CC BY
6
1 л/мнн. Извлекают НГЖ-4 из фильтра и силнка-геля гексаном или диэтиловым эфиром, отгоняют растворитель до 0,2—0,5 мл и наносят на хрома-тографическую пластинку. Параллельно наносят стандартные растворы, помещают в подвижную фазу, проявляют по реакции азосочетания с диазо-тированным п-ннтроаннлином или 4-амнноантипи-рином после соответствующего гидролиза.
Концентрацию НГЖ-4 в воздухе определяют по формуле:
у **
где X — содержание НГЖ-4 (в мг/м3); А — количество вещества, обнаруженное в хроматогра-фируемой пробе (в мкг); V! — объем хроматогра-фируемой пробы (в мл); V — общий объем пробы (в мл); — объем (в л) исследуемой пробы воздуха. приведенный к стандартным условиям (С. И. Муравьева и соавт.).
Концентрацию А высчитывают по формуле: ,__Сст-Snp
Л- Ser '
где А — количество вещества на хроматограмме пробы (в мкг); Сст — концентрация НГЖ-4 на хроматограмме стандарта (в мкг); S„T — площади пятна на хроматограмме стандарта (в ммг); 5пр — площадь пятна на хроматограмме пробы (в мм'-).
Литература. Беляева Н. Н., Быстрова Т. А., Кириллов В. Ф. и др.— Гиг. и сан., 1980, № 6, с. 80—83. Клисенко М. А., Лебедева Т. А., Юркова 3. Ф. Химический анализ микроколичеств ядохимикатов. 1972. Санитарно-химический контроль воздуха промышленных предприятий./Муравьева С. И., Бабина М. Д., Атласов А. Г. и др. М., 1982. Шталь Э. Хроматография в тонких слоях. М., 1965.
Поступила 20.12.82
УДК «15.9.076.9:612.833.821,3
И. И. Швайко, И. П. Козярин, В. М. Войцеховский, Н. И. Марценюк
К МЕТОДИКЕ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ОРИЕНТИРОВОЧНОЙ РЕАКЦИИ «НОРКОВОГО» РЕФЛЕКСА У КРЫС
Киевский медицинский институт им. акад. А. А. Богомольца
К настоящему времени в экспериментальной токсикологии наряду с традиционным изучением функционального состояния нервной системы сформулировалось новое научное направление — поведенческая токсикология (А. Д. Фролова; М. Г. Шандала и соавт.; О. В. Березина и А. А. Гоев, и др.).
Поведенческие, ориентировочные реакции организма животных, подвергающихся воздействию ядов, позволяют объективно оценивать степень их повреждающего действия. Эти реакции могут быть поставлены в любой лаборатории, требуют небольших затрат времени и обладают достаточно высокой чувствительностью.
Мы уже ряд лет широко используем одну из методик изучения ориентировочной исследовательской реакции крыс — определение «норкового» рефлекса в модификации Е. С. Балыниной и И. В. Бе-
резовской и считаем возможным оценить ее положительно. Однако при практическом применении этого теста выявлены и некоторые его недостатки. В частности, это касается установки, которая представляет собой открытую площадку без боковых стенок. Из-за их отсутствия в процессе проведения исследований, на которые отводится всего до 5 мин, происходят значительные потери времени за счет обследования животными краев площадки по ее периметру. Часто животное пытается спрыгнуть с площадки и приходится насильно возвргф' щать его назад, что не может не влиять на результаты исследования. Одновременно наличие открытой площадки не позволяет строго выполнить одно из главных требований данной методики — максимально изолировать объект наблюдения от посторонних раздражителей.
Результаты определения «норкового* рефлекса у крыс на площадке с боковыми стенками и без них
Без боковых стенок С боковыми стенками
Действующие факторы Доза М,±т М,±т Р»
»1 »1
Пары уксусной кислоты 2 мг/м3 12 2,23±0,07 12 6,6±0,2 <0,05
4.3 мг/м3 12 5,2±0,7 12 6,7±0.1 <0.05
Актеллик (пероралыю) 1/400 LDb0 9 3,3±0,7 9 6,3±0,17 <0.05
Отсутствие воздействия — 24 2,8±0,22 20 4,5±0,17 <0,05 +
* Р — между /И] и Мг.
В связи с этим нами внесены некоторые изменения в конструкцию установки, предложенной Е. С. Балыниной и И. В. Березовской.
В данном варианте площадка представляет собой квадрат белого цвета размером 60x60 см в 16 равномерно расположенными отверстиями диаметром 4 см. Высота ножек площадки 20 см. По периметру площадки дополнили боковыми стенками, 3 из которых изготовлены из непрозрачного белого материала, а передняя для удобства наблюдения за животными — из прозрачного органического стекла. Высота боковых стенок 30 см. В каждой из 4 стенок, в том числе прозрачной, на высоте 10 см имеется по 4 отверстия диаметром 4 см, расположенных на равном расстоянии друг от друга. К эксперименту остаются в силе такие требования, как стандартное освещение, изоляция от посторонних раздражителей, проведение исследований в одно и то же время суток.
Сравнительное определение числа заглядываний (у 97 крыс — контрольная группа) показало, что на боковые стенки приходится 27,5% заглядываний в среднем за 1 мин.
Другими словами, улучшены количественные и качественные результаты определения «норкового» рефлекса, что позволяет более точно оценивать их при последующей статистической обработке и анализе. В качестве примера приводим результаты определения ориентировочной реакции у подопытных и контрольных животных на 2 вариантах установки (см. таблицу).
Наши предложения могут быть использованы и в более совершенных установках (типа НР-80-1 М) с автоматической регистрацией показателей «норкового» рефлекса.
Литература. Балынина Е. С., Березовская И. В. —
Фармакол. и токсикол., 1976, № 5, с. 635—638. Березина О. В., Гоев А. А. — Гиг. и сан., 1982, № 1, с. 42—46.
Фролова А. Д., Цворкин Э. А., Лисман М. Б. и др. —
Там же, 1980, № 8, с. 53—57. Шандала М. Г., Руднев М. И., Навакатикян .VI. А.— Там же, № 6, с. 43—48.
Поступила 01.11.82
УДК 628.312:547.5331:543.544
В. С. Козлова, И. А. Кочеровская (Киев)
ЭКСТРАКЦИОННО-ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОЕ ОПРЕДЕЛЕНИЕ 2,3,6-ТРИХЛОРТОЛУОЛА И 2,3,6-ТРИХЛОР-П-ТРЕТБУТИЛТОЛУОЛА В ВОДЕ
Большинство хлорсодержащих органических веществ — токсичные соединения, содержание которых в воде лимитируется ПДК.
Данная работа посвящена разработке метода определения высокотоксичных 2,3,6-трихлортолуо-ла (2,3,6-ТХТ) и родственного ему соединения 2,3,6-трихлор-п-третбутилтолуола (2,3,6-ТХБТ) в *воде на уровне ПДК, которые равны соответственно 0,03 и 0,1 мг/л. В литературе отсутствуют данные по определению указанных веществ в воде.
Работа проведена на хроматографе «Цвет-100» с пламенно-ионизационным детектором. Концентрирование трихлортолуолов осуществляли методом экстракции из 500 мл воды при соотношении фаз ио : и„=50 : 500. Экстрагент упаривали под вакуумом досуха, сухой остаток переносили че-тыреххлористым углеродом в градуированную пробирку и хроматографировали при следующих условиях: колонка металлическая длиной 2 м и внутренним диаметром 3 мм2; сорбент — 5%, БЕ-ЗО на хроматоне М-А\У-ЭМС5, диаметр зерен 0,20— 0,25 мм, температура термостата колонок 170 °С, испарителя 230 "С, расход газа-носителя азота на входе в колонку 2,5 л/ч, соотношение расходов азота, водорода и воздуха 1 : 1 : 10, скорость * диаграммной ленты 200 мм/ч, объем пробы 1,4 мкл, предел измерения 10_12-50А. Время удерживания 2,3,6-ТХТ и 2,3,6-ТХБТ соответственно 1,5 и 5,7 мин.
Количественное определение примесей проводили с использованием внешнего стандарта, которым служил раствор трихлортолуолов в четыреххло-ристом углероде. Раствор готовили с учетом концентрирования пробы, он содержал 15 мг/л 2,3,6-ТХТ и 48 мг/л 2,3,6-ТХБТ.
Высокая температура кипения определяемых веществ (240 ЭС для 2,3,6-ТХТ и 296 °С для 2,3,6-ТХБТ) требует использования для анализа высокотемпературных неподвижных фаз, число которых весьма ограничено. Испытано 5 высокотемпературных неподвижных фаз, которые наносили на хроматон N-AW в количестве 5% от массы носителя. Сорбенты предварительно кондиционировали при ступенчатом повышении температуры до 200 °С в течение 6 ч. Испытание проводили при температуре колонки 170°С и пределе измерения 10~12Х Х50А. Установлено, что полифенилметилсилок-сан-4, ОУ-17 и полиэтнленгликольадипинат непригодны для работы, так как в условиях анализа они дают большой фоновый ток, что приводит к нестабильной работе прибора. Пригодными оказались пентафениловый эфир 5Ф4Э и силиконовый каучук БЕ-ЗО. Лучшие результаты получены на БЕ-30, с использованием которого и была разработана методика.
Предварительные опыты показали, что при максимально допустимом объеме пробы 5 мкл и пределе измерения 10_12-50А чувствительность хро-
