CC BY
16
Т. 16, специальный выпуск, 2011 Вестник Ивановской медицинской академии
47
изучение ультраструктурных особенностей миометрия и рецепции половых стероидов у беременных разных возрастных групп
Подзолкова Н. М., Назарова С. В., Анташова М. А.
ГОУ ДПО « Российская медицинская академия последипломного образования» Минздравсоцразвития России
В последние десятилетия значительный рост частоты родов у женщин старше 35 лет (в 1997 г. -24%, в 2008 г. - 43,2%) стал объективной реальностью современного акушерства во всем мире, в том числе и в России. Поздний репродуктивный возраст женщины принято рассматривать как самостоятельный фактор риска развития осложнений во время беременности, родов и послеродового периода. Большинство исследователей едины во мнении, что их уровень в данной возрастной группе заметно выше, чем среди более молодых пациенток. Однако до сих пор дискуссионным остается вопрос, что именно - «возраст яичников» или «возраст матки» - является основной причиной высокой частоты осложнений.
Цель исследования - провести сравнительный анализ содержания рецепторов к прогестерону и эстрогенам, индекса пролиферативной активности и ультраструктурных особенностей миометрия беременных женщин позднего и оптимального репродуктивного возраста для выяснения влияния состояния миометрия на течение беременности и родов в разных возрастных группах.
На базе родильного дома ГКБ № 72 г. Москвы у 20 беременных пациенток в возрасте от 35 до 45 лет, составивших основную группу, и 10 беременных моложе 30 лет (от 18 до 29 лет), вошедших в группу контроля, во время операции кесарева сечения осуществлялся забор биоптата миомет-рия для последующего иммуногистохимическо-го и микроэлектронного исследования. Имму-ногистохимическое исследование выполнялось пероксидазно-антипероксидазным методом с применением антител к эстроген- и прогестерон-рецепторам фирмы «BIOCARE» (ER Clone SP1, 1:300; PGR Clone SP2, 1:300) и «Ki67» фирмы «DAKO» (clone MIB 1), с предварительным разведением их в Primary Antibody Duluent (Diagnostic BioSystems)). Затем проводилась полуколичественная оценка иммуногистохимического определения рецепторов гормонов, основывающаяся на учете процента позитивных клеток и определения интенсивности их окрашивания. Индекс пролиферации Ki67 получали путем подсчета позитивных
клеток (в %) в 50 полях зрения (* 400). Изучали ультраструктурные особенности миометрия в ходе электронно-микроскопического исследования: определяли количество микрофиламентов и внутриклеточных органелл, форму ядра, субплаз-молемальные уплотнения и контакты, развитие коллагена, васкуляризацию биоптата.
Согласно полученным данным, в основной группе заметно большей была концентрация рецепторов к эстрогенам. В 60% наблюдений она составила более 40%. Интенсивность окраски ядер в среднем равнялась 1+. В группе контроля в 60% наблюдений доля окрашенных ядер была равна 0, а в оставшихся 40% - была крайне низкой (15% при интенсивности окраски 1+). Концентрация рецепторов к прогестерону также заметно отличалась в двух возрастных группах. Доля окрашенных ядер по D. С. АИ^ в основной группе в 85% случаев превышала 40%, в то время как в группе контроля в 70% наблюдений этот показатель был ниже 40%. Интенсивность окраски в баллах существенно не отличалась и в среднем составляла 2+.
Индекс пролиферативной активности №67 в основной группе в среднем составил 3,3%, а в контрольной - 0,6%. Выявлена корреляция этого индекса с концентрацией рецепторов к эстрогенам, что, очевидно, связано с тем, что эстроген является индуктором пролиферативной активности миометрия.
Результаты электронно-микроскопического исследования биоптатов миометрия показали, что количество микрофиламентов, субплазмоле-мальных уплотнений и контактов и васкуляриза-ция миометрия в двух данных возрастных группах не имеют существенных различий. Однако в био-птатах миометрия женщин позднего репродуктивного возраста значительно чаще встречаются внутриклеточные органеллы и сильнее развит коллаген, чаще встречаются клетки с каплями липидов, крупными ядрышками, лизосомами, выражен гладкий эндоплазматический ретикулум, вакуоли. В то время как в биоптатах миометрия более молодых пациенток отмечается значительно более правильная форма клеток и ядер, более
48
Проблемы репродуктивного здоровья женщин
выраженные микрофиламенты (при их приблизительно равном количестве по сравнению с биоп-татами основной группы), а субплазмолемальные уплотнения и контакты в миометрии молодых пациенток более короткие, без расширений.
Таким образом, в данном исследовании показано, что с возрастом миометрий женщин претерпевает как структурные, так и рецепторные изме-
нения, что подтверждает литературные данные о высоком значении «возраста матки» для развития ряда осложнений течения беременности и родов у женщин позднего репродуктивного возраста.
Очевидно, что наибольшие изменения касаются именно рецепторного аппарата миометрия, в то время как на ультраструктуру клеток возраст оказывает меньшее влияние.
роль биологических маркеров в дифференциальной диагностике опухолей и опухолевидных образований яичников
Подзолкова Н. М., Осадчев В. Б., Бабков К. В., Сырокваша Е. А.
ГОУ ДПО «Российская медицинская академия последипломного образования» Минздравсоцразвития России (Москва)
Одним из перспективных направлений в ранней диагностике новообразований яичников является поиск биологических веществ, специфичных для опухолей определенного гистотипа, которые можно было бы идентифицировать (количественно и качественно) биохимическими и иммунологическими методами. Повышение диагностической значимости и снижение частоты ложноотрицательных результатов возможно при комплексном определении биологических маркеров, отражающих особенности как генной экспрессии, так и метаболизма опухоли.
Цель исследования - оценка информативности комплексного определения биологических маркеров в дифференциальной диагностике опухолей и опухолевидных образований яичников.
Обследовано 59 пациенток с верифицированными опухолями и опухолевидными образованиями яичников в возрасте от 21 до 47 лет (средний возраст - 39 ± 4,8 года). В зависимости от результатов гистологического исследования удаленных тканей все больные разделены на две группы: первую составили 18 (30,5%) женщин с эндометриоидными кистами яичников, вторую -41 (69,5%) пациентка с серозными цистаденома-ми - 20 (33,9%), муцинозными цистаденомами -10 (16,9%), фибромами - 9 (15,3%), грануле-зоклеточными опухолями яичников - 2 (3,4%). В плазме крови пациенток обеих групп определялось содержание лептина, пролактина, остеопон-тина, инсулиноподобного фактора роста II, макро-фагального колониестимулирующего фактора и СА-125 методом иммуноферментного анализа.
Предельно допустимые концентрации маркеров у здоровых женщин: СА-125 - 35 ЕД/мл, пролактин -30 нг/мл, лептин - 27,6 нг/мл, остеопонтин -147,1 нг/мл, макрофагальный колониестимулиру-ющий фактор - 4 000 пг/мл, инсулиноподобный фактор роста II - 280 нг/мл.
В результате проведенного исследования установлено, что концентрации лептина, пролактина, мак-рофагального колониестимулирующего фактора, остеопонтина, инсулиноподобного фактора роста II в первой группе (п = 18) не превысили референс-ных значений (лептин - 19,8 ± 3,8 нг/мл, пролактин -23,4 ± 4,2 нг/мл, макрофагальный колониестимули-рующий фактор - 2 245,7 ± 4,8 нг/мл; остеопонтин -121,3 ± 5,3 нг/мл, инсулиноподобный фактор роста II - 168,7 ± 5,1 нг/мл). Однако отмечалось увеличение концентрации СА-125 (52,7 ± 4,6 ЕД/мл) у 15 (83,3%) больных данной группы.
У каждой третьей обследованной с серозными и муцинозными цистаденомами яичников (п = 30) отмечено повышение дискриминационных значений лептина (48,3 ± 4,2 нг/мл). Уровни пролактина, остеопонтина превышали референ-сные значения у 23 (76,7%), макрофагального колониестимулирующего фактора, инсулиноподобного фактора роста II - у 14 (46,7%) больных (пролактин - 38,7 ± 4,2 нг/мл; остеопонтин -252 ± 5,4 нг/мл; макрофагальный колониестиму-лирующий фактор - 4347 ± 3,7 нг/мл; инсулиноподобный фактор роста II - 312,4 ± 5,8 нг/мл). Повышение концентрации СА-125 (48,1 ± 5,3 ЕД/мл) отмечено у каждой пятой пациентки.
