CC BY
44
влияющие на состояние здоровья, и факторы высокой напряженности труда фармацевтических работников.
Список литературы:
1. Конституция Российской Федерации от 12.12.1993 (ст.37) // «Собрание законодательства РФ». - 2014. - №31, (4 авг.). - ст.4398.
2. Трудовой кодекс Российской Федерации от 30.12.2001 №197-ФЗ (ст.209) // «Собрание законодательства РФ». - 2002. - №1 (ч. 1), (7 янв.). - ст.3.
3. Федеральный закон от 21.11.2011 №323 «Об основах охраны здоровья граждан в РФ» (ст.18) // «Собрание законодательства РФ». - 2011. - №48, (28 нояб.). - ст.6724.
4. Федеральный закон от 28.12.2013 №426-ФЗ «О специальной оценке условий труда» // «Собрание законодательства РФ». - 2013. - №52 (ч.1), (30 дек.). - ст.6991.
5. ГОСТ Р ИСО 26000-2012. Руководство по социальной ответственности. (разд.6) Доступно на http://docs.cntd.ru/document/gost-r-iso-26000-2012 [Дата обращения - 02.02.2019].
6. «Р 2.2.2006-05. 2.2. Гигиена труда. Руководство по гигиенической оценке факторов рабочей среды и трудового процесса. Критерии и классификация условий труда» (утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 29.07.2005) // «Бюллетень нормативных и методических документов Госсанэпиднадзора». - 2005. - N 3.
7. Карева Н.Н. Трудовые практики - перспективное направление развития социальной ответственности аптечных организаций. Вестник Российской военно-медицинской академии. - 2018. -№ 3 (63). - С. 214-218.
ИЗУЧЕНИЕ КАЧЕСТВЕННОГО СОСТАВА И СУММАРНОГО СОДЕРЖАНИЯ ВЕЩЕСТВ ФЕНОЛЬНОЙ ПРИРОДЫ В ХВОЕ СОСНЫ ОБЫКНОВЕННОЙ (РШТО SILVESTRIS Ь).
Нестеров Г.В.
студент ФГАОУ ВО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) Бобкова Н.В.
д.ф.н., доцент кафедры фармацевтического естествознания ФГАОУ ВО Первый МГМУ имени
И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Кондрашев С.В.
к.ф.н., доцент кафедры химии ФГАОУ ВО Первый МГМУ имени И.М. Сеченова Минздрава России
(Сеченовский Университет) DOI: 10.31618/ESU.2413-9335.2019.2.59.41-43
Аннотация: В ходе анализа спиртовых извлечений из сосновой хвои методом тонкослойной хроматографии установлено наличие 8 веществ, среди которых идентифицированы дигидрокверцетин, катехин и кислота коричная. Количественное определения веществ полифенольной природы осуществляли методом Фолина-Чикалтеу, в ходе которого установлено суммарное содержание полифенольных веществ, составившее от 6,42 до 7,34, что позволило рекомендовать норму содержания полифенольных веществ не менее.
Ключевые слова: сосна обыкновенная, хвоя сосны, фенольные соединения, метод Фолина-Чикалтеу, экстрактивные вещества.
Study of qualitative composition and total content of substances of phenolic nature in Pinus sylvestris
L.
Abstract: During the analysis of alcohol extracts from pine needles by thin-layer chromatography found the presence of 8 substances, among which identified dihydroquercetin, catechin and cinnamic acid. Quantitative determination of polyphenolic substances of nature were performed by the method of Polina-Jikalau, which established the total content of polyphenolic substances, formed from 6,42 to 7.34, which allowed to recommend to the normal content of polyphenolic substances not less.
Key words: Pinus sylvestris, the needles of pine, phenolic compounds, method Polina-Ciocalteu, extractive substances.
Лесные ресурсы РФ по занимаемой площади (до 675 млн гектар) занимают первое место в мире, в них сосредоточено более 25% мировых запасов леса. [1,2] Среди древесном пород, заготавливаемых в России с целью промышленной переработки, одно из ведущих мест принадлежит сосне обыкновенной [3]. При осуществлении промышленной переработки древесины сосны обыкновенной остается значительная масса хвои, из которой используется не более 10-15% для выделения веществ, извлекаемых углеводородными экстрагентами [2].
Отечественными учеными проводились исследования хвои сосны обыкновенной [4,5,6], направленные на изучение состава отдельных фенольных соединений, для которых было установлено наличие бактерицидного, антирадикального и антиокси-дантного действия. В хвое сосны были обнаружены коричная, феруловая, кумаровая, фенилуксуская кислоты, дигидроконифериловый, бензиловый, ди-гидрокумаровый спирты [7]. Выявлено содержание хлорофиллов и каротиноидов в составе экстракта сосновой хвои [8]. Широкий комплекс биологически активных веществ сосновой хвои позволяет
рассматривать данное сырье в качестве перспективного источника создания новых лекарственных средств. Внедрению хвои сосны в современную фармацевтическую практику препятствует отсутствие нормативной документации, что доказывает актуальность научных исследований, направленных на идентификацию и количественное определение фенольных соединений в сырье с последующей разработкой соответствующих показателей качества.
Целью нашего исследования является анализ фенольных соединений хвои сосны методом ТСХ и количественная оценка суммарного содержания фенольных соединений методом Фолина -Чикалеу.
Материалы и методы исследования. Объектом исследования служила хвоя сосны, заготовленная в августе-сентябре 2018 г. в Московской области от дикорастущих деревьев, а также приобретенная в промышленной упаковке (компания-производитель ООО «Русские корни» в полиэтиленовых пакетах 50 г.; «Ивановские травы» в бумажных крафт-пакетах 30 г. ТУ 9185-0137771770-2012) . Идентификацию веществ фенольной природы осуществляли методом хроматографии в тонком слое сорбента на пластинках «Sorbfil АФ-А-УФ» РАЗМЕРОМ 10Х10 см, с размером частиц 5-17 мкм. Поскольку разделение веществ фенольной природы чаще всего осуществляют, используя кислые смеси растворителей, нами была отобрана хро-матографическая система н-бутанол-уксусная кислота-вода в соотношении 40:12:28. Детектирование осуществляли 1% раствором хлорида железа (111) в 96% этаноле.
Сумму полифенольных соединений оценивали с использованием метода Фолина-Чикалтеу (Folin-Ciocalteu), который широко используется при анализе пищевого сырья [6,7,8]. Метод основан на применении реактива Фолина-Чикалтеу, который представляет собой смесь фосфорно-вольфрамовой и форсфорно-молибденовой кислот. В ходе реакции полифинольные соединения окисляются под действием реактива и появляется голубая окраска за счет образования смеси востановленных фоль-фраматов и молибдатов. Оптическая плотность раствора пропорциональна содержанию полифенол-ных веществ. (6)
Результаты и обсуждение. В ходе анализа спиртового извлечения из сосновой хвои методом ТСХ обнаружено 8 зон адсорбции, среди которых сравнением со стандартами идентифицированы ка-техин, дигидрокверцитин и коричная кислота, Rf которых совпали с Rf стандартов. Оценку количественного содержания полифенольных соединений осуществляли по следующей методике: около 10 г (точная навеска) измельченной хвои исследуемых образцов сосны обыкновенной помещали в колбу вместимостью 250 мл, прибавляли 100 мл 70% этилового спирта и проводили экстракцию при постоянном перемешивании и подогреве 40° в течении четырех часов, после охлаждения смесь фильтровали в мерную колбу объемом 100 мл, доводя до метки 70% этиловым спиртом. 2 мл полученного извлечения помещали в мерную колбу объемом 100 мл, добавляли 50 мл дистиллированной воды, 5 мл реактива Фоллина-Чикалтэу, 15 мл 20% раствора натрия карбоната, доводили объем колбы до метки и перемешивали, измеряли оптическую плотность, исследуемого раствора при длине волны 765 Нм. Параллельно проводили измерение оптической плотности раствора, состоящего из одного мл раствора РСО галловой кислоты, 5 мл реактива Фол-лина-Чикалтэу, 15 мл 20% раствора натрия карбоната и дистиллированной воды до 100 мл.
Суммарное содержание полифенолных соединений в % в хвое сосны пересчете на галловую кислоту вычисляют по формуле:
„ D Хт0Х100Х1Х100Х100Х100
Х = -0-, где
D0xmxaxl00xl00x(100-w)
D - оптическая плотность исследуемого раствора
D0 - оптическая плотность раствора РСО галловой кислоты
m - масса сырья, г m0 - масса РСО галловой кислоты,г а - аликвота раствора А, мл w - потеря в массе при высушивании сырья, % Так же для исследуемых образцов было проведено определение содержания экстрактивных веществ, в соответствии с тербованиями 0ФС.1.5.3.0006.15 «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах». Результаты анализа представлены в таблице.
Таблица 1. Результаты количественного определения полифенольных соединений и экстрактивных веществ, извлекаемых спиртом этиловым 70% в хвое сосны обыкновенной
Определяемый показатель качества Объект исследования
Хвоя ООО «Русские корни» Хвоя «Ивановские травы» Хвоя сосны обыкновенной, заготовленная от дикорастущих деревьев
Содержание экстрактивных веществ,% 13,98 13,23 14,72
Содержание суммы полифенольных соединений,% 6,76 6,42 7,34
Полученные результаты определения суммар- воляют рекомендовать нормы: содержание полифе-ного содержания полифенольных и экстрактивных нольных веществ не менее 6% , экстрактивных ве-веществ для исследуемых образцов хвои сосны поз- ществ, извлекаемых 70% спиртом этиловым не
Евразийский Союз Ученых (ЕСУ) # 2 (59), 2019 мене 13%, которые могут быть включены в разрабатываемую нормативную документацию.
Литература
1.Лесное хозяйство России. -М.:Лесная про-мышленность,-1983.-184с.
2.У. Юй Фенольные соединения кроны дерева сосны обыкновенной ((Pinus silvestris L.)
Автореф. Дисс. к.хим.н. Санкт-Петербург
2006.
3.Азароа В.И.,Буров А.В.,Оболенская А.В. Химия древесины и синтетических полимеров,-учебник для вузов СПБЛТА,-1999.-628С.
4.Иванова С.З., Запесочная .Г.Г, Тюкавкина Н.А.,Медведева С.А. О-ацилированные флавоноид-ные гликозиды хвои (Pinus silvestris L.)\\ Химия природных соединений. -1978.-№3.-с.399-400
5. .Иванова С.З., Запесочная .Г.Г, Шейченко В.И., Тюкавкина Н.А.,Медведева С.А. О строении ди-п-кумароил-изокверцитина из хвои (Pinus sil-vestris L.)\\ Химия природных соединений.-1980.-№2.-с.254-255
6.Васильев С.Н.,Рощин В.И.,Ягодин В.И. Экстрактивные вещества древесной зелени Pinus sil-vestris L.\\Растительные ресурсы.-1995.№2.-с.79-119
7.У. Юй, Рощин В.И. Состав соединений полярных экстрактов хвои и ветвей сосны обыкновенной з Pinus silvestris L.\\ 11 Международная конференция « Лесные биологически активные ресурсы( березовый сок, живица, эфирные масла, пищевые, технические и лекарственные растения)»-Хаба-ровск,2004.-с.214-216
8.Павлуцкая И.С.,Рощин В.И.,Соловьев В.А. Групповой состав хлорофилло-каротиновой пасты и провитаминного концентрата из хвойной древесной зелени\\Химия древесины.-1984.№3.-с. 102-107
9. Н.В.Нестерова, И.А.Самылина Изучение качественного состава и показателей качества листьев яблони лесной и домашней. журнал «Здоровье и образование в XXI веке» 2015, №4, т 17, с. 251-258
