oneology I 4' 2023
^ ИИ
-o
Л 95 o
X 85
£
¡ 8И
o
s
Ф
го 75 m s X
ГИИ
-o
■S 9И
7И -
20 30
Время, мес / Time, months
Рис. 4. Сравнение БРВ в группах пациентов по статусу экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухоли (n = 109)
Fig. 4. Comparison of disease-free survival in groups of patients according to the status of survivin (BIRC5) mRNA expression in the tumor (n = 109)
Таблица 6. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (n = 130) Table 6. Survivin (BIRC5) mRNA expression in CTCs (n = 130)
§ 8И
S
a
* 7И
I 60
о s
ш СП
го ЛИ m s X
á 4Я
Х> I-
U
g 3Я is d
<и
СП
87ИИ
к
Экспрессия в опухоли, отн. ед. / Expression in tumor, rel. units -<1 :-1-2 -i- >2
Log-rank test p = 0,0015 _i_I_i_I_
г И
2Я 3Я
Время, мес / Time, months
4Я
50
Рис. 5. Сравнение БРВ в группе пациентов с положительной экспрессией в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения (n = 68), отн. ед. Fig. 5. Comparison of relapse-free survival in the group of patients with positive expression in circulating tumor cells 9 months after surgical treatment (n = 68), rel. units
Группа Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в Е инвввидяпвг ОК
до операции через 3 мес через 6 мес через 9 мес
in 9 months
Колоректальный рак Colorectal cancer абс. (%) 83 60 (55,5) abs. (%) 59 (55,7) 68 (64,2)
M ± SD min—max 1,175 ± 1,33 1,015 ± 0,93 1,044 ± 1,11 1,134 ± 1,01
0,001-5,401 0,001-4,972 0,001-4,762 0,001-4,098
Рак прямой кишки Cancer rectum £. !%) 36 <73>5> 24 <49> 25(51) 30 (61)
M ± SD 1,145 ± 1,15 1,101 ± 1,21 1,102 ± 0,89 1,206 ± 1,03
min-max 0,002-5,101 0,001-4,972 0,001-2,973 0,001-3,972
Рак ободочной кишки Colon cancer а£:!%) 47 (78,3) 36 (61) 34(59,6) 38 (66,7)
M ± SD 1,198 ± 1,46 0,958 ± 0,69 1,075 ± 1,26 1,077 ± 0,99
min-max 0,001-5,401 0,001-2,701 0,001-4,762 0,002-4,098
Группа наблюдения (аденомы) Observation group (adenomas) ate.. (%) 6 (28,6) 2 (4,5) - -
M ± SD 0,052 ± 0,11 0,018 ± 0,02 - -
min-max 0,001-0,283 0,016-0,019 - -
с использованием регрессионной модели пропорциональных рисков Кокса и определением ОР (табл. 11, 12).
Согласно монофакторному анализу установлено, что статистически значимое влияние на БРВ пациентов оказывают: гиперэкспрессия мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК (>2 отн. ед.), экспрессия мРНК сурви-
вина (ВШС5) в опухоли (>1< отн. ед.), наличие пораженных регионарных лимфатических узлов, наличие отдаленных метастазов, лимфоваскулярная инвазия и стадия заболевания.
Выбраны показатели с самым высоким уровнем статистически значимой связи и проведен многофакторный
.§ 9Я
о
н65
Таблица 7. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК перед хирургическим лечением и клинико-морфологические параметры пациентов с КРР (n = 109)
Table 7. Survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells before surgical treatment and clinical and morphological parameters ofpatients with colorectal cancer (n = 109)
Показатель Экспрессия мРНК сурвивина, абс. (%) Survivin mRNA expression, abs. (%) P
положительная positive отрицательная
Пол: Sex: мужской male женский female 38 (34,9) 45 (41,3) 12 (11,0) 14 (12,8) 0,974
Место жительства: Place of residence: город city село village 56 (51,4) 27 (24,8) 18 (16,5) 8 (7,3) 0,942
Возраст, лет: Age, years: <60 >60 21 (19,3) 62 (56,9) 9(8,3) 17 (15,5) 0,499
Нарушение жирового обмена: Fat metabolism disorder: нормальный вес normal weight избыточная масса тела overweight 26 (23,9) 57 (52,3) 8 (7,3) 18 (16,5) 0,850
Локализация опухоли: Tumor localization: ободочная кишка colon прямая кишка rectum 47 (43,1) 36 (33,1) 13 (11,9) 13 (11,9) 0,554
Ободочная кишка: Colon: правая половина right half левая половина left half 25 (41,7) 22 (36,7) 9 (15,0) 4 (6,6) 0,358
Прямая кишка: Rectum: дистальный отдел distal section проксимальный отдел proximal part 21(19,3) 15(13,8) 4(8,6) 9(18,3) 0,114
Опухоль: TUM: 1 2 3 4 4(3,7) 13 (11,9) 23 (21,2) 43 (39,4) 5(4,6) 3 (2,7) 3 (2,7) 15(13,8) 0,412
Лимфатический узел: NOD: 0 1 2 50 (45,9) 22 (20,2) 11 (10,1) 22 (20,2) 2(1,8) 2(1,8) 0,030
Окончание табл. 7 >_ е
End of table 7 в аз
Показатель Экспрессия мРНК сурв1 Survivin mRNA exnress тина, абс. (%) ion, abs. (%) P
положительная positive отрицательная
Метастаз: MTS: 0 1 76 (69,7) 7(6,4) 26 (23,9) 0 (0,0) 0,194
Стадия: Stage: I II III IV 14(12,8) 35 (32,1) 27 (24,9) 7(6,4) 8 (7,3) 14 (12,8) 4 (3,7) 0 (0,0) 0,019
Морфологическое строение: Morphological structure: аденокарцинома adenocarcinoma муцинозная аденокарцинома mucinous adenocarcinoma 70 (64,2) 13 (11,9) 21 (19,3) 5(4,6) 0,901
Степень дифференцировки: Degree of differentiation: Gl G2 G3 15(13,8) 54 (49,5) 14 (12,8) 10 (9,2) 13 (11,9) 3 (2,8) 0,758
ЛВИ+ LVI+ ЛВИ-LVI- 58 (53,2) 25 (22,9) 16 (14,7) 10 (9,2) 0,427
Размер опухоли, мм: Tumor size, mm: <50 >50 31(28,4) 52 (47,8) 7(6,4) 19(17,4) 0,461
Экспрессия мРНК сурвивина в опухолевой ткани: Survivin mRNA expression in tumor tissue: есть there is нет no 74 (67,9) 9(8,3) 19(17,4) 7(6,4) 0,044
Хроническая кишечная непроходимость: Chronic intestinal obstruction: есть there is нет no 23 (21,1) 60 (55,1) 8 (7,3) 18 (16,5) 0,959
Токсико-анемический синдром: Toxic-anemic syndrome: есть there is нет no 30 (27,5) 53 (48,6) 10 (9,2) 16 (14,7) 0,831
Лучевая терапия (рак прямой кишки): Radiation therapy (rectal cancer): химиолучевая терапия chemoradiation therapy предоперационная preoperative 9 (37,5) 6 (25,0) 3 (12,5) 6 (25,0) 0,400
Примечание. ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия. Note. LVI — lymphovascular invasion.
Таблица 8. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК перед хирургическим лечением и клинико-морфологические параметры пациентов с аденомами толстой кишки (n = 21)
Table 8. Survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells before surgical treatment and clinical and morphological parameters ofpatients with colon adenomas (n = 21)
Показатель Parameter
Экспрессия мРНК сурв
вивина
urvivin mRNA expression, abs. (%)
, абс. (%)
Пол: Sex: мужской male женский female
2 (9,5) 4 (19,1)
3 (12,8) 12(57,6)
0,597
Возраст, лет: Age, years: <60 >60 2 (9,5) 4 (19,1) 6(28,6) 9 (42,8) 1,000
Локализация опухоли: Tumor localization: ободочная кишка colon прямая кишка rectum 3 (12,8) 3 (12,8) 9 (42,8) 6(28,6) 1,000
Дисплазия: Dysplasia: low grade high grade 3 (12,8) 3 (12,8) 12(57,6) 3 (12,8) 0,291
Размер опухоли, мм: Tumor size, mm: <50 >50 4 (19,1) 2 (9,5) 13 (61,9) 2 (9,5) 0,544
Таблица 9. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК в зависимости от клинико-морфологических параметров пациентов (n = 109) Table 9. Survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells depending on the clinical and morphological parameters ofpatients (n = 109)
Категория Category Presence of expression Отсутствие экспрессии, абс. (%) Число пациентов в отдельных подгруппах, абс. % положительной экспрессии в от-
Число пациентов, абс. (%) M ± SD дельных подгруппах
min—max patients, abs. ( Of\ Number of patients in separate subgroups, abs. % positive expression in individual subgroups
Quantitypatients, abs. (%) | (%)
Т1 Т2 Т3 Т4 4 (4,8) 0,848 ± 0,10 13 (15,7) 1,014 ± 0,98 23 (27,7) 1,199 ± 1,35 43 (51,8) 1,241 ± 1,45 0,030-2,201 0,002-3,332 0,002-5,101 0,001-5,401 5(19,2) 3 (11,5) 3 (11,5) 15 (57,7) 9 16 26 58 44.4 81,3 88.5 74,1
Всего Total 83 (100) 1,175 ± 1,33 0,001-5,401 26(100) 109 76,2
N0 N1 N2 50 (60,2) 0,950 ± 1,08 22 (26,5) 1,669 ± 1,55 11 (13,3) 1,210 ± 1,69 0,001-5,101 0,002-5,401 0,020-5,401 22 (84,6) 2 (7,7) 2 (18,2) 72 24 13 69,4 91,7 84,6
Всего Total 83 (100) 1,175 ± 1,33 0,001-5,401 26(100) 109 76,2
M0 Ml 76 (91,6) 1,189 ± 1,35 7 (8,4) 1,020 ± 1,04 0,001-5,401 0,082-2,982 26(100) 0 (0,0) 102 7 74,5 100
Всего Total 83 (100) 1,175 ± 1,33 0,001-5,401 26(100) 109 76,2
Категория
Category
Окончание табл. 9 End of table 9
Наличие экспрессии
Presence of expression
Число пациентов, абс. (%)
Quantitypatients, abs. (%)
M ± SD
min—max
Отсутствие экспрессии, абс. (%)
Число пациентов в отдельных подгруппах, абс.
Number of patients in separate subgroups, abs.
% положительной экспрессии в отдельных подгруппах
Примечание. ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия. Note. LVI — lymphovascular invasion.
I 14 (16,9) 0,747 ± 0,78 0,002- -2,201 8(36,4) 22 63,6
II 35 (42,2) 1,011 ± 1,19 0,001- -5,101 14(53,8) 49 71,4
III 27 (32,5) 1,650 ± 1,66 0,002- -5,401 4 (15,4) 31 87,1
IV 7 (8,4) 1,020 ± 1,04 0,082- 2,982 0 (0,0) 7 100
Всего Total 83 (100) 1,175 ± 1,33 0,001- -5,401 26(100) 109 76,2
G1 15(18,1) 0,766 ± 0,87 0,001- 2,322 10 (38,5) 25 60,0
G2 54 (65,1) 1,279± 1,43 0,002- -5,401 13 (50,0) 67 80,6
G3 14 (16,9) 1,213 ± 1,32 0,003- 4,002 3 (11,5) 17 82,4
Всего Total 83 (100) 1,175 ± 1,33 0,001- -5,401 26(100) 109 76,2
ЛВИ+ 58 (69,9) 1,197 ± 1,40 0,001- -5,401 16 (61,5) 74 78,4
LVI+
ЛВИ- 25 (30,1) 1,124 ± 1,16 0,002- -5,101 10 (38,5) 35 71,4
LVI-
Всего Total 83 (100) 1,175 ± 1,33 0,001- -5,401 26 (10330 109 76,2
Ъ 100
-о а
-о g
13
95
90
85
80
75
10 20 30
Время, мес / Time, months
40
50
Рис. 6. Сравнение общей выживаемости) в группах пациентов по статусу экспрессии мРНК сурвивина (BIRC5) в опухоли (n = 93) Fig. 6. Comparison of overall survival in patient groups according to the status of survivin (BIRC5) mRNA expression in the tumor (n = 93)
анализ (уровень значимости модели p <0,0001). В результате установлено, что независимое влияние на БРВ пациентов, прошедших радикальное лечение, оказывает гиперэкспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (>2 отн. ед.).
Отношение рисков для пациентов с гиперэкспрессией >2 отн. ед. в сравнении с экспрессией <2 отн. ед.
равно 12,2 (95 % ДИ 3,6—41,5). Таким образом, риск возврата болезни у пациентов с экспрессией >2 отн. ед. в 12,2 раза выше, чем у пациентов с экспрессией <2 отн. ед.
Из 109 пациентов группы исследования 19 (17,4 %) умерли от прогрессирования заболевания в течение 48 мес наблюдения.
Общая выживаемость всех 109 пациентов, включенных в исследование, составила 82,6 % (95 % ДИ 75,3-89,8) . Медиана ОВ составила 42,0 + 12,9 мес (95 % ДИ 39,2-44,8). Общая выживаемость пациентов в подгрупп ах (экспрессия в опухоли <1,0 отн. ед. и гиперэкспрессия >1,0 отн. ед.) составила 87,5 % (95 % ДИ 69,3—100,0) и 81,7 % (95 % ДИ 73,7—89,7) соответственно (р = 0,09) (рис. 6).
Общая выживаемость пациентов с уровнем экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК (через 9 мес после хирургического лечения) до 2 отн. ед. составила 88,4 ± 3,2 % (95 % ДИ 78,4—98,4), в то время как аналогичная выживаемость пациентов с уровнем экспрессии >2 отн. ед. составила 36,4 ± 5,0 % (95 % ДИ 2,5—70,3) (р <0,0001) (рис. 7).
Значимое влияние на ОВ пациентов исследуемой группы оказывает только уровень экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения.
0
Таблица 10. Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения и клинико-морфологические параметры пациентов с КРР (n = 106)
Table 10. Survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells 9 months after surgical treatment and clinical and morphological parameters of patients with colorectal cancer (n = 106)
Экспрессия мРНК сурвивина, абс. (%)
Локализация опухоли: Tumor localization: ободочная кишка colon
прямая кишка rectum
Ободочная кишка: Colon: правая половина right half левая половина left half
Прямая кишка: Rectum: дистальный отдел distal section проксимальный отдел proximal section
Опухоль: TUM: 1 2
3
4
Лимфатический узел: NOD: 0 1 2
Метастаз: MTS: 0 1
Стадия: Stage:
I
II
III
IV
Морфологическое строение: Morphological structure: аденокарцинома adenocarcinoma муцинозная аденокарцинома mucinous adenocarcinoma
38 (35,8) 19 (17,9) 30 (28,3) 19 (17,9)
20 (35,1) 13 (22,8) 18 (31,6) 6 (10,5)
18 (36,7) 12 (24,5)
5 (4,7) 10 (9,4) 16 (15,1) 37 (34,9)
45 (42,5) 17 (16,0) 6 (5,7)
63 (59,4) 5 (4,7)
13 (12,3) 31 (29,2) 19 (17,9) 5 (4,7)
57 (53,8) 11 (10,4)
0,560
0,255
7 (14,3) 12 (24,5)
4 (3,8) 6(10,5) 10 (9,4) 18 (17,0)
26 (24,5) 7 (6,6) 5 (4,7)
0,198
0,621
0,814
38 (35,9) 0,157 0 (0,0)
9 (8,5) 17 (16,0) 12 (11,4) 0 (0,0)
31 (29,2) 7 (6,6)
0,699
0,980
Степень дифференцировки: Degree of differentiation: G1 G2 G3 11 (10,4) 46 (43,4) 11 (10,4) 12 (11,3) 20 (18,9) 6 (5,6) 0,823
ЛВИ+ LVI+ ЛВИ-LVI- 46 (43,4) 22 (20,8) 25 (23,6) 13 (12,2) 0,845
Размер опухоли, мм: Tumor size, mm: <50 >50 26 (24,5) 42 (39,6) 12 (11,4) 26 (24,5) 0,493
Экспрессия мРНК сурвивина в опухолевой ткани: Survivin mRNA expression in tumor tissue: есть there is нет no 55 (51,9) 13(12,3) 35 (33,0) 3 (2,8) 0,161
Хирургическое лечение: Surgery: радикальное radical циторедуктивное cytoreductive 63 (59,4) 5(4,7) 38 (35,9) 0 (0,0) 0,157
Химиотерапия: Chemotherapy: проводилась was carried out не проводилась was not carried out 29 (27,4) 39 (36,8) 13 (12,2) 25 (23,6) 0,519
Лучевая терапия (рак прямой кишки): Radiation therapy (rectal cancer): химиолучевая терапия chemoradiation therapy предоперационная preoperative 7(31,8) 8(36,4) 3(13,6) 4 (18,2) 1,000
Примечание. ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия. Note. LVI — lymphovascular invasion.
Рассчитано ОР смерти у пациентов с гиперэкспрессией >2 отн. ед. мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК. Оно оказалось в 6,8 раза выше, чем у пациентов с экспрессией <2 отн. ед. - ОР 6,8 (95 % ДИ 2,65-17,33, р = 0,0001).
Изучено влияние различных факторов на ОВ пациентов группы исследования, проведен моновариантный и многофакторный регрессионный анализ с использованием регрессионной модели пропорциональных рисков Кокса и определением ОР (табл. 13, 14).
Согласно монофакторному анализу установлено, что статистически значимое влияние на БРВ пациентов оказывают: гиперэкспрессия мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК (>2 отн. ед.), наличие пораженных регионарных лимфатических узлов, наличие отдаленных метастазов и стадия заболевания.
-о а
-о g
а.
100
90
& 80
70
60
50
40
S 30 :р
Г
I I
Экспрессия в опухоли, отн. ед. /
Expression in tumor, rel. units
<2
>2
I
ь_
Log-rank test p <0,0001
о0
20
30
40
50
Время, мес / Time, months
100
80
60
20
Рис. 7. Сравнение общей выживаемости в группе пациентов с положительной экспрессией в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения (n = 68), отн. ед.
Fig. 7. Comparison of overall survival in the group of patients with positive expression in CTCs 9 months after surgical treatment (n = 68), rel. units
20 40 60 80
100 - специфичность / 100 - specificity
100
Рис. 8. ROC-кривая (экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения)
Fig. 8. ROC curve (expression of survivin (BIRC5) mRNA in circulating tumor cells 9 months after surgical treatment)
tB 40
0
0
Выбраны показатели с самым высоким уровнем статистически значимой связи и проведен многофакторный анализ (уровень значимости моделир <0,0001). В результате установлено, что независимое влияние на ОВ пациентов, прошедших радикальное лечение,
оказывает гиперэкспрессия мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК (>2 отн. ед.).
Отношение рисков для пациентов с гиперэкспрессией >2 отн. ед. в сравнении с экспрессией <2 отн. ед. равно 10,5 (95 % ДИ 3,1—35,5). Таким образом, риск
Таблица 11. Влияние различных факторов на безрецидивную выживаемость у пациентов группы исследования (моновариантная модель Кокса) Table 11. The influence of various factors on relapse-free survival in patients in the study group (monovariate Cox model)
Параметр Parameter Отношение рисков 95 % Доверительный интервал P
A <11 Д111 vl vl 95 % Confidence interval H
Т3—4/Т1—2 1,86 0,71-4,84 0,203
N1—2/N0 5,11 2,51-10,4 <0,001
M1/M0 3,80 2,38-6,08 0,001
G3/G1-2 1,13 0,50-2,54 0,772
ЛВИ+/-LVI+/- 4,10 1,33-12,63 0,014
Стадия III-IV/I-II Stage III-IV/I-II 4,90 2,40-10,00 <0,001
Муцинозная/немуцинозная аденокарцинома Mucinous/nonmucinous adenocarcinoma 1,32 0,63-2,77 0,465
ЦОК+/ЦОК- через 9 мес после операции CrCs+/CrCs- 9 months after surgery 1,52 0,70-3,28 0,289
Гиперэкспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (>2< отн. ед.) Overexpression of survivin mRNA (BIRC5) in CTCs (>2< rel. units) 3,08 1,56-6,08 <0,001
Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в опухоли (>1< отн. ед.) Expression of survivin mRNA (BIRC5) in the tumor (>1< rel. unit) 4,85 1,14-20,68 0,033
Примечание. ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия; ЦОК — циркулирующие опухолевые клетки.
Note. LVI — lymphovascular invasion; CTCs — circulating tumor cells. ^■
Таблица 12. Результаты многофакторного анализа Table 12. Results of multivariate analysis
Показатель Статистические данные Statistical data
- ß Стандартная ошибка exp (ß) Wald-статистика Wild statistics Уровень значи- ДИ мости, p ДВР|
Standard error Significance level, р "
N1—2/N0 15,07 23,19 6,075 0,41 0,95 1,1-10,9
M1/M0 1,29 0,84 3,49 2,35 0,13 0,7-19,0
ЛВИ+/- 0 35 0 97 LVI+/— 0,35 0,97 0,70 0,14 0,71 0,1-4,7
Стадия III—IV/I—II Stage III—IV/I—II 12,79 23,19 0,15 0,03 0,96 8,9-13,8
Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (>2< от. ед.) 2 50 0 63 Survivin (BIRC5) mRNA expression in CTCs (>2< rel. units) 12,19 16,03 0,0001 3,6-41,5
Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в опухоли (>1< отн. ед.) 1 48 1 07 4,39 Expression of survivin mRNA (BIRC5) in the tumor (>1< rel. unit) 1,90 0,17 0,5-35,9
Примечание. ДИ — доверительный интервал; ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия. Note. CI — confidence interval; LVI — lymphovascular invasion.
Таблица 13. Влияние различных факторов на общую выживаемость у пациентов группы исследования (моновариантная модель Кокса) Table 13. The influence of various factors on overall survival in patients in the study group (monovariate Cox model)
Показатель Parameter OP RR 95 % ДИ P
Т3—4/Т1—2 2,53 0,63-10,21 0,192
N1—2/N0 7,30 2,61-20,43 0,0002
M1/M0 6,73 3,72-12,15 0,0001
G3/G1-2 1,44 0,55-3,82 0,460
ЛВИ+/-LVI+/- 4,02 0,98-16,45 0,053
Стадия III-IV/I-II Stage III-IV/I-II 7,01 2,50-19,63 0,0002
Муцинозная/немуцинозная аденокарцинома Mucinous/nonmucinous adenocarcinoma 1,35 0,51-3,59 0,550
Гиперэкспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (>2< отн. ед.) Overexpression of survivin mRNA (BIRC5) in CTCs (>2< rel. units) 6,77 2,65-17,33 0,0001
Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в опухоли (>1< отн. ед.) Expression of survivin mRNA (BIRC5) in the tumor (>1< rel. unit) 3,07 0,75-12,52 0,099
Примечание. ОР — отношение рисков; ДИ — доверительный интервал; ЛВИ — лимфоваскулярная инвазия. Note. RR — risk ratio; CI — confidence interval; LVI — lymphovascular invasion.
возврата болезни у пациентов с экспрессией >2 отн. ед. У пациентов с отдаленными метастазами после
в 10,5 раза выше, чем у пациентов с экспрессией циторедуктивного лечения — ОР 7,5 (95 % ДИ 1,6—
<2 отн. ед. 35,5). Таким образом, у данной группы пациентов риск
Таблица 14. Результаты многофакторного анализа Table 14. Results of multivariate analysis
Примечание. ДИ — доверительный интервал; ЦОК — циркулирующие опухолевые клетки. Note. CI — confidence interval; CTCs — circulating tumor cells.
Статистические данные Statistical data
Показатель
Parameter ß Ст=аНаЯ exp (ß) Wald-стати- стика Wald statistics Уровень значимости, p ДИ
CI exp (ß)
N1-2/N0 14,82 27,29 27,37 0,003 0,96 1,4-12,6
M1/M0 2,02 0,79 7,54 6,53 0,01 1,6-35,5
Стадия III—IV/I-II Stage III—IV/I-II 13,27 27,29 0,01 0,002 0,96 8,7-23,9
Экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (>2< отн. ед.) Survivin (BIRC5) mRNA expression in CTCs (>2< rel. units) 2,35 0,62 10,48 14,24 0,0002 3,1-35,5
Таблица 15. Результаты ROC-анализа (экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК через 9 мес после хирургического лечения) Table 15. Results of ROC analysis (survivin (BIRC5) mRNA expression in circulating tumor cells 9 months after surgical treatment)
Точка диапюсти.шск0г)0 разделе- Чувствительность, %
Diagnostic separation point (rel. units)
Специфичность, %
Площадь под ROC-кривой
Доверительный интервал
Confidence interval
>2,0043
50,0
95,6
0,736
0,641-0,817
возврата болезни в 7,5 раза выше в сравнении с пациентами без отдаленных метастазов.
У пациентов с IV стадией заболевания после цито-редуктивного лечения и с гиперэкспрессией мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК (>2 отн. ед.) условная вероятность прогрессирования заболевания в 79 раз выше, чем у пациентов, у которых эти факторы отсутствуют.
Проведен ROC-анализ для оценки качества диагностической модели (табл. 15 и рис. 8). Уровень экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК может использоваться в качестве дополнительного прогностического критерия при прогнозировании БРВ и ОВ пациентов с КРР (р = 0,0028, Аис = 0,736).
Поскольку метод отличается высокой специфичностью и низкой чувствительностью, он может использоваться как конфирматорный для выявления у радикально пролеченных пациентов МОБ и высокой вероятности неблагоприятного исхода заболевания.
Обсуждение
Имеется ряд исследований, сообщающих как о положительной, так и об отрицательной корреляции между ОВ пациентов и экспрессией сурвивина в опухолевой ткани и ЦОК при КРР.
В исследованиях G. Qi и соавт. и Е. Okada и соавт. изучалась иммуногистохимическая экспрессия сурви-
вина у пациентов с КРР и раком желудка. Результаты исследований продемонстрировали, что экспрессия сурвивина в опухолевой ткани толстой кишки является негативным прогностическим фактором исхода заболевания, в противоположность этому экспрессия сурвивина положительно коррелировала с благоприятным прогнозом при раке желудка [11, 12].
В исследовании К. Jakubowska и соавт. отмечено, что экспрессия сурвивина наблюдается как в ядрах, так и в цитоплазме опухолевых клеток [13]. Материалом исследования послужили ЦОК, образцы опухоли и регионарные лимфатические узлы у радикально пролеченных пациентов, страдающих КРР. Положительная экспрессия сурвивина наблюдалась у 84,2 % пациентов, включая ядерную (63,2 %) и цитоплазматическую (81,6 %) экспрессию. Положительная экспрессия сур-вивина в клетках карциномы толстой кишки указывала на рост митотической активности опухоли и увеличивала риск развития метастатических очагов, в том числе и в отдаленных органах (р <0,05).
Результаты исследования M. Devetzi и соавт., в котором были изучены DR5, DR4, Survivin, XIAP, cIAP1, cIAP2, продемонстрировали прямую взаимосвязь между выживаемостью и экспрессией сурвивина и других белков семейства апоптоза [14]. Подтверждением также является исследование J. Kim и соавт., посвященное
4' 2023
о определению взаимосвязи сурвивина, маркеров ство-« ловых опухолевых клеток (CD44 и CD133) и маркеров _ эпителиально-мезенхимального перехода (E-кадгерин = и TWIST1). Было установлено, что сурвивин в сочета-™ нии с CD44 может использоваться для прогнозирова-о ния рецидива и выживаемости у пациентов, после _ предоперационной химиолучевой терапии при ди-= стальном раке прямой кишки [15]. се A. Krieg с соавт. и Y.-J. Huang с соавт. в 2013 г. не-
о зависимо друг от друга провели метаанализ 15 и 14 ис-® следований соответственно, в период 1998-2012 гг. « [16, 17]. Метаанализы суммарно включали данные = о 3718 пациентах, страдающих I-IV стадией КРР. Цель о проведенных исследований - определение клиничес-* кой значимости экспрессии сурвивина в ЦОК и опу-Л холевом материале. Оценка экспрессии сурвивина з в ЦОК проводилась с помощью ОТ-ПЦР в опухолевом s материале при помощи иммуногистохимии. Авторы о отметили высокую диагностическую ценность метода ОТ-ПЦР. Результаты продемонстрировали, что гиперэкспрессия сурвивина связана с уменьшением ОВ (95 % ДИ 1,55-2,42; 12-23 %), сопровождается лим-фоваскулярной инвазией (95 % ДИ 0,28-0,90; 12-0 %) и наличием метастазов в регионарных лимфатических узлах (95 % ДИ 0,19-0,75; 12-61 %) [16]. Кроме того, существует корреляция между гиперэкспрессией сурвивина и стадией заболевания (р <0,05), глубиной опухолевой инвазии (р <0,05), отдаленными метастазами и степенью дифференцировки опухоли (р <0,05) [17].
В нашем исследовании положительная экспрессия мРНК сурвивина (BIRC5) в ЦОК (до операции) была выявлена у 76,1 % пациентов. Гиперэкспрессия сурви-вина в ЦОК коррелировала с поражением регионар-
ных лимфатических узлов (р = 0,03, г = 0,21), стадией опухолевого процесса (р = 0,01, г = 0,25), степенью дифференцировки опухоли (р = 0,03, г = 0,21).
Гиперэкспрессия сурвивина в ЦОК (через 9 мес после операции) значимо влияла на БРВ ОР (95 % ДИ ОР) = 3,1 (95 % ДИ 1,56-6,08, р = 0,0012) и ОВ пациентов ОР 6,8 (95 % ДИ 2,65-17,33, р = 0,0001), страдающих КРР.
Гиперэкспрессия сурвивина в опухолевой ткани коррелировала с глубиной опухолевой инвазии (р = 0,013, г = 0,26), стадией заболевания (р = 0,001, г = 0,33), значимо влияла на БРВ пациентов ОР 4,3 (95 % ДИ 1,08-17,07, р = 0,038). Однако значимого влияния на ОВ выявлено не было ОР 3,07 (95 % ДИ 0,75-12,52, р = 0,099).
Таким образом, можно сделать вывод, что определение экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в ЦОК является клинически значимым для оценки МОБ и прогнозирования ОВ пациентов. Определение экспрессии мРНК сурвивина (ВШС5) в опухолевой ткани может стать перспективным исследованием для оценки вероятности прогрессирования заболевания, однако для подтверждения этого необходимо продолжить исследование с большим количеством пациентов.
Заключение
Гиперэкспрессия мРНК сурвивина при КРР является негативным фактором прогноза заболевания и напрямую зависит от опухолевого поражения регионарных лимфатических узлов, стадии заболевания, степени дифференцировки опухоли и может использоваться для диагностики МОБ и оценки прогноза ОВ пациентов.
ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES
1. Bettegowda C., Sausen M., Leary R.J. et al. Detection of circulating tumor DNA in early- and late-stage human malignancies. Sci Transl Med 2014;6(224):224ra24.
DOI: 10.1126/scitranslmed.3007094
2. Tie J., Wang Y., Tomasetti C. et al. Circulating tumor DNA analysis detects minimal residual disease and predicts recurrence in patients with stage II colon cancer. Sci Transl Med 2016;8(346):346ra92. DOI: 10.1126/scitranslmed.aaf6219
3. Tarazona N., Gimeno-Valiente F., Gambardella V. et al. Targeted next-generation sequencing of circulating-tumor DNA for tracking minimal residual disease in localized colon cancer. Ann Oncol 2019;30(11):1804-12. DOI: 10.1093/annonc/mdz390
4. Tan Y., Wu H. The significant prognostic value of circulating tumor cells in colorectal cancer: A systematic review and meta-analysis. Curr Probl Cancer 2018;42(1):95-106.
DOI: 10.1016/j.currproblcancer.2017.11.002
5. Alberter B., Klein Ch.A., Polzer B. Single-cell analysis of CTCs with diagnostic precision: opportunities and challenges for personalized medicine. Expert Rev Mol Diagn 2016:16(1):25—38. DOI: 10.1586/14737159.2016.1121099
6. Marcuello M., Vymetalkova V., Neves R.P. et al. Circulating biomarkers for early detection and clinical management
of colorectal cancer. Mol Aspects Med 2019;69:107-22. DOI: 10.1016/j.mam.2019.06.002
7. Andersen M.H., Svane I.M., Becker J.C. et al. The universal character of the tumor-associated antigen survivin. Clin Cancer Res 2007;13(20):5991-4. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-07-0686
8. Shintani M., Sangawa A., Yamao N. et al. Immunohistochemical expression of nuclear and cytoplasmic survivin in gastrointestinal carcinoma. Int J Clin Exp Pathol 2013;6(12):2919-27.
9. Choi J., Chang H. The expression of MAGE and SSX,
and correlation of COX2, VEGF, and survivin in colorectal cancer. Anticancer Res 2012;32(2):559-64.
10. Miura K., Fujibuchi W., Ishida K. et al. Inhibitor of apoptosis protein family as diagnostic markers and therapeutic targets of colorectal cancer. Surg Today 2011;41(2):175-82.
DOI: 10.1007/s00595-010-4390-1
11. Qi G., Tuncel H., Aoki E. et al. Intracellular localization
of survivin determines biological behavior in colorectal cancer. Oncol Rep 2009;22(3):557-62. DOI: 10.3892/or_00000471
12. Okada E., Murai Y., Matsui K. et al. Survivin expression in tumor cell nuclei is predictive of a favorable prognosis in gastric cancer patients. Cancer Lett 2001;163(1):109-16.
DOI: 10.1016/s0304-3835(00)00677-7
13. Jakubowska K., Pryczynicz A., Dymicka-Piekarska V. et al. Immunohistochemical expression and serum level
of survivin protein in colorectal cancer patients. Oncol Lett 2016;12(5):3591-97. DOI: 10.3892/ol.2016.5075
14. Devetzi M., Kosmidou V., Vlassi M. et al. Death receptor 5 (DR5) and a 5-gene apoptotic biomarker panel with significant differential diagnostic potential in colorectal cancer. Sci Rep 2016;6:36532. DOI: 10.1038/srep36532
15. Kim J., Ahn S., Kim K. et al. Prognostic significance
of survivin expression and combined analysis with cancer stem cell and epithelial-mesenchymal transition-related markers in patients
with rectal cancer undergoing preoperative chemoradiotherapy. Anticancer Res 2018;38(12):6881-9. DOI: 10.21873/anticanres.13064a
16. Krieg A., Werner T.A., Verde P.E. et al. Prognostic and clinico-pathological significance of survivin in colorectal cancer:
a meta-analysis. PLoS One 2013;8(6):e65338. DOI: 10.1371/journal.pone.0065338
17. Huang Y.J., Qi W.X., He A.N. et al. The prognostic value of survivin expression in patients with colorectal carcinoma: a meta-analysis. Jpn J Clin Oncol 2013;43(10):988-95. DOI: 10.1093/jjco/hyt103
Вклад авторов:
Андрей В. Орехва: сбор и обработка данных, написание статьи;
Е.А. Шляхтунов, В.М. Семенов: концепция и дизайн исследования, утверждение окончательного варианта статьи; И.В. Жильцов, А.В. Ерушевич: редактирование статьи;
Г.М. Шаппо, Я.Н. Лях, Алина В. Орехва: сбор данных для анализа, анализ полученных данных. Authors' contributions
Andrey V. Orekhva: data collection and processing, writing the article;
E.A. Shlyakhtunov, V.M. Semenov: study concept and design, approval of the final version of the article; I.V. Zhiltsov, A.V. Erushevich: editing the article;
G.M. Shappo, Ya.N. Lyakh, Alina V. Orekhva: collecting data for analysis, analysis of the obtained data.
ORCID авторов / ORCID of authors
Андрей В. Орехва / Andrey V. Orekhva: https://orcid.org/0000-0001-9145-4216 Е.А. Шляхтунов / E.A. Shlyakhtunov: https://orcid.org/0000-0002-5906-5373 В.М. Семенов / V.M. Semenov: https://orcid.org/0000-0002-7029-9226 И.В. Жильцов / I.V. Zhiltsov: https://orcid.org/0000-0002-4912-2880 Г.М. Шаппо / G.M. Shappo: https://orcid.org/0000-0002-2147-3937 A.B. Ерушевич / A.V. Erushevich: https://orcid.org/0009-0009-0231-7945 Я.Н. Лях / Ya.N. Lyakh: https://orcid.org/0009-0001-2385-4880 Алина В. Орехва / Alina V. Orekhva: https://orcid.org/0009-0007-4484-6736
Финансирование. Работа выполнялась в соответствии с планом научных исследований УО «Витебский государственный медицинский университет». Финансовой поддержки со стороны компаний-производителей лекарственных препаратов авторы не получали. Funding. The work was carried out in accordance with the scientific research plan of the Vitebsk State Medical University. The authors did not receive financial support from drug manufacturers.
Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The authors declare no conflict of interests.
Соблюдение правил биоэтики. Исследование одобрено этическим комитетом УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет», а также этическим комитетом УЗ «Витебский областной клинический онкологический диспансер». Compliance principles of bioethics. The study was approved by the ethical committee of the Vitebsk State Order of Peoples' Friendship Medical University, as well as the ethical committee of the Vitebsk Regional Clinical Oncology Dispensary.
Статья поступила: 12.09.2023. Принята к публикации: 08.11.2023. Article submitted: 12.09.2023. Accepted for publication: 08.11.2023.
