CC BY
86
ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ДИАЗЕПАМА... 45
УДК 615.217:599.323.4 А.А. Шимширт, Т.С. Калинина, Т.А. Воронина ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ДИАЗЕПАМА НА ТРЕВОЖНЫЕ РЕАКЦИИ У МЫШЕЙ, ВЫЗВАННЫЕ ИНДОМЕТАЦИНОМ ФГБУ «НИИ фармакологии имени В.В. Закусова» РАМН, Москва Контактная информация: Шимширт Александр Александрович, аспирант, младший научный сотрудник лаборатории психофармакологии адрес: 125315, Москва, Балтийская ул., д. 8; тел. +7(499)601-24-14 e-mail: spring05-79@vandex.ru Статья поступила 20.12.2011, подписана в печать 18.01.2012 Резюме Индометацин в ряде случаев вызывает развитие тревожных расстройств, которые связывают с ингибиро-ванием синтеза позитивного модулятора ГАМКа рецепторов аллопрегнаналона. Впервые показано, что индометацин в однократной дозе 10 мг/кг при внутрибрюшинном введении вызывает усиление тревоги у мышей-самцов линии Balb/c в стандартном тесте «открытое поле». Изучена возможность снижения индуцированного индометацином уровня тревожности с помощью классического анксиолитика диазепама. Показано, что диазепам в дозе 1 мг/кг, введённый однократно внутрибрю-шинно через 30 мин после индометацина, полностью устраняет тревожные реакции у мышей, вызванные индо-метацином. Ключевые слова: индометацин, диазепам, мыши Balb/c, тревожные реакции.
A.A. Shimshirt, T.S. Kalinina, T.A. Voronina INFLUENCE OF DIAZEPAM ON THE ANXIETY-LIKE RESPONSES CAUSED BY INDOMETHACIN IN MICE BALB/C Zakusov Institute of Pharmacology of RAMS, Moscow Abstract There were the cases to observe the development of anxiety following administration of indomethacin. One mechanism suggested of this side drug effect is indomethacin-induced inhibition of the synthesis of the positive modulator GABa receptors allopregnanolon. In test «open field» for the first time has shown anxiety in male of inbred mice Balb/c administrated with 10 mg/kg of indomethacin. It was observed the decrease of indomethacin-induced anxiety 30 minute after treatment with classic anxiolytic diazepam with single dose of 1 mg/kg intraperitoneally. There was complete elimination of the anxiety response. Keywords: indomethacin, diazepam, male of inbred Balb/c, anxiety. Введение Материалы и методы Индометацин - НПВС, вызывающее в ряде Эксперименты выполнены на 54 мышах-случаев побочные эффекты в виде тревожных рас- самцах линии Balb/c массой тела 20-25 г (питомник стройств (анксиогенное действие). В качестве при- РАМН «Столбовая), содержащихся в виварии ин-чины этих расстройств обсуждается ингибирование ститута в стандартных условиях при естественной синтеза позитивного модулятора ГАМКа рецепто- суточной смене день/ночь. Для постановки опыта ров аллопрегнанолона, регулятора, в т.ч. уровня мышей делили на 6 групп. Основные группы 1 и 2 тревожности у человека и животных, а для коррек- (n=6) получали индометацин 5 или 10 мг/кг и диа-ции предлагаются бензодиазепиновые анксиолити- зепам 1 мг/кг. Группы положительного контроля 3 ки. [5; 8-10;13; 15]. (n=7), 4 и 5 получали только индометацин или Для выявления анксиогенных реакций у ла- только диазепам (n=10) в адекватных дозах. Группа бораторных животных используются различные отрицательного контроля 6 (n=18) получала физио-тесты, например, «открытое поле», приподнятый логический раствор по 0,2-0,25 мл в идентичной крестообразный лабиринт, реакции замирания и схеме введения. зоосоциальных взаимодействий [6; 7; 11; 16]. Зна- В работе использованы индометацин-субстан-чение уровня эндогенного аллопрегнаналона в про- ция, который вводили мышам однократно внутри-тивотревожном действии классического анксиоли- брюшинно за 60 мин до постановки теста, и диазепам-тика диазепама не описано. субстанция, который вводили мышам однократно Косвенным подтверждением реализации это- внутрибрюшинно через 30 мин после индометацина. го механизма может быть уменьшение или снятие Субстанции веществ и растворитель Twin-80 произ-индометацином гипноседативных эффектов диазе- ведены Sigma Aldrich (США). пама [3; 12]. Оценка уровня тревожности проведена в тесте Поэтому целью настоящего исследования «открытое поле» в соответствии со стандартным про-стало изучение влияния индометацина и его ком- токолом [1]. Установка «открытое поле» для мышей бинации с диазепамом на уровень тревожности в представляет собой камеру размером 40-40-20 см. одном из специфических тестов - «открытое поле» Пол камеры разделён равномерно линиями на 9 квад-у самцов мышей инбредной линии Balb/c. ратов с 16 отверстиями диаметром 2 см.
№ 1/том 11/2012 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
46 ОРИГИНАЛЬНЫЕ СТАТЬИ ИЗУЧЕНИЕ ВЛИЯНИЯ ДИАЗЕПАМА...
У каждой мыши индивидуально в течение 2 мин регистрировали горизонтальную и вертикальную активности и п обследованных отверстий в полу. Об уровне тревожности судили по уменьшению КОИр, вычисленному при суммировании указанных выше параметров. Для мышей Ва1Ь/с среднее значение КОИР=20-30.
Статистическая обработка данных проведена с использованием средних значений с ошибкой стандартного отклонения. Достоверность отличий между группами определяли методом дисперсионного анализа (ЛМОУЛ) с использованием программы «Биостат», версия 4.03.
Результаты
Впервые показано (см. рис.), что индометацин в дозе 10 мг/кг вызывает двукратное уменьшение параметров ориентировочно-исследовательских реакций у мышей-самцов Ва1Ь/с, о чём свидетельствует достоверное уменьшение КОИР: 10,86±2,27 против 20,38±2,43 в отрицательном контроле (р<0,01). Относительно высокий исходный уровень тревожности и ответ на ин-дометацин характеризует мышей-самцов Ва1Ь/с, как высокочувствительную модель для изучения влияния нейростероидной системы на ГАМКа рецепторы [2; 4; 14]. Диазепам один вызывал двукратное увеличение параметров ориентировочно-исследовательской активности, о чём свидетельствует достоверное увеличение КОИР: 39,38±3,4 против 20,38±2,43 в отрицательном контроле (р<0,01), что согласуется с данными литературы [14]. Введённый через 30 мин после индуцирующей тревожный синдром дозы индометацина диазепам стимулирует ориентировочно-исследовательскую активность на характерном достоверно высоком уровне, о чём свидетельствует динамика КОИР: 44,83±6,74 против 39,38±3,4 (в положительном контроле диазепама); 44,83±6,74 против 10,86±2,2 (в положительном контроле индометацина) (р<0,01). Это свидетельствует о независимости механизма противотревожного действия классических анксиолитиков от уровня эндогенных нейростероидов. Полученные данные рекомендуют при назначении индометацина по прямым показаниям учитывать гормональный фон пациента, особенно при наличии тревожных реакций, депрессии и посттравма-
тических состояний. Изучение особенностей противо-тревожного действия анксиолитиков разного типа (классических, селективных, атипичных) на фоне действия агентов, влияющих на синтез эндогенных ней-ростероидов, является актуальным вопросом дальнейшего экспериментального анализа.
- 30
к
Индометацин Индометацин Индометацин Индометацин Диазепам
5 мг/кг + 10м-/кг+ 5 мг/кг (п=7) 10 мг/кг (n=7) 1 мг/кг (п=10) Диазегам1 Диазепам1
мг/кг{,=6) мг/кг(П=6) Группа животных
физ. р-р. (11=18)
Рис. Влияние индометацина и/или диазепама на величину ориентировочно-исследовательских реакций (КОИР) у мышей-самцов Ва1Ь/с в «открытом поле»:
*р<0,05 в сравнении с физиологическим раствором; #р<0,05 в сравнении с индометацином; **р<0,01 в сравнении с физиологическим раствором; ##р<0,01 в сравнении с индометацином.
Выводы
1. Индометацин в дозе 10 мг/кг при однократном внутрибрюшинном введении вызывает достоверное двукратное снижение ориентировочно-исследовательских реакций у самцов мышей Ва1Ь/с.
2. Диазепам в дозе 1 мг/кг при однократном внут-рибрюшинном введении проявляет анксиоли-тическое действие, увеличивая в 2 раза коэффициент ориентировочно-исследовательских реакций у мышей-самцов Ва1Ь/с.
3. Диазепам, введённый после индометацина в дозе, индуцирующей уменьшение ориентировочно-исследовательских реакций, приводит к предупреждению тревожного состояния у мышей-самцов Ва1Ь/с.
Литература
1. Воронина Т.А., Середенин С.Б. Методические указания по изучению транквилизирующего (анксиолитического) действия фармакологических веществ. - В кн.: Руководство... - М.: «ИИА «Ремедиум», 2000. - С. 126-30.
2. Середенин С.Б., Воронина Т.А., Незнамов Г.Г. и др. Фармакогенетическая концепция.. .//Вестник РАМН. - 1998. - № 11. - С. 3-9.
3. Almaghour H.G., Sherif F.M. Effect of non-steroidal anti-inflammatory drugs on behavioral actions of diazepam in mice // Neurosciences (Riyadh). - 2010. - 2. - P. 84-9.
4. Belzung C., Berto F. Further pharmacological validation of the Balb/c neophobia in the free exploratory paradigm as an animal model of trait anxiety // Behav. Pharmacol. - 1997. - 8. - P. 541-8.
5. ClunieM., Crone L.-A. etal. Psychiatric side effects of indomethacin in parturients // Can. J.l ofAnest. - 2003. - 6. - P. 586-8.
6. Frye C.A, EdingerL.E. Testosterone's metabolism.// Pharmacol Biochem Behav. - 2004. - 3. - P. 473-81.
7. Frye C.A, Paris J.J, Rhodes M.E. Exploratory, anti-anxiety, social, and sexual behaviors of rats in behavioral estrus is attenuated with inhibition of 36,56-THP formation in the midbrain ventral tegmental area // Behav Brain Res. - 2008. - 2. - P. 269-76.
8. Frye C.A., Paris J.J. Progesterone turnover to its 5-a-reduced metabolites in the ventral tegmental area of the midbrain is essential for initiating social and affective behavioar and progesterone metabolism in female rats // Journal of endocrinological investigation. - 2011. - 7. - P. 188-99.
9. Griffin L.D., Mellon S.H. Biosynthesis of the neurosteroid 3{alpha}-hydroxy-4-pregnen-20-one (3{alpha}HP), a specific inhibitor of FSH release // Endocrinology. - 2001. - 11. - P. 4617-4622.
10. Hoppman R.A., Peden J.G., Ober S.K. Central nervous system side effects of nonsteroid anti-inflammatory drugs // Arch Intern Med. - 1991. - 151. - P. 1309-13.
11. KitaA., Furukawa K Involment ofneurosteroids in the anxiolytic-like effects ofAC-5216 in mice//Pharm Biochem Behav. -2008. - 89. - P. 171-8.
12. LiuX., Lee T.L., WongP.T.-H. Cyclooxygenase-1 inhibition shortens the duration of diazepam-induced loss of righting reflex in mice // Anesth Analg. - 2006. - 102. - P. 135-40.
13. Reddy D.S., Rogawski M.A. Stress-induced deoxycorticosterone-derived neurosteroids modulate GABAA receptor function and seizure susceptibility // The Journal of Neuroscience. - 2002. - 9. - P. 3795-805.
14. Seredenin S.B., IarkovaM.A., VoroninM.V. 3H-Diazepam binding in the brain of intact animals with various reactivity to emotional stress // Eksperimental'naia I klinicheskaia farmakologiia. - 2001. - 1. - P. 63-5.
15. TsutsuiK. Minireview: Progesterone biosynthesis and action in the developing neuron // Endocrinology. - 2008. - 6. - P. 2757-61.
16. Ugale R.R., Sharma A.N., Kokare D.M. et al. Neurosteroid alloregnanalone mediates anxiolytic effect of etifoxine in rats // Brain Research. - 2007. - 12. - P. 193-201.
№ 1/том 11/2012
РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ
