CC BY
130
Д • 7universum.com
ikUNIVERSUM:
/YY\ МЕДИЦИНА И ФАРМАКОЛОГИЯ
К ВОПРОСУ О МОРФОМЕТРИЧЕСКОЙ ОЦЕНКЕ ФУНКЦИОНАЛЬНОЙ ИММУНОМОРФОЛОГИИ ЛИМФОУЗЛОВ: ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ И НОВЫЙ АЛГОРИТМ
Волков Владимир Петрович
канд. мед. наук, рецензент НП СибАК,
РФ, г. Тверь E-mail: _ patowolf@yandex.ru
TO THE QUESTION OF THE MORPHOMETRIC ASSESSMENT OF FUNCTIONAL IMMUNOMORPHOLOGY OF LYMPH NODES: REVIEW OF LITERATURE AND NEW ALGORITHM
Vladimir Volkov
candidate of medical sciences, Reviewer of Non-Commercial Partnership "Siberian Association of Advisers"
Russia, Tver
АННОТАЦИЯ
Предлагается новый алгоритм исследования функциональной иммуноморфологии лимфатических узлов, опирающийся на определение на тканевом уровне пяти параметров и расчёт трёх коэффициентов. Новый подход позволяет объективно и точно оценить структурно-функциональное состояние органов как в норме, так и в условиях патологии, что отражает иммунный статус и общий уровень адаптационного потенциала организма.
ABSTRACT
The new algorithm of research of functional immunomorphology of lymph nodes relying on definition at the tissue level of five parameters and calculation of three coefficients is offered. New approach allows estimating objectively and precisely a structurally functional condition of organs both in norm,
Волков В.П. К вопросу о морфометрической оценке функциональной иммуноморфологии лимфоузлов: обзор литературы и новый алгоритм // Universum: Медицина и фармакология : электрон. научн. журн. 2015. № 7-8 (19) . URL: http://7universum.com/ru/med/archive/item/2549
and in the conditions of pathology, that reflects the immune status and the general level of adaptation potential of an organism.
Ключевые слова: лимфатические узлы, функциональная иммуно-
морфология, морфометрия, новый алгоритм исследования.
Keywords: lymph nodes, functional immunomorphology, morphometry, new algorithm of research.
Важную роль в адаптации организма к воздействию неблагоприятных эндо- и экзогенных факторов играет иммунная система (ИС), значение которой в поддержании иммунного гомеостаза и, следовательно, необходимого уровня адаптационного потенциала организма (АПО) [8; 44], трудно переоценить [13; 17; 18; 32; 37; 44]. Указанная функция ИС осуществляется при взаимодействии различных иммунокомпетентных органов, одним из которых являются лимфатические узлы (ЛУ), висцеральные и периферические (соматические) [13; 17; 18; 34; 37].
ЛУ — наиболее многочисленные органы иммуногенеза [21]. Их число у взрослого человека около 460, а общая масса составляет примерно 1 % массы тела (500—1000 г) [36]. Это в три-пять раз превышает массу самого крупного солитарного органа ИС — селезёнки.
ЛУ осуществляют две основные функции — иммунную и дренажно-детоксикационную [12; 21; 33], что позволяет отнести эти органы как к ИС, так и к лимфатической системе [10]. Дренажную функцию выполняет преимущественно мозговое вещество ЛУ, иммунная принадлежит коре, где выделяют три обособленные структурно-функциональные единицы: 1) лимфоидные фолликулы (ЛФ), 2) межфолликулярная зона, или корковое плато (КП) и 3) внутренняя кора, или паракортикальная зона, паракортекс (ПК) [20; 31; 38; 42].
В клеточном составе ЛФ преобладают В-лимфоциты, которые при антигенной стимуляции претерпевают бласттрансформацию и последующую
дифференцировку в плазмоциты, формируя светлые (герминативные) центры (ГЦ) ЛФ [17; 18; 20; 33; 38; 42]. При этом первичный ЛФ превращается во вторичный, что документирует наличие иммунного ответа гуморального типа [4; 18; 19; 38].
Напротив, популяция Т-лимфоцитов локализуется в КП и ПК [18—20; 32; 33; 38; 42], расширение которых свидетельствует о нарастании иммунного ответа клеточного типа [4; 18; 19; 38]. Смешанный тип иммунного ответа наблюдается при реактивном изменении всех иммунокомпетентных структур ЛУ [4; 19]. Поэтому морфологическое развитие указанных компонентов паренхимы ЛУ отражает уровень функциональной иммунной активности этих органов ИС [4; 18; 19; 32; 38].
Изучению функциональной иммуноморфологии ЛУ в различных условиях существования организма и при воздействии многочисленных эндо-и экзогенных факторов посвящено огромное число публикаций. Среди них важное место занимают работы, основанные на применении морфометрических методов исследования. При этом многочисленные авторы используют разнообразные подходы к количественной оценке состояния структурных компонентов ЛУ на тканевом уровне. Представляет определённый интерес несколько подробнее рассмотреть указанные подходы и попытаться критически оценить их информативность и целесообразность использования.
Часть авторов производили прямое измерение различных тканевых структур с помощью окуляр-микрометра, либо замеры проводились на изображениях ЛУ (зарисовках или фотоснимках). На основании полученных линейных размеров высчитывались площади изучаемых объектов и даже их объёмы. Полученные планиметрические и объёмные результаты представлялись в виде процентов от общей площади среза ЛУ или общего объёма органа [23; 24; 27; 39].
На наш взгляд, подобное определение количественных параметров, связанное с достаточно трудоёмкими вычислениями, является нецелесообразным и излишним. Действительно, в основе всех расчётов
по соответствующим формулам лежат линейные размеры тех или иных изучаемых структур. Поэтому производные величины (площадь и объём) не несут никакой новой информации, а их динамика полностью соответствует таковой первичных (линейных) количественных величин. Следует подчеркнуть, что это положение справедливо не только в отношении морфометрии ЛУ, но и вообще для морфометрических исследований в целом [1].
Распространённым и логически вполне обоснованным приёмом количественного изучения морфологии ЛУ является определение методом точечного счёта площадей, занимаемых теми или иными тканевыми компонентами [10—12; 14; 25; 26; 28]. При этом используются различные окулярные сетки. Из них наиболее распространены модели, предложенные Г.Г. Автандиловым [2] и С.Б. Стефановым [35].
Отношение числа точек, приходящихся на каждую структуру, к общему числу точек на срезе, выраженное в процентах, характеризует долю указанных структурных элементов в ткани ЛУ в целом. Увеличение микроскопа при проведении подлобного исследования подбирается таким образом, чтобы на каждую структуру приходилась хотя бы одна точка окулярной сетки [1; 2].
Кроме того, некоторые исследователи подсчитывали число ЛФ в кортикальном слое в целом, а также по отдельности число первичных и вторичных ЛФ [24; 27; 39].
Морфометрическую характеристику функциональной морфологии ЛУ существенно дополняют количественные индексы и коэффициенты, используемые разными авторами [3; 6; 14; 25; 30]. В частности, имеет определённое значение корково-мозговой (К/М) индекс, на основании значений которого выделяются три типа ЛУ — фрагментированный, компактный и промежуточный [5], что имеет серьёзное значение при оценке дренажной функции ЛУ.
В диссертации Д.Е. Батушенко (2004) [3], кроме К/М индекса, вычислялись также такие производные количественные показатели, как Т/В
коэффициент и паренхиматозно-стромальный индекс коркового и мозгового вещества ЛУ.
Так называемый фолликулярный коэффициент [9; 14], представляющий собой отношение числа вторичных ЛФ к числу первичных, отражает выраженность иммунного ответа гуморального типа, осуществляемого за счёт развития ГЦ, где происходят процессы плазмотизации В-лимфоцитов и антителопоэза.
В настоящее время достаточно широкое распространение получили цифровая фотография и различные компьютерные программы [16; 40; 41], позволяющие автоматизировать процесс морфометрического изучения ЛУ и значительно сократить трудоёмкость и продолжительность исследований.
С помощью рассмотренных морфометрических методов изучалось состояние различных тканевых структур ЛУ. Их перечень различен у разных авторов в зависимости от целей проводимого исследования. Во многих работах приводятся морфометрические характеристики всех компонентов паренхимы и стромы ЛУ [10—12; 14; 25; 26; 28]. Другие исследователи ограничивались несколькими параметрами в разнообразных сочетаниях [22; 23; 27; 29; 39; 43].
Критически оценивая представленный литературный материал, касающийся морфометрического изучения ЛУ, следует, на наш взгляд, признать наиболее привлекательным алгоритм, используемый в работах сотрудников НИИ клинической и экспериментальной лимфологии СО РАМН (г. Новосибирск) [10—12; 14; 25; 26; 28]. При этом методом точечного счёта определяются удельные площади (в процентах к общей площади среза ЛУ) таких структур, как капсула, субкапсулярный синус, КП, первичные ЛФ (Ф1), вторичные ЛФ (Ф2), ПК, мякотные тяжи, мозговой синус. При необходимости рассчитываются К/М индекс и фолликулярный коэффициент (индекс Ф2/Ф1). Указанный алгоритм позволяет достаточно объективно судить об уровне обеих главный функций ЛУ — иммунной и дренажной.
Однако все перечисленные методы морфометрического изучения ЛУ, каждый из которых имеет свои плюсы и минусы, всё-таки недостаточно
наглядно отражают более тонкие нюансы изменений морфологического субстрата иммунной функции ЛУ в различный условиях существования организма. Речь идёт о выраженности и соотношении иммунных ответов гуморального и клеточного типов, а также о том, за счёт каких процессов меняется уровень функциональной иммунной активности ЛУ гуморального типа — гипер-/гипоплазии ЛФ в целом или гипер-/гипотрофии отдельно взятых ЛФ.
Избежать отмеченных недостатков позволяет, на наш взгляд, предлагаемый нами новый подход к проблеме, основанный как на опыте других исследователей, в частности приведённом в обзорной части статьи, так и на собственных наработках.
Здесь следует отметить, что предлагаемый метод предназначен для изучения на тканевом уровне морфологической основы лишь иммунной функции ЛУ, оставляя в стороне дренажную функцию органа. Поэтому число структурных объектов ткани ЛУ, подвергнутых морфометрии, существенно сокращено. В этом также имеется определённый плюс, так как экономится время исследования и снижается его трудоёмкость.
Новый алгоритм предполагает определение пяти морфометрических параметров, на основе которых рассчитываются три коэффициента (индекса). Рассмотрим последовательно процедуру исследования.
Изучаются шесть гистологических срезов с каждого объекта, измерения проводятся в шести полях зрения каждого среза, с последующим нахождением средних величин указанных параметров, как рекомендуют С.А. Кащенко и О.Н. Петизина [16]. Как показывает опыт аналогичного исследования селезёнки [7; 15], этого количества наблюдений вполне достаточно для получения репрезентативных результатов.
Прежде всего, методом точечного счёта в поле зрения микроскопа при малом увеличении находятся процентные параметры иммунокомпетентных структур коры ЛФ: 1) площадь всех ЛФ ^лф). 2) площадь КП (Sra)
и 3) площадь ПК ^пк).
Затем с помощью окуляр-микрометра измеряются диаметры ЛФ флф) и их ГЦ (Dra,). Учитывая тот факт, что обычно форма ЛФ и их ГЦ в срезах ЛУ не является строго округлой [16; 31; 38], находятся два параметра — максимальный (а) и минимальный (в) диаметры ЛФ и/или ГЦ. Усреднённый показатель этих величин находится по формуле [45]:
Описанные величины лежат в основе расчёта соответствующих индексов, отражающих уровень функционирования изученных структурных компонентов ЛУ, то есть интенсивность иммунного ответа гуморального и/или клеточного типов.
Первым рассчитывается фолликулярный коэффициент (ФК) по формуле:
ФК интегрально отражает связь между показателями Sлф и Dлф, с разных позиций характеризующих количественную сторону состояния лимфоидного аппарата коры ЛУ. Знаменатель в формуле (2) взят произвольно с целью получения удобных для использования конечных цифровых величин.
Здесь важно подчеркнуть, что ФК является величиной достаточно условной. Применение этого показателя целесообразно и репрезентативно только в сравнительном с условной нормой (УН) плане для оценки уровня функциональной активности лимфоидного аппарата ЛУ при различных патологических состояниях.
(1).
(2).
Так, всякое увеличение какого-либо из показателей, входящих в формулу ^лф или Dлф), приведёт к росту ФК, и наоборот. Если одновременно
изменяются оба исходных параметра, то здесь возможны два варианта колебаний ФК.
При однонаправленном процессе, то есть одновременном нарастании (или убывании) Sлф и Dлф, значение ФК окажется значительно выше (или значительно ниже) УН. При разнонаправленном процессе, когда один показатель увеличивается, а другой уменьшается, ФК может мало отличаться от УН либо относительно незначительно отклоняться в ту или иную сторону в зависимости от того, какой из параметров изменится в большей степени.
Указанные отклонения ФК от УН, с учётом направленности изменений Sлф и Dлф, показывают, какой из патологических процессов превалирует: гипер-/гипоплазия В-клеточного компонента коры ЛУ в целом или гипер-/гипотрофия отдельных ЛФ.
Кроме значений Dлф, определённую информацию о функциональном состоянии ЛФ даёт также такой показатель, как Dra,, как известно, служащих местом пролиферации В-лимфоцитов и их дифференцировки в плазматические клетки [17; 18; 20; 33; 38; 42]. При этом целесообразно определять второй предлагаемый нами коэффициент, выраженный в процентах, — так называемый герминативно-фолликулярный индекс (ГФИ), рассчитываемый по формуле:
ГФИ= ~~ х 100
и лф
(3).
Этот индекс объективно отражает степень развития светлых центров, что ассоциируется с выраженностью иммунного ответа гуморального типа [4; 18; 19; 32; 38]. При этом следует отметить, что ГФИ так же, как и ФК, является величиной условной, поэтому данный индекс применим только в сравнительном плане для оценки уровня указанного иммунного ответа
по сравнению с УН. Варианты изменений ГФИ представляются в следующем виде.
Всякое увеличение числителя приведённой формулы (3), то есть Dra,, приведёт к нарастанию значения ГФИ. Наоборот, снижение величины Dr, вызовет уменьшение ГФИ. С другой стороны, наблюдается обратное соотношение ГФИ и Dлф: при увеличении Dлф происходит снижение ГФИ, а при уменьшении — нарастание.
Если одновременно изменяются оба исходных параметра (Dr, и Dлф), то здесь возможны два варианта колебаний ГФИ. Во-первых, при однонаправленном процессе, то есть одновременном нарастании или убывании Dr, и Dлф, значение ГФИ может мало отличаться от УН. Всё будет зависеть от выраженности изменения каждого параметра. При равномерном (пропор,иональном) характере изменений обоих указанных показателей величина ГФИ примерно равна УН. Преобладание темпов сдвига какого-либо из исходных параметров вызывает отклонение ГФИ от УН в ту или иную сторону в зависимости от того, какой из показателей изменится в большей степени. Если это числитель (Dra,), то ГФИ превысит УН (при одновременном нарастании Dгц и Dлф) или, наоборот, окажется меньше (если оба параметра снижаются).
Если в большей степени изменяется знаменатель дроби флф), наблюдается обратное явление: ГФИ будет несколько выше УН при опережающем снижении Dлф или ниже УН при преимущественном повышении величины Dлф.
Во-вторых, при разнонаправленном процессе, когда Dгц увеличивается, а Dлф уменьшается (или наоборот), ГФИ окажется значительно выше (или значительно ниже) УН.
При значениях ГФИ, близких к УН, оценку состояния лимфоидного аппарата селезёнки следует проводить исходя из абсолютных величин Dra, и Dлф, сравнивая их с УН.
Таким образом, описанные количественные показатели и коэффициенты показывают уровень развития В-клеточной популяции ЛУ, что, как известно, отражает напряжённость процесса гуморального иммунитета в организме [4; 18; 19; 32; 38].
С другой стороны, Т-лимфоциты, как упоминалось ранее, локализуются главным образом в пределах КП и ПК [18; 19; 20; 32; 33; 38; 42]. Поэтому для количественной характеристики Т-клеточного лимфоидного компонента ЛУ достаточно определить сумму таких параметров, как Sra и Sпк, которая объективно отражает степень выраженности иммунного ответа клеточного типа [4; 18; 19; 32; 38].
Причём представляется целесообразным подсчитать ещё один предлагаемый нами индекс — так называемый лимфоидный коэффициент (ЛК). Его вычисление производится по формуле:
(4).
ЛК показывает соотношение объёмов зон локализации В- и Т-лимфоцитов, что объективно характеризует выраженность и соотношение иммунных ответов гуморального и клеточного типов соответственно. И этот индекс, как и предыдущие, применим лишь в сравнительном плане с УН. При этом изменения ЛК в зависимости от колебаний величин числителя и знаменателя дроби аналогичны описанным для ГФИ.
Таким образом, предлагаемый новый морфометрический подход к изучению функциональной иммуноморфологии ЛУ позволяет объективно и точно оценить структурно-функциональное состояние органа как в норме, так и в условиях патологии, что отражает иммунный статус и общий уровень АПО.
Список литературы:
1. Автандилов Г.Г. Медицинская морфометрия: руководство. — М.:
Медицина, 1990. — 384 с.
2. Автандилов Г.Г. Морфометрия в патологии. — М.: Медицина, 1973. — 248 с.
3. Батушенко Д.Е. Функциональная анатомия регионарных лимфатических узлов в условиях использования различных методов оптимизации остеосинтеза при дефекте большеберцовой кости в эксперименте: Автореф. дис. ...канд. мед. наук. — Новосибирск, 2004. — 19 с.
4. Белянин В.Л., Цыплаков Д.Э. Диагностика реактивных гиперплазий лимфатических узлов. — СПб-Казань: Чувашия, 1999. — 328 с.
5. Бородин Ю.И. Индивидуальные особенности анатомической функции подколенных лимфатических узлов и транспортная функция последних // Вопросы экспериментальной морфологии лимфатической системы и соединительнотканного каркаса: науч. тр. Новосибирского мед. ин-та. — Новосибирск, — 1968. — Т. 50. — С. 34—43.
6. Власов В.А. Морфометрические исследования зон брыжеечных
лимфоузлов в антенатальный период развития [Электронный ресурс]. — Режим доступа. — URL:
http://www.rusnauka.com/3_ANR_2012/Medecine/8_100040.doc.htm (дата обращения: 12.07.2015).
7. Волков В.П. Новый алгоритм морфометрической оценки функциональной иммуноморфологии селезёнки // Universum: Медицина и фармакология: электрон. научн. журн. — 2015. — № 5—6 (18) [Электронный ресурс]. — Режим доступа. — URL: http://7universum.com/ru/med/archive/item/2341 (дата обращения: 11.07.2015).
8. Волков В.П., Росман С.В. К оценке адаптационных возможностей организма при шизофрении // Псих. здоровье. — 2013. — № 7. — С. 50—54.
9. Горчакова О.В., Горчаков В.Н. Возрастные изменения паховых
лимфоузлов и их озоно- и фитокоррекция. — Saarbrucken: Palmarium Academic Publishing, 2014. — 170 c.
10. Горчакова О.В., Горчаков В.Н. Клеточные популяции функциональных компартментов мезентериальных лимфоузлов на разных этапах онтогенеза и после фитотерапии // Фундамент. исслед. — 2015. — № 1—2. — С. 249—255.
11. Горчакова О.В., Горчаков В.Н. Сочетанная озоно- и фитотерапия в оптимизации структуры и функции лимфоузла на этапе позднего онтогенеза // Медицина и образование в Сибири. — 2014. — № 2. — С. 42—43.
12. Горчакова О.В., Горчаков В.Н. Структурно-функциональный ответ
лимфоузла на озоноаппликацию в разные возрастные периоды // Бюлл. СО РАМН. — 2013. — Т. 33, — № 6. — С. 117—123.
13. Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Митин Ю.А. Клиническая иммунология: рук-во для врачей. — СПб.: Питер, 2001. — 576 с.
14. Катковская А.Г., Горчаков В.Н. Структурная реорганизация лимфатического узла при лимфотропной реабилитации дисфункции толстой кишки в эксперименте. // Вестн. НГУ. — Серия: биология, клиническая медицина. — Новосибирск, — 2009. — Т. 7, — № 3. — С. 9—15.
15. Кащенко С.А., Золотаревская М.В. Изменения морфометрических показателей белой пульпы селезёнки крыс под воздействием иммунотропных препаратов // Укр. мед. альм. — 2011. — Т. 14, — № 5. — С. 74—77.
16. Кащенко С.А., Петизина О.Н. Морфометрические показатели лимфатических узлов крыс после применения иммунофана [Электронный ресурс]. — Режим доступа. — URL: http://gisap.eu/ru/node/636 (дата обращения: 12.07.2015).
17. Клиническая иммунология и аллергология / пер. с англ. / под ред. Г. Лолора-мл., Т. Фишера, Д. Адельмана. — М.: Практика, 2000. — 806 с.
18. Клиническая иммунология и аллергология / пер. с нем. — 2-е изд., перераб. и доп. / под ред. Л. Йегера. — М.: Медицина, — 1990. — Т. 1. — 528 с.
19. Ковригина А.М. Морфологическая характеристика реактивных изменений лимфоузлов // Онкогеметол. — 2009. — Т. 2, — № 4. — С. 297—305.
20. Коненков В.И., Бородин Ю.И., Любарский М.С. Лимфология. — Новосибирск: Манускрипт, 2012. — 1179 с.
21. Краюшкин А.И., Александрова Л.И., Гончаров Н.И. История кафедры анатомии человека: монография / под ред. проф. В.Б. Мандрикова. — Волгоград, 2010. — 180 с.
22. Краюшкина Н.Г. Закономерности динамики морфометрических параметров лимфатических узлов при воздействии переменного электромагнитного поля промышленной частоты (экспериментально -морфологическое исследование): Автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Волгоград, 2013. — 19 с.
23. Майбородина В.И. Общие и специфические закономерности реакции лимфатических узлов различных регионов на неоадъювантную терапию при раке (экспериментально-клиническое исследование): Автореф. дис. ... д-ра мед. наук. — Барнаул, 2009. — 38 с.
24. Мелехин С.В. Особенности строения брыжеечных лимфоузлов при иммунизации мышей первого поколения, родившихся от облученных родителей // Усп. совр. естествознания. — 2003. — № 11. — С. 70—71.
25. Мельникова Е.В., Чевагина Н.Н. Морфофункциональное состояние регионарного лимфоузла щитовидной железы в условиях артифициального гипертиреоза и коррекции на этапе реабилитации // Бюлл. СО РАМН. — 2005. — № 1(115). — С. 17—20.
26. Микроанатомическая организация трахеобронхиального лимфоузла крыс при длительном содержании их в условиях производства (нефтепереработки) / Е.Ж. Бекмухамбетов, Т.Ж. Умбетов, Г.А. Мутигулина [и др.] // Биол. вестн. — 2013. — Т. 16, — № 1. — С. 19—23.
27. Мищенко В.А., Касабьян Е.С. Морфологии брыжеечных лимфатических узлов // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической морфологии. — Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2010. — С. 52—55.
28. Морфология органов иммуногенеза при воздействии электромагнитных излучений / Л.И. Александрова, Н.Г. Краюшкина, В.Л. Загребин [и др.]. — Вестн. ВолгГМУ. — 2013. — Вып. 2(46). — С. 32—36.
29. Оздоровительное воздействие сапропеля на лимфоузлы в эксперименте / Н.А. Бубенко, И.Е. Сорокин, Т.А. Никифорова [и др.] // Усп. совр. естествознания. — 2010. — № 7. — С. 33—36.
30. Пищальников Э.А. Внутриорганное лимфатическое русло и региональные лимфатические узлы брыжеечного отдела тонкой кишки при блокаде грудного протока: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Оренбург, 1996. — 30 с.
31. Савилова О.В., Тайгузин Р.Ш. Макро- и микроанатомия лимфатических узлов тонкого отдела кишечника коз оренбургской породы // Учёные записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им Н.Э. Баумана. — 2012. — Т. 212. — С. 130—137.
32. Сапин М.Р., Этинген Л.Е. Иммунная система человека. — М.: Медицина, 1996. — 420 с.
33. Сапин М.Р., Юрина Н.А, Этинген Л.Е. Лимфатический узел. — М.: Медицина, 1978. — 271 с.
34. Современные данные о структурно-функциональной организации лимфатического узла / Ю.Е. Выренков, В.К. Шишло, Ю.Г. Антропова Ю.Г. [и др.] // Морфология. — 1995. — № 3. — С. 84—90.
35. Стефанов С.Б. Морфометрическая сетка случайного шага как средство ускоренного измерения элементов морфогенеза // Цитология. — 1974. — № 6. — С. 785—787.
36. Томилов А.Ф. Атлас клинической медицины. Внешние признаки болезней: руководство. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. — 176 с.
37. Хаитов Р.М., Ярилин А.А., Пинегин Б.В. Иммунология: атлас. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. — 624 с.
38. Хэм А., Кормак Д. Гистология: пер. с англ. — М.: Мир, 1983. — Т. 2, Гл. 13.Лимфоидная ткань. — С. 191—252.
39. Черненко Н.В., Катаев С.И., Кулида Л.В. Средостенные, брыжеечные и
паховые лимфатические узлы белых крыс в норме и после удаления селезёнки // Совр. пробл. науки и образования. — 2015. — № 2 [Электронный ресурс]. — Режим доступа. — URL: www.science-
education.ru/122-17377 (дата обращения: 12.07.2015).
40. Шефер Е.Г. Постстрессовая иммуноморфология периферических лимфоидных органов в возрастном аспекте: Автореф. дис. ... канд. мед. наук. — Волгоград, 2011. — 22 с.
41. Овчаренко В.В., Маврич В.В. Комп’ютерна програма для морфометричних дослщжень «Morpholog» // Свщоцтво про реестрацш авторського права на твiр № 9604, дата реестраци 19.03.2004.
42. Isaacson P.G. Normal structure and function of lymph nodes / J.O’D. McGee, P.G. Isaacson, N.A. Wright ^ds.). Oxford Textbook of Pathology. — Oxford: Oxford Univ. Press, 1992. — Р. 1745—1756.
43. Local popliteal lymph node reactions to hexachlorobenzene and pentachlorobenzene: comparison with systemic effects / Р. Schielen, А. Van Der Pijl, R. Bleumink [et al.] // Immunopharmacol. — 1996. — V. 31, — № 2—3. — P. 171—181.
44. Lymphatic system: morphofunctional consideration / G. Sullustio,
C. Giangregorio, L. Cannas [et al.] // Rays. — 2000. — V. 25, — № 4. — P. 419—427.
45. Williams M.A. Quantitative methods in biology // Practical methods in electron microscopy / A.M. Glauert (ed.). — Amsterdam: North-Holland, — 1977. — V. 6. — P. 48—62.
