CC BY
62Ихтиопаразитология
К МЕТОДИКЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ПОДВИЖНЫХ ЭКТО-И ЭНДОПАРАЗИТИЧЕСКИХ ПРОСТЕЙШИХ РЫБ
THE METHODOLOGY FOR THE STUDY OF MOBILE ECTO AND ENDOPARASITICIDES SIMPLEST FISH
O.H. Юнчис
O.N. Yunchis
Автор сообщения делится многолетним опытом ихтиопатологических исследований морских рыб, прибывающих на предприятия по передержке рыб из частных аквариумов и океанариумов.
Для обнаружения большинства подвижных эндо- и эктопаразитических простейших, амёб, криптобой и т.д. необходимо проводить исследование только живых или погибающих рыб.
Необходимо менять классическую последовательность исследования органов рыб. После обездвиживания рыб и взятия на исследование крови, исследовать мазки и соскобы с поверхности тела и жабр, затем отпечатки из органов брюшной полости или перитони-алъную жидкость. Следующим должно быть исследование содержимого мочевого и желчного пузырей и отпечатков с разных участков пищеварительного тракта.
The author shares many years of experience ihtiopatologice studies of marine fish, staying on the enterprise for keeping fish from private aquariums and oceanariums.
For detection of most motile endo- and ectoparasitic protozoa, amoebae, cryptology, etc. it is necessary to study only the living or dying fish.
It is necessary to change the classical sequence of study of organs offish. After immobilization of the fish and taking blood tests, to examine smears and scrapings from the body surface and gills, then prints from the abdominal cavity or peritoneal fluid. The following should be the examination of the contents of urinary and gall bladder, and prints from different parts of the digestive tract.
Ключевые слова: ихтиопатологическое исследование, паразитическая протофауна, эндопаразитические и эктопаразитические простейшие, амёбы, инфузории, жгутиконосцы.
Keywords: ichthyopathology study, parasitic protofauna, endoparasitic and ectoparasitic protozoa, amoeba, ciliates, flagellates.
Введение
При завозе пресноводных и морских рыб из Юго-Восточной Азии для декоративных аквариумов наблюдается их частая гибель по неизвестным причинам. Модифицированное ихтиопатологическое исследование этих рыб позволило установить причину гибели, вызванную паразитическими амёбами и жгутиконосцами, быстро погибающими на мертвой рыбе.
32
Юрий Александрович Стрелков всегда уделял большое внимание различным методикам, применяемым в ихтиопатологии. Действительно, только единообразие методик позволяет сравнивать разные собранные паразитологические материалы и сделать достоверные выводы. При паразитологическом исследовании рыб соблюдается определенная последовательность исследования органов, для того чтобы исключить возможность нахождения паразитов на несвойственном для паразита органе [1-3]. Разные методики предназначены для решения определенных задач. Со временем в эти методики вносятся изменения, позволяющие более глубоко исследовать ранее слабо изученные или неизвестные обстоятельства или конкретных паразитов.
В настоящее время в России наблюдается интенсивное строительство океанариумов, публичных аквариумов, увеличение численности аквариумистов, занимающихся содержанием морских аквариумов с морскими гидробионтами. Основным источником поступления морских рыб являются моря, и меньше 0.1% рыб поступает от искусственного разведения. Потребность в рыбах коралловых биоценозов настолько велика, что их реализация происходит в течение суток или нескольких дней. Рыбы, отловленные из естественных водоемов, всегда имеют паразитоценоз конкретного места обитания. В процессе содержания рыб в аквариумах некоторые виды паразитов могут размножиться, вызвать заболевания рыбы и их гибель, которую бывает сложно предотвратить в условиях аквариума. Контроль ветеринарной и тем более ихтиопатологической службой на местах отлова и передержки рыб осуществляется крайне редко. Такое явление связано с тем, что мало настоящих спе-циалистов-ихтиопатологов, знающих паразитов и других возбудителей, вызывающих заболевания и гибель морских рыб. Услуги таких специалистов стоят дорого. Следует отметить, что на местах лова и передержки цены на рыб сравнительно невысокие, но они возрастают в десятки и сотни раз для потребителей, поэтому каждая поступающая рыба становится ценной. Для предотвращения болезней и гибели ценных рыб необходимо знать их паразитофауну и, особенно, зараженность рыб паразитическими простейшими с прямым циклом развития, которые в условиях аквариума представляют наибольшую опасность. Сбор литературных материалов, касающихся паразитов морских рыб, позволил установить, что изучены в основном крупные по величине паразиты: паразитические ракообразные, плоские и круглые черви, пиявки, моногенеи и мелкие по размерам паразиты, сохраняющиеся после гибели хозяина, такие как миксоспоридии, кокцидии, микроспоридии. Паразитические простейшие - амёбы, инфузории, жгутиконосцы, имеющие прямой цикл развития, изучены фрагментарно, однако именно они составляют наибольшую опасность при содержании рыб в искусственных условиях.
Материалы и методы
Материалом для этого сообщения послужили многолетние (24 года) ихтиопа-тологические исследования морских рыб, прибывающих на предприятия по передержке рыб из частных аквариумов и океанариумов. Рыбы относятся к родам Chae-todon, Forcipiger, Chaelmon, Pomacanthus. Удалось исследовать такие их виды, как
33
Pomacanthus asfur (Арабский ангел), P. Imperator (А. император), P. navarchus (А. оранжевый), P. maculosus, P. annularis (А. кольчатый), P. semicirculatus, Hoacan-thus ciliaris (А. карибский), Centropyge bicolor (Сине-желтый ангел), C. bispinosa (Ангел двухколючковый), С. loricula (Ангел огненный), Apolemichthys xanthurus (Ангел желтохвостый), Heniochus diphreutes (Бабочка вымпельная), Chaetodon auri-ga (Аурига), С. collare (Пакистанская бабочка), С. semilarvatus (Лимонная бабочка), С. lunula (Масковая бабочка), С. xanturus (Сетчатая оранжевохвостая бабочка), Chelmon го stratus (Бабочка-пинцет), С. flavissimus (Бабочка желтый пинцет), Сига-новые - Siganus vulpinus (Желтая лиса), Caesio xanthonotus (Цезио). Обследовали погибших, погибающих и живых рыб. Рыбу брали после транспортировки, а также в процессе содержания в условиях карантина и в экспозиционных аквариумах. Это позволило установить некоторые причины, по которым паразитологи и ихтиопато-логи не обнаруживают паразитических простейших, таких как амёбы, инфузории, жгутиконосцы, имеющих прямой цикл развития, и не проводят профилактическую обработку рыб.
Результаты и обсуждение
Обычно при поступлении морские и пресноводные рыбы должны пройти адаптацию в карантине для последующего содержания их в аквариумах. В условиях карантина в лучших случаях на исследование берут соскоб, или мазок, - отпечаток с поверхности тела для исследования на наличие эктопаразитов. Как правило, при исследовании мазков редко обнаруживают наиболее опасных эктопаразитов Oodinium ocellatum и Criptocarion irritans. Это происходит по той причине, что на недавно пойманной рыбе эти виды находятся в состоянии носительства, т.е. в единичных экземплярах. Мазок (соскоб) или отпечаток берется с ограниченной поверхности тела. В таком случае паразит может отсутствовать в исследуемом препарате, так как паразиты еще находятся в виде носительства и их численность невелика. Кроме того, у ряда видов рыб, таких как хирурги Acanthuridae и т.д., поверхность тела покрыта плотным кожным покровом, и криптокарион, находясь под плотной кожей в мазках (соскобах), может отсутствовать. Численность этих паразитов обычно увеличивается на рыбах, которые концентрируются и передерживаются некоторое время в садках или аквариумах. Такое явление связано с тем, что в ограниченном объеме в условии плотности содержания рыб возрастает вероятность их перезаражения. В процессе карантина, сроком обычно месяц (непонятно, почему принят такой срок?), за рыбами проводится пассивное наблюдение до появления признаков заболевания. При появлении признаков заболевания принимаются меры борьбы с ним. В тех случаях когда в процессе карантинного содержания проявляется заболевание, полное паразитологическое исследование на живой рыбе не проводится, так как для этого рыбу надо подвергнуть эутоназии. Ввиду ценности морских рыб паразитологическое исследование проводится после их гибели и чаще всего не сразу. У погибших рыб, полежавших в воде некоторое время (один-два часа), эндопаразитических амёб, жгутиконосцев (кригггобий, гексамит и т.д.), как правило, не находят или находят в небольших количествах (один-два паразита в
34
5-10 полях зрения большого увеличения микроскопа). Обычно в таких исследуемых мазках имеется большое количество цист паразитов, которые способны обнаружить только опытные ихтиопатологи, при этом ставится диагноз на отсутствие или носительство паразитов. В то же время при паразитологическом исследовании погибающих рыб из этих же аквариумов обнаруживается от 3-6 паразитов в поле зрения при большом увеличении микроскопа, то есть такая численность вызывает заболевание и гибель рыб. Нами проводилось паразитологическое исследование живых рыб сразу после их поступления в карантин, после удаления их из транспортной емкости перед пересадкой в карантинные аквариумы. При ихтиопатологи-ческом исследовании только что прибывших живых бабочек, ангелов и лис, паразитических амёб, жгутиконосцев, как правило, находят в единичных количествах. Трудность их обнаружения состоит в том, что они не окрашены, прозрачны и их можно спутать с клетками хозяина, обнаруживаются они по подвижности. На обнаружение амёб тратится большое количество времени, легче находятся жгутиконосцы. После гибели рыбы эти паразиты быстро лизируются, и их легко спутать с клетками хозяина. Практически невозможно найти паразитических амёб и жгутиконосцев в толстых мазках. Еще сложнее обнаружить тканевых амёб, так как они очень похожи на клетки крови и обладают очень медленным движением. Для того чтобы увидеть движение тканевых амёб, необходимо исследовать одно поле зрения в течение 10-15 мин. Движение тканевых и полостных амёб весьма своеобразно. Оно бывает двух типов - как бы перекатывание и второй тип движения - образование не псевдоподия, а небольшого прозрачного выпячивания и перетекания в него всего объёма тела амёбы. При исследовании погибших рыб, пробывших в воде в транспортных емкостях несколько часов, обычно не находят паразитических амёб, эндопаразитических простейших, криптобий и других жгутиконосцев и инфузорий. Рыбы этих же видов и из этих же партий, содержавшиеся в карантине в течение 30-40 дней без антипротозойных обработок, неожиданно погибающие, но прижизненно подвергнутые исследованию, как правило, имеют высокую численность паразитических простейших. Можно предположить, что биохимические изменения, происходящие в погибающей рыбе, служат сигналом для паразитов о необходимости покинуть хозяина или перейти в стадию покоя (цисты). Таким образом, у погибающих рыб паразитические простейшие начинают быстро образовывать цисты, погибают и покидают хозяев. В естественных условиях рыбы-бабочки и рыбы-ангелы питаются губками, коралловыми полипами и другими организмами, которые, возможно, лимитируют численность эндопаразитических простейших. В условиях искусственного содержания основной пищей этих рыб являются креветки, мидии, кальмары или специализированные искусственные корма, но эти корма не могут компенсировать недостаток естественных кормов, что снижает резистентность рыб и создает ситуацию для благоприятного размножения эндопаразитических простейших. Такое положение усугубляется еще и тем, что в условиях искусственной среды морского аквариума поступившие рыбы, носители паразитических амёб, жгутиконосцев, при отсутствии естественного гидробиоциноза, регулируюшего численность паразитов, наличия стресс-факторов, снижающих защитные свойства
35
организма рыб, получают возможность быстрого размножения, что приводит к возникновению заболевания и гибели рыб.
Редкие случаи обнаружения эндопаразитических простейших, отловленных в естественных условиях, и их плохая изученность на морских рыбах, вероятно, связаны с тем, что интенсивность заражения морских рыб очень низкая, а при ихтио-патологическом исследовании чаще используются рыбы не живые, а погибшие, у которых простейшие покинули своих хозяев, погибли или образовали цисты. Для исследования необходимо отбирать только живых и погибающих рыб. Необходимо менять порядок очередности паразитологического исследования органов рыб. После исследования мазков с поверхности тела и жабр следует исследовать отпечатки с органов брюшной полости или жидкость брюшной полости, затем исследовать содержимое желчного и мочевого пузырей и содержимое разных отделов пищеварительного тракта.
Чрезвычайно важное значение имеет идентифицирование видов простейших. Но в настоящее время описание новых видов классическими методами на основе морфологических данных (размеры тела, форма, строение и расположение ядер, характер вакуолей, жгутиков и т.д.) не принимается во внимание, поскольку определение вида проводится на основании молекулярно-генетического анализа. Такого рода анализ недоступен многим паразитологам. В частности, на нашем материале мы видим все эти отличия у разных представителей паразитической протофауны, отличия даже в характере движения, приуроченности к определенным хозяевам или к группе хозяев, но опубликовать имеющиеся материалы в компетентных источниках, к сожалению, невозможно.
Для обнаружения большинства подвижных эндо- и эктопаразитических простейших, амёб, криптобой и т.д. необходимо проводить исследование только живых или погибающих рыб.
Необходимо менять классическую последовательность исследования органов рыб. После обездвиживания рыб и взятия на исследование крови, исследовать мазки и соскобы с поверхности тела и жабр, затем отпечатки из органов брюшной полости или перитониальную жидкость. Следующим должно быть исследование содержимого мочевого и желчного пузырей и отпечатки с разных участков пищеварительного тракта.
1. Быховская-Павловская И.Е. Паразиты рыб. Руководство по изучению. Л.: Наука, 1985. 121 с.
2. Митенёв В.К., Зубченко А.В. Краткое методическое руководство по сбору паразитологического материала от морских промысловых рыб на НИС и НПС. Мурманск: ПИН-РО, 1985. 8 с.
3. Курочкин Ю.В. Методическое пособие по паразитологическому инспектированию морских рыб. Владивосток: ТИНРО, 1979. 84 с.
36
