Изучение маркеров апоптоза в яичниках при внутриутробном развитии Текст научной статьи по специальности «Клиническая медицина»

Результаты исследования

Результаты исследования показали, что среднее значение гемоглобина у женщин с ПДЖ составило 125,3 ± 1,1 г/л, у женщин с ЛДЖ этот показатель был ниже на 9 % (114,0 ± 0,85, р > 0,05), а у женщин с МДЖ — ниже на 19 % (101,5 ± 0,77), р < 0,05. Среднее значение количества эритроцитов у женщин с ПДЖ было 4,32 ± 0,11 х 1012/л, у пациенток с ЛДЖ — ниже на 8 % (3,97 ± 0,1, р > 0,05) и ниже на 15 % (3,67 ± 0,08, р < 0,05) у женщин с МДЖ. Средний показатель гемато-крита у женщин из первой группы составил 39,2 ± 0,83 %, у пациенток второй группы этот показатель был ниже на 5 % (37,2 ± 0,74, р > 0,05), у женщин третьей группы — ниже на 18 % (32,1 ± 0,63, р < 0,05). Показатель среднего значения сывороточного железа в первой группе — 23,8 ± 3,6 мкмоль/л, у женщин с ЛДЖ — ниже на 18 % (16,4 ± 2,5, р < 0,05), в третьей — ниже на 52 % (11,4 ± 1,9, р < 0,05). Среднее значение коэффициента насыщения трансферрином у пациенток с ПДЖ — 23,7 ± 4,1 %, у женщин с ЛДЖ этот показатель был ниже на 34 % (15,6 ± 3,49, р < 0,05), у женщин с ПДЖ — ниже на 55 % (10,7 ± 2,93, р < 0,05). Среднее значение ферритина в первой группе составило 46,8 ± 5,1 мкг/л, во второй — ниже на 51 % (22,9 ± 4,22, р < 0,05) и в третьей — ниже на 82 % (8,1 ± 3,7,

р < 0,05). У женщин без ЖДС все эти показатели были в пределах нормальных значений. Изменение морфологии эритроцитов (МСУ, мкм3, МСН, пг, МСНС, ммоль/л) наблюдалось у пациенток с МДЖ, а при всех остальных формах показатели были в норме.

В результате проведенной прегравидарной подготовки после родов у женщин с ПДЖ развитие МДЖ не наблюдалось, среди пациенток с ЛДЖ манифестное железодефицит-ное состояние развилось у 19 % (10) женщин; у 27 % (27) женщин с МДЖ развилась желе-зодефицитная анемия. У пациенток без ЖДС и не получавших прегравидарную подготовку анемия после родов развилась у 55 % (44). У всех женщин кровопотеря в родах была физиологической.

Выводы

В ходе нашего исследования была доказана эффективность прегравидарной подготовки женщин с ЖДС. Учитывая, что у женщин с ЛДЖ манифестное ЖДС развилось у 19 %, у пациенток с МДЖ ЖДС развилось в 27 % случаев и у пациенток без ЖДС железодефи-цит развился у 55 % пациенток, необходимо проводить дополнительные исследования показателей обмена железа на сроке 32-33 недели (период активного роста плода, когда потребность в железе увеличивается).

изучение маркеров апоптоза в яичникАХ при внутриутробном развитии

© В.Р. Родичкина, А.О. Дробинцева

ФГБНУ «НИИ акушерства, гинекологии и репродуктологии им. Д.О. Отта», Санкт-Петербург

Актуальность проблемы

Физиологическая гибель клеток имеет место во всех тканях организма, в том числе и в органах женской репродуктивной системы, проявляясь, в частности, в процессах циклического отторжения эндометрия и атрезии фолликулов. Запрограммированное уничтожение клеточных элементов особенно важно на всех этапах гаметогенеза. Процесс фолли-кулогенеза начинается в фетальном периоде развития, идет непрерывно и заканчивается в постменопаузе. Основная масса фолликулов редуцируется путем атрезии, которая может начаться на любой стадии развития

фолликула. Апоптоз играет ключевую роль в процессах нормального эмбрионального развития: без программированной гибели клеток невозможно нормальное формирование морфофункциональных систем организма. Апоптоз регулируется сложной системой взаимодействий вне- и внутриклеточных факторов, направленных на выживаемость и гибель клетки. Внутриклеточная передача и реализация сигнала представляют собой сложные взаимодействия различных индукторов и ингибиторов, которые в одних и тех же клетках могут иметь разные ответы. Нарушение процессов апоптоза в яичниках

ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА и ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕЙ

ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017

КИ 1684-0461 ■

служит причинои развития различных патологических состояний, ведущих к бесплодию, таких как ановуляция, синдром полики-стозных яичников, а также имеет место при опухолеобразовании. Задачей современных исследований является изучение возможности влияния на апоптоз с целью коррекции овариального резерва, патологических изменений в яичнике, а также возможности улучшения качества программ вспомогательных репродуктивных технологий.

Цель исследования

Изучить динамику процессов апоптоза клеток гранулезы и ооцитов в яичнике при внутриутробном развитии.

Материал и методы исследования

Объектом для исследования послужили образцы яичников плодов, полученные из архива отделения патоморфологии ФГБНУ «НИИ АГиР им. Д.О. Отта». Материал (n = 9) был разделен на группы по срокам гестации: 23-27 недель (конец второго триместра), 28-42 недели (третий триместр). Для имму-ногистохимического исследования использовали первичные моноклональные антитела к KISS1, KISS1R, bcl-2, p53. В качестве вторичных антител использовали антитела, конъюгированные с флуорохромом Alexa Fluor 647 и Alexa Fluor 488 (1 : 100, Abcam, Великобритания). Морфометрическое исследование проводилось с использованием системы компьютерного анализа микроскопических изображений, состоящей из микроскопа Olympus FV1000D (Olympus, Япония) и программного обеспечения Vidеotest Morphology 5.2 (Россия). Относительная площадь экспрессии (S, %) рассчитывалась по следующим формулам:

S = S (иммунопозитивных ядер) 0 S (ядер) '

S = S (иммунопозитивных структур) 100 S (ткани)

Результаты исследования

Все исследуемые маркеры были выявлены в ткани яичника на сроках гестации 23-42 недели. Наименьший уровень значений показателя относительной площади экспрессии апоптотического маркера р53 (5,9 %) был зарегистрирован в клетках гранулезы и ооцитах на сроке 35-42 недели, в то время как значения показателя относительной площади экспрессии антиапоптотического белка Ьс1-2 на данном сроке были наиболее высокими (10,89 %). Экспрессия кисспептина и его рецептора выявлена в корковом веществе яичников. Статистически достоверных различий экспрессии К18Б1 и ЮББШ не выявлено. Однако статистически достоверное увеличение показателя относительной площади иммунопозитивного окрашивания в зависимости от срока гестации было зафиксировано при анализе значений относительной площади экспрессии К18Б1 (г = 0,92, р < 0,01) и ЮББШ (г = 0,99, р < 0,01). Минимальный уровень экспрессии кисспептина (19,25 %) и его рецептора (28,33 %) наблюдался на сроке 19-20 недель гестации, максимальный — на 40-й неделе (48,92 и 36,67 % соответственно).

Выводы

Полученные результаты свидетельствуют о том, что процесс апоптоза непрерывно сопровождает развитие яичника. Площадь экспрессии кисспептина и его рецептора в ткани яичника статистически достоверно увеличивается с увеличением гестационного возраста. Это может быть обусловлено участием кисспептинов в регуляции формирования органов репродуктивной системы и синхронизации работы нейроэндокринно-репро-дуктивной оси. В дальнейшем планируется увеличение объема выборки и дополнительное исследование про- и антиапоптотических факторов.

ЖУРНАЛЪ АКУШЕРСТВА " ЖЕНСКИХЪ БОЛЪЗНЕИ

ТОМ LXVI СПЕЦВЫПУСК 2017

ISSN 1684-0461