CC BY
9
DOI 10.31588/2413-4201-1883-248-4-25-29
УДК 619:615.9:619:615.4
ИЗУЧЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ ХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА, ОБЛАДАЮЩЕГО ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Василиади О.И. - аспирант, Рудь Е.Н. - аспирант, Гринь В.А. - к.вет.н., Кузьминова Е.В. - д.вет.н, доцент, Семененко М.П. - д.вет.н, доцент
ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии»
Ключевые слова: фитосомальный комплекс, силимарин, дигидрокверцетин, лецитин, гепатопротектор, хроническая токсичность
Keywords: phytosomal complex, silymarin, dihydroquercetin, lecithin, hepatoprotector, chronic toxicity
Птицеводство является одной из наиболее эффективных,
высокорентабельных и перспективных отраслей сельского хозяйства, однако в связи с интенсификацией производства возрастает риск возникновения
несоответствия между физиологическими возможностями организма птицы и существующими условиями ее кормления и содержания. Наличие в кормах токсических агентов в сочетании с
несбалансированностью рационов
приводит к развитию эндо- и экзогенного токсикоза в организме птицы, что является пусковым механизмом возникновения многих заболеваний и, в первую очередь, гепатопатий [2, 4, 5].
На сегодняшний день, несмотря на обширный арсенал современных гепатозащитных средств, разработка и внедрение в ветеринарную практику гепатопротекторных препаратов,
обладающих эффективными
фармакологическими свойствами и низкой токсичностью, продолжает оставаться актуальным направлением фармакологии. К наиболее перспективному и
развивающемуся направлению в этой области относится способ получения и применения инновационной лекарственной формы - фитосомы [3, 6].
Фитосома - это флавоноидная молекула, связанная, по крайней мере, с одной молекулой фосфатидилхолина. Она является молекулой-гибридом,
обладающей высокой растворимостью в липидной и в водной средах, используется
для увеличения биодоступности лекарственного компонента, более направленной его доставки, повышения эффективности действия и снижения терапевтической дозы [1, 7].
В ФГБНУ «Краснодарский научный центр по зоотехнии и ветеринарии» для лечения и профилактики болезней печени у сельскохозяйственной птицы разработан фитосомальный комплекс, включающий растительные компоненты - силимарин и дигидрокверцетин. В качестве
фосфолипидной основы использован соевый лецитин.
Цель исследования - изучить хроническую токсичность фитосомального комплекса с гепатопротекторной эффективностью на лабораторных животных.
Материал и методы исследований. Эксперименты проводились на базе вивария «Краснодарского научного центра по зоотехнии и ветеринарии». Оценку параметров хронической токсичности фитосомального комплекса осуществляли в соответствии с «Руководством по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» (под общей редакцией профессора Р.У. Хабриева, 2005). При соблюдении правил, предусмотренных «Европейской конвенцией по защите позвоночных животных, которые используются с экспериментальной и научной целью» (ETS № 123, Страсбург, 18.03.1986).
В опыте участвовало 40 нелинейных
крыс, разделенных на 4 группы по 10 особей в каждой, в возрасте 1,5 месяца и массой тела - 146,7±1,5 г. Перед опытом животные находились на карантине 14 дней, затем в течение 60 дней крысам задавали фитосомальный комплекс -ежедневно натощак, индивидуально в виде свежеприготовленных болюсов.
Исследовались следующие дозы гепатопротектора: 1 опытная - 1/10, 2 опытная - 1/20 и 3 опытная - 1/50 от максимально введенной дозы при определении острой токсичности комплекса (10300 мг/кг массы тела), что составило 150, 75 и 30 мг на животное; контрольная группа получала нейтральные болюсы.
На протяжении опыта учитывалась сохранность животных и параметры клинического статуса - аппетит, активность, состояние слизистых оболочек и кожного покрова, поведенческие реакции, а также возможные клинические признаки интоксикации. Взвешивание лабораторных животных проводили в начале опыта, затем на 30 и 60 сутки. В середине и в конце эксперимента у 5 крыс из каждой группы отбирались образцы крови для биохимического анализа с последующей эвтаназией и
патологоанатомическим вскрытием.
Биохимические исследования крови проводили на автоматическом химическом анализаторе - Vitalab Selectra Junior с
использование реактивов фирмы ELITech Clinical Systems.
Статистическая обработка данных проводилась с помощью программы Statistica v. 10. Достоверность различий между группами определяли с помощью t-критерия Стьюдента.
Результат исследований. При изучении хронической токсичности фитосомального комплекса
зарегистрировано, что сохранность животных во всех группах была стопроцентной. При ежедневном клиническом осмотре крыс ухудшения клинического состояния и признаков интоксикации не зарегистрировано -аппетит сохранен, шерсть гладкая и блестящая, видимые слизистые оболочки розовые, лимфатические узлы не увеличены, дыхание ровное без патологических шумов. Отмечено, что на фоне применения значительных доз фитосомального комплекса и,
соответственно, повышенного потребления лецитина, произошло некоторое учащение акта дефекации у животных в 1 опытной группе, так как растительные жиры обладают слабительным эффектом.
По результатам проведенного опыта установили, что при применении комплекса во всех опытных группах происходит более выраженное увеличение массы тела животных, относительно контрольных аналогов (Таблица 1).
Таблица 1 - Влияние фитосомального комплекса на массу тела крыс в хроническом опыте, г (М±т; п=10)
Группа Период исследования Прирост, %
фоновый 30 день 60 день
1 опытная 147,1±2,8 198,5±3,1 245,3±1,6* 66,8
2 опытная 145,4±1,9 185,6±2,4 239,6±3,6 64,8
3 опытная 149,9±2,7 183,9±2,1* 225,8±2,2 50,6
4 контрольная 144,4±1,8 178,2±2,5 205,7±1,3 42,5
Примечание: различия достоверны (*p<0,05) в сравнении с контролем
Наибольший прирост массы тела отмечен в 1 группе, составивший по завершении опыта 66,8 % по отношению к исходной массе тела животных. У контрольных крыс динамика приростов массы тела была минимальной по группам, и составила 42,5 % от фоновых значений.
Разница по группам равнялась - 24,2 % (1 группа), 22,3 % (2 группа) и 8,1 % (3 группа).
Результаты биохимического анализа крови показали, что все определяемые показатели соответствовали параметрам нормы для животных этого вида и возраста
(Таблица 2). Отмечено увеличение показателя общего белка в сыворотке крови во всех опытных группах в сравнении с контролем, как на 30 день опыта, так и по его завершению. Наибольшая разница отмечалась в 1 группе, составившая к середине опыта 17,9 %, а в конце - 18,8 %.
При анализе ферментного профиля крыс установлено, что у животных опытных групп в сыворотке крови зафиксированы более низкие значения аланинаминотрансферазы в сравнении с контролем, с разницей на 60 день опыта -21,2 % (1 группа), 17,5 % (2 группа) и
11.8 % (3 группа). Данные изменения свидетельствуют о том, что фитосомальный комплекс восстанавливает функциональную и барьерную функции печени, нормализует ее ферментообразующую функцию.
Применение препарата
стимулировало липидный обмен, на что указывает повышение уровня
триглицеридов в сыворотке крови опытных крыс относительно контрольных, с разницей к 60 суткам - 46,8 % (1 группа),
32.9 % (2 группа) и 35,4 % (з группа).
Таблица 2 - Влияние фитосомального комплекса на биохимические показатели крови крыс хроническом эксперименте ^±т; п=5)
Показатели Группы
1 опытная 2 опытная 3 опытная 4 контроль
На 30 день
Общий белок, г/л 78,3±1,75 76,1±2,04 72,5±1,25* 66,4±1,01
Мочевина, ммоль/л 5,2±0,41 5,5±0,37 5,4±0,52 5,3±0,47
Холестерин, ммоль/л 2,1±0,05 1,9±0,08 2,2±0,04 2,1±0,06
АсАТ, Ед/л 73,1±1,81 71,7±2,45 69,8±1,52 79,6±3,62
АлАТ, Ед/л 52,4±2,55 54,5±1,73 60,1±2,52 67,3±1,98
ЩФ, Ед/л 613,9±14,3 634,5±17,2 625,8±16,2 637,1±14,9
Глюкоза, ммоль/л 7,9±0,24 7,6±0,32 7,3±0,42 7,5±0,37
Кальций, ммоль/л 2,7±0,25 2,3±0,18 2,4±0,23 2,3±0,17
Фосфор, ммоль/л 1,5±0,05 1,9±0,04 1,7±0,06 1,6±0,07
Триглицериды, ммоль/л 1,13±0,16* 0,97±0,09 1,03±0,05** 0,74±0,11
На 60 день
Общий белок, г/л 80,1±2,57 78,5±2,38 76,7±1,96 67,4±1,34
Мочевина, ммоль/л 5,5±0,38 5,8±0,24 5,6±0,19 5,7±0,22
Холестерин, ммоль/л 2,2±0,04 1,9±0,08 2,3±0,02 2,2±0,02
АсАТ, Ед/л 74,5±2,73 70,8±3,01 71,2±1,95 77,3±2,31
АлАТ, Ед/л 51,3±2,48** 53,7±1,83* 57,4±2,65 65,1±2,37
ЩФ, Ед/л 635,5±10,23 656,7±11,21 644,6±10,36 659,2±12,07
Глюкоза, ммоль/л 8,1±0,17 7,6±0,31 7,5±0,29 7,9±0,18
Кальций, ммоль/л 2,2±0,16 2,4±0,21 2,2±0,18 2,0±0,10
Фосфор, ммоль/л 2,6±0,06 2,4±0,02 2,5±0,04 2,6±0,08
Триглицериды, ммоль/л 1,16±0,13 1,05±0,08* 1,07±0,18 0,79±0,11
Примечание: различия достоверны (*p<0,05, ** p<0,01) в сравнении с контролем
в
По результатам вскрытия, как на 30, так и на 60 день хронического эксперимента установили, что все внутренние органы крыс при длительном применении фитосомального комплекса не имеют патологических изменений, признаки интоксикации отсутствуют.
Заключение. Результаты
проведенных исследований показали, что применение лабораторным животным фитосомального комплекса в течение 60 дней в дозах - 150, 75 и 30 мг на животное, не оказывает отрицательного воздействия на организм крыс и биохимические показатели их крови. Препарат стимулирует приросты массы тела
животных, улучшает показатели белкового и липидного обменов, а также функциональное состояние печени. Таким образом, фитосомальный комплекс при длительном применении безвреден для теплокровных животных.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Жилкина, В.Ю. Фитосомы -инновационная технология доставки растительных компонентов / В.Ю. Жилкина, А.И. Марахова, П. Кезимана, Е.В. Блынская // Успехи современного естествознания. - 2015. - № 11 - С. 31-34.
2. Кузьминова, Е.В. Эффективность каротиноидов при токсическом поражении печени / Е.В. Кузьминова, В.С. Соловьев, М.П. Семененко, С.Н. Николаенко // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2009. - № 1-2. - С. 117-119.
3. Медетханов, Ф.А. Доклинические исследования общетоксических свойств средства З-88 на белых крысах / Ф.А. Медетханов, В.Г. Софронов, Э.К. Папуниди [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2020. - Т. 242. - № 2. - С. 112-115.
4. Медетханов, Ф.А. Изучение подострой (субхронической) токсичности и
кумулятивных свойств комплексного средства на основе растительного сырья / Ф.А. Медетханов, Ю.В. Ларина, Д.П. Хадеев [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2018. - Т. 236. - № 4. - С. 130-134.
5. Медетханов, Ф.А. Параметры острой токсичности комплексного средства на ос н о в е растительного сырья / Ф .А. Медетханов, Д.П. Хадеев, К.В. Муравьева, И.А. Конакова // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины им. Н.Э. Баумана. - 2017. - Т. 230. - № 2. -С. 105-108.
6. Семененко, М.П. Клиническая фармакология нового комплексного гепатопротекторного препарата / М.П. Семененко, М.Н. Соколов, Е.В. Кузьминова // Политематический сетевой электронный научный журнал К у б а н с кого государственного аграрного университета. - 2016. - № 119. - С. 10771088.
7. Тяпкина, Е. Рациональное использование лекарственных препаратов в ветеринарии / Е. Тяпкина, Л. Хахов, М. Семененко, Е. Кузьминова и др. / Краснодар, 2014. - 57 с.
ИЗУЧЕНИЕ ПАРАМЕТРОВ ХРОНИЧЕСКОЙ ТОКСИЧНОСТИ ПРЕПАРАТА, ОБЛАДАЮЩЕГО ГЕПАТОПРОТЕКТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Василиади О.И., Рудь Е.Н., Гринь В.А., Кузьминова Е.В., Семененко М.П.
Резюме
В настоящее время к наиболее перспективному и развивающемуся направлению в области ветеринарной фармакологии относится способ получения и применения инновационной лекарственной формы - фитосомы. В статье представлены результаты исследований по определению хронической токсичности фитосомального комплекса с гепатопротекторной активностью, включающего силимарин, дигидрокверцетин и лецитин. Установлено, что его применение лабораторным нелинейным крысам в течение шестидесяти дней в дозах - 150, 75 и 30 мг на животное, не оказывает отрицательного воздействия на организм крыс и биохимические показатели их крови. Показатель сохранности во всех группах был стопроцентный. Фитосомальный комплекс стимулирует приросты массы тела животных, при разнице относительно контрольных аналогов - 24,2 % (1 группа), 22,3 % (2 группа) и 8,1 % (3 группа). Его длительное применение улучшает в пределах референсных значений показатели белкового и липидного обменов, а также функциональное состояние печени. При патологоанатомическом вскрытии лабораторных животных признаков интоксикации не выявлено. Таким образом, фитосомальный комплекс при длительном применении безвреден для теплокровных животных.
STUDY OF CHRONIC TOXICITY PARAMETERS OF A DRUG WITH HEPATOPROTECTIVE ACTIVITY
Vasiliadi O.I., Rud E.N., Grin V.A., Kuzminova E.V., Semenenko M.P.
Summary
Currently, the most promising and developing area in the field of veterinary pharmacology is the method of obtaining and using an innovative dosage form such as phytosomes. The article presents the results of studies to determine the chronic toxicity of a phytosomal complex with hepatoprotective activity, including silymarin, dihydroquercetin and lecithin. It was determined that its application to laboratory nonlinear rats for sixty days at doses of 150, 75 and 30 mg per animal does not have a negative effect on the organism of rats and the biochemical parameters of their blood. The preservation index in all groups was 100%. The phytosomal complex stimulates body weight gains in animals, with a difference relative to control analogs - 24.2% (group 1), 22.3% (group 2) and 8.1% (group 3). Its long-term use improves the indicators of protein and lipid metabolism, as well as the functional state of the liver within the reference values. Autopsy of laboratory animals showed no signs of intoxication. Thus, long-term use of the phytosomal complex is harmless to warmblooded animals.
