CC BY
3ПРОБЛЕМЫ ПРИКЛАДНОЙ НАУКИ
УДК: 619:615.33
В.Е. Абрамов, В.,П. Шуклин, С.В. Русаков, Н.П. Бирюкова, Л.Р. Шаповалова, С.М. Грибко
(ФГУ «ВГНКИ», Cмоленский сельскохозяйственный институт)
ИЗУЧЕНИЕ СРОКОВ ВЫВЕДЕНИЯ ОСТАТОЧНЫХ КОЛИЧЕСТВ ТИАМУЛИНА ИЗ ОРГАНИЗМА СВИНЕЙ
Ключевые слова: антибиотики, тиамулин, дегард ведения,свиньи.
Введение
Денегард 80% производства «Сандоз ГмбХ» Австрия - антибактериальный препарат содержит в своем составе 800 г/кг тиамулина гидрогена фумарата, наполнитель желатин; представляет собой мелкодисперсный порошок бело-желтого цвета со специфическим запахом, нерастворим в воде.
Задачи и цели исследования
Изучить сроки выведения тиамулина из организма свиней после курсового применения препарата Денегард 80% порошок.
Материалы и методы
1. Препарат денегард «Denagard 80% coated» производства фирмы «Сандоз» Австрия.
Место проведения опыта. Откормочный комплекс АПК «Катынский», помещение № 11/12, ФГУ «ВГНКИ».
2. Стандарт: тиамулин гидроген фума-рат с активностью 99,2%, предоставлен фирмой «Сандоз».
Жидкостной хроматограф высокого давления Hewlett Paccard 1090 A с УФ-детектором.
3. Сроки выведения остаточных количеств тиамулина изучали на свиньях породы русская белая, находившихся на участке финального откорма. В опыте использовали - 31 животное обоего пола массой 107-115 кг . 30 животных являлись опытными, а одно - контрольным. Во время опыта животных кормили только комбикормом (рецепт № К-58оп-727), кормление двухра-
80% порошок, остаточные количества, сроки вы-
зовое, поение из автоматических поилок.
Из опытных животных были сформированы 3 группы по 10 голов, которых поместили в отдельный станок. После взвешивания животных были приготовлены 30 навесок препарата денегард 80% из расчета 12,5 мг на 1 кг массы тела. Эти навески тщательно перемешивали с небольшим количеством комбикорма (состав приведен выше) и делили на две части. Одна часть комбикорма задавалась перед утренним кормлением, вторая - перед вечерним. денегард вводили в течение 10 суток.
Через 5 и 6 суток после последней дачи препарата провели убой 3 животных из опытных групп и 1 животного (контрольного) из соседнего станка, где животные получали комбикорм без препарата. От туш были взяты образцы органов и тканей (массой около 50 г), используемых в пищу (мышечная ткань, печень, легкие, почки, сердечная мышца, жировая ткань). Образцы поместили в промаркированные полиэтиленовые пакеты, заморозили при температуре минус 18-20° С. Транспортировка образцов в лабораторию для исследований проводилась в пенопластовом термоконтейнере с вложением охлажденных до минус 18-20° С аккумуляторов холода.
Методика определения тиамулина в биосубстратах Для исследований использовали методику Hwi-Cang Chen et al. (2006 г.) в нашей модификации.
Для построения графика корреляции площади пика и концентрации использо-
вали ряд стандартных разведений тиаму-лина гидроген фумарата 10; 5; 2,5; 1,0; 0,5 и 0,1 мкг/см3.
Содержание тиамулина гидроген фумарата в экстрактах рассчитывали по уравнению калибровки. Полученные значения корректировали с учётом уровня извлечения тиамулина из органов и тканей, а также коэффициента концентрирования.
Определение уровня извлечения тиамулина проводили на контрольных пробах, приготовленных из экстрактов органов и тканей животного не получавшего препарат.
Предел детектирования тиамулина ги-дроген фумарата в экстрактах определяли хроматографированием проб экстрактов органов и тканей с внесёнными стандартными образцами.
Опытным путём было установлено, что предел количественного определения тиамулина гидроген фумарата в стандартах составляет 100 нг/см3.
На основании этой величины и с учётом % извлечения по методу Eckschlag K., Danzer K. (1994 г.) были рассчитаны пороги количественного определения («detection threshold») тиамулина гидроген фума-рата в печени, почках, мышцах, сердце и лёгких (печень - 136,84 нг/г, почки - 148,92 нг/г, мышцы - 153,37 нг/г, сердце - 143,08 нг/г, легкие - 130,84 нг/г).
Также были установлены пределы определения (чувствительность) для биосубстратов, представленные в таблице 1.
При помощи статистических расчётов, выполненных в соответствующем разделе компьютерной программы «DataBase Biostatistic 4.02 vs», определили относительные коэффициенты отклика детектора (Df - «deflection factor») для анализируемых экстрактов и получили следующие формулы расчёта концентраций тиамули-на гидроген фумарата: Для проб печени: Y = 5.2071071 x X Для проб почек: Y = 4.7845818 x X Для проб мышечной ткани: Y = 4.6456401 x X Для проб сердца: Y = 4.9798127 x X
Таблица 1
Для проб лёгких: Y = 5.4458018 x X Результаты
В результате предварительных исследований были определены пределы детектирования тиамулина гидроген фумарата в экстрактах (чувствительность метода).
В результате проведения модельных опытов с целью определения степени экстракции ранее нами было установлено, что для мышц коэффициент экстракции составил, в зависимости от внесенной концентрации, 62-87%, для печении - 63-88%, для легких 60-75%, для почек - 62-84%, для сердечной мышцы - 63-77%.
Результаты, полученные при испытании образцов, взятых от животных через 5 суток после окончания десятидневного введения препарата представлены в таблице 2.
Данные табл.2 свидетельствуют о том, что через 5 суток после окончания введения препарата денегард в исследованных образцах мышечной и сердечной ткани и легких антибиотик тиамулин не был обнаружен в пределах чувствительности метода. В тоже время в образцах печении тиа-мулин обнаруживали в концентрациях от 229,082 до 260,654 нг/г (или от 229 до 260 мг/ кг). В образцах почек тиамулин обнаруживали в концентрациях от 154,903 до 183,007 нг/г (или от 154 до 183 мг/кг).
3.3. Данные, полученные в результате испытаний образцов, взятых от животных через 6 суток после окончания десятидневного введения препарата свидетельствовали о том, что через 6 суток после окончания введения препарата во всех исследованных образцах антибиотик тиамулин не был обнаружен в пределах чувствительности метода.
Выводы
1. Через 5 суток после окончания десятидневного введения препарата денегард 80% порошок свиньям в дозе 12,5 мг/кг массы тела остаточные количества антибиотика тиамулина обнаруживали в печени и почках (органы экскреции). Содержание тиамулина в печени и почках не превышало установленные в ЕС MLR для этих органов.
2. Через 6 суток после окончания применения препарата денегард 80% порошок во всех исследованных образцах органов и тканей используемых в пищу антибиотик тиамулин обнаружен не был (в пределах чувствительности метода).
3. На основании полученных данных рекомендуем установить срок предубой-ной выдержки для свиней не менее 6 суток.
Орган /ткань Порог определения, нг/г (нг/см3)
Печень 68,418
Почки 74,210
Мышцы 76,687
Сердце 71,541
Лёгкие 65,419
Таблица 2
Содержание тиамулина через 5 суток после окончания введения Денегарда 80%
Биосубстрат Номер животного Содержание тиамулина, нг/г
4 но
Мышечная ткань 5 но
6 но
4 243,710
Печень 5 229,082
6 260,654
4 176,139
Почки 5 154,903
6 183,007
4 но
Сердечная мышца 5 но
6 но
4 но
Легкие 5 но
6 но
но - ниже предела определения РЕЗЮМЕ
Проведено изучение сроков выведения остаточных количеств тиамулина из организма свиней после десятидневного введения препарата денегард 80% порошок в дозе 12,5 мг на 1 кг массы. Установлено, что через 6 суток после окончания курсового применения препарата денегард 80% в дозе 12,5 мг на 1 кг массы тела во всех исследованных образцах (мышечная, ткань, печень, почки, легкие, сердце) тиамулин не обнаруживали (с учетом чувствительности метода).
Литература
1. H.-C. Chen, S.-H. Cheng, Y.-H. Tsai, D.-F Hwang // De- by Solid Phase Extraction and HPLC. // Journal of
termination of Tiamulin Residue in Pork and Chicken Food and Drug Analysis, Vol. 14, №1, 2006, Р 80-83.
УДК: 636.294:591.44
Г.Т. Дягилев, К.С. Кириков
(ГНУ Якутский научно-исследовательский институт сельского хозяйства Россельхозакадемии, г. Якутск)
МОРФОЛОГИЯ ЛИМФАТИЧЕСКИХ УЗЛОВ ГРУДНОЙ КОНЕЧНОСТИ СЕВЕРНОГО ОЛЕНЯ
Ключевые слова: морфология, лимфатический узел, северный олень
При возникновении патологических процессов в области дистальных участков конечностей животных первую реакцию дают региональные лимфатические узлы, особенно поверхностный шейный и подколенный [3].
Поэтому изучение лимфатических узлов конечностей имеет теоретическое, а также практическое значение. Лимфатические узлы северного оленя исследованы недостаточно. Имеются только несколько работ описательного характера [1, 2, 4, 5].
Материал и методика Материалом для исследования послужили 10 грудных конечностей северного
оленя, полученных от разных оленеводческих хозяйств Оймяконского улуса Республики Саха (Якутия).
Анатомию лимфатических узлов исследовали путем тонкого препарирования и рентгенографии. При этом изучали их топографию и взаимоотношения к сосудам, нервам и мышцам. Выясняли количество, форму и консистенцию лимфатических узлов, определяли количество приносящих и выносящих лимфатических сосудов. Измеряли кутиметром длину, ширину и толщину узлов. Взвешивание узлов проводили на весах L6 621 с точностью до 0,01г. Для измерения толщины
