Научная статья на тему 'Изучение видовых особенностей взаимного расположения первичных политенных хромосом в ядрах трофоцитов яичников у видов D. yakuba Burla и D. santomea Lachaise, Harry подгруппы «Melanogasten> рода Drosophila (Sophophora)'

Изучение видовых особенностей взаимного расположения первичных политенных хромосом в ядрах трофоцитов яичников у видов D. yakuba Burla и D. santomea Lachaise, Harry подгруппы «Melanogasten> рода Drosophila (Sophophora) Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»

144
31
Поделиться
Ключевые слова
ПЕРВИЧНЫЕ ПОЛИТЕННЫЕ ХРОМОСОМЫ / ЭНДОЦИКЛ / ВЗАИМНОЕ РАСПОЛОЖЕНИЕ ХРОМОСОМ В ЯДРАХ ТРОФОЦИТОВ ЯИЧНИКОВ / ПОДГРУППА ВИДОВ DROSOPHILA MELANOGASTER

Аннотация научной статьи по биологическим наукам, автор научной работы — Вассерлауф Ирина Эгоновна, Усов Константин Евгеньевич, Митренина Елизавета Юрьевна, Стегний Владимир Николаевич

Аннотация. Изучено взаимное расположение политенных хромосом в ядрах трофоцитов яичников у видов D. yakuba и D. santomea. У межвидовых гибридов была обнаружена видовая специфичность ориентации хромосом в ядре, проявляющаяся в асинаптировании гомеологичных хромосом. Это объясняется тем, что гомеологи «сохраняют» свою видоспецифичную позицию в пространстве ядра. Изучение ассоциации хромосом D. yakuba и D. santomea на протяжении всего эндомитотического цикла выявило динамику прицентромерных гетерохроматиновых блоков хромосом 3 и 2, связанную с образованием ядрышкового материала.

Похожие темы научных работ по биологическим наукам , автор научной работы — Вассерлауф Ирина Эгоновна, Усов Константин Евгеньевич, Митренина Елизавета Юрьевна, Стегний Владимир Николаевич

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

Investigation of species -specific peculiarities of ovarion nurse cells polytene chromosomes spatial arrangement of D. yakuba Burla

Spatial arrangement of ovarion nurse cells polytene chromosomes of two species D. yakuba and D. santomea has been revealed. Chromosomes of inter-specific hybrids differ in their orientation in the nucleus. The orientation is species-specific, it comes out in asynapsis of homeologous chromosomes. It can be explained by the fact that chromosomes maintain their species-specific position in the hybrid nucleus. Investigation of chromosome association of D. yakuba and D. santomea through endomitotic cycle has shown that movement of chromosomes 2 and 3 heterochromatic blocks is determined by nucleolus formation.

Текст научной работы на тему «Изучение видовых особенностей взаимного расположения первичных политенных хромосом в ядрах трофоцитов яичников у видов D. yakuba Burla и D. santomea Lachaise, Harry подгруппы «Melanogasten> рода Drosophila (Sophophora)»

ЦИТОЛОГИЯ И ГЕНЕТИКА

УДК 575, 576

И.Э. Вассерлауф, К.Е. Усов, Е.Ю. Митренина, В.Н. Стегний

ИЗУЧЕНИЕ ВИДОВЫХ ОСОБЕННОСТЕЙ ВЗАИМНОГО РАСПОЛОЖЕНИЯ ПЕРВИЧНЫХ ПОЛИТЕННЫХ ХРОМОСОМ В ЯДРАХ ТРОФОЦИТОВ ЯИЧНИКОВ У ВИДОВ D. YAKUBA BURLA И D. SANTOMEA LACHAISE, HARRY ПОДГРУППЫ «MELANOGASTER» РОДА DROSOPHILA (SOPHOPHORA)

Работа выполнена при финансовой поддержке РФФИ (проект № 04-04-48175), целевой программы «Развитие научного потенциала высшей школы (2006-2008)» (проект РНР.2.2.1.1.2038) и НШ - 4283.2006.4

Аннотация. Изучено взаимное расположение политенных хромосом в ядрах трофоцитов яичников у видов D. yakuba и D. santomea. У межвидовых гибридов была обнаружена видовая специфичность ориентации хромосом в ядре, проявляющаяся в асинаптировании гомеологичных хромосом. Это объясняется тем, что гомеологи «сохраняют» свою видоспецифичную позицию в пространстве ядра. Изучение ассоциации хромосом D. yakuba и D. santomea на протяжении всего эндомитотического цикла выявило динамику прицентромерных гетерохроматиновых блоков хромосом 3 и 2, связанную с образованием ядрышкового материала.

Ключевые слова: первичные политенные хромосомы, эндоцикл, взаимное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников, подгруппа видов Drosophila melanogaster.

Взаимное расположение хромосом в пространстве ядра у эукариот играет важную роль в экспрессии генов и сегрегации хромосом в процессе клеточного деления [1-5]. Для интерфазного ядра характерна динамичность хроматина [6-9], при этом хромосомы сохраняют свою территориальность и взаимное расположение [10].

Расположение политенных хромосом в ядрах соматических тканей (слюнные железы, протаракальная железа, средняя и задняя кишка и мальпигиевы сосуды) и генеративной системы клеток (ядра трофоцитов яичников) у двукрылых насекомых имеет тканевую специфичность [11-12]. У близкородственных видов малярийных комаров (комплекс Anopheles maculipennis [11]) и дрозофилы (виды подгруппы Drosophila melanogaster [13], виды группы D.virilis [14]) в ядрах трофоцитов яичников были выявлены видовые отличия в ориентации хромосом. Видоспецифичность проявлялась в наличии или отсутствии связей определенных хромосом с ядерной оболочкой; в морфологии участков прикрепления хромосом к оболочке; наличии или отсутствии хромоцентральной организации хромосом в ядре [11, 13, 15]. Есть основания предполагать, что в подобных структурных перестройках архитектуры хромосом принимают участие мобильные генетические элементы (МГЭ), активация которых осуществляется при инбредном размножении и экстремальных температурах развития [16-18].

Для двукрылых насекомых характерен нутриментарный тип оогенеза. Ооцит и трофоциты по происхождению являются сестринскими клетками. У малярийных комаров политенные хромосомы трофоцитов хорошо структурированы, имеют дисковую исчерченность [1, 11].

У дрозофилы на стадиях оогенеза с S3 по S7 выявляются эндополиплоид-ные ядра с различной степенью политенизации и морфологией хроматина: мелкие ядра с ретикулярной структурой хроматина; первичные политенные хромосомы, имеющие гетерохроматиновые блоки; помпонообразные, компактные хромосомы; стадия распада помпонообразных хромосом и ядра с ретикулярной структурой хроматина [19-20]. Первичные политенные хромосомы на стадии S3 - S5 оогенеза дрозофилы являются удобными для изучения взаимного расположения хромосом в ядре.

Ранее нами была изучена ориентация хромосом в ядрах трофоцитов яичников у 8 близкородственных видов подгруппы «melanogaster» и построена межвидовая схема пространственной реорганизации хромосом [13]. Предполагается, что эволюция архитектуры ядер шла от локального хромоцентра (D. orena) к диффузному (D. simulans, D. sechellia, D. erecta) и к полному его исчезновению (D. mauritiana, D. yakuba, D. teissieri), к прикреплению прицен-тромерных или теломерных районов хромосом к оболочке ядра (D. melanogaster).

Недавно в западно-экваториальной Африке на одном из островов Гвинейского залива Sao Tome был открыт новый вид - D. santomea. Этот вид морфологически отличается от близкородственных подгруппы D. melanogaster жёлтым цветом тела без чёрных брюшных сегментов. D. santomea сходна с D. yakuba по структуре политенных хромосом (гомосеквентна), митотических хромосом, гену period, аллозимам [21].

В связи с этим нам было интересно изучить взаимное расположение хромосом трофоцитов яичников D. santomea и дополнить нашу филогенетическую схему, построенную на основе ориентации хромосом в ядрах трофоцитов.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Материалом исследований служили 0,5-, 1-, 1,5-, 2-суточные самки D. yakuba (Фонд центра штата Аризона, США) и D. santomea, любезно предоставленные F. Lumeunier (Laboratoire Populations, Ge ne tique et Evolution, UPR CNRS, Gif-sur-Yvette, Франция).

Были получены межвидовые гибриды от скрещиваний: çD. yakuba х х ^D. santomea; ç D. santomea х ^ D. yakuba.

Яичники выделяли в физиологическом растворе 0,7% NaCl и фиксировали в упрощенном спирт-уксусном фиксаторе Карнуа в соотношении 3:1. Для изучения архитектуры ядер трофоцитов яичников получали «полудавленные» лактоацетоорсеиновые препараты. Яичники, окрашенные лактоацеторсеином (Orcein - Sigma, England), осторожно накрывали покровным стеклом и слегка давили так, чтобы хромосомы оставались внутри ядра.

Для выявления ядрышкового материала в ядрах трофоцитов яичников было проведено Ag-окрашивание - препараты инкубировали в растворе азотно-

кислого серебра. На сухие препараты наносили 3-4 капли 50%-ного раствора AgNO3 и осторожно накрывали их покровным стеклом. Затем препараты помещали в эксикатор с дистиллированной водой и инкубировали в термостате 24-30 ч при температуре 65°С; после этого их анализировали и фотографировали при помощи микроскопа Laboval-4 и фотоаппарата Olympus (увеличение 10x100).

Достоверность различий между контролем и экспериментальными данными вычисляли с помощью fZ-теста Манна-Уитни при заданной вероятности р = 0,95.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

Взаимное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников у гомосеквентных видов D. yakuba и D. santomea

Взаимное расположение хромосом у гомосеквентных видов D. yakuba и D. santomea оценивалось только на стадиях S3 - S5 оогенеза на протяжении которых образуются первичные политенные хромосомы.

Ориентация хромосом в ядрах трофоцитов D. santomea (рис. 1, в, г) сходна с таковой D. yakuba (рис. 1, а, б). Хромосомы не образуют общего хромоцентра, хромосомы Х и 3 прицентромерными районами близко ассоциированы по отношению друг к другу, а хромосома 2 локализована в противофазе. Гомологи хромосом 2 и 3 в прицентромерных районах слегка асинаптированы и содержат крупные гетерохроматиновые блоки, которые локально объединяют плечи хромосом. Прикреплений хромосом к оболочке ядра визуально не обнаружено (см. рис. 1, а-г).

Такое сходство в ориентации хромосом ядер трофоцитов было ранее выявлено и у других гомосеквентных видов (например, D. simulans и D. sec-hellia) [11, 13]. Только с помощью гибридологического анализа этих видов были обнаружены видовые отличия, которые проявляются в асинаптирова-нии гомеологичных хромосом. Это связано с тем, что гомеологи «сохраняют» свою видоспецифичную позицию в пространстве ядра.

У межвидовых гибридов от скрещиваний ç D. yakuba x ^ D. santomea (рис. 1, д, е); ç D. santomea x ^ D. yakuba (рис. 1, д-з) было выявлено нарушение в спаривании гомеологичных хромосом в прицентромерных районах или полное асинаптирование плеч гомеологов, которое визуально выявляется не во всех ядрах. Был проведен анализ 10 гибридных самок от скрещивания ç D. yakuba x ^D. santomea (164 ядра). Полученные результаты показали достаточно высокий процент ядер с асинаптированными гомеологичными хромосомами (72,6±3,5%). Такая дезориентация гомеологов в прицентромерных районах или их полное асинаптирование, вероятно, связаны с видоспецифичной позицией гомеологичных хромосом в пространстве ядра у межвидовых гибридов, что свидетельствует о видовой специфичности ориентации хромосом в ядрах трофоцитов гомосеквентных видов D. yakuba и D. santomea.

Нарушение синапсиса у гомеологов межвидовых гибридов было обнаружено не во всех ядрах. Возможно, это связано с различной степенью полите-низации и компактизации хромосом на различных стадиях эндоцикла.

. за

к і

л? * ^ * -Л. - ч и: ' г*> V В *' .. .0 ч -V .*Л -7 - . г V

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

В шву^ 1 І. Л Шілг 3 С Д е

В

УЙ!

Еш* '* 9■

* 1Т.

В '

* ь*.

Ж

Рис. 1. Взаимное расположение хромосом в ядрах трофоцитов яичников у В. уакиЬа (а, б), В. заШошеа (в, г) и их межвидовых гибридов - $ В. уакиЬа хб В. заШошеа (д, е),

$ В. заШошеа х б В. уакиЬа (ж, з). ХЬ, 2, 3 - хромосомы; с - прицентромерные районы хромосом; стрелками обозначены асинапсисы гомеологичных хромосом у межвидовых

гибридов (увеличение 10x100)

На ранних стадиях политенизации хромосом были едва заметны асинапсисы в прицентромерных районах, которые нами не оценивались как хромо-

сомы с нарушением синаптирования. На более поздних стадиях эндомитоти-ческого цикла нарушение синапсиса гомеологов у межвидовых гибридов выявляется ярче. Такое асинаптирование гомеологов в гибридном ядре связано с видоспецифичным позиционированием гомеологичных хромосом в пространстве ядра. Подобные результаты были получены у гомосеквентных видов малярийных комаров Anopheles maculipennis и An. subalpinus [22], а также и у видов D. sechellia и D. simulans комплекса D. melanogaster [13].

Известно, что на основании данных, полученных в результате изучения структуры митотических и политенных хромосом, гена period, аллозимов, D. santomea расположили близко к D. yakuba в филогенетическом древе комплекса «yakuba». Предполагают, что D. santomea произошла от D. yakuba или эти виды имели одного общего предка. Метафазные хромосомы D. santomea и D. yakuba различаются по количеству прицентромерных гетерохроматиновых блоков Х-хромосомы и хромосомы 4 [21]. Гетерохроматин играет важную роль в поддержании ориентации хромосом в пространстве ядра. Возможно, что при видообразовании с изменением количества гетерохроматина могла измениться и территориальность хромосом в пространстве ядра, т. е. произойти пространственная реорганизация хромосом в ядре (системная мутация). Могли измениться места локализаций прицентромерных районов в ядре. В связи с этим взаимное расположение хромосом в ядрах трофоцитов D. santomea и D. yakuba отличается по локализации прицентромерных районов хромосом, которая выявляется только в ядрах межвидовых гибридов. Таким образом, ориентация хромосом в ядрах трофоцитов яичников у видов D. santomea и D. yakuba видоспецифична.

Ассоциация хромосом и функционирование ядрышка в ядрах трофоцитов яичников на протяжении эндомитотического цикла

Известно, что хроматин на протяжении интерфазы динамичен в пространстве ядра и заякорен с помощью ламин к ядерной мембране [6-7, 9]. При этом хромосомы занимают определенную территорию в пространстве ядра, которая сохраняется на протяжении всей интерфазы и на последующих стадиях клеточного цикла [23, 10].

У Calliphora erythrocephala на протяжении всего эндоцикла в полиплоидных ядрах трофоцитов яичников (от первичных ретикулярных ядер, политенных хромосом, стадии распада хромосом, до образования вторичных ретикулярных ядер) обнаружено сохранение позиционности хромосом в пространстве ядра [24]. В связи с этим мы в своих исследованиях также изучали позиционность хромосом в полиплоидных ядрах трофоцитов яичников у D. yakuba и D. santomea на различных стадиях эндоцикла (от образования тонких первичных политенных хромосом до их распада).

Был проведен сравнительный анализ позиционирования хромосом в ядрах трофоцитов в период эндомитотического цикла (S1-S7 стадии оогенеза; рис. 2). У 0,5-3-суточных самок были обнаружены все стадии эндомитоза, характерные для Diptera. Видовой особенностью являлась скорость протекания эндоцикла. Для D. santomea характерно более длительное прохождение эндомитотического

цикла. У 0,5-суточных самок D. yakuba можно было наблюдать практически все стадии эндоцикла (см. рис. 2, а—ж), а у D. santomea этого же возраста - только мелкие с ретикулярной структурой ядра трофоцитов (см. рис. 2, а ’).

Рис. 2. Стадии эндоредупликации хроматина в ядрах трофоцитов яичников D. yakuba (а-е), D. santomea (а ’-е ’). Стадии эндоцикла - первичные ретикулярные ядра (а, а ’), удлиненные первичные политенные хромосомы (б, б ’), первичные политенные хромосомы (в, в ’; г, г ’), компактные политенные хромосомы (д, д ’), стадия распада первичных политенных хромосом (е, е ’). Стрелками обозначены районы декомпактизации прицентромерного гетерохроматина; вторичные ретикулярные ядра (ж, ж’) (увеличение lQxlQQ)

На стадии первичных политенных хромосом у В. уакиЬа и В. &аМотеа были обнаружены два морфологических типа ядер, большинство которых имеют характерную для вида морфологию хромосом. Плечи хромосом 2 и 3 объединены прицентромерными гетерохроматиновыми блоками, около 10% ядер имеют хромосомы 2 и 3 с разобщением плеч в прицентромерных районах, связанных с декомпактизацией гетерохроматиновых блоков и образованием тонких фибрилл хроматина (см. рис. 2, г). Возможно, существует достаточно кратковременная стадия эндоцикла, в которой плечи хромосом 2 и 3 разобщаются, а при компактизации хромосом вновь объединяются с образованием гетерохроматиновых блоков (рис. 2, д). Поэтому ядер с такой организацией хромосом выявляется около 10%. У В. santomea эта стадия наблюдается реже, возможно, она проходит быстрее (см. рис. 2, г ’), чем у В. уакиЬа, и в связи с этим не всегда заметна.

Хромосомы на протяжении эндоцикла сохраняют свою позиционность по отношению друг к другу. Такая ассоциация выявляется и на стадии, в течение которой плечи хромосом разобщаются в результате декомпактизации при-центромерных гетерохроматиновых блоков. Можно предположить, что выявленная нами стадия декомпактизации прицентромерного гетерохроматина имеет функциональную значимость, характерную для питающих клеток ооцита и, по-видимому, связана с образованием ядрышкового материла, необходимого для питания ооцита.

У В. уакиЬа с помощью Л§-окрашивания было обнаружено, что на протяжении всего эндоцикла «разрыв» плеч хромосом связан с функционированием ядрышка (рис. 3). На ранней стадии (Б2) эндоцикла прицентромерные тяжи ядрышкообразующей хромосомы ХЬ (см. рис. 3, а) входят в ядрышко, а хромосомы 3 и 2 «лежат» на нем. На более поздней стадии (Б3) с образованием второго ядрышка в хромосоме 3 декомпактизуются прицентромерные гетерохроматиновые блоки в фибриллярные тяжи, входящие в ядрышко, в связи с чем плечи хромосомы разобщаются (рис. 3, б, в). На последующей стадии с увеличением и слиянием ядрышек гетерохроматиновые прицентромер-ные блоки хромосомы 2 также декомпактизуются и прицентромерными тяжами контактируют с ядрышком (рис. 3, г). На стадии компактных хромосом прицентромерные тяжи хромосом 2 и 3 компактизуются вновь, образуя плотные гетрохроматиновые блоки (рис. 3, д, е). На стадии распада первой распадается ядрышкообразующая Х-хромосома (рис. 3, ж). В ретикулярных ядрах выявляется ядрышко, заполняющее весь объем ядра, а декомпактизованный хроматин «лежит» на ядрышке (см. рис. 3, з).

Таким образом, на протяжении эндоцикла наблюдается динамика гетерохроматиновых блоков, связанная с их декомпактизацией и функционированием ядрышка, причем визуально наблюдаемый «разрыв» плеч хромосом 2 и 3 непосредственно связан с образованием ядрышка. По-видимому, гетерохроматиновые блоки, содержащие р-ДНК последовательности [25], непосредственно принимают участие в образовании ядрышка.

Рис. 3. Ag-окрашивание в ядрах трофоцитов яичника на выявление ядрышка на протяжении всего эндомитотического цикла у D. yakuba (а-з); N - ядрышко, N1, N2 - 1-е и 2-е ядрышки; XL, 2, 3 - хромосомы; с - прицентромерные районы хромосом (увеличение lQxlQQ)

Авторы выражают искреннюю благодарность F. Lumeunier (Laboratoire Populations, Genetique et Evolution, UPR CNRS, Gif-sur-Yvette, Франция) за предоставление линии D. santomea.

Литература

1. Стегний В.Н. Реорганизация структуры интерфазных ядер в онто- и филогенезе малярийных комаров // ДАН СССР. 1979. Т. 249, № 5. С. 1231-1234.

2. Глазков М.В. Ассоциация хромосом с ядерной оболочкой и упорядоченность пространственной организации генетического материала в интерфазном ядре // Цитология и генетика. 1999. Т. 33, № 2. С. 79-88.

3. Marshall W.F., Sedat J.W. Nuclear architecture. Results Probl. // Cell Differ. 1999. Т. 25. Р. 283-301.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

4. Sadoni N., Langer S. Nuclear organization of mammalian genomes: polar chromosome territories build up functionally distinct higher order compartments // The Journal of Cell Biology. 1999. Vol. 146, № 6. С. 1211-1226.

5. Cremer T., Cremer C. Chromosome territories, nuclear architecture and gene regulation in mammalian cells // Nat. Rev. Genet. 2001. Vol. 2. С. 292-301.

6. De Boni U., Mintz A.H. Curvilinear, three-dimensional motion of chromatin domains and nucleoli in neuronal interphase nuclei // Science. 1986. Vol. 234. С. 863-866.

7. Marshall W.F. et al. Interphase chromosomes undergo constrained diffusional motion in living cells // Current Biology. 1997. Vol. 7. С. 930-939.

8. Abney J.R., Cutler B., Fillbach M.L., Axelrod D.S. Chromatin dynamics in interphase nuclei and its implication for nuclear structure // J. Cell Biol. 1997. Vol. 137, № 7. С. 1459-1468.

9. Csink A.K., Henikoff S. Large-scale chromosomal movements during interphase progression in Drosophila // J. Cell Biol. 1998. Vol. 143, № 1. Р. 13-22.

10. Croft J.A., Bringer J.M., Boyle S. et al. Differences in the localization and morphology of chromosomes in the human nucleus // J. Cell Biol. 1999. Vol. 145, № 6. С. 1119-1131.

11. Стегний В.Н. Архитектоника генома, системные мутации и эволюция. Новосибирск: Изд-во Новосиб. ун-та, 1993. С. 110.

12. Hochstrasser M., Sedat J. W. Three-dimensional organization of Drosophila melanogaster interphase nuclei. I. Tissue-specific aspects of polytene nuclear architecture // J. Cell Biol. 1987а. Vol. 104. Р. 1455-1470.

13. Стегний В.Н., Вассерлауф И.Э. Видовая архитектоника хромосом генеративной ткани и проблемы филогенетических отношений в подгруппе melanogaster рода Drosophila (Sophophora) //Генетика. 1994. Vol. 30, № 4. С. 478-483.

14. Cтегний В.Н., Вассерлауф И.Э., Ананьина Т.В. Взаиморасположение первичных политенных хромосом яичников у 12 видов группы «virilis» рода Drosophila (Sophophora) // Генетика. 1996. Т. 32, № 6. С. 750-754.

15. Стегний В.Н., Шарахова М.В. Системная реорганизация архитектоники политен-ных хромосом в онто- и филогенезе малярийных комаров: Структурные особенности зон прикрепления хромосом к ядерной мембране // Генетика. 1991. Т. 27, № 5. С. 828-835.

16. Biemont C., Arnault C., Heizmann A. Massive changes in genomic location of P elements in an inbred line of Drosophila melanogaster // Naturwissenschaften. 1990. Т. 77. С. 485-488.

17. Медведева А.В., Савватеева Е.В. Влияние температуры на пространственную организацию политенных хромосом мутантов дрозофилы с измененными функциями кальмо-дулина // ДАН СССР. 1991. Т. 318, № 4. С. 988-991.

18. ЕвгеньевМ.Б., Мнджоян Е.И., Зеленцова Е.С. и др. Мобильные элементы и видообразование // Молекулярная биология. 1998. Т. 32, № 1. С. 184-192.

19. Жимулев И.Ф. Политенные хромосомы: морфология и структура. Новосибирск: Наука, 1992. С. 480.

20. Стегний B.H., Вассерлауф И.Э., Ананьина Т.В. Идентификация, взаиморасположение и развитие первичных политенных хромосом в ядрах трофоцитов у Calliphora erythrocephala (Diptera: Calliphoridae) // Генетика. 1999. Т. 35, № 7. С. 912-918.

21. Lachaise D., Harry M., Solignac M. et al. Evolutionary novelties in islands: Drosophila santomea, a new melanogaster sister species from Sao Tome // Evolution. 2000. Vol. 267. Р. 1487-1495.

22. Стегний В.Н. Популяционная генетика и эволюция малярийных комаров. Томск: Изд-во Том. ун-та, 1991. 137 с.

23. Zink D., Cremer T. Chromosome dynamics in nuclei of living cells // Curr. Biol. 1998. Vol. 8. Р. 321-324.

24. Ананьина Т.В., Ведерников А.Е., Вассерлауф И.Э. и др. Визуализация хромосомных территорий в интерфазных ядрах трофоцитов яичников Calliphora erythrocephala Mg (Dip-tera: Calliphoridae) // Генетика. 2005. Т. 41, № 10. С. 1106-1112.

25. Zurita F., Jimenez R., Diaz de la Geuardia R., Burgos M. The relative rDNA content of a NOR determines its level of expression and its probability of becoming active. A sequential silver staining and in-situ hybridization study // Chromosome Research. 1999. Vol. 7. Р. 563-570.