Экспрессия антиапоптотического протеина сурвивина и кодирующего его гена BIRC5 в первичной карциноме молочной железы как фактор прогноза заболевания Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

4120181 ОПУХОЛИ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ Том 14 / Vol. 14 TUMORS OF FEMALE REPRODUCTIVE SYSTEM

Экспрессия антиапоптотического протеина сурвивина и кодирующего его гена В1ЯС5 в первичной карциноме молочной железы как фактор прогноза заболевания

Е.А. Шляхтунов

Кафедра онкологии с курсами ЛД, ЛТ, ФПК и ПК УО «Витебский государственный ордена Дружбы народов медицинский университет»; Республика Беларусь, 210009 Витебск, проспект Фрунзе, 27

Контакты: Евгений Александрович Шляхтунов evgenij-shlyakhtunov@yandex.ru

Цель исследования — изучить экспрессию антиапоптотического протеина сурвивина и кодирующего его гена ВШС5 в первичной карциноме молочной железы как потенциальный прогностический и предиктивный маркер.

Материалы и методы. При помощи методов иммуногистохимии и полимеразной цепной реакции в режиме реального времени изучено 67 образцов (биоптатов) первичной карциномы молочной железы на предмет наличия экспрессии белка сурвивина и кодирующего его гена ВШС5.

Результаты. Экспрессия сурвивина определялась в 47 (70,15 %) образцах карциномы молочной железы, наиболее часто — в про-токовой карциноме средней и высокой степени злокачественности (О2—О) и в большинстве случаев сочеталась с лимфовенозной стромальной инвазией. Экспрессия белка сурвивина коррелировала с экспрессией HER2/neu. В 59,6 % случаев сурвивин экспрес-сировался в опухолях с низким уровнем Ю-67. Наиболее часто сурвивин экспрессировался при люминальном А и люминальном В молекулярно-биологических подтипах опухоли. Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени определила экспрессию гена ВШС5 во всех 67 образцах карциномы. Уровень нормализованной экспрессии гена ВШС5 достоверно умеренно коррелировал с экспрессией его продукта — белка сурвивина (г = 0,704, р <0,01) и слабо отрицательно — с экспрессией онкопротеина HER2/neu (г = -0,285, р <0,05).

При медиане наблюдения 40мес общая выживаемость пациентов без экспрессии сурвивина в первичной опухоли составила 100 %, общая выживаемость пациентов с его экспрессией — 77,16 % (диапазон 74,6-80,1 %) (р = 0,041), а безрецидивная выживаемость — 100 и 71,9 % (диапазон 70,1—74,2 %) соответственно (р = 0,037). Отношение рисков прогрессирования в группе больных с экспрессией сурвивина равнялось 10,6 (95 % доверительный интервал 0,85—132,2) (р = 0,041).

Заключение. Экспрессия белка сурвивина и кодирующего его гена ВШС5может рассматриваться как неблагоприятный прогностический фактор и использоваться в качестве предиктивного и прогностического маркера.

Ключевые слова: рак молочной железы, сурвивин, ВШС5

Для цитирования: Шляхтунов Е.А. Экспрессия антиапоптотического протеина сурвивина и кодирующего его гена ВШС5 в первичной карциноме молочной железы как фактор прогноза заболевания. Опухоли женской репродуктивной системы 2018;14(4):12—9.

DOI: 10.17650/1994-4098-2018-14-4-12-19

о

Expression of anti-apoptothic protein survinin and its gene BIRC5 in primary breast carcinoma as a prognostic factor

for the disease

E.A. Shlyakhtunov

Department of Oncology, Vitebsk State Order of Peoples' Friendship Medical University; 27Prospekt Frunze, Vitebsk 210009, Republic of Belarus

o £ E

Objective: to study the expression of anti-apoptotic protein survivin and its gene BIRC5 in primary breast carcinoma as a potential predictive S and prognostic marker.

Materials and methods. Using immunohistochemical methods and real-time polymerase chain reaction 67samples (biopsy) of the primary breast carcinoma were studied for the presence of expression of survivin protein and its gene BIRC5. w Results. Expression of survivin was determined in 47(70.15 %) mammary carcinoma samples. Expression of survivin was most often determined s in medium and high grade ductal carcinoma (G2—G), and was associated with lymphovenous stromal invasion in most cases. Expression of survivin protein correlated with the expression of HER2/neu. In 59.6 % of cases survivin was expressed in tumors with a low Ki-67 index. ^ Most often, survivin was expressed in luminal A and luminal B molecular-biological tumor subtypes. Real-time polymerase chain reaction © determined the expression of BIRC5gene in all 67 carcinoma samples. The level of normalized expression of BIRC5gene significantly modS erately correlated with the expression of its product — survivin protein (r = 0.704, p <0.01) and slightly correlated with the expression of on-S coprotein HER2/neu (r = —0.285, p <0.05).

iz The median follow-up was 40 months. Overall survival of patients without survivin expression in primary tumor was 100 %, overall surS vival of patients with survivin expression was 77.16 % (range 74.6—80.1 %) (p = 0.041), relapse-free survival was 100 % and 71.9 %

Том 14 / Vol. 14

(range 70.1—74.2 %) respectively (p = 0.037). The ratio of progression risks in the survivin expression group was 10.6 (95 % confidence interval 0.85-132.2) (p = 0.041).

Conclusion. Expression of the protein survivin and its gene BIRC5 is an independent adverse prognostic factor and can be used as a predictive and prognostic marker.

Key words: breast cancer, survivin, BIRC5

For citation: Shlyakhtunov E.A. Expression of anti-apoptothic protein survinin and its gene BIRC5 in primary breast carcinoma as a prognostic factor for the disease. Opukholi zhenskoy reproduktivnoy systemy = Tumors of female reproductive system 2018;14(4):12-9.

Введение

Сурвивин — белок, кодируемый у людей геном BIRC5 и получивший название «бакуловирусный протеин» [1, 2]. Сурвивин — член семейства белков-ингибиторов апоптоза (inhibitors of apoptosis proteins, IAP). Основная функция белка сурвивина заключается в блокировании каспазной активации апоптоза. Экспрессия гена BIRC5 особенно высока в период внутриутробного развития и в большинстве опухолей и ничтожно мала в нормальной дифференцированной ткани [3]. Экспрессия гена сурвивина четко отрегулирована клеточным циклом. Установлено, что экспрессия гена BIRC5 и синтез сурвивина связаны с белком p53 [4]. Экспериментальные исследования показали, что сурвивин блокирует как внешний, так и внутренний путь апоптоза, связывая и ингибируя эффектор-ные каспазы 3 и 7 [5].

BIRC5 может быть расценен как онкоген, поскольку его сверхэкспрессия в большинстве раковых клеток содействует их сопротивлению апоптотическим стимулам и химиотерапевтическим методам лечения, таким образом обеспечивая выживание и прогрессиро-вание опухоли.

Цель исследования — изучить экспрессию анти-апоптотического протеина сурвивина и кодирующего его гена BIRC5 в первичной карциноме молочной железы как потенциальный прогностический и предик-тивный маркер.

Материалы и методы

Было изучено 67 образцов (биоптатов) первичной карциномы молочной железы, полученных в ходе оперативного вмешательства или трепанобиопсии опухоли у пациенток с верифицированным резектабельным первичным раком молочной железы pT1—4N3cM0 стадии. Помимо стандартного иммуногистохимиче-ского (ИГХ) исследования экспрессии рецепторов эстрогена и прогестерона, а также рецептора эпидер-мального фактора роста определяли экспрессию анти-апоптотического белка сурвивина. Использовали антитела Survivin Antibody Bwtin Conjugated (Pierce, Франция) и систему для автоматической визуализации BOND Polymer Detection Systems (Leica Microsystems, Германия). Окрашивание проводили в автоматиче-

ском режиме на иммуностейнере фирмы Leica Microsystems. Дальнейшее изучение микропрепаратов и их оценку осуществляли с применением микроскопов фирмы Leica.

Наряду с ИГХ-исследованием экспрессии сурви-вина в ткани карциномы при помощи полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией (ОТ-ПЦР) в режиме реального времени была исследована нормализованная экспрессия гена BIRC5, кодирующего этот белок. Полученный в ходе биопсии или оперативного вмешательства образец опухоли объемом до 5 мм3 замораживали, затем измельчали, лизировали. Выделение матричной РНК из лизированных клеток проводили в соответствии с инструкциями производителя наборов для выделения РНК (ООО «СИВитал», Республика Беларусь). Применяя технологию обратной транскрипции, синтезировали комплементарную ДНК, которую в последующем использовали для анализа экспрессии гена BIRC5 в режиме реального времени методом ОТ-ПЦР. Нормализованную экспрессию рассчитывали относительно уровня экспрессии референсного гена «домашнего хозяйства» с-ABL. Статистическую обработку полученных данных выполняли в соответствии с современными требованиями, предъявляемыми к проведению медико-биологических исследований. Качественные показатели представлены абсолютными и относительными величинами. Количественные признаки, не подчиняющиеся нормальному закону распределения, представлены о в виде медианы, интерквартильного диапазона, мини- ~ мального и максимального значений. В качестве меры g связи для количественных признаков, не подчиняю- g щихся нормальному закону распределения, рассчиты- то вали коэффициент корреляции Спирмена. Во всех S случаях различия считали статистически значимыми при уровне значимостир <0,05. Все значенияр были двусторонними. Для оценки значимости экспрессии к сурвивина как прогностического фактора смерти и прогрессирования заболевания проведен корреля- о ционный и многофакторный анализ с использованием 4 регрессионной модели пропорциональных рисков g Кокса и определением отношения рисков. Статисти- s ческая обработка результатов выполнена с использо- то ванием программы SPSS Statistics 10.0. S

Том 14 / Vol. 14

ОПУХОЛИ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ

TUMORS OF FEMALE REPRODUCTIVE SYSTEM Оригинальные статьи

CT

о

о £ £ re

Результаты и обсуждение

Учитывая тот факт, что в настоящее время отсутствуют такие ИГХ-критерии оценки уровня экспрессии сурвивина, как, например, для рецептора эпидер-мального фактора роста HER2/neu, оценку экспрессии таргетного антигена проводили по принципу да/нет, т. е. имеется экспрессия данного протеина в клетках или нет.

Экспрессия сурвивина определялась в 47 (70,15 %) образцах карциномы молочной железы.

Клинико-анатомическая характеристика опухолевого процесса и патоморфологическая характеристика образцов первичных карцином, в которых иммуноги-стохимически определялась экспрессия антиапопто-тического протеина сурвивина, представлены в табл. 1 и 2 соответственно.

Таблица 1. Клинико-анатомическая характеристика первичных карцином молочной железы, экспрессирующих сурвивин (n = 67) Table 1. Clinical and anatomical characteristics of primary survivin-positive breast carcinomas (n = 67)

Таблица 2. Патоморфологическая характеристика первичных карцином молочной железы, экспрессирующих сурвивин (n = 67) Table 2. Pathomorphological characteristics of primary survivin-positive breast carcinomas (n = 67)

о S

s

iz

Показатель Число образцов, n (%)

Сторона:

Affected side:

левая 25 (53,2)

left

правая 22 (46,8)

right

Локализация:

Location:

центральная 3 (6,4)

central

верхневнутренний квадрант 8 (17,0)

upper inner quadrant 3 (6,4)

нижневнутренний квадрант

lower inner quadrant 26 (55,3)

верхненаружный квадрант

upper outer quadrant 4 (8,5)

нижненаружный квадрант

lower outer quadrant 3 (6,4)

мультицентрический рост

multifocal tumor growth

T 1 21 (44,7)

2 24 (51,1)

3 2 (4,3)

N:

0 20 (42,6)

1 20 (42,6)

2 2 (4,3)

3 5 (10,6)

Стадия:

Stage:

I 12 (25,5)

IIA 16 (34,0)

IIB 12 (25,5)

IIIA 2 (4,3)

IIIC 5 (10,6)

Показатель Число образцов, n (%)

Parameter Number of specimens, n (%)

Морфологическое строение: Morphological subtype: тубулярная карцинома tubular carcinoma медуллярная карцинома medullary carcinoma муцинозная карцинома mucinous carcinoma неспецифическая карцинома unspecified carcinoma дольковая карцинома lobular carcinoma протоковая карцинома ductal carcinoma 1 (2,1) 1 (2,1) 2 (4,3) 1 (2,1) 8 (17,0) 34 (72,3)

Степень дифференцировки: Tumor differentiation grade: Gi g2 G3 2 (4,3) 23 (48,9) 22 (46,8)

Лимфовенозная стромальная инвазия: Lymphovenous stromal invasion: есть yes нет no 41 (87,2) 6(12,8)

Молекулярно-биологический подтип: Molecular subtype: люминальный А luminal A люминальный B HER2 -luminal B HER2 -люминальный B HER2+ luminal B HER2+ гипер-НЕК2-экспрессирующий HER2-overexpressing трижды негативный (базальный) triple negative (basal) 24 (51,1) 11 (23,4) 5(10,6) 3(6,4) 4 (8,5)

Уровень Ki-67, %: Ki-67 level, %: >15 <15 19 (40,4) 28 (59,6)

При анализе клинико-анатомических характеристик опухоли и экспрессии сурвивина в опухолевой ткани каких-либо статистически значимых корреляций выявлено не было.

Наибольший интерес представляет изучение экспрессии сурвивина в сравнении с известными прогностическими маркерами, определяемыми в опухолевой ткани, главным образом такими, как гистологический тип опухоли, молекулярно-биологический подтип опухоли, степень дифференцировки, лимфовенозная

ОПУХОЛИ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ^ 1*12018 TUMORS OF FEMALE REPRODUCTIVE SYSTEM Том 14 / Vol. 14

стромальная инвазия, индекс пролиферативной активности и др. (см. табл. 2).

Из представленных в табл. 2 данных видно, что экспрессия антиапоптотического белка сурвивина определялась наиболее часто в протоковой карциноме средней и высокой степени злокачественности и в большинстве случаев сочеталась с лимфовенозной стромальной инвазией.

Следует отметить, что экспрессия белка сурвивина обратно коррелировала с экспрессией рецептора эпи-дермального фактора роста HER2/neu: наиболее часто сурвивин экспрессировался в опухолях, не экспресси-рующих HER2/neu (r = 0,113,p >0,05).

Интересны полученные данные о взаимосвязи экспрессии сувивина и индекса пролиферативной активности Ki-67. Так, например, в 59,6 % случаев сур-вивин экспрессировался в опухолях с низким показателем Ki-67 — меньше 15 %.

Несмотря на то что данные статистически недостоверны в отношении экспрессии как HER2/neu, так и Ki-67 (p >0,05), и корреляционная зависимость слабая, данный факт может свидетельствовать о том, что опухоли, экспрессирующие сурвивин, находятся в особом состоянии — в стадии неактивной пролиферации, но ингибирования апоптоза. Графическое изображение сочетания экспрессии сурвивина и молеку-лярно-биологического подтипа опухоли представлено на рис. 1.

Качественная оценка экспрессии белка сурвивина также имеет определенное значение с точки зрения понимания функции данного протеина и возможных

1 Люминальный А/Luminal A

■ Люминальный B HER2-/Luminal B HER2 -

Люминальный B HER2+/Luminal B HER2+

i Гипер-HER2-экспрессирующий/Hyper-HER2-expressing

Трижды негативный (базальный)/Triple negative (basal)

Рис. 2. Цитоплазматическая экспрессия белка сурвивина в клетках первичной карциномы молочной железы, у. 200

Fig. 2. Cytoplasmic expression of survivin protein in primary breast carcinoma cells, у 200

потенциальных механизмов воздействия на данный сигнальный путь. Так, при ИГХ-исследовании установлено, что белок сурвивин экспрессировался преимущественно в цитоплазме опухолевых клеток первичной карциномы молочной железы (рис. 2).

Следует обратить внимание на то, что не вся опухоль экспрессирует данный белок, а экспрессия отмечается в ряде случаев в отдельных участках, что может свидетельствовать о гетерогенности раковых клеток в пределах самой опухоли. Гетерогенность раковых клеток в пределах одной опухоли является одним из важных моментов в патогенезе и развитии резистентности опухоли к проводимой терапии. Различные фенотипы опухолевых клеток в первичной

о

о £ £

<о

Рис. 1. Иммуногистохимическая экспрессия белка сурвивина в зависимости от молекулярно-биологического подтипа карциномы молочной железы, число случаев

Fig. 1. Immunohistochemical expression of the survivin protein depending on the molecular-biological subtype of breast carcinoma, number of cases

Рис. 3. Уровни нормализованной экспрессии гена BIRC5 в первичной карциноме молочной железы относительно уровня экспрессии референс-ного гена c-ABL (n = 67)

Fig. 3. Levels of normalized expression of BIRC5 gene in primary breast carcinoma relative to the expression level of reference gene c-ABL (n = 67)

о S S

iz

Том 14 I Vol. 14

ОПУХОЛИ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ

TUMORS OF FEMALE REPRODUCTIVE SYSTEM Оригинальные статьи

опухоли и, главным образом, наличие клеток на этапе эпителиально-мезенхимального перехода и стволовых клонов определяют прогноз течения опухолевого процесса.

Также при помощи ОТ-ПЦР в режиме реального времени была исследована экспрессия гена сурвивина ВШС5 в 67 образцах первичной карциномы молочной железы. Во всех без исключения образцах опухолевой ткани определялась экспрессия гена ВШС5, однако уровни рассчитанной нормализованной экспрессии от-

носительно уровня экспрессии референсного гена c-ABL варьировали в широком диапазоне (рис. 3, табл. 3).

Результаты корреляционного анализа приведены в табл. 4.

При анализе представленных данных установлено, что уровень нормализованной экспрессии гена ВШС5 достоверно умеренно коррелирует с экспрессией его продукта — белка сурвивина (г = 0,704, р <0,01) и слабо отрицательно — с экспрессией онкопротеина HER2/neu (г = -0,285,р <0,05).

Таблица 3. Показатели нормализованной экспрессии гена BIRC5 в первичной карциноме молочной железы Table 3. Normalized expression of the BIRC5 gene in primary breast carcinomas

Ген Показатель экспрессии Expression

Gene Медиана Минимальное значение Максимальное значение Верхняя граница нижнего квартиля Нижняя граница

1 Minimum Maximum ■ПИП

BIRC5

1,49

0,015

30,40

0,662

13,5

Таблица 4. Корреляция нормализованной экспрессии гена BIRC5 с другими молекулярно-биологическими и патологоанатомическими характеристиками первичной карциномы молочной железы

Table 4. Correlation between normalized BIRC5 expression and other molecular and pathoanatomical characteristics of primary breast carcinomas

Показатель Коэффициент корреляции Спирмена (r) Statistical significance (p)

Parameter Spearman's correlation coefficient (r)

Экспрессия Ki-67 (ИГХ) Ki-67 expression (IHC) -0,038 913 0,754

Экспрессия HER2/neu (ИГХ) HER2/neu expression (IHC) -0,285245 0,019

Экспрессия сурвивина (ИГХ) Survivin expression (IHC) 0,704 108 0,000

Экспрессия рецепторов эстрогена (ИГХ) Estrogen receptor expression (IHC) -0,149 550 0,227

Экспрессия рецепторов прогестерона (ИГХ) Progesterone receptor expression (IHC) -0,031 379 0,800

Экспрессия BIRC5 и HER2/neu (ПЦР) Expression of BIRC5 and HER2/neu (PCR) -0,153 308 0,215

T (размер опухоли) T (tumor size) 0,129 916 0,294

N (число метастазов в регионарных лимфатических узлах) N (number of regional lymph node metastases) 0,218 674 0,075

G (степень дифференцировки) G (tumor differentiation grade) 0,004 557 0,970

Лимфовенозная стромальная инвазия Lymphovenous stromal invasion 0,018 127 0,884

Примечание. ИГХ — иммуногистохимическое исследование, ПЦР — полимеразная цепная реакция. Полужирным выделена статистически значимая корреляция (p <0,05).

Note. IHC — immunohistochemistry, PCR — polymerase chain reaction. Statistically significant correlations are highlighted in bold (p <0.05).

Том 14 / Vol. 14

Таблица 5. Общая выживаемость пациенток в зависимости от наличия или отсутствия экспрессии суреиеина в первичной опухоли (n = 67) Table 5. Overall survival of patients depending on the survivin expression status of the primary tumor (n = 67)

Выживаемость, % (95 % доверительный интервал)

Группа Su rvival, % (95 % confidence interval)

Group 1-летняя 2-летняя 3-летняя

1-year 2-year 3-year

НЦ~0:^РеССИИ 93'61 (91,1-96,3) 85,88 (82,1-88,2) 77,16 (74,6-80,1)

Отсутствие экспрессии 100 100 100

Survivin-negative

Таблица 6. Безрецидивная выживаемость пациенток в зависимости от наличия или отсутствия экспрессии сурвивина в первичной опухоли (n = 67) Table 6. Relapse-free survival of patients depending on the survivin expression status of the primary tumor (n = 67)

Группа Выжш $аемость, Survival, % (95 % доверительный интервал) % (95 % confidence interval)

Group 1-летняя 2-летняя 3-летняя

1 1-year 2-year 3-year

Наличие экспрессии Survivin-positive 90,49 (89,5-93,1) 81,07 (79,2-83,1) 71,9 (70,1-74,2)

Отсутствие экспрессии Survivin-negative 100 100 100

1,04 1,02 1 1,00 :S 1 0,98 Ci - 0,96 1 0,94 CD CÛ S 0,92 .Û ' Cû 1 0,90 \o О 0,88 0,86 0

5 10 15 20 25 30 35 40 45 Время, мес / Time, months

Отсутствие экспрессии / Survivin-negative Наличие экспрессии / Survivin-positive

Рис. 4. Сравнение общей выживаемости пациенток с экспрессией сур-вивина в первичной опухоли и без экспрессии сурвивина (n = 67) Fig. 4. Comparison of overall survival between patients with survivin-positive and survivin-negative primary rumors (n = 67)

Важной составляющей данного исследования является определение значения экспрессии антиапопто-тического протеина сурвивина как прогностического и предиктивного фактора при терапии первичного неметастатического рака молочной железы. Проведен анализ общей и безрецидивной выживаемости в зави-

Безрецидивная выживаемость / Relapse-free survival

I

i- 1

L

0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 Время, мес / Time, months

- Отсутствие экспрессии / Survivin-negative

- Наличие экспрессии / Survivin-positive

Ж

Рис. 5. Сравнение безрецидивной выживаемости пациенток с экспрессией сурвивина в первичной опухоли и без экспрессии сурвивина (n = 67) Fig. 5. Comparison of relapse-free survival between patients with survivin-positive and survivin-negative primary rumors (n = 67)

симости от наличия экспрессии сурвивина, определя- о

емой ИГХ-методом в первичной опухоли. Несмотря 4

на малую выборку, были получены интересные дан- g

ные. Так, например, в группе пациенток без экспрес- s

сии сурвивина не было отмечено смертей и прогрес- то

сирования заболевания за анализируемый промежуток S

Том 14 / Vol. 14

ОПУХОЛИ ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ

TUMORS OF FEMALE REPRODUCTIVE SYSTEM Оригинальные статьи

Таблица 7. Результаты многофакторного анализа Table 7. Results of multivariate analysis

Показатель

Parameter

Экспрессия сур-вивина в первичной опухоли Survivin expression in the primary tumor

Статистические данные

Стандартная ошибка

е (ß)

2,364

1,285

4,884

Wald stat

3,380

0,041

Отношение рисков

10,634

Доверительный интервал

'°e ""erval

Верхняя

граница Upper limit

0,85 132,2

ß

времени. Напротив, наличие экспрессии антиапопто-тического сурвивина отрицательно сказывалось на показателях общей и безрецидивной выживаемости. Показатели различия общей и безрецидивной выживаемости были статистически достоверны (p = 0,041 и 0,037 соответственно) (табл. 5, 6; рис. 4, 5).

По данным проведенного многофакторного анализа было установлено, что на безрецидивную выживаемость наряду с общеизвестными факторами риска (количество метастатически пораженных регионарных лимфатических узлов, наличие экспрессии HER2/neu и др.) оказывает влияние такой фактор, как наличие экспрессии антиапоптотического протеина сурвивина в опухолевой ткани. Неблагоприятным независимым фактором риска развития прогрессирования является наличие экспрессии сурвивина в опухолевой ткани первичной карциномы молочной железы, а сочетание данного фактора с другими факторами риска приводит к повышению риска возврата болезни более чем в 10 раз.

Результаты анализа представлены в табл. 7.

I. Tamm и соавт. показали, что уровень сурвивина был повышен во всех 60 различных человеческих ли-о ниях опухоли [5]. В литературе имеются сведения ~ о том, что инактивация сурвивина в раковых клетках g позволяет остановить формирование микроканальцев, g что приводит к полиплоидии, а также к крупному iz апоптозу [6]. Еще одной из важных функций сурвиви-S на является регулирование уровня белка p53. Известно, что особенностью большинства опухолей со сверхэкспрессией сурвивина является полная потеря w дикого типа p53 [7]. В то же время исследования ,_ A. Mirza и соавт. доказывают, что существует связь о между уровнями сурвивина и p53. Белок p53 дикого 4 типа подавлял экспрессию сурвивина на уровне ма-g тричной РНК [7] как в клетках рака легкого, так s и в клетках рака молочной железы.

ГС

При исследовании образцов крови от больных раком ученые нашли антитела, специфические для сурвивина и отсутствующие у здоровых людей. Измерение уровня сурвивин-определенных антител в крови пациента является способом мониторинга развития опухоли, а определение экспрессии сурвивина при всех наиболее распространенных злокачественных опухолях (рак легкого, толстой кишки, поджелудочной, предстательной и молочной желез, саркомы мягких тканей, Т-клеточ-ный лейкоз) позволяет прогнозировать риск смерти [8]. Кроме того, исследования показали, что клетки рака молочной железы, гиперэкспрессирующие ген эпи-дермального фактора роста НЕЯ2/пеи, имели более высокие уровни сурвивина, которые коррелировали с увеличенным сопротивлением таксан-вызванному апоптозу. В то же время комбинация таксанов с ингибитором сурвивина привела к увеличенному апоптозу в HER2-гиперэкспрессирующих клетках рака молочной железы по сравнению с монотерапией [9, 10].

Заключение

Полученные данные по исследованию экспрессии гена ВШС5 и его белкового продукта — протеина сур-вивина из семейства ингибиторов апоптоза показывают возможность использования этого показателя в качестве одного из опухолеспецифических маркеров карциномы молочной железы. Положительная корреляционная связь экспрессии гена ВШС5 с таким известным прогностическим фактором, как экспрессия онкопротеина НЕЯ2/пеи — рецептора эпидермально-го фактора роста (г = —0,285, р <0,05), и его активная транскрипция (г = 0,704, р <0,01) позволяют рассматривать экспрессию ВШС5 и кодируемого им белка сурвивина как неблагоприятный прогностический фактор и использовать в качестве предиктивного маркера ответа на химиотерапию, в том числе и таргетную.

Том 14 / Vol. 14

ЛИТЕРАТУРА/REFERENCES

1. Stoecklein N.H., Klein C.A. Genetic disparity between primary tumours, disseminated tumour cells, and manifest metastasis. Int J Cancer 2010;126(3):589-98. PMID: 19795462. DOI: 10.1002/ ijc.24916.

2. Ambrosini G., Adida C., Altieri D.C. A novel anti-apoptotic gene, survivin, expressed in cancer and lymphoma. Nat Med 1997;3(8):917-21. PMID: 9256286.

3. Sah N.K., Khan Z., Khan G.J., Bisen P.S. Structural, functional and therapeutic biology of surviving. Cancer Lett 2006;244(2):164-71. PMID: 16621243. DOI: 10.1016/j.canlet.2006.03.007.

4. Olie R.A., Simoes-Wust A.P., Baumann B. et al. A novel antisense oligonucleotide targeting survivin expression induces apop-

tosis and sensitizes lung cancer cells to chemotherapy. Cancer Res 2000;60(11):2805-9. PMID: 10850418.

5. Tamm I., Wang Y., Sausville E. et al. IAP-family protein survivin inhibits caspase activity and apoptosis induced by Fas (CD95), Bax, caspases, and anticancer drugs. Cancer Res 1998;58(23):5315-20. PMID: 9850056.

6. Castedo M., Perfettini J.L., Roumier T. et al. Cell death by mitotic catastrophe: a molecular definition. Oncogene 2004;23(16):2825-37. PMID: 15077146. DOI: 10.1038/sj.onc.1207528.

7. Bonora M., Wieckowsk M.R., Chinopou-los C. et al. Molecular mechanisms of cell death: central implication of ATP synthase in mitochondrial permeability transition. Oncogene 2015;34(12):1475-86.

PMID: 24727893. DOI: 10.1038/ onc.2014.96.

8. Friedrichs B., Siegel S., Andersen M.H. et al. Survivin-derived peptide epitopes and their role for induction of antitumor immunity in hematological malignancies. Leuk Lymphoma 2006;47(6):9785-85. DOI: 10.1080/10428190500464062.

9. Lu J., Tan M., Huang W.C. et al. Mitotic deregulation by survivin in ErbB2-overex-pressing breast cancer cells contributes to Taxol resistance. Clin Cancer Res 2009;15(4):1326-34. PMID: 19228734. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-08-0954.

10. Jolly M.K., Tripathi S.C., Jia D. et al. Stability of the hybrid epithelial/mesenchy-mal phenotype. Oncotarget 2016;7(19):27067-84. PMID: 27008704. DOI: 10.18632/oncotarget.8166.

ORCID авторов / ORCID of authors

Е.А. Шляхтунов / E.A. Shlyakhtunov: https://orcid.org / 0000-0002-5906-5373

Конфликт интересов. Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов. Conflict of interest. The author declares no conflict of interest.

Финансирование. Исследование проведено без спонсорской поддержки. Financing. The study was performed without external funding.

CT

о

о E E re

о S

s

Статья поступила: 04.11.2018. Принята к публикации: 09.12.2018. "

Article received: 04.11.2018. Accepted for publication: 09.12.2018. S