CC BY
7Цель
Оценить возможность и эффективность доставки экзогенных функциональных белков растительными везикулами к клеткам человека.
Материалы и методы
В настоящей работе PEVs из грейпфрутового сока были выделены методом ультрацентрифугирования, после чего охарактеризованы при помощи анализа траектории наночастиц, динамического светорассеяния, атомно-силовой микроскопии и криоэлектронной микроскопии, что позволило получить высококачественные изображения мембранных везикул грейпфрута. Далее in vitro были проведены эксперименты по оценке эффективности нагрузки PEVs флюоресцентно меченными белками, а также по захвату клетками человека нагруженных частиц методами флюоресцентной спектроскопии и проточной цитометрии. Функциональность доставленных в составе PEVs белков в клетках человека оценивали в режиме реального времени с помощью оборудования xCELLigence. Биораспределение растительных везикул in vivo анализировали с применением изотопа I125.
Результаты
В исследовании показано, что внеклеточные везикулы грейпфрута высокоэффективны для доставки экзогенных белков, включая HSP70, в различные опухолевые клетки человека. Кроме того, было подтверждено сохранение функциональной активности белков, доставляемых в клеточные линии человека при помощи растительных везикул. В рамках работы было также проанализировано биораспределение нагруженных меченым I125 белком растительных везикул в животных тканях и органах ex vivo. Таким образом, в этом исследовании впервые продемонстрирована эффективная доставка белков, включая иммуномодулирующий Hsp70 [4], с сохранением их функциональности в клетки млекопитающих in vitro и ex vivo с помощью нативных везикул растительного происхождения.
Выводы
В совокупности представленные данные могут стать основой для дальнейшего развития фармакологических наносистем. Исследование выполнено при поддержке РНФ № 19-74-20146.
Список литературы
1. Hessvik NP, Llorente A. Current knowledge on exosome biogenesis and release . Cell Mol Life Sci . 2018;75(2):193-208 .
2 . Sil S, Dagur RS, Liao K, et al . Strategies for the use of Extracellular Vesicles for the Delivery of Therapeutics [published
online ahead of print, 2019 Aug 27] . J Neuroimmune Pharmacol . 2019;10 .
3 . Meng, W. et al . Prospects and challenges of extracellular vesicle-based drug delivery system: Considering cell source . Drug
Deliv. 27, 585-598 (2020) .
4 . Komarova, E ., Suezov, R . , et al . Hsp70-containing extracellular vesicles are capable of activating of adaptive immunity in
models of mouse melanoma and colon carcinoma Sci Rep 11, 21314 (2021)
Изучение связи между экспрессией микроРНК в биопсийном материале и устойчивостью клеток рака молочной железы к паклитакселу
Авторы
Сидина Е.И., sidina@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Слюсаренко М.А., slusarenko_masha@mail.ru, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Князева М.С., margo9793@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Забегина Л.М., lidiazabegina@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Шалаев А.В., shalaeff.andrey@gmail.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Малек А.В., anastasia@malek.com, ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова:
МикроРНК, неоадъювантная химиотерапия, химиорезистентность, паклитаксел
Актуальность лекарственная устойчивость у ряда пациентов пред-
Неоадъювантная химиотерапия является важным ставляет собой серьезную проблему. Поиск в биоп-этапом лечения рака молочной железы (РМЖ), но сийном материале молекул — предикторов хими-
орезистентности в перспективе может обеспечить персонализированный подход к выбору терапии и повысить эффективность лечения. Большим диагностическим потенциалом в этом отношении обладают молекулы микроРНК.
Цель
Используя материал диагностических трепан-биопсий, изучить профиль экспрессии 16 микроРНК, которые, по данным литературы, участвуют в реакции опухоли на действие паклитаксела. Сравнить полученные результаты с данными о химиочув-ствительности пациентов к неоадъювантной химиотерапии паклитакселом и выявить микроРНК, имеющие предиктивный потенциал.
Материалы и методы
Для анализа микроРНК использовали архивные образцы диагностических трепан-биопсий от 31 пациентки с диагнозом РМЖ, проходившей лечение паклитакселом в ФГБУ «НМИЦ онкологии им. Н.Н. Петрова» в 2018-2019 гг. Проводили выделения тотальной клеточной РНК и последующую обратную транскрипцию с полимеразной цепной реакцией. Определяли относительную экспрессию микроРНК в образцах, после чего выявляли различия между группами с помощью критерия х2.
Результаты
Исследована экспрессия 16 микроРНК (miR-7-5p, тЖ-15а-5р, тЖ-16-5р, тЖ-24-3р, miR-27a-3p, тЖ-29-3р, тЖ-30а-5р, тЖ-34а-5р, miR-93-5p, тЖ-125Ь-5р, тЖ-145-5р, тЖ-186-5р, тЖ-200с-3р, miR-205-5р, т1Я-221-3р, т1Я-451а-5р) в архивных образцах пациенток с диагнозом РМЖ. Пациентки были разделены на 2 группы на основании оценки регресса опухоли после терапии паклитакселом. В результате анализа данных ОТ-ПЦР с достоверностью 0,95 обнаружено различие между двумя группами в содержании т1Я-7-5р и тЖЛ86-5р. Данные микроРНК чаще обнаруживались в образцах пациенток, чувствительных к терапии паклитакселом (размер резидуальной опухоли после 2 циклов терапии менее 50%).
Выводы
Таким образом, проведенное исследование позволяет предположить, что существует связь между присутствием в клетках РМЖ молекул miR-7-5p, miR-186-5p и химиорезистентностью этих клеток по отношению к паклитакселу. Эти результаты имеют значение для понимания молекулярных механизмов реакции клеток РМЖ на цитостатическую терапию. Необходимы дальнейшие исследования для оценки предиктивного потенциала miR-7-5p и miR-186-5p и разработки персонализированного подхода при выборе схемы неоадъювантной химиотерапии.
Список литературы
1. Ghafouri-Fard, Soudeh et al . Role of non-coding RNAs in modulating the response of cancer cells to paclitaxel treatment . Biomedicine & pharmacotherapy=Biomedecine & pharmacotherapie vol . 134 (2021): 111172. D0l:10 ,1016/j . bio-pha . 2020 .111172
2 . Si, Wengong et al . The role and mechanisms of action of microRNAs in cancer drug resistance . Clinical epigenetics vol . 11,1 25 . 11 Feb . 2019, doi:10 . 1186/s13148-018-0587-8.
ЯДЕРНАЯ МЕДИЦИНА В КЛИНИЧЕСКОЙ ОНКОЛОГИИ
Использование магнитных частиц для определения иммунореактивной фракции меченных изотопом 68Ga наноантител против PD-L1
Авторы
Авров Кирилл Олегович, kirillavrov@hotmail.com, ФГБУ «РНЦРХТ им. академика А.М. Гранова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Шатик Сергей Васильевич, s_shatik@hotmail.com, ФГБУ «РНЦРХТ им. академика А.М. Гранова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Самойлович Марина Платоновна, mpsamoylovich@gmail.com, ФГБУ «РНЦРХТ им. академика А.М. Гра-нова» Минздрава России, Санкт-Петербург
Ключевые слова:
радиоиммуноконъюгат, иммунореактивная фракция, магнитные частицы
