CC BY
27
DOI 10.31588/2413-4201-1883-247-3-187-191
УДК 619:615.28:615.9
ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЧЕТВЕРТИЧНОГО АММОНИЕВОГО СОЕДИНЕНИЯ, ВХОДЯЩЕГО В СОСТАВ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩЕГО СРЕДСТВА
Нехайчик Ф.М. - аспирант кафедры эпизоотологии и паразитологии
ФГБОУ ВО «Казанская государственная академия ветеринарной медицины
имени Н.Э. Баумана»
Ключевые слова: дезинфекция, четвертичные аммониевые соединения, дезинфицирующее средство, токсикологическая оценка, лабораторные животные
Keywords: disinfection, quaternary ammonium compounds, disinfectant, toxicological assessment, laboratory animals
Дезинфекция играет важную роль в системе ветеринарно-санитарных
мероприятий путем обеспечения эпизоотологического благополучия
животноводства по инфекционным и инвазионным заболеваниям. Современные дезинфицирующие средства должны быть эффективными по отношению к патогенным микроорганизмам и малотоксичными для животных. Многие дезинфицирующие средства обладают слабым бактерицидным и вирулицидным действием, что не позволяет им качественно обеззараживать
контаминированные органическими
веществами объекты ветеринарного надзора. Наибольшее распространение получили те препараты для дезинфекции, которые с экономической и производственной точки зрения являются малотоксичными для различных видов домашних, сельскохозяйственных
животных и обслуживающего персонала [1, 2, 3].
Дезинфицирующие средства на основе четвертичных аммониевых соединений (ЧАС) зарекомендовали себя как препараты, обладающие хорошей моющей способностью, проявляют низкую токсичность, не имеют резкого запаха. Они не вызывают коррозию металлических обрабатываемых поверхностей, не обесцвечивают ткани, хорошо
растворяются в воде, сохраняют стабильность при транспортировке и хранении. Бактерицидное действие
четвертичных аммониевых соединений (ЧАС) обусловлено дезорганизацией цитоплазматической мембраны и снижением активности ферментов у микроорганизмов [4, 5].
Цель работы - оценка фармако-токсикологических свойств нового дезинфицирующего четвертичного
аммониевого соединения. В связи с чем были выполнены следующие задачи: изучить острую токсичность нового соединения; определить аллергенные свойства нового соединения; оценить местно-раздражающее действие нового соединения.
Материал и методы исследований. Исследования проводились на базе вивария ФГБОУ ВО Казанской ГАВМ. Были изучены токсикологические свойства нового дезинфицирующего четвертичного аммониевого соединения. Для этого формировались опытные и контрольные группы лабораторных животных. Опытным группам задавали раствор исследуемого соединения в различных дозах, контрольным группам задавали
дистиллированную воду.
Острую токсичность ЧАС изучали согласно методическим указаниям по доклиническому изучению
общетоксического действия лекарственных препаратов на белых крысах и белых мышах [9]. Исследуемый препарат задавали внутрижелудочно через зонд с оливой в объеме 2 мл/гол. (для белых крыс) и 0,5 мл/гол. (для белых мышей). Средне
смертельную дозу вычисляли по методу Кербера [6].
Аллергенные свойства изучали на двух опытных и одной контрольной группах морских свинок. Результаты анализировали по реакции специфического лизиса лейкоцитов крови (РСЛЛ). Животных опытных групп
сенсибилизировали, вводя однократно в кожу наружной поверхности уха, ближе к его основанию 50 (1 опытная группа) и 200 мкг на животное (2 опытная группа) исследуемый препарат в объёме 0,1 мл. В качестве растворителя применяли физиологический раствор. Контрольным животным вводили в том же объёме растворитель. Выявление сенсибилизации проводили через 8 дней с помощью реакции специфического лизиса лейкоцитов крови (РСЛЛ) [8].
Оценка местно-раздражающего действия нового четвертичного
аммониевого соединения проводили на кроликах и морских свинках. Кроликам препарат закладывали в левый конъюнктивальный мешок. В течение 14 дней ежедневно проводились наблюдения
[9].
Морским свинкам ставили кожные аппликации. Раствор исследуемого препарата наносили на область спины на участок 2*2 см по обе стороны от позвоночника. Контролем служила дистиллированная вода. Кожную реакцию регистрировали через 1 и 16 часов после нанесения. Токсикологические свойства нового дезинфицирующего четвертичного аммониевого соединения изучили согласно «Руководству по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ» [9].
Результат исследований. Фармако-
дезинфицирующего четвертичного
аммониевого соединения (ЧАС) изучали на белых нелинейных крысах и мышах, морских свинках и белых кроликах. Перед постановкой опытов животных
выдерживали на 14-ти дневном карантине. Формирование подопытных и контрольных групп животных проходило по принципу аналогов. Лабораторные животные находились в одинаковых условиях содержания и кормления. В ходе всех экспериментов самки содержались отдельно от самцов.
В ходе проведенных экспериментов проводили оценку клинического состояния животных, потребления корма и воды, регистрировалась продолжительность жизни. Результаты опытных групп сравнивали с результатами контрольных.
При изучении острой токсичности нового дезинфицирующего ЧАС было установлено, что у крыс внутрижелудочное введение препарата в дозе 700 мг/кг массы животного вызывало возникновение симптомов легкого отравления, которые исчезали через 8 часов.
При введении раствора в дозе 1500 мг/кг массы животного через 2 минуты наблюдалось резкое ухудшение общего состояния, признаки острой интоксикации, одышка, ослабление сердечной деятельности. Смерть наблюдалась через 2 часа после введения дозы 1500 мг/кг. При
патологоанатомическом вскрытии
животных этой группы наблюдалась картина общего венозного застоя, отека легких, катарального энтерита.
Для оценки токсического действия препарата рассчитали средне смертельную дозу (ЛД50) по методу Кербера:
токсикологические
свойства
нового
ЛД50 = ЛД:
,100
где: Ъ - средняя арифметическая из п особей, у которых наблюдается эффект (то есть смежные - две цифры в графе «Пало, гол.» складывается и делится пополам);
Б - интервал (разница) между
дозами.
Результаты вычислений средне смертельной дозы по методу Кербера указаны в таблице 1.
При изучении острой токсичности нового дезинфицирующего ЧАС на белых
п
мышах установлено, что при внутрижелудочном введении белым мышам раствора в дозе 400 мг/кг живой массы проявились признаки легкой интоксикации организма, которые исчезали спустя 12 часов. Введение раствора в количестве 700 мг/кг живой массы вызывало признаки острой интоксикации уже через 2 часа после введения. По
результатам патологоанатомического
вскрытия у павших мышей наблюдались признаки общего венозного застоя, отека легких.
Средне смертельную дозу (ЛД50) для белых мышей определяли по методу Кербера (Таблица 2).
Таблица 1 - Сводные данные для определения средне смертельной дозы нового ЧАС для белых крыс по методу Кербера
Доза мг/кг 300 500 700 900 1100 1300 1500
Выжило, гол. 10 10 8 8 6 3 0
Пало, гол. 0 0 2 2 4 7 10
Z 0 0 1 2 3 5,5 8,5
D 200 200 200 200 200 200 200
D*Z 0 0 200 400 600 1100 1700
ЛД5о = 1500
200+400+600+1100+1700 10
= 1100 мг/кг
Таблица 2 - Сводные данные для определения средне смертельной дозы для белых мышей по методу Кербера
Доза мг/кг 100 200 300 400 500 600 700
Выжило, гол. 10 10 10 8 4 2 0
Пало, гол. 0 0 0 2 6 8 10
Z 0 0 0 2 3 5,5 8,5
D 100 100 100 100 100 100 100
D*Z 0 0 0 100 400 700 900
„„ 100+400+700+900 ,
ЛД5о = 700 --+-= 490 мг/кг
Согласно классификации, ГОСТ 12.1.007-76 «Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности (с изменениями N 1,2), 2007 г.» новый дезинфицирующий ЧАС относится к 3 классу опасности -умеренно опасные [8].
При изучении раздражающего действия, нового дезинфицирующего ЧАС на конъюнктиву глаз кроликов, раствор закапывали в левый конъюнктивальный мешок. Правый глаз опытных животных служил контролем. После внесения препарата на минуту прижимали слезоносовой канал у внутреннего угла глаза. Влияние препарата на конъюнктиву выражалось гиперемией и инъецированием сосудов, которые исчезали через 12 часов.
Изъязвлений конъюнктивы, рубцовых изменений век, помутнений роговицы не регистрировали.
Для изучения местного
раздражающего действия, нового дезинфицирующего ЧАС на кожу, использовали 8 морских свинок. Раствор наносили на кожу с одной стороны позвоночного столба из расчета 10 мг/см2, контролем служила противоположная сторона, где была нанесена дистиллированная вода. В первые сутки наблюдений отмечались признаки гиперемии и шелушения кожи без образования глубоких трещин и струпьев. Эти признаки исчезали спустя неделю после начала эксперимента.
Таким образом, новый
дезинфицирующий ЧАС не обладает
раздражающим действием на кожу и конъюнктиву.
Аллергенные свойства нового дезинфицирующего ЧАС. проводили на 24 морских свинках, которых разделили на две
опытные и одну контрольную группы по 8 животных в каждой группе. После инкубации подсчитывали количество лейкоцитов и рассчитывали показатель РСЛЛ по формуле:
Группа животных: Количество лейкоцитов при различных дозах сенсибилизации, (х109/л)
1 опытная группа 10,0±0,04
2 опытная группа 9,46±0,06
Контрольная группа 10,20±0,04
РСЛЛ_ Лконтроль-Лопыт
Лконтроль*100% '
где: Л контроль - количество лейкоцитов у животных контрольной группы, (х109/л); Л опыт - количество лейкоцитов у животных опытной группы, (х109/л). Результаты исследования аллергенных свойств нового дезинфицирующего ЧАС представлены в таблице 3.
Таблица 3 - Результаты исследования аллергенных свойств нового дезинфицирующего ЧАС в опыте на морских свинках
Из данных таблицы следует, что показатель РСЛЛ у животных 1 опытной группы сенсибилизированных новым дезинфицирующим ЧАС в дозе 50 мкг на животное, составил 1,96 %, а у 2 опытной группы, сенсибилизированной препаратом в дозе 200 мкг на животного, - 7,25 %. Поэтому РСЛЛ расценивали как отрицательную, так как показатель лизиса лейкоцитов у обеих групп подопытных животных был менее 9 %.
Анализ проведённых исследований показал, что новый дезинфицирующий ЧАС, при внутрикожной сенсибилизации морских свинок, не обладает аллергенными свойствами.
Заключение. В ходе проведения опытов по определению острой токсичности нового ЧАС были получены следующие результаты: для белых мышей показатель острой токсичности составил 400 мг/кг, для белых крыс - 700 мг/кг.
Средне смертельная доза для белых мышей составила 490 мг/кг, для белых крыс 1100 мг/кг.
Аллергенные свойства в первой опытной группе - 10 х109/л, во второй -9,46х109/л, у контрольной группы показатель равен 10,2х109/л. Показатель лизиса лейкоцитов составил менее 9 %,
поэтому РСЛЛ отрицательная. Новое дезинфицирующее четвертичное
аммониевое соединение не обладает аллергенными свойствами.
При оценке местно-раздражающего действия было установлено, что новый дезинфицирующий ЧАС не обладает раздражающим действием на кожу и конъюнктиву.
Исходя из вышеизложенного, новый дезинфицирующий ЧАС относится к третьему классу опасности - умеренно опасные вещества.
ЛИТЕРАТУРА
1. Белова, В.И. Основные направления исследований в разработке дезинфицирующих средств / В.И. Белова, Ю.П. Волков // Научные основы дезинфекции и стерилизации. - М., 2017. -С. 13-18.
2. Буянов, В.В. Разработка композиционных составов на основе пероксосольватов и оценка их эффективности в отношении возбудителей особо опасных инфекций / В.В. Буянов, В.П. Никольская, В.Н. Андрус [и др.] // Вестн. РАМН. - 2007. - № 12. - С. 34-37.
3. Вашков, В.И. Антимикробные средства и методы дезинфекции при инфекционных заболеваниях /
В.И. Вашков. - М.: Изд. «Медицина», 2019. - С. 21 -46.
4. Вашков, В.И. Бактерицидные свойства некоторых свободных четвертичных аммониевых соединений / В.И. Вашков, И.П. Комков, Е.Е. Одинец // Тр. Центрального НИДИ: Проблемы дезинфекции и стерилизации. Москва. -2018. - С. 116.
5. ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда (ССБТ). Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности (с Изменениями N 1, 2). - М.: Изд. «Стандартинформ», 2007. - 7 с.
6. Медведь, Л.И. Пестициды и проблема здравоохранения / Л.И. Медведь, Ю.С. Каган, Е.И. Спыну // Журнал Всесоюзного химического общества. -
1968. - Т. 8. - №3. - С. 263-271.
7. Методические указания по доклиническому изучению общетоксического действия лекарственных препаратов. - М., 1985. - 83 с.
8. Методические указания (МУ 1.1.578-96) «Требования к постановке экспериментальных исследований по обоснованию предельно допустимых концентраций промышленных химических аллергенов в воздухе рабочей зоны и атмосферы (утв. Госкомсанэпиднадзором РФ 21.10.1996 г.)
9. Хабриев, Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - М.: Изд. «КолосС», 2009. - С. 6589.
ИЗУЧЕНИЕ ФАРМАКО-ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЧЕТВЕРТИЧНОГО АММОНИЕВОГО СОЕДИНЕНИЯ, ВХОДЯЩЕГО В СОСТАВ ДЕЗИНФИЦИРУЮЩЕГО
СРЕДСТВА
Нехайчик Ф.М.
Резюме
Изучение токсикологических свойств нового дезинфицирующего четвертичного аммониевого соединения проводилось на лабораторных животных вивария ФГБОУ ВО Казанская ГАВМ. Токсикологические свойства оценивали на белых мышах, белых крысах, морских свинках и кроликах путем формирования экспериментальной и контрольной групп. Экспериментально определили величину острой пероральной токсичности, показатель средней смертельной дозы, определили аллергенные свойства и оценили местно-раздражающее действие. В ходе испытаний было установлено, что новое четвертичное аммониевое соединение относится к третьему классу опасности.
STUDY OF PHARMACO-TOXICOLOGICAL PROPERTIES OF A QUATERNARY AMMONIUM COMPOUND THAT IS PART OF A DISINFECTANT
Nekhaychik F.M.
Summary
The study of the toxicological properties of a new disinfecting quaternary ammonium compound was carried out on laboratory animals of the vivarium of the Kazan State Medical University. Toxicological properties were evaluated on white mice, white rats, guinea pigs and rabbits by forming experimental and control groups. The value of acute oral toxicity, the indicator of the average lethal dose was experimentally determined, allergic properties were determined and the local irritant effect was evaluated. During the tests, it was found that the new quaternary ammonium compound belongs to the third hazard class.
