CC BY
10
DOI 10.31588/2413-4201-1883-245-1-160-163
УДК 619:636.9:615.2
ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРЫХ СВОЙСТВ ГИПОКСЕНА НА МОДЕЛИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТОКСИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА БЕЛЫХ КРЫС
Резниченко А.А. - к.вет.н.
ФГБОУ ВО «Белгородский государственный аграрный университет
им. В.Я. Горина»
Ключевые слова: белые крысы, четырёххлористый углерод, гипоксен, гептран, печень
Keywords: white rats, carbon tetrachloride, hypoxen, Gatran, liver
Актуальным направлением современных исследований является разработка средств, направленных на повышение устойчивости печени к негативному влиянию различных ксенобиотиков. Наиболее часто поражения печени наблюдаются в крупных животноводческих хозяйствах, где высокая концентрация поголовья требует постоянного применения антибактериальных препаратов, вакцин и других средств, чтобы сдержать развитие инфекционных заболеваний среди животных [3, 11]. Считается, что нарушение обмена веществ вызывает поражение этого органа, что приводит к поражению гепатоцитов.
«Гепатопротекторный эффект могут оказывать фармакологические средства, улучшающие метаболические процессы в организме, ингибирующие перекисное окисление липидов и обладающие антиги-поксической активностью» [4, 8].
Изучению патогенеза токсического поражения печени посвятили свои работы многие учёные [5, 10]. В последние годы убедительно доказано, что процессы пере-кисного окисления липидов являются одним из важных механизмов повреждения гепатоцитов и прогрессирования хронических диффузных заболеваний печени [9].
По данным С.Б. Матвеева, именно среднемолекулярные вещества являются универсальным биохимическим маркером эндогенной интоксикации. «Такого рода вещества представлены промежуточными и конечными продуктами нормального и нарушенного белкового и липидного обмена, они накапливаются в организме в количествах, превышающих нормальные
концентрации, и являются продуктами свободно радикального перекисного окисления липидов, промежуточного метаболизма, средне молекулярными пептидами» [6].
При поражении печени, независимо от этиологии, ведущим патоморфологиче-ским синдромом является нарушение клеточных структур, что приводит к повышению проницаемости и разрушению мембран гепатоцитов и их органелл и развитию гиперферментемии митохондриально-го фермента АсАТ и цитоплазматического фермента АлАТ [3].
Поэтому актуальным направлением современных исследований является поиск препаратов, обладающих гепатопротек-торным действием.
Исходя из этого, нами был испытан препарат, обладающий антиоксидантными свойствами - гипоксен.
Целью нашей работы было изучение гепатопротекторных свойств гепоксе-на на модели острого токсического гепатита на белых крысах.
Для достижения цели были поставлены следующие задачи: вызвать токсический гепатит у белых крыс путём применения четырёххлористого углерода; установить гепатопротекторный эффект гипо-ксена и сравнить его эффективность с препаратом гептраном.
Материал и методы исследований. Острый токсический гепатит вызывали внутрибрюшинным введением белым крысам четырёххлористого углерода на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл на 100 г массы тела в течение 3 -х суток одно-
кратно [1].
Для лечения животных использовали гипоксен и гептран. Эффективность действия препаратов оценивали по клиническому состоянию белых крыс и биохимическим показателям сыворотки крови, при этом использовали биохимический анализатор.
Цифровой материал исследований подвергался математической обработке в описании Н.А. Плохинского [7] с вычислением средних арифметических (М), их среднестатистических ошибок и критерия достоверности (р). Различия считали достоверными при р<0,05.
Гипоксен (натриевая соль [поли-(2,5 -дигидроксифенилен)] -4 тиосульфо-кислоты) представляет собой порошок черного цвета, без запаха или со слабым специфическим запахом. Препарат выпускает ЗАО «Петрохим» (Белгород).
Гептран комплексный препарат, обладает гепатопротективным и антистрессовым действием, в 1 мл гептрана содержится 50 мг карнитина, 200 мг магния сульфата, 220 мг сорбитола, 30 мг циано-
Из данных таблицы видно, что введение крысам четырёххлористого углерода вызвало нарушение клеток печени, что сопровождалось увеличением в сыворотке крови активности AST и ALT (на 13,7 и 18,1 % соответственно, при р< 0,05).
После применения гипоксена ак-
кобаламина, 8 мг кальция пантотената, 20 мг никотинамида, вспомогательные и формообразующие вещества.
Результат исследований. Для проведения опыта было отобрано 4 группы белых беспородных крыс-самцов массой 160-180 г по 6 голов в каждой.
Первая группа - контрольная; вторая, третья и четвёртая группы -опытные. Первой группе никаких препаратов не применяли (интактные животные). Крысам второй, третьей и четвёртой опытных групп
внутрибрюшинно вводили 50 % эмульсию четырёххлористого углерода на вазелиновом масле в дозе 4,0 мл/кг массы тела в течение 3-х суток. Третьей опытной группе сразу после окончания введения четыреххлористого углерода в течение 7 дней применяли гипоксен из расчёта 50 мг/кг массы тела, четвёртой опытной группе в течение такого же периода времени выпаивали гептран в дозе 1 мл/л воды. Взятие крови проводили в конце экспериментального периода (через 14 суток (Таблица 1).
тивность AST и ALT в третей опытной группе увеличилась на 1,7 и 1,8 %, однако эти изменения не получили статистического подтверждения с контролем.
Что касается гептрала, то его действие было также эффективным, что проявлялось незначительным увеличением
Таблица 1 - Биохимические показатели крови крыс
Показатель Группа
1 2 3 4
контрольная 4-х хлористый углерод гипоксен +4-х хлористый углерод гептрал + 4-х хлористый углерод
Общий белок, г/л 68,9±1,45 66,0±1,58 72,3±1,40 72,7±1,51
Альбумины, г/л 32,7±1,29 30,4±0,96 38,1±1,39* 36,7±1,14
Креатинин, Мг/дл 0,48±0,22 0,50±0,39 0,54±0,31 0,49±0,36
Холестерол, ммоль/л 1,23±0,26 1,57±0,21 1,27±0,23 1,30±0,29
Щелочная фосфатаза, u/L 351,8±5,21 380,0±4,96* 350,8±5,29 357,3±5,49
Билирубин, Мг/дл 0,56±0,19 0,59±0,15 0,53±0,09 0,58±0,31
Мочевина, Mmol/L 6,79±0,57 7,14±0,69 6,47±0,64 7,11±0,65
Глюкоза, mmoL/L 9,26±0,98 5,92±0,96* 9,97±1,11 8,96±1,05
AST, ед/л 178,7±6,32 203,2±6,29* 180,9±6,89 181,3±5,76
ALT, ед/л 92,8±5,47 109,6±5,58* 94,4±4,35 97,6±5,29
Примечание *-р <0,05
аспартатаминотрансферазы и аланинами-нотрансферазы: на 1,5 и выше контроля при р>0,05.
Во второй группе в сыворотке крови произошло статистически подтверждённое с контрольными показателями уменьшение общего белка на 4,2 % (р<0,05). Таким образом, 4-х хлористый углерод вызывает нарушение белкового обмена. Печень принимает активное участие в метаболизме метионина, то при поражении гепатоцитов нарушается механизм транссульфирования, вследствие чего происходит уменьшение в крови глутатио-на и цистеина. При токсическом гепатите в результате ингибирования синтеза белка и деградации аминокислот отмечается гипо-проеинемия.
После применения гипоксена и гер-трала у крыс 3 и 4 опытных групп не наблюдалось нарушения белкового обмена.
Таким образом, можно предположить, что гипоксен и гептрал при токсическом поражении печени стимулируют обезвреживание продуктов распада белка, тем самым подавляют развитие эндогенной интоксикации.
После интоксикации 4-х хлористым углеродом произошло уменьшение глюкозы в сыворотке крови животных второй группы на 36,1 % по сравнению с контролем. Таким образом, при интоксикации в результате ингибирования гликонеогенеза и усиления гликогенолиза, на фоне резкого снижения содержания гликогена в печени начинается развиваться гипогликемия.
Следует отметить, что в третьей и четвёртой опытных группах произошло увеличение глюкозы. Таким образом, оба препарата эффективно препятствуют развитию гипогликемии.
Во второй опытной группе отмечалось повышение уровня щелочной фосфа-тазы на 8,0 %, по сравнению с контролем (р<0,05), что свидетельствует о поражении паренхимы печени. В третьей и четвёртой опытных группах после применения гипо-ксена и гептрала содержание этого фермента было в пределах физиологической нормы. Таким образом, проведённые исследования показали, что гепоксен и геп-
трал оказывают гепатопротекторное действие на организм животных. Оба изучаемых препарата остановили развитие токсического гепатита в организме крыс, что проявилось снижением ферментов переа-минирования и щелочной фосфатазы, а также увеличением белка и глюкозы в сыворотке крови. Это свидетельствует о восстановлении функции гепатоцитов и нормализации работы организма.
Заключение. На основании проведённых исследований, гипоксен можно рекомендовать как эффективное гепатопро-текторное средство для сельскохозяйственных животных. Препарат рекомендуется применять с водой из расчёта 50,0 мг/кг массы тела.
ЛИТЕРАТУРА:
1. Венгеровский, А.И. Методические указания по изучению гепатозащит-ной активности фармакологических веществ / А.И. Венгеровский // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Изд. «Ремедиум». - 2000. - С. 228-231.
2. Катикова О.Ю. Влияние мекси-дола на состояние гомеостаза и перекисное окисление липидов при интоксикации парацетамолом // Эксперим. и клин, фармакология. - 2002. - Т. 65. - № 5. - С. 53-56.
3. Колесниченко, С.П. Применение новой биологически-активной добавки для профилактики гепатозов сельскохозяйственной птицы / С.П. Колесниченко, Ф.К. Денисова [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. - Казань. - 2017. - Т. 232 (4). - С. 8084.
4. Колесниченко, С.П. Эффективность использования карофлавина при ге-патозах цыплят-бройлеров / С.П. Колесни-ченко, Н.Г. Савушкина, С.Б. Носков [и др.] // Ученые записки Казанской государственной академии ветеринарной медицины имени Н.Э. Баумана. - Казань. - 2017. -Т. 232 (4). - С. 85-88.
5. Кузьминова, Е.В. Политематический сетевой электронный научный журнал / Е.В. Кузьмина // Кубанского государственного аграрного университета. - 2014.
- № 102. -С. 787-797.
6. Матвеев, С.Б. Оценка эндогенной интоксикации по показателям средне молекулярных пептидов при неотложных состояниях / С.Б. Матвеев, Н.Ф. Федорова, М.А. Годков // Клиническая лабораторная диагностика. - 2009. - № 5. - С. 16-18
7. Плохинский, Н.А. Биометрия / Н.А. Плохинский. - М.: Изд. «Московского университета», 1987. - 367 с.
8. Резниченко, Л.В. Новая белково-минеральная добавка для телят / Л.В. Резниченко, С.Б. Носков, Д.А. Медведев, А.А. Степанов // Зоотехния - 2014. - № 7.
- С. 7-8
9. Резниченко, Л.В. Результаты ис-
пытания микосорбентов при экспериментальном микотоксикозе цыплят-бройлеров / Л.В. Резниченко, А.А. Резниченко, Ф.К. Денисова // Актуальные вопросы сельскохозяйственной биологии. - 2019. -№ 2 (12). - С. 123-127.
10. Olson, J.A. Vitamin A and carotene as antioxidant in a physiological context / J.A. Olson // Journal of nutritional science and vitaminology. - 1993. - V. 39. - P. 5765.
11. Pietta P.G. Flavonoids as Antioxidants / P.G. Pietta // Journal of Natural Products. - 2000. - Vol. 63. - № 7. - P. 10351042.
ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРЫХ СВОЙСТВ ГИПОКСЕНА НА МОДЕЛИ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНОГО ТОКСИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА БЕЛЫХ КРЫС
Резниченко А.А.
Резюме
Острый токсический гепатит вызывали внутрибрюшинным введением белым крысам четырёххлористого углерода на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл на 100 г массы тела в течение 3-х суток однократно. В результате чего у животных произошло нарушение цито-плазматических мембран гепатоцитов, что сопровождалось увеличением в сыворотке крови ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы, резким снижением глюкозы и общего белка. Применение гипоксена остановил этот патологический процесс. После применения препарата в сыворотке крови животных снизилась до физиологических значений активность ферментов переаминирования и щелочной фосфатазы, увеличилось количество белка и глюкозы, улучшилось физиологическое состояние белых крыс. Таким образом, гипоксен можно применять животным в качестве гепатопротекторного средства в дозе 50,0 мг/кг массы тела.
STUDY OF THE HEPATOPROTECTIVE PROPERTIES OF HYPOXENE ON A MODEL OF EXPERIMENTAL TOXIC HEPATITIS IN WHITE RATS
Reznichenko A.A.
Summary
Acute toxic hepatitis was caused by intraperitoneal administration of carbon tetrachloride in vaseline oil to white rats at the rate of 0.4 ml per 100 g of body weight for 3 days once. As a result, the animals had a violation of the cytoplasmic membranes of hepatocytes, which was accompanied by an increase in serum transamination enzymes and alkaline phosphatase, a sharp decrease in glucose and total protein. The use of hypoxen stopped this pathological process. After using the drug, the activity of transamination enzymes and alkaline phosphatase in the blood serum of animals decreased to physiological values, the amount of protein and glucose increased, and the physiological state of white rats improved. Thus, hypoxen can be used in animals as a hepatoprotective agent at a dose of 50.0 mg/kg of body weight.
