CC BY
47
данного показателя при стронгилятозе у КРС и мониезиозе и стронгилятозе у овец.
THE BIOCHEMICAL PROPERTIES OF THE SALIVA OF CATTLE AND SMALL RUMINANTS IN HELMINTHIASIS, AND DEWORMING
Mahamat M.K.
Summary
The article describes the biochemical parameters of saliva in helminthiasis in ruminants. An increase in the value of this indicator and moniezioze strongilyatoze.
УДК 619:615.3:579.873.21
ИЗУЧЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ШТАММОВ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА К НОВЫМ ТУБЕРКУЛОСТАТИКАМ
Мингалеев Д.Н. - к.в.н., доцент; *Честнова Р.В. - зав. лабораторией; Хамзин Р.А. -д.в.н., профессор; Садыков Н.И. - к.в.н., доцент ФГБОУ ВПО КГАВМ, тел. (843) 2382579
*ГУЗ «Республиканский клинический противотуберкулезный диспансер»
Ключевые слова: туберкулез, штаммы микобактерий,
лекарственная устойчивость, новые туберкулостатики.
Key words: the tuberculosis, cultures myсоbacterium, medicinal firm, new tuberkulostatics.
Туберкулез по-прежнему остается серьезной проблемой государства и общества. Каждый день в России в среднем появляется 124 случая этой болезни, от которой 14 человек умирают. В России отмечается высокий уровень распространенности туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью как среди новых случаев (9%), так и при повторном лечении (24,4%). [2]
Эпидемическая и эпизоотическая ситуации по туберкулезу продолжают оставаться напряженными. Туберкулез крупного рогатого скота занимает особое место среди других инфекционных болезней животных, его своеобразие в том, что болезнь долгие годы может протекать без проявления клинических признаков. В неблагополучных стадах достаточно остаться не выявленным одному больному животному, чтобы на долгие годы продлить проведение оздоровительных мероприятий. [3]
Одной из причин увеличения заболеваемости туберкулезом и смертности от него является увеличение числа больных с тяжелыми формами заболевания, особенно вызванными лекарственно-устойчивыми микобактериями, что затрудняет проведение эффективного лечения, способствует развитию необратимых хронических форм и обусловливает высокую летальность. Распространение туберкулеза с множественной лекарственной устойчивостью и неконтролируемый характер инфекций создают дополнительные проблемы при лечении с помощью традиционных противотуберкулезных препаратов.
Для лечения больных множественной лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза требуется примерно 2 года, для лечения больных, зараженных чувствительными к основным препаратам штаммами микобактерий туберкулеза, - 6-8 месяцев.
Низкая эффективность используемых в настоящее время противотуберкулезных препаратов объясняется длительным (более полувека) их использованием, постоянным ростом количества больных с множественной лекарственной устойчивостью, вызванным появлением лекарственно-резистентных штаммов микобактерий. Большинство лекарственных препаратов действует неселективно, поэтому возникает необходимость ввода избыточного количества лекарственного вещества, что приводит к возникновению серьезных побочных проявлений в виде нарушения функций печени, почек, гемопоэза и т.д.
Новые противотуберкулезные препараты в последние 40 лет не появлялись. Поэтому поиск, создание новых фармацевтических препаратов, обладающих антимикобактериальными свойствами и позволяющих повысить эффект химиотерапии, остается весьма актуальной задачей. [1]
В связи с вышеизложенным, в Казанском институте органической и физической химии им. А.Е. Арбузова синтезированы новые противотуберкулёзные препараты - «Линарол» и «Линарол -Ф1», которые могут быть использованы в качестве противотуберкулезных средств в ветеринарной и медицинской практике для профилактики и лечения туберкулеза.
Эффективность любого противотуберкулезного препарата оценивают не только по наличию бактерицидной и бактериостатической активности, но и по способности предотвращать развитие лекарственной устойчивости. Поэтому целью наших исследований было выяснение влияния новых синтезированных препаратов на лекарственную чувствительность различных штаммов микобактерий.
Материал и методика исследований. Чувствительность микобактерий к исследуемым препаратам проводили в сравнительном аспекте по отношению с уже известными и используемыми противотуберкулезными препаратами: изониазидом, рифампицином,
офлоксацином, стрептомицином, этамбутолом, этионамидом и их различными сочетаниями.
Лекарственную устойчивость микобактерий к вышеперечисленным препаратам определяли методом абсолютных концентраций на среде Левенштейна - Йенсена без содержания в ней крахмала согласно приказу МЗ РФ № 109 от 21.03.2003.
Линарол разводили согласно прописи изониазида. В питательную среду непосредственно перед свертыванием добавляли рабочие разведения данного вещества. Расчеты производили с учетом процента активности препарата.
Для определения эффективности действия препаратов использовали бактериальные суспензии:
• культуры микобактерий туберкулеза штамма Н37Яу;
• культуры микобактерий туберкулеза штамма M. bovis 14;
• культуры микобактерий туберкулеза обладающего устойчивостью к большинству противотуберкулезных препаратов;
• культуры микобактерий выделенного от больного человека;
• культуры микобактерий выделенного от инфицированного
крупного рогатого скота.
Выросшие на плотной питательной среде культуры микобактерий снимали лопаточкой и помещали в толстостенную стеклянную пробирку. Тщательно растирали стеклянной палочкой и постепенно добавляли стерильный физиологический раствор. Полученную суспензию переносили в стерильную пробирку. Культуры стандартизировали по оптическому стандарту мутности №5. Разводили в 10 раз стерильным физиологическим раствором. После приготовления суспензий всех взятых приготовленных образцов вносили стерильной пипеткой по 1 мл суспензии микобактерий, соответствующих стандарту №5. Получили суспензию с содержанием клеток соответствующих 5x10 микробных тел. Посев на среды производился из этих суспензий. Вносили по 0,2 мл суспензии, в верхнюю 1/3 косяка, во все пробирки, которые культивировали при 37 градусах. Инкубирование проводилось до 4 недель при обязательном еженедельном просмотре.
Результаты определения лекарственной устойчивости учитывали на 21 день после посева. При скудном росте в контрольной пробирке все пробирки с препаратами оставляли еще на 1-2 недели в термостате до получения выраженного роста в контроле.
Культуру считали чувствительной к данной концентрации препарата, если в пробирке со средой, содержащей препарат, выросло менее 20 колоний при обильном росте в контрольной пробирке. Культуру считали устойчивой к той концентрации препарата, которая содержится в данной пробирке, если в пробирке со средой выросло более 20 колоний при обильном росте в контроле.
Результаты исследований. Результаты определения лекарственной устойчивости микобактерий к испытуемым препаратам отражены в таблице 1.
1. Определение лекарственной устойчивости микобактерий туберкулеза к
новым туберкулостатикам
Концентрации препаратов Рост колоний микобактерий туберкулеза
Н37 Яу М. Ьоуіб 14 Устойчивый штамм Штамм, выделенный от человека Штамм, выделенн ый от КРС
Изониазид 1 мкг\мл -* - +* + -
Изониазид 10 мкг\мл - - + - -
Рифампицин 40 мкг/мл - - + + -
Рифампицин 80 мкг\мл - - + + -
Изониазид (10 мкг\мл) + рифампицин (40 мкг/мл) - - + - -
Офлоксацин 10 мкг\мл - - + - -
Стрептомицин 10 мкг\мл - - + + +
Стрептомицин 25 мкг\мл - - + + -
Этамбутол 2 мкг\мл - - + - -
Этамбутол 5 мкг\мл - - + - -
Этионамид 30 мкг\мл - - + - -
Этионамид 50 мкг\мл - - + - -
Линарол 10 мкг\мл - - - - -
Линарол-Ф1 10 мкг\мл - - - - -
Контроль (среда, не содержащая препаратов) + + + + +
*Примечание:«-» - отсутствие роста (менее 20 колоний); «+» - наличие роста микобактерий (более 20 колоний).
В результате проведенных исследований установлено, что новые противотуберкулезные препараты - «Линарол» и «Линарол-Ф1» проявили
выраженное бактериостатическое действие ко всем исследованным штаммам микобактерий туберкулеза.
Концентрации изониазида, рифампицина, офлоксацина,
стрептомицина, этамбутола, этионамида и их различные сочетания вели себя согласно литературным данным: штамм H37Rv и M. bovis 14 был чувствителен ко всем концентрациям препаратов при положительном контроле, устойчивый штамм микобактерий туберкулеза проявил свою устойчивость ко всем препаратам.
Штамм, выделенный от больного человека, оказался чувствительным к изониазиду в дозе 10 мкг/мл среды, сочетанию изониазида и рифампицина, а также к офлоксацину, этамбутолу и этионамиду в различных концентрациях.
Штамм, выделенный от инфицированного крупного рогатого скота, оказался не чувствительным лишь к стрептомицину в концентрации 10 мгк\мл среды. К изониазиду в концентрации 1 и 10 мкг\мл среды, а также к остальным исследуемым препаратам в различных концентрациях этот штамм оказался чувствительным.
В контроле, к 21 дню исследования, отмечался обильный рост микобактерий туберкулеза всех исследуемых штаммов.
Выводы и предложения. Таким образом, проведенное исследование показало, что новые туберкулостатики «Линарол» и «Линарол-Ф1» обладают выраженным бактериостатическим действием на культуральные и лекарственно устойчивые штаммы микобактерий.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Визель А.А. Лечение туберкулеза органов
дыхания / А.А. Визель // Казань: КГМУ МЗ РФ - ГП ВЭО «Саламат», 1998. - 121 с. 2. Гулюкин М.И. Оздоровительные мероприятия при туберкулезе крупного рогатого скота / М.И. Гулюкин, А.Х. Найманов, В. А. Ведерников, Н.Г. Толстенко, Н.К. Букова, Н.А. и др. // Журнал «Ветеринария», 2012. - №1. - С. 3 - 8. 3. Овдиенко Н.П. Туберкулез как международная и национальная медико-ветеринарная проблема в современных условиях / Н.П. Овдиенко, Н.Г. Толстенко, Н.А. Яременко, П.П. Рахманин, Н.В. Мельник и др. // Научно-производственный журнал «Ветеринарный врач», 2009. - №2. - С. 14 - 17.
ИЗУЧЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ РАЗЛИЧНЫХ ШТАММОВ МИКОБАКТЕРИЙ ТУБЕРКУЛЕЗА К НОВЫМ ТУБЕРКУЛОСТАТИКАМ
Мингалеев Д.Н., Честнова Р.В., Хамзин Р.А., Садыков Н.И.
Резюме
Изучена чувствительность различных штаммов микобактерий туберкулеза к новым туберкулостатикам «Линаролу» и «Линаролу-Ф1». В результате проведенных исследований установили, что новые
туберкулостатики обладают выраженным бактериостатическим действием в отношении лекарственно устойчивых штаммов микобактерий туберкулеза.
THE STUDY OF SENSITIVITY DIFFERENT CULTURES
MYCOBAKTERIUM TUBERCULOSIS OF NEW TUBERKULOSTATICS
Mingaleev D.N., Chestnova R.V., Hamzin R.A., Sadykov N.I.
Summary
Studied sensitivity different cultures myсоbacterium tuberculosis to new tuberkulostatics "Linarolu" and "Linarolu-F1". As a result called on studies have installed that new tuberkulostatics possess expressed bacteriostatic action in respect of medicinal firm cultures mycobaсterium tuberculosis.
УДК: 619:616.981.45
ИЗГОТОВЛЕНИЕ ПАСТЕРЕЛЛЕЗНОГО АНТИГЕНА
Миннебаев Ш.Г. - к.в.н., доцент; Юсупова Р.Х. - к.в.н., ассистент
ФГБОУ ВПО КГАВМ
Ключевые слова: микроорганизм, пастереллез, антиген.
Key words: microorganisms, pastеurellоsis, antigen
Диагноз на пастереллез ставят на основании комплекса эпизоотологических, клинических, патологоанатомических данных, результатов бактериологического исследования и заражения лабораторных животных. Каждый из указанных методов диагностики не исключает друг друга и имеет ценность лишь в совокупности с другими методами, в особенности с результатами бактериологических исследований. Только анализ данных всех названных методов диагностики дает основание для правильной постановки диагноза на пастереллез (В.И. Геведзе, С.Г. Соколов, 1987).
Но все же традиционно применяемые методы диагностики по выделению Р. multocida из назальных смывов не всегда позволяют выявить субклинически больных бактерионосителей.
В связи с этим предпринимаются попытки разработки высокочувствительных методов серологической диагностики пастереллеза кроликов (N. M. Patton, 1988).
Цель исследования - изготовление пастереллезного антигена из культуры Р. multocida для ИФА.
