CC BY
48
УДК 619:616.36-002:615.244
ИЗУЧЕНИЕ ГЕПАТОПРОТЕКТОРНЫХ СВОЙСТВ ЛАРИКАРВИТА
С.Б. НОСКОВ, кандидат ветеринарных наук, директор Белгородская межобластная ветеринарная лаборатория
Л. В. РЕЗНИЧЕНКО, доктор ветеринарных наук, профессор
Белгородская ГСХА Е-таИ: [email protected]
Резюме. На модели острого токсического гепатита белых крыс, вызванного четырёххлористым углеродом, показаны высокие гепатопротекторные свойства препарата ларикарвит. Его применение способствовало увеличению белка и альбуминов, снижению щелочной фосфатазы в сыворотке крови подопытных животных, по сравнению с положительным контролем, при этом уровень ферментов переаминирования (AST и ALT) был значительно ниже, чем в отрицательном контроле, где применяли четырёххлористый углерод и незначительно отличался от фоновых значений. Ключевые слова: гепатит, печень, четырёххлористый углерод, ферменты переаминирования, ларикарвит, крысы.
Болезни печени занимают значительное место в общей структуре заболеваемости животных. В последние годы отмечается тенденция неуклонного роста этой патологии. Гепатотоксический фактор - различные ксенобиотики, поступающие в организм животных с кормом, водой, воздухом. Их количество в окружающей среде исчисляется десятками тысяч.
Независимо от действующего фактора в печени формируется ограниченное количество патологический реакций, важнейшие из которых - некроз, холестаз, фиброз и др. Один из основных патогенетических механизмов повреждения биомембран - инициация процессов перекис-ного окисления липидов [6], что ведёт к повышению проницаемости клеточных мембран, некрозу и гибели гепа-тоцитов [6, 5]. Образование свободных радикалов и реактивных метаболитов - важный механизм повреждения клеток, интоксикации органов, развития патологических процессов в организме [4]. Нарушение процесса детоксикации организма приводит к нарушению гомеостаза и развитию патологических реакций [2]. При поражении печени наблюдается подавление иммунной системы, главным образом Т-клеточного звена [1].
Поэтому возникает необходимость изучения новых фармакологических средств, эффективно коррегирую-щих биохимическую функцию печени и иммунологическую реактивность организма, а проблема изыскания новых препаратов, сочетающих иммуностимулирующие, антиоксидантные и противовоспалительные свойства остаётся весьма актуальной, несмотря на наличие достаточно обширного ассортимента средств для устранения этой патологии. У каждого из таких препаратов, обладающих определённым положительным воздействием, базирующимся на механизмах различного типа, есть серьёзные побочные эффекты. К тому же большинство применяемых в ветеринарной медицине средств дорогостоящие, что побуждает химиков, фармакологов и ветеринарных врачей искать высокоактивные отечественные гепатопротекторы.
Исходя из этого, мы совместно с учёными-химиками Достижения науки и техники АПК, №08-2010 __
ЗАО «Петрохим» (Белгород) разработли новый комплексный препарат, в состав которого входят каротин, хлорофилл, биофлавоноидный комплекс лиственницы, а также витамины А, Д и Е, который получил название ларикарвит.
Цель нашей работы - изучение гепатопротекторных свойств ларикарвита на модели острого токсического гепатита у белых крыс.
Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:
вызвать токсический гепатит у белых крыс путём применения четырёххлористого углерода;
установить гепатопротекторный эффект ларикарвита и сравнить его эффективность с гепатовексом.
Условия, материал и методы. Острый токсический гепатит вызывали внутрибрюшинным введением белым беспородным крысам-самцам массой 160...180 г четырёххлористого углерода на вазелиновом масле из расчёта 0,4 мл/100 г массы тела в течение 3 суток однократно [5].
Животных разделили на 4 группы по 7 голов в каждой.
Первая группа - положительный контроль (крысам внут-рибрюшинно вводили вазелиновое масло в дозе 4,0 мл/кг массы тела). Вторая группа - отрицательный контроль (животным внутрибрюшинно вводили эмульсию четырёххлористого углерода на вазелиновом масле в дозе 4,0 мл/ кг массы тела). Особям третьей опытной группы в течение 14 суток до применения четырёххлористого углерода, в период применения и в последующие 5 суток с кормом довали ларикарвит из расчёта 1 г/кг массы тела, крысам четвёртой группы в течение этого же периода выпаивали гепатовекс из расчёта 1 мл/л воды.
Декапитацию крыс и взятие крови проводили на 5 сутки после окончания опыта.
Для оценки эффективности действия ларикарвита и гепатовекса осуществляли клинический осмотр животных, измерение массы и контроль некоторых биохимических показателей сыворотки крови (ALT, AST, креатинин, общий билирубин, щелочная фосфатаза, белок). Биохимические исследования проводили по стандартным методикам с использованием биохимического анализатора.
Цифровой материал подвергали математической обработке в описании Н. А. Плохинского (1987) с вычислением средних арифметических (М), их среднестатистических ошибок (m) и критерия достоверности (р). Различия считали достоверными при р<0,05.
Гепатовекс - комплексный препарат, в 100 мл которого содержится 5 г DL метионина, 10 г L-лизина гидрохлорида, 19 г холин-хлорида, 1 мг витамин В12, 10 г сорбитола и наполнитель (до 100 мл).
Ларикарвит представляет собой сыпучую порошкообразную массу, содержит в своём составе хлорофилл ели (1,5 мг/г), бета-каротин (3,3 мг/г), биофлавоноидный комплекс лиственницы (20 мг/г), витамин А (500 МЕ/г), витамин Д3 (250 МЕ/г) и витамин Е (0,2 мг/г).
Результаты и обсуждение. За период проведения опыта масса тела крыс второй группы уменьшилась после введения 4-ххлористого углерода на 2,6 %, что говорит о токсическом действии этого вещества на организм животных. В III опытной группе, где применяли ларикарвит, действие 4-ххлористого углерода было менее выражено и масса тела животных увеличилась (см. табл.).
При использовании гепатовекса масса крыс за период проведения эксперимента практически не изменялась.
Таблица. Биохимические показатели крови крыс
Показатель Контрольные Опытные
I II III IV
AST, u/L 340,9±6,02 364,3±6,13* 326,9±6,9611 362,2±7,76*
ALT, u/L 95,2±4,57'1 122,5±5,12** 96,7±4,23'' 121,8±3,40**
Альбумины, г/л 31,9±0,78 31,1±0,91 39,5±0,83** 31,6±1,0
Общий белок, г/л 60,5±1,0 61,6±0,76 63,9±0,86* 61,0±0,87
Мочевина, Mmol/L 5,7±0,62 6,9±0,59 6,3±0,74 4,9±0,80
Креатинин, Мг/дл 0,4±0,31 0,34±0,29 0,3±0,36 0,3±0,33
Билирубин, Мг/дл 2,7±0,54 2,48±0,39 2,45±0,44 2,5±0,42
Холестерин, Mmol/L 1,49±0,13 1,2±0,12 1,3±0,15 1,38±0,11
Мочевая кислота, Мг/дл 4,3 3,1 2,9 3,3
Щелочная фосфатаза, u/L 433,7±5,13 449,7±5,22* 412,3±5,74* 458,2±6,23*
*- р<0,05; **- р<0,01 (достоверные различия с положительным контролем); 11 - р<0,01 (достоверные значения с отрицательным контролем)
Под действием четырёххлористого углерода происходило значительное повышение AST и ALT в отрицательном контроле (на 6,8 и 28,7 %) и в IV опытной группе (на 6,3 и 27,9 %), по сравнению с положительным контролем (во всех случаях р<0,05...0,01). Это свидетельствует о токсическом поражении гепатоцитов и, возможно, кардиомиоцитов.
В третьей опытной группе, отрицательного влияния четырёххлористого углерода на функциональное состояние печени практически не наблюдалось. Значительно меньшее содержание AST и ALT (на 11,4 и 26,7 %, р<0,05...0,01), по сравнению с отрицательным контролем, свидетельствует о высоком гепатопротекторном действии ларикарвита.
Повышение уровня щелочной фосфатазы в отрицательном контроле и в IV опытной группе (на 3,6 и 10,4 % соответственно), также свидетельствует о поражении печени, которое сопровождается некрозом гепатоцитов. В варианте с применением ларикарвита, величина этого показателя, наоборот, снизилась (на 5,2 %), что потверж-дает высокую лечебно-профилактическую эффективность препарата.
Следует отметить достоверное увеличение белка и альбуминов в сыворотке крови крыс III опытной группы (на 5,6 и 12,5 % соответственно, по сравнению с контролем, р<0,05...0,01). Увеличение уровня альбуминов указывает на качественное функционирование печени (его снижение характеризует хроническую патологию этого органа).
Кроме того, при низкой концентрации альбумина в крови нарушается равновесие между плазмой крови и межклеточной жидкостью.
По остальным показателям сыворотки крови животных различия с отрицательным и положительным контро-
лем были статистически не достоверны.
Следует отметить, что применение гепатовекса не оказало существенного положительного влияния на функцию печени подопытных крыс. Биохимические показатели крови животных, как и их масса в течение всего экспериментального периода незначительно отличалась от отрицательного контроля.
При проведении макроскопических исследований органов животных установлено токсическое поражение печени после введение 4-х хлористого углерода. При этом отмечена жировая дистрофия органа, изменение окраски и дряблая консистенция. Такая же картина наблюдалась у крыс, подвергшихся воздействию четырёххлористым углеродом и одновременно с кормом получавших гепато-векс. После применения ларикарвита в сочетании с четырёххлористым углеродом печень животных не имела видимых патологических изменений и практически не отличалась от печени крыс, которым вводили вазелиновое масло (положительный контроль).
Выводы. Внутрибрюшинное введение белым крысам в течение 3 суток четырёххлористого углерода в форме 50 %-ной эмульсии на вазелиновом масле из расчёта 4,0 мл/ кг приводит к повышению уровня AST и ALT (на 6,8 и 28,7%) и увеличению щелочной фосфатазы (на 3,6 %), по сравнению с контролем.
Лечебно-профилактическое использования ларикарвита в дозе 1 г/кг белым крысам в течение 14 суток до применения четырёххлористого углерода, в период его применения и в течение последующих 5 суток, способствовало увеличению белка и альбуминов (на 5,6 и 12,5 %), а также снижению щелочной фосфатазы (на 5,2%) по сравнению с положительным контролем. При этом уровень AST и ALT был ниже, чем в отрицательном контроле (на 11,4 и 26,7 %), и мало отличался от фоновых значений.
Применение гепатовекса не оказало гепатопротектор-ного действия на организм животных, при этом уровень AST и ALT превысил контрольные показатели на 6,3 и 27,9 %, щелочная фосфатаза возросла на 10,4 %.
Таким образом, ларикарвит можно рекомендовать как эффективное гепатопротекторное средство для животных.
Литература.
1. Алексеева И.Н., Брызгина Т.М., Павлович С.И. Печень и иммунологическая реактивность. - Киев.: Наукова Думка. - 1991. - С. 168.
2. Баргакан З.С., Момот А.П. Основы диагностикинарушений гомеостаза. - М., 1999. - 224 с.
3. Батрак Г.Е., Кудрин А.Н. Дозирование лекарственных средств экспериментальным животным. - М, 1979. - С. 140.
4. Баранова И.П., Зыкова О.А. Состояние системы антиоксидантной защиты и эффективность метаболической терапии у больных HAV-инфекцией//Вестник С.-Петербургской государственной медицинской академии. - 2006. - № 1(7). - С. 209-210.
5. Гайворонская В.В. Изыскание средств, защищающих и восстанавливающих функцию печени при повреждающих воздействиях. Автореферат дис. ... канд. мед. наук. - С.-Пб., 1992. - 22 с.
6. Губский Ю.И. Коррекция химического поражения печени / Ю.И. Губский. - Киев: Здоровье, 1989. - 168 с.
STUDY OF HEPATOPROTECTIVE PROPERTIES OF LARIKARVIT ON THE MODEL OF AN ACUTE TOXIC
HEPATITIS OF WHITE RATS
S.B.Noskov, L. V.Reznichenko
Summary. On the model of an acute toxic hepatitis of the white rats caused by carbon tetrachloride we showed high hepatoprotective properties of larikarvit. The application of this preparation promoted increase in fiber and albumins, decrease in alkaline phosphatase in blood whey of experimental animals in comparison with the positive control, besides the level of enzymes of reamination (AST and ALT) was considerably below values of the negative control where carbon tetrachloride was applied and it slightly differed from background values.
Key words: a hepatitis, a liver, carbon tetrachloride, reamination enzymes, larikarvit, rats.
68 -------------------------------------- ___________ Достижения науки и техники АПК, №08-2010
