CC BY
14
Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Комплексные проблемы сердечно-сосудистых заболеваний» (21-22 июня 2021 г.) 179
КЛЕТОЧНЫЕ ПЛАСТЫ НА ОСНОВЕ КЛЕТОК ЭПИКАРДИАЛЬНОГО МЕЗОТЕЛИЯ - EX VIVO МОДЕЛЬ ДЛЯ ИЗУЧЕНИЯ ЭПИКАРДИАЛЬНОГО
МИКРООКРУЖЕНИЯ Цоколаева З.И.1, 3, Дергилев К.В.1, Белоглазова И.Б.1, Василец Ю.Д.1, 2, Копейкина А.С.4,
Парфенова Е.В.1, 2
1 Федеральное государственное бюджетное учреждение «Национальный медицинский исследовательский центр кардиологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Российская Федерация; 2 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования «Московский государственный университет имени М.В. Ломоносова», Москва, Российская Федерация; 3 Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Федеральный научно-клинический центр реаниматологии и реабилитологии», Москва, Российская Федерация;4 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Российский национальный исследовательский медицинский университет имени Н.И. Пирогова"Министерства здравоохранения Российской Федерации, Москва, Российская Федерация
Введение. Результаты работ последних лет позволяют рассматривать эпикард, как важнейший элемент эндогенного регенеративного резерва сердца и регулятор его формирования в эмбриональном периоде. Клетки эмбрионального проэпи-карда подвергаются эпителиально-мезенхималь-ному переходу (ЭМП) и образуют эмбриональные мезенхимные прогениторные клетки, которые дифференцируются в клетки сосудов, фибробласты и участвуют в формировании кровеносных сосудов и стромы сердца, отвечая за компактизацию формирующегося миокарда. Во взрослом неповрежденном сердце эпикард неактивен и представлен тонкой оболочкой, состоящей из мезотелия и базальной мембраны. Однако, при повреждении сердца происходит активация эмбриональной программы в клетках эпикарда, они также подвергаются ЭМП, пролиферируют и дифференцируются в гладкомы-шечные клетки сосудов, перициты, миофибробла-сты, а также, возможно, в клетки эндотелия и кар-диомиоциты. Недавно открытая роль эпикарда в репаративном ответе сердца на повреждение делает перспективной разработку подходов к регуляции процесса активации эпикарда для увеличения его вклада в репарацию/регенерацию сердца. Изучение механизмов этой активации, которые во многом неясны, необходимо и требует наличия ex vivo модели эпикарда.
Цель. Разработать модель эпикардиального микроокружения ex vivo и охарактеризовать ее свойства.
Резульаты. В основе разработанной ex vivo модели эпикардиального микроокружения лежит метод формирования клеточных пластов на термочувствительных плашках, разработанный нами ранее для других типов клеток. Клеточные пласты
состоят из 4-5 слоев эпикардиальных клеток, которые образуют между собой плотные межклеточные контакты, и белков внеклеточного матрикса, наработанного этими клетками. Показано, что в составе сформированного эпикардиального пласта клетки формируют контакты на основе Е-кадгерина - белка организатора контактов на базально-боковых межклеточных поверхностях, что является отличительным признаком слоев эпителиоподобных клеток и указывает на отсутствие активности эпители-ально-мезенхимальной трансформации. В составе образованной клеточной структуры клетки имели низкий уровень пролиферации и апоптоза, что повторяет свойства эпикардиальных клеток in vivo. В составе пласта обнаружены белки внеклеточного матрикса (коллагены, ламинин и фибронектин), которые составляю основу базальной мембраны и обеспечивают нормальную архитектуру эпикарди-альной области. Разработанная модель сохраняла способность ответа на действие активирующих стимулов (гипоксия, рекомбинантные факторы TGFpi, PDGFbb), что приводило к перестройке ба-зального клеточного слоя, хаотичному перераспределению клеток и появлению признаков мезотели-ально-мезенхимального перехода.
Заключение. Таким образом, разработанная ex vivo модель эпикарда - «эпикардиальной клеточной ниши» - с определенной долей допущения повторяет характеристики эпикардиального микроокружения in vivo и реализует соответствующие клеточные ответы при воздействии патологических стимулов, что позволяет ее использовать для биомедицинских исследований.
Финансирование. Работа выполнена при финансовой поддержке гранта РНФ 19-15-00384.
