CC BY
23
УДК 582.998:581.144.4/ 615.453.3] 615.038; 616.8 http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5-66-72
ИЗУЧЕНИЕ ЦЕРЕБРОПРОТЕКТОРНОГО ДЕЙСТВИЯ ГРАНУЛИРОВАННЫХ ЭКСТРАКТОВ ИЗ ЛИСТЬЕВ АЛЬФРЕДИИ ПОНИКШЕЙ (ALFREDIA CERNUA) Семёнова Н.Н., Компанцев Д.В., Поздняков Д.И., Шаталова Т.А., Хаджиева З.Д., Мичник О.В., Лигай Л.В. Пятигорский медико-фармацевтический институт -филиал ФГБОУВО ВолгГму, г. Пятигорск, Российская Федерация Аннотация. С целью получения лекарственного препарата из листьев Л1/ге<Иа сегпиа и рационального использования сырья нами была разработана технология последовательного экстрагирования сырья - листьев альфредии, спиртом разной концентрации, получены гранулированные экстракты (ИЭ40, ИЭ70 и ИЭ95 с использованием этанола 40%, 70%, 95%, соответственно). Целью исследованияяви-лось изучение церебропротекторного действия гранулированных экстрактов альфредии. Церебропротекторную активность экстрактов изучали путем проведения двух серий опытов на половозрелых крысах линии Угз1аг. На первом этапе у крыс создавали ишемию головного мозга (вариант - фокальная ишемия) и оценивали активность животных в водном лабиринте Морриса. Затем определяли величины некроза, отека головного мозга. Во второй части эксперимента проводили биохимические исследования по оценке состояния про/антиоксидантного равновесия в тканях мозга в условиях церебральной ишемии. Было установлено, что введение исследуемых экстрактов альфредии ИЭ40, ИЭ70, ИЭ95 и препарата сравнения (экстракта гингко билоба) привело к восстановлению про/антиоксидантного баланса, нормализации метаболизма головного мозга, снижению степени отека и некроза мозговой ткани. Эффект применения экстракта ИЭ40 превосходил по величине церебро-протекторного действия экстракты ИЭ70 и ИЭ95 и не уступал референтному препарату - экстракту гинкго би-лоба. Ключевые слова: листья альфредии поникшей, гранулированные экстракты, церебропротекторная активность, про-антиоксидантная активность, эксперименты на крысах. THE STUDY OF THE CEREBROPROTECTIVE ACTION OF THE GRANULAR EXTRACTS FROM THE LEAVES OF THE ALFREDIA CERNUA Semenova N.N., Kompancev D. V., Pozdnyakov D.I., Shatalova T.A., Hadzhieva Z.D., Michnik O.V., Ligaj L. V. Рyatigorsk medical pharmaceutical institute of Volgograd state medical university, Pyatigorsk, Russian Federation Annotation. In order to obtain the drug from the leaves of Alfre-dia cernua and the rational use of raw materials, we have developed a technology of sequential extraction of raw materials -leaves of alfredia with the alcohol of different concentrations, obtained granular extracts (IE40, IE70 and IE95 using ethanol 40%, 70%, 95%, respectively). The aim of the study was to study the cerebroprotective effect of granular extracts of Alfredo. Cerebroprotective activity of the extracts was studied by conducting two series of experiments on Mature rats of the Vistar line. At the first stage we created cerebral ischemia in rats (focal ischemia) and assessed animal activity in the Morris water maze. Then the values of necrosis, edema of the brain ofanimals were determined. In the second part of the experiment, biochemical studies were conducted to assess the state of Pro/antioxidant balance in brain tissues under cerebral ischemia. It was found that the introduction of the studied extracts of Alfred IE40, IE70, IE95 and the comparison drug (gingko biloba extract) led to the restoration of Pro/antioxidant balance, normalization of brain metabolism, reducing the degree of edema and necrosis of brain tissue. The effect of the extract H340 surpassed by the magnitude of the cerebroprotective actions of extracts H370 and H395 and not inferior to the reference drug - Ginkgo biloba extract. Key words: the leaves of the Alfredia cernua, the granular extracts, the cerebroprotective activity, the pro-antioxidant activity, the experiments on the rats.
БИБЛИОГРАФИЧЕСКИЙ СПИСОК [1] Шилова И.В., Суслов Н.И., Самылина И.А. Химический состав и ноотропная активность растений Сибири. - Томск, 2010. 236 с. REFERENCES [1] Shilova I.V., Suslov N.I. Samylina I.A. Chemical composition and nootropic activity of plants in Siberia. Tomsk, 2010, 236 p. (in Russian)
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5 —--—
2 Разработка технологии экстрагирования листьев аль-фредии поникшей (Alfredia сетиа)/Семёнова Н.Н., Компанцев Д.В., Шаталова Т.А., Мичник О.В., Мич-ник Л.А., Стригун Н.С.//Журнал научных статей Здоровье и образование в XXI веке. 2018. Т. 20. №12. С. 149-154.
[3] Bederson J.B., Pitts L.H., Tsuji M., Nishimura M.C., Davis R.L., Bartkowski H. Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination //Stroke. 1986. Vol. 17. P. 472-476 [Электронный ресурс] режим доступа: URL https: //www. ahajour-
nals.org/doi/pdf/10.1161/01.str.17.3.472 (дата обращения: 06.12.2018)
[4] Хоцкин Н.В., Куликов В.А., Завьялов Е.Л., Фурсенко Д.В., Куликов А.В. Проведение иавтоматизация теста «водный лабиринт Морриса» в условиях SPF-вивария. //Вавиловский журнал генетики и селекции. 2015. 19(4). С. 388-393. DOI 10.18699/VJ15.049
[5] Пат. 2354397 Российская Федерация. Средство, обладающее анксиолитическим действием/Кувачева Н.В., Мустафин Р.Н., Суслов Н.И., Хазанов В.А., Шилова И.В. Опубл. 10.05.2009. Бюл. №13-8с. -[Электронный ресурс] режим доступа: URL http://www.freepa-tent.ru/patents/2354397 (дата обращения: 10.12.2018)
[6] Wang N., Chen X., Geng D., Huang H., Zhou H. Ginkgo biloba leaf extract improves the cognitive abilities of rats with L>-galactose induced dementia // Journal of Biomedical Research. 2013. Vol. 27. P. 29-36.
[7] Сернов Л.Н., Гацура В.В. Элементы экспериментальной фармакологии. М: Всерос. центр по безопасности биол. актив. веществ, 2000. 351 с.
[8] Поздняков Д.И. Эндотелиопротекторная активность производных коричной кислоты и флавоноидов на фоне ишемии головного мозга: дисс. ... канд. фармац. наук. 14.03.06. Волгоград, 2018. 200 с.
[9] Voronkov A. V., Pozdnyakov D. I. Endothelotropic activity of 4-hydroxy-3, 5-di-tret-butylcinnamic acid in the conditions of experimental cerebral ischemia//Research Results in Pharmacology. 2018. N.2. С.1-10.
[10] Королюк М.А. Метод определения активности ката-лазы // Лабораторное дело. 1988. № 1. С. 16 - 19.
[11] Woolliams JA, Wiener G, Anderson PH, McMurray CH Variation in the activities of glutathione peroxidase and superoxide dismutase and in the concentration of copper in the blood in various breed crosses of sheep //Research in Veterinary Science. 1983. P. 253-256.
[12] Pierce S. Glutathione peroxidase activities from rat liver / S. Pierce, A.L. Tappel // Biochim. еt biophys. Acta. 1978. Vol. 523. No 1. P. 27 - 36.
[13] Goldberg D.M. & Spooner RJ (1983) in Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyen, H.V. Ed.) 3rd edn. Vol. 3, P. 258-265, Verlog Chemie, Deerfield Beach, FL.
[14] Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью ТБК // Современные методы в биохимии /под. ред. В.Н. Ореховича. М.: Медицина, 1977. С. 44-46.
[2] Development of technology for extraction of the leaves of Alfredia drooping (Alfredia Cernua).Semenova N.N., Kompancev D.V., Shatalova T.A., Michnik O.V., Michnik L.A., Strigun N.S.. Journal of scientific articles Health & Education millennium, 2018, vol. 20, No.12, p.p. 149-154. (in Russian)
[3] Bederson J.B., Pitts L.H., Tsuji M., Nishimura M.C., Davis R.L., Bartkowski H. Rat middle cerebral artery occlusion: evaluation of the model and development of a neurologic examination. Stroke. 1986; 17, p. 472-476 (access mode: URL https://www.ahajour-nals.org/doi/pdf/10.1161/01.str.17.3.472) (date of treatment: 06.12.2018) (in English)
[4] Khotskin N.V., Kulikov V.A., Zavyalov E.L., Fursenko D.V., Kulikov A.V. Con-ducting and automating the water Morris maze test in SPF conditions. Vavilovskii Zhurnal Genetiki I Selektsii. Vavilov Journal of Genetics and Breeding, 2015, 19(4), p.p. 388-393. Doi 10.18699/VJ15.049 (in English)
[5] RU 2354397 Means having an anxiolytic effect. Ko-vacheva N. I., Mustafin R.N., Suslov N.A., Khazanov V.A., Shilova I.V. Publ. 10.05.2009. Issue No.13, 8p. (access mode: URL http://www.freepatent.ru/pa-tents/2354397) (date of treatment: 10.12.2018) (in Russian)
[6] Wang N., Chen X., Geng D., Huang H., Zhou H. Ginkgo biloba leaf extract improves the cognitive abilities of rats with L>-galactose induced dementia. Journal of Biomedical Research, 2013, vol. 27, p.p. 29-36. (in English)
[7] Sernov L.N., Gatsura V.V. Elements of experimental pharmacology. Moscow: 2000, 351 p. (in Russian)
[8] Pozdnyakov D.I. Endotheliopathy activity of derivatives of cinnamic acid and flavonoids on the background of cerebral ischemia: dissertation of candidate of pharmaceutical Sciences. 14.03.06. Volgograd, 2018, 200 p. (in Russian)
[9] Voronkov A. V., Pozdnyakov D. I. Endothelotropic activity of 4-hydroxy-3, 5-di-tret-butylcinnamic acid in the conditions of experimental cerebral ischemia. Research Results in Pharmacology. 2018, No.2, p.p.1-10. (in English)
[10] Korolyuk M.A. Method for determining catalase activity. Laboratory work, 1988, No. 1, p.p. 16 - 19. (in Russian)
[11] Woolliams J.A., Wiener G., Anderson P.H., McMurray C.H .Variation in the activities of glutathione peroxidase and superoxide dismutase and in the concentration of copper in the blood in various breed crosses of sheep Research in Veterinary Science. Vol. 34, Issue 3, May 1983, p.p. 253-256. (in English)
[12] Pierce S. Glutathione peroxidase activities from rat liver. S. Pierce, A.L. Tappel. Biochim. Et biophys. Acta. 1978, vol. 523, No. 1, p.p. 27 - 36. (in English)
[13] Goldberg D.M. & Spooner RJ (1983) in Methods of Enzymatic Analysis (Bergmeyen, H.V. Ed.) 3rd edn. Vol 3, p.p. 258-265, Verlog Chemie, Deerfield Beach, FL. (in English)
[14] Stalnaya I.D., Garishvily T.G. Method for determination of malondialdehyde by TBK. Modern methods in biochemistry. Under edition V.N. Orechovich. Moscow, Medicine, 1977, p.p. 44-46. (in Russian)_
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5 —--—
В настоящее время известны работы по исследованию химического состава и фармакологического действия травы и экстрактов альфредии поникшей (Alfredia cernua) (в дальнейшем альфредии) [1]. В этих исследованиях было установлено церебропротектор-ное действие спирто-водных экстрактов травы альфредии [1]. В связи с тем, что стебли травы практически не содержат значимых количеств биологически активных веществ, нами была изучена возможность использования в качестве сырья листьев альфредии взамен травы [2]. С целью получения лекарственного препарата из листьев альфредии и рационального использования сырья нами были разработаны: 1) технология последовательного экстрагирования сырья, листьев аль-фредии, спиртом разной концентрации [2]; 2) технология гранулирования полученных жидких экстрактов, путем их адсорбции в жидком состоянии на специальных носителях (кроскармеллоза натрия, полипласдон и др.).
Целью исследования является изучение цереб-ропротекторного действия гранулированных экстрактов листьев альфредии, полученных из одной и той же порции сырья путем его последовательного экстрагирования спирто-водными растворами разной концентрации (95%, 70%, 40%).
Материалы и методы исследования. В качестве объектов исследования использовали гранулированные экстракты альфредии (ИЭ95%, ИЭ70%, ИЭ40%).
Церебропротекторную активность экстрактов изучали путем проведения двух серий опытов. Для проведения эксперимента у половозрелых крыс линии Vistar массой 210-230 грамм создавали экспериментальную модель ишемии головного мозга (вариант - фокальная ишемия путем создания необратимой правосторонней окклюзии средней мозговой артерии) [3]. Для проведения эксперимента были сформированы следующие группы по 12 животных: ЛО - ложнооперированные крысы; НК - группа животных негативного контроля, лишенная фармакологической поддержки; группы животных, получавшие исследуемые экстракты ИЭ40; ИЭ70 и ИЭ95; РП - группа животных, которой вводили референтный препарат экстракт гинкго билоба (ЭГБ, Hunan WarantPharm Laboratories). Содержание и все проводимые с животными манипуляции соответствовали требованиям Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых для экспериментальных и других научных целей (Strasbourg, 22 June, 1998.).
В первой части эксперимента сначала оценивали поведение крыс в тесте «Водный лабиринт Морриса» (ВЛМ) [4], а затем - величину некроза, отека головного мозга. Во второй части эксперимента проводили биохимические исследования по оценке состояния
про/ангаоксидантного равновесия в тканях мозга в условиях церебральной ишемии.
Изучаемые экстракты (ИЭ40; ИЭ70 и ИЭ95), а также референтный препарат - экстракт гинкго билоба (ЭГБ, Hunan WarantPharm Laboratories) вводили интр-агастрально через атравматичный зонд, после моделирования ишемии головного мозга и далее ежедневно однократно на протяжении 3-х суток. Исследуемые экстракты вводили в дозе 100 мг/кг [5], препарат сравнения в дозе 35 мг/кг [6]. Регистрацию показателей активности животных осуществляли на 4-е сутки с момента операции.
Для определения величины отека головного мозга, его извлекали, взвешивали и высушивали в сушильном шкафу до постоянной массы при температуре 60°С. Массу влаги выражали в процентах от исходной массы навески. Размер зоны некроза определяли трифенил-тетразолиевым методом [7]. Результаты экспериментов обрабатывали методами вариационной статистики с применением пакета прикладных программ «Statistica 6.0». Сравнение групп средних производили методом ANOVA с пост-тестом Ньюмена-Кейсла, при р <0,05.
Во 2 серии опытов число особей в каждой экспериментальной группе равнялось 6. В качестве биоматериала в работе использовали сыворотку цитратной крови, гомогенат и супернатант головного мозга крыс. В го-могенате головного мозга оценивали изменение концентрации малонового диальдегида (МДА), в суперна-танте головного мозга определяли активность антиок-сидантных ферментов: каталазы, супероксиддисму-тазы (СОД), глутатионпероксидазы (ГП) и глутатион-редуктазы (ГР).
Концентрацию молочной кислоты определяли в ферментативной реакции с образованием квинино-мина, концентрация которого пропорциональна содержанию молочной кислоты в образце [8, 9]. Содержание пировиноградной кислоты определяли по убыли НАДН в лактат-дегидрогеназной реакции [8, 9]. Активность каталазы определяли спектрофотометрическим методом по скорости разложения пероксида водорода [9, 10]. Активность супероксиддисмутазы (СОД) оценивали ксантин-ксантиноксидазным методом, основанным на реакции дисмутации супероксидного радикала, образующегося в ходе окисления ксантина и восстановления 2-(4-йодофенил)-3-(4-нитрофенол)-5-фе-нилтетразолия хлорида [9, 11]. Активность глутати-онпероксидазы (ГП) определяли в сопряженной глута-тион-редуктазной реакции по регистрации убыли НАДФН [9, 12]. Оценку активности глутатионредук-тазы (ГР) проводили по реакции, основанной на способности ГР катализировать реакцию восстановления глутатиона в присутствии НАДФН [13].
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5
—--—-
Концентрацию малонового диальдегида (МДА) определяли спектрофотометрической детекцией окрашенного в розовый цвет комплекса, образующегося в ходе реакции конденсации с 2-тиобарбитуровой кислотой [9, 14].
Результаты исследования. Данные об активности групп животных в тесте «Водный лабиринт Морриса» приведены на рисунке 1.
Рис. 1. Влияние исследуемых объектов и препарата сравнения на время выполнения исследовательской задачи
в тесте ВЛМ
Примечание: # - статистически значимо относительно ЛО группы крыс; *- статистически значимо относительно НК группы крыс.
Результаты оценки активности животных в тесте ВЛМ, представленные на рисунке 1, показали, что у животных НК - группы время выполнения задачи превосходило аналогичный показатель ЛО - группы крыс в 4,5 (р <0,05) раза. На фоне введения животным референта - экстракта гинкго билоба время достижения площадки у крыс в сравнении с НК группой животных уменьшилось на 24,3% (р <0,05). При применении изучаемого экстракта ИЭ40, отмечено сохранение памятного следа у крыс после ишемии головного мозга, о чем может свидетельствовать повышение скорости
решения исследовательской задачи у данной группы крыс по отношению к НК группе животных на 24,8% (р<0,05). В то же время введение изучаемых объектов ИЭ70 и ИЭ95 значимого влияния на поведение крыс в тесте ВЛМ не оказало (статистически значимых отличий относительно НК группы животных не установлено).
Сравнительные данные о влиянии изучаемых объектов и препарата сравнения на величину отека и размер зоны некроза головного мозга у крыс в условиях фокальной ишемии представлены на рисунке 2.
The Journal of scientific articles "Health and Education Millennium", 2019. Vol. 21. No 5 http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5 —-9»C»0»9-—
Рис. 2. Влияние исследуемых объектов и препарата сравнения на величину отека головного мозга у крыс в
условиях ишемии головного мозга.
Примечание: # - статистически значимо относительно ЛО группы крыс; *- статистически значимо относительно НК группы крыс.
Результаты оценки степени гидратации головного мозга, представленные на рисунке 2, показали, что у крыс НК- группы содержание влаги в головном мозге в условиях церебральной ишемии на 9,8% ф <0,05) превосходит аналогичный показатель ЛО- группы крыс. Это может свидетельствовать о развитии отека головного мозга у НК- группы, лишенных фармакологической поддержки. Применение ЭГБ способствовало уменьшению степени гидратации головного мозга у крыс в сравнении с НК- группой животных на
3% ф <0,05). В условиях введения крысам исследуемого экстракта ИЭ40 данный показатель уменьшился на 3,9% ф <0,05). При этом на фоне введения объектов ИЭ70 и ИЭ95 величина церебрального отека статистически значимо относительно НК группы крыс не изменилась.
Данные об исследовании влияния изучаемых объектов и препарата сравнения на размер зоны некроза головного мозга у крыс в условиях церебральной ишемии представлены на рисунке 3.
60
50
¡а
-л
С &
и
а X Я X о
40
20
10
* *
* нн * rh нн Hh
НК
ЭГБ
ИЭ40
ИЭ70
ИЭ95
Журнал включен в Перечень рецензируемых научных изданий ВАК
~ 70 ~
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5
—--—-
Рис. 3. Влияние исследуемых объектов и препарата сравнения на размер зоны некроза головного мозга у крыс в
условиях церебральной ишемии.
Примечание: # - статистически значимо относительно ЛО группы крыс; *- статистически значимо относительно НК группы крыс.
Анализ данных, полученных при изучении влияния изучаемых экстрактов на величину зоны некроза головного мозга у крыс в условиях церебральной ишемии и представленных на рисунке 3, показал, что применение ЭГБ способствовало уменьшению зоны некроза по сравнению с НК- группой животных на 42% ф <0,05). На фоне введения исследуемых объектов ИЭ40, ИЭ70 и ИЭ95 величина зоны некроза по отношению к НК-группе крыс, лишенных фармакологической поддержки, уменьшилась на 39,5% (р <0,05); 20,2% (р <0,05) и 21,5% (р <0,05), соответственно. При этом относительно группы животных, которым вводили ЭГБ, у крыс, получавших ИЭ70 и ИЭ95, процент некротизированной ткани головного мозга был выше на 18,1% (р <0,05) и 17% (р <0,05), соответственно.
Кроме того, у животных, получавших ИЭ40, зона некроза головного мозга по отношению к крысам, которым вводили изучаемые объекты ИЭ70 и ИЭ95, снизилась на 16% (р <0,05) и 14,9% (р <0,05). Таким образом, было установлено, что уменьшение гидратации головного мозга при применении исследуемых экстрактов, способствовало уменьшению величины зоны некроза мозговой ткани, что положительно отразилось на сохранении памятного следа у крыс в условиях церебральной ишемии.
Результаты изучения влияния исследуемых объектов и препарата сравнения на изменение сывороточной концентрации молочной и пировиноградной кислот у крыс в условиях фокальной ишемии представлены в таблице 1.
Таблица 1
Влияние изучаемых объектов и препарат сравнения на изменение концентрации лактат и пирувата в сыворотке крови крыс в условиях фокальной ишемии головного мозга
Группа ЛО НК ЭГБ ИЭ40 ИЭ70 ИЭ95
Лактат, ммоль/л 1,37±0,068 3,61±0,064# 2,63±0,116* 2,54±0,093* 2,57±0,032* 2,92±0,064*
Пируват, мкмоль/л 110,36±1,96 445,20±7,211# 278,53±17,636* 347,92±3,678* 359,65±3,291* 385,14±7,841*
Примечание: # - статистически значимо относительно ЛО группы крыс; *- статистически значимо относительно НК группы крыс.
В ходе изучения влияния исследуемых объектов и препарата сравнения на изменение сывороточной концентрации молочной и пировиноградной кислот у крыс в условиях фокальной ишемии (таблица 1) установлено, что у НК- группы крыс в условиях фокальной ишемии в сравнении с ЛО- группой животных наблюдалось повышение концентрации лактата и пирувата в сыворотке крови на 163,5% (р<0,05) и в 4 (р<0,05) раза, соответственно. На фоне введения экспериментальным животным референтного препарата ЭГБ установлено снижение содержания молочной и пировиноград-ной кислот в сыворотке крови относительно НК группы крыс на 37,3% (р <0,05) и 59,8% (р <0,05) соответственно. При применении исследуемого объекта ИЭ40 концентрация лактата и пирувата в сравнении с НК группой животных уменьшилась на 42,1% (р <0,05)
и 28% (р <0,05) соответственно. В условиях введения экспериментальным животным изучаемых объектов ИЭ70 и ИЭ95 содержание молочной кислоты по отношению к НК группе крыс снизилось на 40,5% (р <0,05) и 23,6% (р <0,05) соответственно. В тоже время на фоне применения данных экстрактов (ИЭ70 и ИЭ95) концентрация пировиноградной кислоты уменьшилась на 23,8% (р <0,05) и 15,6% (р <0,05) соответственно. При этом содержание пирувата у крыс, получавших ИЭ70 и ИЭ95, в сравнении с животными, которым вводили ЭГБ, было выше на 29,1% (р <0,05) и 38,3% (р <0,05) соответственно.
Результаты изучения влияния изучаемых объектов и препарата сравнения на изменение про/антиокси-дантного равновесия у крыс в условиях фокальной ишемии представлены в таблице 2.
Таблица 2
Влияние изучаемых объектов и препарат сравнения на изменение про/антиоксидантного баланса головного мозга у крыс в условиях церебральной ишемии
Показатели Группы животных
ЛО НК ЭГБ ИЭ40 ИЭ70 ИЭ95
СОД, ЕД/мг 292,88±2,881 97,35±1,159# 243,67±11,043* 210,38±18,057* 182,92±22,269* 181,4±10,306*
ГП, ЕД/мг 551,77±16,533 123,94±8,244# 343,99±14,781* 355,06±11,649* 327,46±12,99* 333,21±9,059*
http://dx.doi.org/10.26787/nydha-2226-7425-2019-21-5
—--—-
ГР, ЕД/мг 32,31±1,058 11,96±1,632# 21,21 ±1,179* 23,43±0,902* 21,23±1,474* 18,34±2,756*
Каталаза, мкат/мг 0,57±0,023 0,18±0,02# 0,32±0,036* 0,37±0,052* 0,34±0,021* 0,33±0,026*
МДА, мкмоль/мг 4,08±0,266 15,45±0,594# 10,03±0,877* 10,96±0,803* 11,53±0,125* 12,54±0,639*
Примечание: # - статистически значимо относительно ЛО группы крыс; *- статистически значимо относительно НК
группы крыс.
В условиях церебральной ишемии (таблица 2) у НК группы крыс отмечено нарушение про/антиоксидант-ного баланса в сторону усиления оксидативного стресса, о чем может свидетельствовать повышение концентрации МДА в сыворотке у данной группы крыс в сравнении с ЛО группой животных в 3,8 ф<0,05) раза, а также уменьшение активности ферментов анти-оксидантной защиты СОД, ГП, ГР и каталазы в 3 ф<0,05) раза; 4,5 (р<0,05) раза; 2,7 (р<0,05) раза и 3,2 ф<0,05) раза, соответственно.
На фоне введения крысам ЭГБ отмечено восстановление активности антиоксидантных ферментов, так в сравнении с НК группой животных у крыс, получавших ЭГБ, наблюдалось увеличение активности СОД -в 2,5 раза (р<0,05); ГП - в 2,8 раза (р<0,05); ГР - в 1,8 раза (р<0,05) и каталазы - в 1,8 раза ф<0,05), кроме того возникшие изменения в антиоксидантной системе сопровождались снижением образования МДА на 54% ф<0,05). При применении изучаемого объекта ИЭ40 относительно НК группы крыс отмечено уменьшение концентрации МДА на 41% ф<0,05), а также повышение активности СОД, ГП, ГР и каталазы в 2,2 раза ф<0,05); 2,9 (р<0,05) раза; 2 ф<0,05) раза и 2,1 ф<0,05) раза соответственно. В условиях введения животным экстракта ИЭ70 наблюдалось (по сравнению с НК группой крыс) уменьшение концентрации МДА, а также повышение активности ферментов эндогенной антиоксидантной защиты СОД, ГП, ГР и каталазы на 34% ф<0,05); 1,9 ф<0,05) раза; 2,6 ф<0,05) раза; 1,8 ф<0,05) раза и 1,9 ф<0,05) раза соответственно. На фоне коррекции ишемии головного мозга введением изучаемого объекта ИЭ95 по отношению к НК группе
животных отмечено повышение активности СОД - в 1,9 раза ф<0,05); ГП - 2,7 раза ф<0,05); ГР - 1,5 раза ф<0,05) и каталазы - в 1,8 раза ф<0,05), а также снижение концентрации МДА - на 22,8% ф<0,05). При этом статистически значимых отличий между группами крыс, получавших референтный препарат и исследуемые объекты ИЭ40, ИЭ70 и ИЭ95 не установлено.
В настоящем исследовании установлено, что исследуемые экстракты ИЭ40, ИЭ70 и ИЭ95 обладают выраженной антиоксидантной активностью, сопоставимой с референтом (экстракт гинкго билоба). При этом, подавление окислительного стресса может способствовать стабилизации процессов энергообмена, предотвращать развитие отека головного мозга, что положительно отражается на животных в условиях церебральной ишемии.
Выводы:
1. Введение исследуемых экстрактов ИЭ40, ИЭ70 и ИЭ95 так же, как и препарата сравнения привело к восстановлению про/антиоксидантного баланса, нормализации метаболизма головного мозга, снижению степени отека и некроза мозговой ткани.
2. Введение исследуемых экстрактов листьев альфре-дии (ИЭ40, ИЭ70 и ИЭ95) так же, как и препарата сравнения привело к снижению степени отека и некроза мозговой ткани. При этом, по совокупности данных, изучаемый объект ИЭ40 превосходит по величине це-ребропротекторного эффекта экстракты ИЭ70 и ИЭ95 и не уступает референтному препарату-экстракту гинкго билоба.
Конфликт интересов - нет.
