CC BY
29
УДК 615.9:616.34-008.87
Л.Н. Калинина
изучение микрофлоры кишечника материнского организма при воздействии биоинсектицида энтомофторина (данные эксперимента)
ООО «Медицина труда»
НИИ Охраны труда и окружающей среды Рижского университета Паула Страдыня (Рига, Латвия)
Проведено исследование влияния биоинсектицида энтомофторина на микрофлору кишечника беременных самок белых беспородных крыс в условиях повторного ингаляционного воздействия в течение всей беременности. Использован новый методический подход в оценке состояния микробиоценоза кишечника методом, парных корреляций.
Ключевые слова: биоинсектицид энтомофторин, антагонизм и синергизм представителей микрофлоры кишечника, динамика взаимосвязей показателей микрофлоры кишечника
stuDING of iNTEsTiNAL MicRoFLoRA AT THE pREGNANT FEMALEs’ oRGANIsM under influence of bioinsecticid entomophthorin (data of experiment)
L.N. Kalinina
«Labour Medicine, Ltd»
Scientific Research Institute of Occupational Safety and Environmental Health Riga University
of Paul Stradinya, Riga, Latvia
Research of influence of bioinsecticid. entomophthorin. on intestinal microflora of pregnant females white not purebred, rats under conditions of repeated, inhalation, influence during all pregnancy is carried out. The new methodical approach, in intestinal microflora estimation, is used, by a method, of pair correlations.
Key words: bioinsecticid entomophthorin, antagonism and synergism of representatives of intestinal microflora, dynamics of interrelations of intestinal microflora indices
Особенную важность для оценки состояния здоровья людей представляет диагностика микробиоценозов. Нормальная микрофлора кишечника, отличающаяся чрезвычайной сложностью, включает более 500 видов микроорганизмов [10] и рассматривается как совокупность множества микробиоценозов, характеризующихся определенным состоянием и занимающая тот или иной биотоп в организме человека и животных [8, 9].
Нами было проведено исследование отдаленного действия биоинсектицида энтомофторина на материнский организм, плод и потомство в условиях повторного ингаляционного воздействия препарата в течение всей беременности с последующим изучением микрофлоры кишечника у беременных самок крыс и их потомства в 1- и 2-месячном возрасте. Постановка исследований осуществлялась в соответствии с методическими рекомендациями [3 — 5]. В экспериментах были использованы белые беспородные крысы массой 260 — 290 г, содержавшиеся на стандартном пищевом рационе в течение всего эксперимента. Статистическая группа состояла из 15 — 20 особей.
Использование парного корреляционного анализа [7] для изучения взаимосвязей показателей микрофлоры кишечника беременных крыс, подвергавшихся ингаляционному воздействию энтомофторина в течение всей беременности на различных уровнях воздействия препарата от недействующего (1,1 ± 0,1 мг/м3), подпорогового (4,1 ± 0,2
мг/м3), порогового (8,0 ± 0,4 мг/м3) до действующего (19,0 ± 2,4 мг/м3) по сравнению с группой параллельного контроля, оказалось весьма эффективным.
Для установления достоверности полученных парных корреляций использовался Х2-тест (Pearson Correlation, SPSS for Windows 16). Все полученные сильные (0,7 < R < 1,0) и средние (0,5 < R < 0,6) парные корреляции, представленные в таблице 1, являются достоверными (р < 0,05).
Как показывает таблица 2, изучение динамики прямых и обратных взаимосвязей микро-флоры кишечника беременных самок крыс, подвергавшихся ингаляционному воздействию энтомофторина в течение всей беременности, в зависимости от величины коэффициента корреляции по сравнению с группой параллельного контроля выявило достоверные изменения на всех уровнях воздействия препарата за исключением минимального.
Исследование вышеуказанной динамики с учетом новых парных корреляций (табл. 3) показало наличие изменений только в 2-х наибольших из испытанных концентраций, что может свидетельствовать о больших защитных возможностях микрофлоры кишечника материнского организма. Особенно хорошо это прослеживается в динамике общего количества парных корреляций (20 : 19 : 20 : 20 против 17 в группе параллельного контроля).
Однако исчезновение парных корреляций и появление новых наблюдалось также при воздействии препарата в наименьшей из изученных
Таблица 1
Парные корреляции отдельных показателей микрофлоры кишечника беременных самок крыс, подвергавшихся ингаляционному воздействию энтомофторина в течение всей беременности
Парные корреляции основных показателей Контроль Концентрация препарата, мг\м 3
1,1 ± 0,1 4,1 ± 0,2 8,0 ± 0,4 19,0 ± 2,4
Бифидобактерий с лактобациллами +0,7 +0,7 +0,7 +0,5 +0,7
кишечными палочками -0,9 -0,8 -0,7 +0,7 -
аэробами -0,7 -0,5 - -0,5 +0,8
грибами рода Candida +0,6 +0,5 +0,6 +0,5 -
Лактобацилл с бактероидами +0,8 +0,7 +0,5
-0,5
анаэробами +0,5 - - - +0,7
аэробами -0,8 -0,7 -0,8 - +0,9
Бактероидов с аэробами -0,5 -1,0
+0,7
протеями -0,7 -0,8 - - -
Анаэробов с аэробами -0,7 -0,8 -0,9
+0,8
протеями -0,6 -0,6 -0,8 -0,9 -
стафилококками + 1,0 +0,9 +0,6 -0,7 -
Аэробов с протеями +0,7 +0,7 +0,7
стафилококками -0,7 -0,8 -0,6 -0,6 -0,5
Взаимосвязи условно-патогенной микрофлоры
протеи - стафилококки -0,6 -0,6 -0,8 -0,9 +0,5
кишечная палочка - грибы рода Candida + 1,0 +0,9 +0,8 - I -
Новые взаимосвязи
бифидобактерии - бактероиды +0,5 +0,5 +1,0 +0,6
бифидобактерии - анаэробы -0,8 +0,8
бифидобактерии - стафилококки -0,7
бифидобактерии - протеи -0,6 -0,7
лактобациллы - кишечная палочка -0,5 +0,5
лактобациллы - протеи -0,8 -0,6 -0,5
лактобациллы - грибы рода Candida -0,6
бактероиды - анаэробы +0,7 -0,6 -0,6 +0,9
бактероиды - кишечная палочка +0,6 +0,9
бактероиды - грибы рода Candida +0,6 -0,7
бактероиды - стафилококки -0,5
кишечная палочка - анаэробы -0,5 -0,6
кишечная палочка - аэробы -0,7 +0,9
кишечная палочка - стафилококки -0,8 -0,9
анаэробы - грибы рода Candida -0,9 -1,0
протеи - грибы рода Candida +0,7 -0,8
стафилококки - грибы рода Candida +0,9
Примечание: сильные парные корреляции - 0,7 < p < 1,0; средние - 0,5 < p < 0,6 (p < 0,05).
Таблица 2
Динамика количества прямых и обратных взаимосвязей микрофлоры кишечника беременных самок крыс, подвергавшихся ингаляционному воздействию энтомофторина в течение всей беременности, в зависимости от величины коэффициента корреляции по сравнению с группой параллельного контроля
Концентрация препарата Общее количество парных корреляций Прямые парные корреляции Обратные парные корреляции Вид парных корреляций
Прямые Обратные
0,7 < R < 1,0 0,5 < R < 0,6 0,7 < R < 1,0 0,5 < R < 0,6
Контроль 1T 8 9 б З 6 З
1,1 ± 0,1 14 6 8 б 1 б З
4,1 ± 0,2 12* б* T З 2 б 2
8,0 ± 0,4 9** З** 6 1** 2 4 2
19,0 ± 2,4 9** 8 1** 6 2 0*** 1
Примечание: ** - p < 0,01.
концентраций при полном отсутствии изменений среднестатистических показателей количественного состава микрофлоры кишечника. Анализ новых парных корреляций на данном уровне воздействия выявил антагонизм бифидобактерий и лактобацилл в отношении условно-патогенных протеев и кишечных палочек с измененными биологическими свойствами. В подпороговой концентрации нарастает количество условно-патогенных протеев, стафилококков, гемолизирующих лактозонегативных E.coli и бактероидов, что объясняется снижением количества бифидобактерий по среднестатистическим значениям показателей. Полученные изменения могут свидетельствовать о том, что аутофлора кишечника, как неспецифический фактор защиты организма, чутко реагирует на воздействие чужеродного антигена даже в небольших количествах, что хорошо выявляется при использовании метода парных корреляций. Использование парного корреляционного анализа для изучения взаимосвязей между представителями микрофлоры кишечника вышеуказанных групп животных, выявило ряд важных фактов.
Бифидобактерии являются ведущим компонентом микробиоценоза кишечника макроорганизма, их положительная физиологическая роль в стабилизации колонизационной резистентности пищеварительного тракта доказана [2]. Анаэробные бактерии, представляющие собой фактор колонизационной резистентности, контролируют состав условнопатогенных микроорганизмов, которые заселяют толстый кишечник и являются основным источником эндогенной инфекции [6]. В нашем исследовании бифидобактерии, как представители защитной микрофлоры кишечника, и в группе контроля, и на уровнях недействующей, подпороговой и пороговой концентраций препарата, имели прямую взаимосвязь с грибами рода Candida, исчезнувшую лишь на уровне действующей концентрации. С точки зрения имеющихся научных данных по взаимосвязям анаэробной и аэробной микрофлоры кишечника, прямая взаимосвязь бифидобактерий с грибами рода Candida выглядит если не артефактом, то малообъяснимым феноменом.
Это, с одной стороны, может свидетельствовать о слабой иммуногенности бифидобактерий и их участии в формировании колонизационной резистентности кишечника, когда синергические взаимоотношения с представителями собственной условно-патогенной микрофлоры кишечника препятствуют проникновению в слизистую оболочку кишечника чужеродных патогенных микроорганизмов, более агрессивных по сравнению с имеющимися в нормальном микробиоценозе в незначительных количествах условнопатогенными грибами рода Candida. С другой стороны, существует вероятность резкого нарастания условно-патогенной бактериальной микрофлоры кишечника в условиях действия антигена, и грибы рода Candida, являясь естественными антагонистами последней, сдерживают ее рост вместе с представителями защитной микрофлоры кишечника (табл. 1).
Исследование динамики взаимосвязей бифидобактерий с кишечными палочками установило их сильный антагонизм, как в группе контроля, так и в 2-х наименьших из испытанных концентраций, что может свидетельствовать об антагонизме защитной микрофлоры в отношении лактозонегативных гемолизирующих форм E. coli. Появление сильной прямой парадоксальной взаимосвязи (изменившей знак парной корреляции на противоположный) бифидобактерий и E. coli с типичными свойствами на уровне пороговой концентрации свидетельствует о мобилизации защитных сил материнского организма в условиях значительного нарастания условно-патогенной аэробной и анаэробной микрофлоры.
Появление новых сильных обратных взаимосвязей бифидобактерий со стафилококками и с протеями (R = —0,7) в действующей концентрации может свидетельствовать о нарастании количества условно-патогенных стафилококков и протеев в условиях действия большой дозы препарата. В то же время появление новых прямых взаимосвязей бифидобактерий с анаэробами и бактероидами на том же уровне воздействия препарата указывает на мобилизацию всех защитных сил организма для создания естественного экологического ба-
Таблица 3
Динамика количества прямых и обратных взаимосвязей микрофлоры кишечника беременных самок крыс, подвергавшихся ингаляционному воздействию энтомофторина в течение всей беременности, в зависимости от величины коэффициента корреляции по сравнению с группой параллельного контроля и с учетом новых
парных корреляций
Концентрация препарата Общее количество парных корреляций Прямые парные корреляции Обратные парные корреляции Вид парных корреляций
Прямые Обратные
0,7 < R < 1,0 0,5 < R < 0,6 0,7 < R < 1,0 0,5 < R < 0,6
Контроль 1T 8 9 5 З 6 З
1,1 ± 0,1 20 9 11 6 З 6 5
4,1 ± 0,2 19 8 11 4 4 6 5
8,0 ± 0,4 20 T 1З* 4 З 9* 4
19,0 ± 2,4 20 12* 8 9* З 4 4
рьера против нарастающего количества условнопатогенной анаэробной и аэробной микрофлоры.
Тот факт, что взаимосвязи бифидобактерий с лактобациллами сохраняются не только по знаку, но и по абсолютному значению на всех уровнях воздействия препарата за исключением пороговой концентрации, где эта связь ослаблена, может свидетельствовать о высоких мобилизационных возможностях фактора неспецифической защиты материнского организма. Этот факт подтверждает также появление новых прямых взаимосвязей бифидобактерий с бактероидами на всех уровнях воздействия препарата, что наиболее выражено на уровне пороговой концентрации (табл. 1).
Анализируя взаимосвязи лактобацилл с отдельными представителями микрофлоры кишечника, следует отметить появление новых обратных взаимосвязей лактобацилл с протеями на всех уровнях воздействия препарата, за исключением наибольшего, где выявлена новая обратная взаимосвязь лактобацилл с грибами рода Candida, а также обратная взаимосвязь с кишечными палочками в наименьшей из испытанных концентраций, что указывает на нарастание естественного антагонизма лактобацилл в отношении условно-патогенных форм протеев, кишечных палочек с измененными биологическими свойствами и грибов рода Candida. Прямая взаимосвязь лактобацилл с кишечными палочками на уровне пороговой концентрации указывает на вовлечение E. mli с типичными свойствами и лактобацилл в создание естественного экологического барьера против нарастания условно-патогенной анаэробной и аэробной микрофлоры.
Оценивая динамику взаимосвязей лактобацилл с бактероидами, следует отметить их прямые парные корреляции в группе контроля и в наименьшей из испытанных концентраций, что может указывать на естественные синергические взаимосвязи защитной анаэробной микрофлоры между собой. Защитный характер прямой взаимосвязи лактобацилл и бактероидов в действующей концентрации подтверждается снижением количества бифидобактерий и бактероидов по среднестатистическим значениям показателей. Обратная взаимосвязь лактобацилл с бактероидами на уровне подпороговой концентрации свидетельствует о двояком характере бактероидов, когда под воздействием антигена бактероиды из защитной микрофлоры превращаются в условно-патогенную микрофлору [6].
Динамика взаимосвязей лактобацилл с аэробами свидетельствует о стабильности естественного антагонизма анаэробной и аэробной микрофлоры в 2-х наименьших из изученных концентраций. На уровне пороговой концентрации эта парная корреляция исчезает, появляясь в виде прямой сильной парадоксальной взаимосвязи (R = +0,9) в действующей концентрации, и может свидетельствовать о создании естественного экологического барьера против значительного нарастания условнопатогенной микрофлоры кишечника.
Анализируя взаимосвязи бактероидов с протеями, следует отметить, что в группе контроля и
в недействующей концентрации наблюдался естественный антагонизм представителей анаэробной и аэробной микрофлоры. Сильная антагонистическая взаимосвязь бактероидов и аэробов на уровне подпороговой концентрации может указывать на нарастание условно-патогенной аэробной микрофлоры, естественными антагонистами которой являются бактероиды. Воздействие препарата в наибольшей из испытанных концентраций выявило сильную прямую парную корреляцию бактероидов и аэробов, которые на данном уровне воздействия препарата совместно выполняют защитную функцию, сдерживая рост условно-патогенной микрофлоры (табл. 1).
Оценивая новые взаимосвязи бактероидов, следует отметить их двоякую природу, когда в условиях действия антигена могут проявляться их патогенные свойства [6]. Это подтверждает появление новых антагонистических взаимосвязей бактероидов с анаэробами в подпороговой и пороговой концентрациях и прямой взаимосвязи бактероидов с грибами рода Candida в подпороговой концентрации. Появление новых прямых взаимосвязей бактероидов с анаэробами и кишечными палочками в недействующей концентрации и сильных прямых взаимосвязей с анаэробами в действующей концентрации и кишечными палочками на уровне пороговой концентрации свидетельствует о защитном характере взаимосвязей бактероидов и E. rnli с типичными свойствами и с представителями защитной анаэробной микрофлоры. Антагонизм бактероидов в отношении грибов рода Candida и стафилококков в действующей концентрации указывает на защитную роль бактероидов в связи с резким нарастанием условно-патогенной аэробной микрофлоры, естественными антагонистами которой они являются.
Исследование парных корреляций анаэробов с другими представителями микрофлоры кишечника у беременных самок выявило антагонизм анаэробов с аэробами и протеями в группе контроля и в 2-х наименьших из испытанных концентраций. Но по мере увеличения концентрации препарата антагонизм этих представителей микрофлоры кишечника нарастает, что может косвенно свидетельствовать об увеличении количества условно-патогенной микрофлоры кишечника, естественными антагонистами которой являются представители защитной анаэробной микрофлоры (табл. 1).
Прямые взаимосвязи анаэробов со стафилококками могут свидетельствовать о защитном характере взаимосвязей анаэробной защитной микрофлоры с сапрофитными и, возможно, условно патогенными стафилококками. Интерпретация взаимосвязей анаэробов с условно-патогенными формами стафилококков аналогична таковой для парных корреляций бифидобактерий с грибами рода Candida, описанных нами выше. Антагонизм анаэробов и стафилококков на уровне пороговой концентрации свидетельствует о значительном нарастании условно-патогенных стафилококков, когда
естественным становится антагонизм защитной анаэробной микрофлоры и нарастающих условно-патогенных форм стафилококка.
Характер взаимосвязей аэробов с протеями свидетельствует о взаимосвязанности всей аэробной микрофлоры между собой в группе контроля, а также о взаимосвязях защитной аэробной микрофлоры с микроцинпродуцирующими формами протеев. Антагонизм аэробов со стафилококками на всех уровнях воздействия препарата уменьшается по мере нарастания концентрации препарата и может свидетельствовать об антагонизме защитной аэробной микрофлоры в отношении нарастающего количества условно-патогенных форм стафилококков (табл. 1).
Взаимосвязи условно-патогенной микрофлоры в обоих случаях имеют двоякую интерпретацию. Антагонизм протеев и стафилококков на всех уровнях воздействия препарата, за исключением максимального, может свидетельствовать об антагонизме либо микроцин-продуцирующих протеев в отношении условно-патогенных форм стафилококков, либо об антагонизме сапрофитных форм стафилококков в отношении условно-патогенных протеев.
Синергические взаимосвязи кишечных палочек и грибов рода Candida могут иметь интерпретацию, аналогичную таковой для бифидобактерий и грибов рода Candida, либо это взаимосвязи условно-патогенных грибов рода Candida и E. coli с измененными биологическими свойствами. Появление новых антагонистических взаимосвязей кишечных палочек с анаэробами и стафилококками, а также прямой взаимосвязи протеев с грибами рода Candida на уровне подпороговой концентрации может свидетельствовать о нарастании условно-патогенной аэробной микрофлоры: E. mli с измененными биологическими свойствами, стафилококков и грибов рода Candida.
Новые сильные парные корреляции на уровне пороговой концентрации — антагонистические взаимосвязи кишечных палочек с аэробами и стафилококками, а также анаэробов и протеев с грибами рода Candida и прямая взаимосвязь стафилококков с грибами рода Candida свидетельствуют о значительном нарастании условно-патогенной аэробной микрофлоры: стафилококков, грибов рода Candida и E. сoli с измененными биологическими свойствами. Новые антагонистические взаимосвязи анаэробов с кишечными палочками и грибами рода Candida на уровне действующей концентрации указывают на значительное нарастание условно-патогенных грибов рода Candida и лактозонегативных гемолизирующих форм кишечных палочек, естественными антагонистами которых является защитная анаэробная микрофлора.
Оценивая распределение антагонистических и синергических взаимосвязей в микрофлоре кишечника беременных самок крыс под воздействием препарата, выявлен высокий мобилизационный потенциал защитной микрофлоры кишечника
— бифидобактерий, лактобацилл, бактероидов, E. coli с типичными свойствами независимо от уровня воздействия препарата. Среди новых парных корреляций доминируют антагонистические взаимосвязи на всех уровнях воздействия препарата за исключением минимального, где их соотношение 3 : 3.
Отмечено исчезновение парных корреляций и появление новых взаимосвязей на уровне недействующей и подпороговой концентраций; появление парадоксальных парных корреляций выявлено, начиная с подпороговой концентрации препарата, в то время как изменения среднестатистических показателей микрофлоры кишечника на уровне недействующей концентрации выявлены не были, а на уровне пороговой концентрации были незначительными (табл. 1).
Анализ новых парных корреляций выявил антагонизм бифидобактерий и лактобацилл в отношении условно-патогенных протеев и кишечных палочек уже при воздействии препарата в минимальной концентрации. Воздействие препарата в подпороговой концентрации вызывало нарастание количества условно-патогенных протеев, стафилококков, кишечных палочек с измененными биологическими свойствами и бактероидов.
Особенно важной является оценка изменений парных корреляций в действующей концентрации по сравнению с группой параллельного контроля. Появление сильных парадоксальных синергических взаимосвязей анаэробной защитной микрофлоры — анаэробов, бифидобактерий, лактобацилл и бактероидов с аэробами может свидетельствовать о резком снижении иммунитета, когда синергизм естественных антагонистов и антагонизм защитной микрофлоры в отношении условно-патогенных микроорганизмов способен противостоять выраженному токсическому действию биоинсектицида энтомофторина.
Анализ динамики парных корреляций и оценка изменений среднестатистических значений показателей, полученных на уровне действующей концентрации, позволяет утверждать, что микрофлора кишечника является не только «первичным неспецифическим барьером, лишь после прорыва которого инициируется включение всех последующих неспецифических и специфических иммунных и биохимических механизмов защиты макроорганизма» [8], но и, вероятнее всего, одним из последних факторов защиты макроорганизма, когда в действующей по общему токсическому эффекту концентрации при выраженном иммунодепрессивном эффекте, изменении целого ряда среднестатистических значений интегральных показателей, только микробиоценоз кишечника способен противостоять выраженному токсическому действию изученного нами биопрепарата.
Таким образом, исследование показателей микрофлоры кишечника беременных самок крыс, подвергавшихся ингаляционному воздействию энтомофторина в течение всей беремен-
ности, методом парных корреляций позволило выявить некоторые особенности механизма защиты материнского организма от воздействия чужеродного антигена. Данные исследований подтвердили выдвинутые ранее предположения о том, что кишечная микрофлора представляет собой типичный биоценоз, где все представители оказывают взаимное влияние друг на друга. Этот симбиоз влияет на устойчивость к токсическим веществам [1].
Отмечена стабильность взаимосвязей бифидобактерий с лактобациллами и бактероидами на всех уровнях воздействия препарата, что связано с высокими мобилизационными способностями материнского организма, направленными на сохранение плода. Исследование динамики каждой конкретной взаимосвязи показателей микрофлоры кишечника на разных уровнях воздействия препарата по сравнению с параллельным контролем выявило наличие синергических взаимосвязей бифидобактерий с грибами рода Candida и анаэробов со стафилококками, как в группе контроля, так и у экспериментальных животных, а также появление новых синергических взаимосвязей бактероидов с кишечными палочками и грибами рода Candida. Это позволяет по-новому оценить роль условно-патогенной микрофлоры кишечника в создании экологического барьера и ее место в микробиоценозе кишечника в целом.
Анализ качественного и количественного изменения каждой конкретной парной корреляции микрофлоры кишечника на разных уровнях воздействия препарата позволяет выявить механизм влияния препарата и способствует более надежному установлению порогов вредного действия.
ЛИТЕРАТУРА
1. Красноголовец В.Н. Дисбактериоз кишечника и его клиническое значение / В.Н. Красного-ловец. — М.: Медицина, 1979. — 210 с.
2. Куваева И.Б. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей / И.Б. Куваева, К.С. Ладодо.
— М.: Медицина, 1991. — 240 с.
3. Методические рекомендации по токсикометрии / Под ред. И.В. Саноцкого. — М.: Секретариат СЭВ, 1987. - 162 с.
4. Методические указания: Постановка исследований для обоснования ПДК производственных штаммов микроорганизмов и на их основе готовых форм препаратов в воздухе рабочей зоны. — М: МЗ СССР, 1983. — 15 с.
5. Микельсаар М.Э. Методика определения количественного состава микрофлоры кала/ М.Э. Микельсаар, А.А. Ленцнер, Л.А. Гольянова // Лабор. дело. — 1972. — № 1. — С. 41—45.
6. Пинегин Б.В. Дисбактериозы кишечника / Б.В. Пинегин, В.Н. Мальцев, В.М. Коршунов. — М.: Медицина, 1984. — 144 с.
7. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В.Ю. Урбах. — М.: Медицина, 1975. — 415 с.
8. Шендеров Б.А. Функциональное питание и его роль в профилактике метаболического синдрома / Б.А. Шендеров. — М.: Дели принт, 2008. — 319 с.
9. Шендеров Б.А. Функциональное питание и пробиотики: микроэкологические аспекты / Б.А. Шендеров. — М.: Медицина, 1997. — 23 с.
10. Conway P. Human colonic bacteria: role in nutrition / P. Conway, G.R Gibson., G.T. Macfarlane // J. Physiology and Pathology. — Boca Raton, 1995.
— N 1. — P. 1—24.
сведения об авторах:
КалининаЛ.Н., ООО «Медицина труда» НИИ Охраны труда и окружающей среды Рижского университета Паула Страдыня (Латвия, Рига)
