CC BY
10
Рис.1. Медианные сети гаплотипов. А- популяция русских (Красненский р-он). В - популяция украинцев. Цифрами обозначены номера гаплотипов и частоты гаплотипов (%).
Как видим, прародительским гаплотипом в обеих популяциях оказался гаплотип №1. Формирование сети в районе гаплотипа №1 сходно в обеих популяциях. Русские популяции имеют более высокий уровень гаплотипического разнообразия, по сравнению с украинскими популяциями Белгородской области. У украинцев обнаружено 7 гаплотипов, что гораздо меньше, чем у русских.
Работа выполнена при частичной финансовой поддержке грантов РГНФ и РФФИ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ.
1. Алтухов Генетические процессы в популяциях. - М.: Наука, 2003. - 370 с.
2. Кравченко С.А., Сломинская П.А. J1.A. Бец и др. Полиморфизм STR—локусов Y-хромосомы у восточных славян в трех популяциях из Белоруссии, России и Украины // Генетика, 2002.-t.38, №1.-С.97-104.
3. Лимборская С.А., Хуснутдинова Э.К., Балановская Е.В. Этногеномика и геногеография народов Восточной Европы.-М.: Наука, 2002.-261 с.
4. Харьков. В.Н., Степанов В.А., Боринская С.А. и др. Структура генофондов восточных украинцев по гаплогруппам Y-хромосомы // Генетика, 2004-. т.40, №3- С.415-421.
5. Roewer L, Kayser М., Dieltjes P. et al. Analysis of molecular variance (AMOVA) of Y-chromosome-specific microsatellites in two closely related human population // Hum. Mol. Genet., 1996.-V5, №7.- P. 1029-1033.
ИЗУЧЕНИЕ ПОЛИМОРФИЗМА ГЕНА АНГИОТЕНЗИН-ПРЕВРАЩАЮЩЕГО ФЕРМЕНТА У РУССКИХ ЦЕНТРАЛЬНОЙ РОССИИ
В. С. Ващилин, Е.В. Балановская, М.И. Чурносов
Белгородский государственный университет ГУ Медико-генетический научный центр РАМН
Сравнительный анализ популяций и восстановление на этой основе истории их взаимоотношений, является предметом исследований генетиков и антропологов. Изучение генофонда населения Центральной России, его исторического формирования, имеет особую актуальность, так как аутосомный ДНК-полиморфизм русских популяций недостаточно изучен, а эти данные имеют важное значение при рассмотрении структуры генофонда населения Российской Федерации.
Одним из видов монолокусного полиморфизма ДНК является диаллельный инсер-ционно-делеционный полиморфизм. В качестве такого маркера можно использовать ген ангиотензин-превращающего фермента. Известно, что ангиотензин-превращающий фермент (АСЕ) занимает центральное место в регуляции гемодинамики и поддержании сосудистого тонуса и тем самым участвует в регуляции уровня артериального давления. Этот фермент превращает прогормон ангиотензин I в ангиотензин II (белок, обладающий сосудосуживающим действием и регулирующий рост гладкомышечных клеток сосудов и кардиомиоцитов). АСЕ также способен инактивировать брадикинин [1].
Ген АСЕ расположен на хромосоме 17q23, состоит из 26 экзонов общей длиной 4,3 тпн и кодирует белок из 1306 аминокислотных остатков, включая сигнальный пептид из 29 аминокислот. В интроне 16 гена находится участок, полиморфизм которого обусловлен наличием или отсутствием (соответственно, инсерцией (от "insertion"-I) или делецией (от "deletion"-D)) участка длиной 287 пар нуклеотидов в так называемом Alu-повторе [1].
Целью настоящей работы было изучение инсерционно-делеционного полиморфизма гена АСЕ у 294 коренных русских жителей пяти популяций Центральной России: 1) Михайловский район Рязанской области - 61 человек, 2) Спасский район Рязанской области - 63 человека; 3) Петровский район Тамбовской области - 67 человек, 4) Барятинский район Калужской области - 58 человек и 5) Боровский район Калужской области - 45 человек. Материалом для исследования послужили образцы венозной крови, собранные в экспедиционном обследовании в 2004 году. Образцы крови для выборки были взяты у не родственных лиц, рожденных на данной территории, родители которых относятся к русскому этносу. Кроме того, учитывались места рождения всех бабушек и дедушек индивидуума. В результате формирования выборки по данному принципу происходит уменьшение случайной погрешности возникающей в результате миграционного потока прошлого века и учистывается только наиболее устойчивые миграции, генетический след которых сохранился в популяции по прошествии двух поколений. Именно такая выборка даст наиболее полное представление о распределении аллелей локуса АСЕ среди жителей Центрального региона.
ДНК выделяли из лейкоцитов периферической крови методом фенол хлороформной экстракции, описанному Mathew (1985 г). Анализ локуса АСЕ проводили методом полимеразной цепной реакции синтеза ДНК с использованием стандартных олигонук-леотидных праймеров [2]:
После денатурации (5 мин при 95°С) выполняли 33 цикла амплификации по схеме: денатурация - 40 сек при 94°С; отжиг праймеров - 40 сек при 57°С; элонгация - 30 сек при 72°С.
Затем пробы выдерживали 6 мин при 72°С и охлаждали. Продукты амплификации анализировали в 2%-ном агарозном геле, окрашивали бромистым этидием и идентифицировали в УФ-свете. При анализе амплифицируемых фрагментов применяли следую-
щую номенклатуру аллелей гена АСЕ: аллель I (490 пн) - наличие (инсерция) Alu-повтора, аллель D (190 пн) - его отсутствие (делеция).
Электрофоретическое разделение продуктов амплификации локуса АСЕ гена ангиотензин-превращающего фермента. 1,7, 10, 11 - гомозигота 190/190 пн (D/D);
9 - гомозигота 490/490 пн (I/I); 2-6, 12, 13 - гетерозигота 490/190 пн (I/D).
Математическая обработка полученных результатов проводилась общепринятыми статистическими методами. Распределение генотипов, оценки соответствия равновесию Харди-Вайнберга и частоты аллелей локуса АСЕ в обследованных популяциях приведены в таблице.
Вариабельность аллельных частот рассматриваемого генетического маркера сопоставима с изменчивостью частот, наблюдаемой в ранее изученных европеоидных и азиатских популяциях [3]. Распределение в четырех исследованных популяциях соответствовало ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга. В популяции Барятинского района Калужской области наблюдалось отклонение от ожидаемого распределения Харди-Вайнберга. Отклонение распределения от ожидаемого может отражать особенности популяционно-генетических процессов в этом регионе.
Таблица
Распределение генотипов, оценки соответствия равновесию Харди-Вайнберга и частоты аллелей по исследуемым популяциям
Район Область N Генотипы Частоты аллелей х2
II ID DD I D
Михайловский Рязанская 61 4,92% 42,62% 52,46% 0,2623 0,7377 0,6271 р>0,05
Спасский Рязанская 63 28,58% 44,44% 26,98% 0,5079 0,4921 0,7746 р>0,05
Петровский Тамбовская 67 25,37% 40,30% 34,33% 0,4552 0,5448 2,3558 р>0,05
Барятинский Калужская 58 24,14% 29,31% 46,55% 0,3879 0,6121 8,4948 р<0.01
Боровский Калужская 45 22,23% 33,33% 44,44% 0,3889 0,6111 4,015 р<0,05
При оценке аллельного полиморфизма выявлено минимальное преобладание алле-ля I у населения Спасского района Рязанской области. В остальных популяциях частота аллеля Э преобладала. Максимальная частота аллеля Э наблюдалась в популяции Ми-
