CC BY
4
МАТЕРИАЛЫ V НАЦИОНАЛЬНОГО КОНГРЕССА ПО РЕГЕНЕРАТИВНОЙ МЕДИЦИНЕ
121
фенотипического состава Т-лимфоцитов проводили методом проточной цитометрии с использованием моно-клональных антител CD3, CD28, aßTCR и ySTCR на приборе Cytomics FC500 (Beckman Coulter, d±IA). В качестве негативного контроля использовались IgG. Aнализ образца составил 50000-75000 клеток.
Результаты. Исследована популяция aß+ и уб+ T-клеток в здоровом человеческом эпидермисе и дерме [3]. Обнаружено 2,7%±0,76 и 0,26 i 0,09 соответственно уб+ T-клеток в коже по сравнению с кровью. Субпопуляция aß+ T-клеток составила (10,29%±3,4 и 65,7%±11,3 соответственно). Эпидермальные CD3+CD28+aß+(79,2%±7,9 и 5,4%±1,77) и CD3+CD28+y6+(71,3%±10,5 и 4,6%±1,21 ) клетки экспрессируют высокие уровни CLA по сравнению с клетками крови. Процесс заживления нарушается при хронических ранах, в связи со сниженным количеством резидентных T-клеток в коже или функционально дефектных. Не было обнаружено существенных различий в соотношении aß+ к уб+ T-клеткам при хронических ранах по сравнению с острыми. Однако, анализ абсолютных значений обнаружил, что 2890± 254 aß и 283 ± 31 уб Т клеток/см2 в нормальном эпидермисе и 10 860± 512aß и 300± 57 уб T клеток/см 2 при острых и хронических ранах соответственно. В месте ран обнаружены в основном aß Т-клетки (p <0,001), тогда как Т-клетки уб, являются популяцией кожи.
Таким образом обнаруженная дисфункция Т-клеток может быть вызвана повышенной экспрессией ингиби-рующих рецепторов, таких как апоптоз, которая усиливается в ответ на тяжелые повреждения. Идентификация эквивалента Т-клеток кожи человека позволит получить представление о механизме эффективного восстановления острых ран и выявит новые мишени для терапевтического вмешательства при лечении хронических ран. С клинической точки зрения, повреждение Т-клеток на ранней стадии процесса заживления раны может быть прогностическим фактором для формирования хронической раны.
Литература:
1. Boyman O, Conrad C, Tonel G, et al. Trends Immunol. 2007. V.
28. P. 51-57.
2. Гольцов С.В., Костоломова Е.Г., Суховей Ю.Г. и др. Пат.
РФ № 2630607 C1, MПK G01N 33/53. 2017.
3. Суховей Ю.Г., Костоломова Е.Г., Унгер И.Г., Aкунеева Т.В.
РИЖ, 2017. Т. 11(20). № 3. С. 521-523.
ИЗУЧЕНИЕ ВЗАИМНОГО ВЛИЯНИЯ КЛЕТОК ЖИРОВОЙ ТКАНИ, НАХОДЯЩИХСЯ НА РАЗНЫХ СТАДИЯХ АДИПОГЕННОЙ ДИФФЕРЕНЦИРОВКИ
Н.В. Костюк, М.Б. Белякова, М.В. Черноруцкий, М.Б. Петрова
ФГБОУ ВО Тверской государственный медицинский университет Минздрава РФ, Тверь, Россия
e-mail: p001637@mail.ru
Ключевые слова: жировая ткань, мезенхимные стромаль-ные клетки, зрелые адипоциты, адипогенная дифференци-ровка, сокультивирование.
Нарушение нормального функционирования клеток жировой ткани лежит в основе патогенеза различных заболеваний, в том числе ожирения, диабета и т. д. Учитывая широкий спектр биологически активных молекул, продуцируемых этой тканью, можно предполагать
ключевую роль сдвига паракринных взаимодействий в развитии патологии. Цель настоящей работы — оценить in vitro взаимное влияние клеток жировой ткани, находящихся на разных этапах адипогенной дифференцировки.
В работе использовали клетки жировой ткани разной локализации, полученные от человека, крысы, кролика. Мезенхимные стромальные клетки (МСК) и зрелые адипоциты выделяли в соответствии со стандартными протоколами. Адипогеную дифференцировку МСК индуцировали добавлением смеси инсулина, дексамета-зона и изобутилметилксантана с последующей заменой на питательную среду, содержащую инсулин. От монокультуры к совместным культурам переходили через 0, 2, 5, 7 дней от начала индукции, моделируя разные стадии адипогенеза. Сокультивирование вели с использованием двухуровневой системы, где легко адгезирующие клетки локализованы на дне сосуда, а зрелые адипоци-ты — на «потолке» [1]. В ходе эксперимента оценивали долю жизнеспособных и липид-содержащих клеток, фиксировали время появления первых липидных капель, характер их распределения в цитоплазме, относительное количество липидов в культуре. Общее время наблюдения — 14 дней. Контролем служили индуцированные и неиндуцированные монокультуры МСК.
В целом адипоциты в совместной культуре оказывают стимулирующее действие на дифференцировку МСК, сокращая время появления первых липидных капель, увеличивая долю запасающих клеток и количество три-глицеридов в них. Эффект присутствия зрелых клеток тем значительнее, чем на более ранней стадии находятся дифференцирующиеся клетки. Обратного влияния МСК и преадипоцитов на зрелые адипоциты отмечено не было. Полученные результаты подтверждают важную роль паракринной регуляции внутри жировой ткани.
Литература:
1. Kostiuk N.V., Ве1уа1«^а M.B., Egorova E.N. et al. Seien. heritage.
2017. N. 13. P. 3.
СТРОМАЛЬНО-ВАСКУЛЯРНАЯ ФРАКЦИЯ ЛИПОАСПИРАТА В РЕЖИМЕ МОНОТЕРАПИИ И СОЧЕТАННОГО ИСПОЛЬЗОВАНИЯ С ПРЕПАРАТОМ ГИАЛУРОНОВОЙ КИСЛОТЫ В ЛЕЧЕНИИ ГОНАРТРОЗА
М.А. Котова, Е.Я. Шевела, Т.Р. Глебова, Н.А. Ница, Г.А. Ахметова, Ю.А. Кожевников, И.В. Меледина, Е.Р. Черных
ФГБНУ НИИ фундаментальной и клинической иммунологии, Новосибирск, Россия
e-mail: kot.maria199411@mail.ru
Ключевые слова: стромально-васкулярная фракция, липо-аспират, гиалуроновая кислота, остеоартрит, ВАШ, KOOS.
Остеоартрит (ОА) — наиболее частая форма артрита, характеризующаяся болями и тугоподвижностью суставов, приводящими к ухудшению качества жизни. Современные варианты лечения ОА нацелены на купирование болевого синдрома и повышение вязкости суставов с помощью внутрисуставного введения препаратов гиалуроновой кислоты (ГлК) [1]. Однако длительное применение некоторых из этих препаратов может вызывать серьезные побочные эффекты. Одно из новых направлений в лечении ОА связано с использованием клеточных технологий, в том числе стромально-васкулярной фракции (СВФ) жировой ткани. Клетки СВФ оказывают
Гены & Клетки XVII, №3, 2022
