CC BY
37
К вопросу микробиологии и вирусологии загрязненных вод
Г.А.Гулиева
Азербайджансикй Государственный институт усовершенствования
врачей им.А.Алиева, г.Баку
Загрязнение окружающей среды - проблема, которая приобрела в настоящее время мировое значение.
Научно-технический прогресс и рост индустриализации, химизация всех аспектов жизнедеятельности человека в сочетании с демографическим взрывом и урбанизацией -все это создало широкие предпосылки для прогрессирующего загрязнения окружающей среды, в первую очередь - химического, но и не в меньшей степени опасного для здоровья человека - биологического.
Особого внимания заслуживает вопрос биологического загрязнения поверхностных вод, взаимосвязи биоценоза вод с микроорганизмами - бактериями, вирусами и т.д.
Наибольший интерес представляют патогенные микроорганизмы, распространяемые водой.
В этом плане заслуживают особое внимание сточные воды, рассматриваемые как резервуар отходов.
Частое обнаружение патогенных микроорганизмов у домашних и диких животных подтверждает значение поступления в сточные воды фекальных загрязнений от всех теплокровных животных, а не только от человека.
В это же время хозяйственно - бытовые сточные воды отражают эпидемиологическую ситуацию, преобладающую в данный момент, отсюда и целесообразность исследования сточных вод на присутствие патогенной микрофлоры - бактерий, вирусов и так далее.
В связи с этим, целевой установкой наших исследований было выявление спектра бактериальной и вирусной флоры в сточных водах города Баку.
Вышеотмеченное представляло интерес
с двух позиций: первое - установление степени очищенности сточных вод, в конечном счете, спускаемые в море, а второе - установление спектра циркулирующей микрофлоры (бактерий, вирусов) среди населения обследуемого региона, имеющее значение с эпидемиологических позиций.
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ. Расценивая сточные воды как постоянный приемник энтеровирусов и бактерий во внешней среде и, учитывая относительно меньшую трудоемкость исследований при применении метода обследования сточных вод по сравнению с методом индивидуального обследования, нами с целью изучения спектра циркулирующих среди населения энтеровирусов и бактериальной флоры начато вирусологическое обследование сточных вод с параллельным бактериологическим исследованием.
При санитарно-бактериологическом анализе сточных вод бактериальными показателями ее загрязнения чаще всего являются сапрофитные бактерии, способные расти на стандартных питательных средах и указывающие на наличие легко разлагающихся органических веществ, и бактерии - обитатели кишечника человека и теплокровных животных, указывающие на загрязнение воды фекальными массами.
Метод заключается в определении в 1 мл воды общего содержания мезофильных аэробных и факультативных анаэробных бактерий, способных расти на питательном агаре при температуре 37°С±0,5°С в течении 24±2 ч, образуя колонии, видимые при увеличении под микроскопом.
Определение числа сапрофитных микроорганизмов, растущих при температуре 20-22°С в течении 48 часов.
Определение числа сапрофитных микроорганизмов, растущих при температуре 37°С в течении 24 часов.
Соотношение численности этих групп микроорганизмов позволяет судить о динамике и интенсивности процесса самоочищения. При температуре 20-22°С вырастает больше сапрофитных микроорганизмов, чем при температуре 37°С.
За период 2009-2010 гг были проведены вышеот-меченные исследования на материале двух очистных сооружений г Баку - в поселке Зых и Говсаны.
Бактериологические исследования сточных вод проводили два раза в месяц в течение отмеченного вы-
Таблица 1. Результаты бактериологического исследования сточных вод
Годы наблюдения Место сбора проб сточных вод Условия забора проб сточных вод Количество исследованных проб Спектр выделенных бактерий
2009 Зыхская очистная станция До механич. очистки 72 E.coli, Str.faecalis, S.flexneri, Sal .typhimurium
После механич. очистки E.coli, Str.faecalis, S.flexneri, Sal .typhimurium
После хлорирования Sal .typhimurium
Говсаны, очистная станция До механич. очистки 96 Clostridium perfringens, Staph.aureus, E.coli, Str.faecalis
После механич. очистки Staph.aureus, E.coli, Str.faecalis, S.flexneri
После биологической очистки E.coli, S.flexneri
После хлорирования E.coli
2010 Итого Зыхская очистная станция До механич. очистки 70 Общие колиформы, Str.faecalis,Pseudomonas aeruginosa
После механич. очистки Общие колиформы, Str.faecalis, Pseudomonas aeruginosa
После хлорирования Pseudomonas aeruginosa
Говсаны, очистная станция До механич. очистки 92 E.coli, S.flexneri, S.typhi, Str.faecalis, Y.enterocolitica
После механич. очистки S.flexneri, S.typhi
После биологической очистки Y.enterocolitica, Pseudomonas aeruginosa
После хлорирования Pseudomonas aeruginosa
330 проб
ше периода.
Материал для исследования отбирался в бассейне сточных вод до механической очистки, после механической, биологической очистки и хлорирования сточных вод перед спуском их в море.
Бактериологические исследования проведены двумя методами: культуральным, общепринятым в бактериологии [1] и методом экспресс - тестов с применением тест - системы RIDA CHECK [2].
В опыте были использованы готовые подложки RIDA COUNT, предназначенные для микробиологического анализа.
Готовые подложки RIDA COUNT представляют собой гибкие полимерные карточки, на которые нанесены пластифицированные хромогенные питательные среды с необходимыми селективными добавками и индикаторами. Карточки покрыты нетканым пористым материалом, обеспечивающим равномерное и быстрое распределение исследуемой пробы по пове-
рхности питательной среды.
Стерильность подложек RIDA COUNT обеспечивается с помощью прозрачной полимерной пленки, которая снимается перед испытанием и опять фиксируется на карточке во время инкубации.
В нашем опыте использованы подложки для количественного определения следующих микроорганизмов: RIDA COUNT Total - общее микробное число, RIDA COUNT Enterobacteriaceae - энтеробактерии, RIDA COUNT Coliform - колиформы (БТКП), RIDA COUNT E.coli - E.coli, RIDA COUNT E.coli/Coliform -E.coli и колиформы (БТКП), RIDA COUNT Yeast& mould Rapid - дрожжи и плесени, RIDA COUNT Salmonella - Сальмонелла, RIDA COUNT Salmonella Enterobacteriaceae - сальмонеллы и Энтеробактерии, RIDA COUNT Staph.aureus - стафилококк.
Для удобства применения подложки каждого вида имеют специальную цветовую кодировку.
За период наблюдения собрано и исследовано
Таблица 2. Аденовирусы и ряд нетипируемых цитопатогенных агентов, выделенных из проб
сточных вод
Год Место сбора проб сточных вод Количество исследованных проб Результат вирусологического исследования
2009 Зыхская очистная станция 24 ECHO7-2 NPEV - 3-Polio 3-2 ECHO „-i Polio +EV-
2010 Зыхская очистная станция 28 Polio 2+NPEV-1 ECHO20-I Polio i-i Polio 2+ECHO11-i Cox B1-6
Итого 52
330 проб сточных вод с очистных сооружений.
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ. Из патогенных микроорганизмов чаще других обнаруживались сальмонеллы, шигеллы, энте-ропатогенные E.coli, Str.faecalis, S.flexneri, Sal.typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium perfringens, Staph.aureus (таблица 1).
Следует отметить, факт выделения бактериальной флоры E.coli, Str.faecalis, S.flexneri, Sal.typhimurium, Pseudomonas aeruginosa, Clostridium perfringens, Staph.aureus и после механической очистки аналогичного спектра, а более эффективная очистка наблюдалась в случае биологической очистки и хлорирования. Но, обнаружение бактериальной флоры и после хлорирования диктует необходимость поиска более эффективных методов очистки, включая поиск новых дезин-фектантов.
При проведении вирусологических исследований применены общепринятые в вирусологии методы исследования с использованием перевиваемой линии культуры тканей L-20B [3, 4].
При индикации энтеровирусов был применен метод Риордана - метод концентрирования энтеровирусов из сточных вод [5].
За период 2009-2010 гг. было собрано 52 пробы сточных вод с выделением довольно широкого спектра энтеровирусов из группы полиовирусов, Coxsackie, ECHO. Наряду с отмеченным были выделены аденовирусы и ряд нетипируемых цитопатогенных агентов (таблица 2).
В связи с отмеченным логичен факт, что исследование сточных вод являются экономичным методом эпидемиологического мониторинга за инфекциями.
ЛИТЕРАТУРА
1. Тимаков В.Д., Левашев В.С., Борисов Л.Б. Микробиология, с.69-93
2. "RIDA CHECK" - r-biopharm A.G.; 10 Medium Sheetscoated with read to use culture medium.
3. Руководство по вирусологическим исследованиям полиомиелита - Глобальная программа по вакцинам и иммунизации. (ГПВИ), РПИ, ВОЗ, Женева, Москва, 1998, с.42-52.
4. Джон Пол "Культура клеток и тканей", Гос. изд. мед. литературы, Медгиз, 1963, с.176-252.
5. Riordan J. Isolation of enteroviruses from sewage before and after vaccine administration - J. biol. and med., 1962, v.34, N.5, p.512-520.
SUMMARY
To the questions of microbiology and virology of polluted waters GGuliyeva
A.Aliyev's Azerbaijan Institute of Physicians Improvement, Baku
The authors present results of analyses of the data obtained revealed the specter of viruses and bacteria floras in sewage of Baku. It was established the circulation of polioviruses (the vaccine variant), ECHO and Coxsackie viruses and bacteria: E.coli, Salmonella etc. among the population.
Поступила 31.05.2011
