Научная статья на тему 'ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА МИКРОБНЫХ КОНСОРЦИУМОВ'

ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА МИКРОБНЫХ КОНСОРЦИУМОВ Текст научной статьи по специальности «Промышленные биотехнологии»

CC BY
56
11
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Ключевые слова
ПРОПИОНОВЫЕ БАКТЕРИИ / КЕФИРНАЯ ЗАКВАСКА / МОЛОЧНОКИСЛЫЕ МИКРООРГАНИЗМЫ / КОНСОРЦИУМ

Аннотация научной статьи по промышленным биотехнологиям, автор научной работы — Бояринева Ирина Валерьевна, Хамагаева Ирина Сергеевна, Стёпочкина Варвара Дмитриевна, Бобченко Виктория Ивановна

Приведён анaлиз научных данных об использовании пробиотических культур, возможности совместного культивирования штамма Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 и микроорганизмов кефирной закваски. Научно-исследовательским способом обоснована необходимость использования пропионовокислых бактерий с целью повышения пробиотических свойств кисломолочных продуктов. Выбор штамма Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 в качестве пробиотической культуры основан на таких аспектах, как выживаемость в агрессивной среде, адгезивные свойства, ценные производственно-технологические свойства. Главной особенностью пропионовокислых бактерий является комплексный биосинтез метабиотиков, а именно витамина В12, антимутагенов, антиоксидантов. Это усиливает их ценные биохимические и пробиотические свойства. Наиболее значимой, с точки зрения технологичности, «молочной» пропионовой бактерией является штамм Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85, который может быть использован в работе самостоятельно и в сочетании с молочнокислыми бактериями. Исследования проводились на основе штамма пропионовокислых бактерий Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 и кефирной грибковой закваски. Установлено, что между пропионовокислыми бактериями и микрофлорой кефирной закваски в ходе совместного культивирования отсутствуют явления антагoнизма и взаимной конкуренции. В статье приведены данные о биoтехнологических и прoбиотических свойствах консорциумов (комбинированных заквасок) с различным сочетанием пропионовокислых и молочнокислых микроорганизмов. Контролем служила кефирная закваска. Во всех тестовых образцах количество микробных клеток Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 и молочнокислых бактерий к концу процесса ферментации достигает 109к.о.е./см3, что наглядно свидетельствует о высокой плотности микробной популяции и сбалансированном росте заквасочных микроорганизмов в консорциуме. Определен наилучший баланс пропионовокислых бактерий и грибковой закваски 1:1 с учетом биотехнологических и биохимических свойств, в частности синтеза витамина В12. Полученный консорциум может быть рекомендован для дальнейшего использования в биотехнологии ферментированных функциональных молочных продуктов

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по промышленным биотехнологиям , автор научной работы — Бояринева Ирина Валерьевна, Хамагаева Ирина Сергеевна, Стёпочкина Варвара Дмитриевна, Бобченко Виктория Ивановна

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

STUDY OF THE BIOCHEMICAL POTENTIAL OF MICROBIAL CONSORTIA

The analysis of scientific data on the use of probiotic cultures, the possibility of joint cultivation of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain and kefir starter microorganisms is presented. The necessity of using propionic acid bacteria in order to increase the probiotic properties of fermented milk products is substantiated. The selection of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain as a probiotic culture is based on such aspects as survival in an aggressive environment, adhesive properties, valuable production and technological properties. The main feature of propionic acid bacteria is the complex biosynthesis of metabiotics, namely vitamin B12, antimutagens, antioxidants. This enhances their valuable biochemical and probiotic properties. The most significant, from the point of view of manufacturability, the "milk" propionic bacterium is the Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain, which can be used in work independently and in combination with lactic acid bacteria. It has been established that there are no antagonism and mutual competition phenomena between propionic acid bacteria and the microflora of kefir starter culture during joint cultivation. The article presents data on biotechnological and probiotic properties of consortia (combined starter cultures) with a different combination of propionic acid and lactic acid microorganisms. Kefir starter culture served as a control. In all test samples, the number of microbial cells of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 and lactic acid bacteria reaches 109k.o.e./cm3, which clearly indicates a high density of the microbial population and a balanced growth of starter microorganisms in the consortium. The best balance of propionic acid bacteria and fungal starter culture 1:1 has been determined, taking into account biotechnological and biochemical properties, in particular, the synthesis of vitamin B12. The resulting consortium can be recommended for further use in the biotechnology of fermented functional dairy products.

Текст научной работы на тему «ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА МИКРОБНЫХ КОНСОРЦИУМОВ»

Ползуновский вестник. 2023. № 1. С. 7-14. Polzunovskiy vеstnik. 2023;1: 7-14.

РАЗДЕЛ 1. ТЕХНОЛОГИЯ ПРОДУКТОВ ПИТАНИЯ

Научная статья

4.3.3 - Пищевые системы (технические науки) УДК 637.1

doi: 10.25712/А8Т11.2072-8921.2023.01.001

DTQXGM

ИЗУЧЕНИЕ БИОХИМИЧЕСКОГО ПОТЕНЦИАЛА МИКРОБНЫХ КОНСОРЦИУМОВ

Ирина Валерьевна Бояринева 1, Ирина Сергеевна Хамагаева 2, Варвара Дмитриевна Стёпочкина 3, Виктория Ивановна Бобченко 4

1 3 4 Дальневосточный федеральный университет, Владивосток, Россия

1 boyarineva.iv@dvfu.ru, https://orcid.org/0000-0003-4791-884X

3 vdkislitsyna@gmail.com, https://orcid.org/0000-0002-4124-6002

4 bobchenko.vi@dvfu.ru

2 Восточно-Сибирский государственный технологический университет технологий и управления, г. Улан-Удэ, Россия, ikhamagaeva@mail.ru, https://orcid.org/0000-0003-4294-5857

Аннотация. Приведён анaлиз научных данных об использовании пробиотических культур, возможности совместного культивирования штамма Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 и микроорганизмов кефирной закваски. Научно-исследовательским способом обоснована необходимость использования пропионовокислых бактерий с целью повышения пробиотических свойств кисломолочных продуктов. Выбор штамма Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 в качестве пробиотической культуры основан на таких аспектах, как выживаемость в агрессивной среде, адгезивные свойства, ценные производственно-технологические свойства. Гпавной особенностью пропионовокислых бактерий является комплексный биосинтез мета-биотиков, а именно витамина В12, антимутагенов, антиоксидантов. Это усиливает их ценные биохимические и пробиотические свойства. Наиболее значимой, с точки зрения технологичности, «молочной» пропионовой бактерией является штамм Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85, который может быть использован в работе самостоятельно и в сочетании с молочнокислыми бактериями. Исследования проводились на основе штамма пропионовокислых бактерий Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 и кефирной грибковой закваски. Установлено, что между пропионовокислыми бактериями и микрофлорой кефирной закваски в ходе совместного культивирования отсутствуют явления антагюнизма и взаимной конкуренции. В статье приведены данные о биотехнологических и пробиотических свойствах консорциумов (комбинированных заквасок) с различным сочетанием пропионовокислых и молочнокислых микроорганизмов. Контролем служила кефирная закваска. Во всех тестовых образцах количество микробных клеток Pюpюnibactehumfreudenreichii Sh-85 и молочнокислых бактерий к концу процесса ферментации достигает 109к.о.е./см3, что наглядно свидетельствует о высокой плотности микробной популяции и сбалансированном росте заквасочных микроорганизмов в консорциуме. Определен наилучший баланс пропионовокислых бактерий и грибковой закваски 1:1 с учетом биотехнологических и биохимических свойств, в частности синтеза витамина В12. Полученный консорциум может быть рекомендован для дальнейшего использования в биотехнологии ферментированных функциональных молочных продуктов.

Ключевые слова: пропионовые бактерии, кефирная закваска, молочнокислые микроорганизмы, консорциум.

Для цитирования: Изучение биохимического потенциала микробных консорциумов / И. В. Бояринева [и др.]. // Ползуновский вестник. 2023. № 1. С. 7-14. doi: 10.25712ZASTU.2072-8921.2023.01.001. БРМ https://elibrary.ru/DTQXGM.

© Бояринева И. В., Хамагаева И. С., Стёпочкина В. Д., Бобченко В. И., 2023

Original article

STUDY OF THE BIOCHEMICAL POTENTIAL OF MICROBIAL CONSORTIA

Irina V. Boyarineva 1, Irina S. Khamagaeva 2, Varvara D. Stepochkina 3,

Victoria I. Bobchenko 4

1, 3, 4 Far Eastern Federal University, Vladivostok, Russia

1 boyarineva.iv@dvfu.ru, https://orcid.org/0000-0003-4791-884X

3 vdkislitsyna@gmail.com, https://orcid.org/0000-0002-4124-6002

4 bobchenko.vi@dvfu.ru

2 East Siberian State Technological University of Technology and Management, Ulan-Ude, Russia, ikhamagaeva@mail.ru, https://orcid.org/0000-0003-4294-5857

Abstract. The analysis of scientific data on the use of probiotic cultures, the possibility of joint cultivation of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain and kefir starter microorganisms is presented. The necessity of using propionic acid bacteria in order to increase the probiotic properties of fermented milk products is substantiated. The selection of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain as a probiotic culture is based on such aspects as survival in an aggressive environment, adhesive properties, valuable production and technological properties. The main feature of propionic acid bacteria is the complex biosynthesis of metabiotics, namely vitamin B12, antimutagens, antioxidants. This enhances their valuable biochemical and probiotic properties. The most significant, from the point of view of manufacturability, the "milk" propionic bacterium is the Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain, which can be used in work independently and in combination with lactic acid bacteria. It has been established that there are no antagonism and mutual competition phenomena between propionic acid bacteria and the microflora of kefir starter culture during joint cultivation. The article presents data on biotechnological and probiotic properties of consortia (combined starter cultures) with a different combination of propionic acid and lactic acid microorganisms. Kefir starter culture served as a control. In all test samples, the number of microbial cells of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 and lactic acid bacteria reaches 109k.o.e./cm3, which clearly indicates a high density of the microbial population and a balanced growth of starter microorganisms in the consortium. The best balance of propionic acid bacteria and fungal starter culture 1:1 has been determined, taking into account biotechnological and biochemical properties, in particular, the synthesis of vitamin B12. The resulting consortium can be recommended for further use in the biotechnology of fermented functional dairy products.

Keywords: propionic bacteria, kefir starter culture, lactic acid microorganisms, consortium.

For citation: Boyarineva, I.V., Khamagaeva, I.S., Stepochkina, V.D. & Bоbchenko, V.I. (2023). Study of the biochemical potential of microbial consortia. Polzunovskiy vestnik, (1), 7-14. (In Russ.). doi: 10.25712/ASTU.2072-8921.2023.01.001.EDN: https://elibrary.ru/DTQXGM.

ВВЕДЕНИЕ

Для сохранения и вoсстановления микробной экологии человека используется широкий набор микроэкологических средств (пробиотики, симбиотики, комбиотики, пре-биотики, синбиотики, виробиотики, включая фагобиотики, а также генно-инженерные пробиотики и метабиотики). Наиболее популярными до настоящего времени являются разнообразные по составу пробиотики, пребио-тики, синбиотики и метабиотики [1, 2].

Пробиотические средства поступают на современный рынок в форме лекарственных

биопрепаратов, биологически активных добавок, пищевых продуктов на основе живых организмов. Потребление кисломолочных биопродуктов, содержащих микробные клетки и метаболиты бифидобактерий и лактобацилл, улучшает здоровье и психику человека за счет плавной коррекции нарушенной микробной экологии и целенаправленной оптимизации активности зон мозга, отвечающих за познавательные и интеллектуальные способности человека [3, 2]. Молочные продукты, такие как йогурт, сыр, мороженое и другие, считаются лучшим средством доставки пробио-

тических штаммов в желудочно-кишечный тракт человека [4]. Недавние научные исследования подтвердили важную роль пробиоти-ков как части здорового питания для человека и животных. Пробиотики могут стать способом обеспечения безопасного, экономически эффективного и «естественного» подхода, который создает барьер против микробной инфекции [5].

Усиление функциональной и иммуномо-дулирующей направленности кисломолочных биопродуктов за счет комплексного использования при их выработке определенных пробио-тических штаммов заквасочных и других микроорганизмов, микробных консорциумов с заданной биологической активностью и оптимизированными ценными технологическими характеристиками, пищевых ингредиентов является весьма перспективным и актуальным инновационным направлением [2, 6, 7].

Ценными считаются микробные штаммы и консорциумы, длительно сохраняющие жизнедеятельность и биохимическую активность, зависящие не только от внешних производственных факторов (состав питательной среды, температурный режим и др.), но и от соотношения и баланса биохимически активных микробных клеток в популяциях микроорганизмов, определяющих жизнеспособность и выживаемость культур, их практическое значение в современных производственных условиях [8].

Каждый производственный пробиотиче-ский штамм молочнокислых и пропионово-кислых бактерий характеризуется уникальностью по количественному и видовому признаку, разнообразием технологических свойств и биохимических процессов, а в микробном консорциуме может находиться в выраженных антагонистических и симбиотических отношениях.

Антагонистическая активность бактериальной клетки определена наличием метабо-литных биологически активных веществ преимущественно белковой природы, биологический синтез которых запрограммирован генетически и может быть полностью реализован при условии соблюдения технологических параметров культивирования [9, 10, 11]. Одними из существенных производственных факторов, влияющих на чувствительность синтеза и продукцию биологически активных веществ, являются компонентный состав питательной среды, температурные режимы культивирования, определенные условия аэрации [12, 13, 14].

При ярко выраженном антагонизме наблюдается торможение микробного роста, т. е. у культур-антагонистов преобладает антимикробное влияние, и они не способны

взаимно сочетаться с культурами другого таксономического вида. А симбиотический микробный баланс и характер отношений приводит к синтезу метаболитных комплексов и взаимному усилению роста [15]. Поэтому необходимо на первом этапе конструирования комбинированных заквасок определить характер взаимоотношений между тест-культурами.

Нормальная здоровая микрофлора макроорганизма представляет собой сложную многокомпонентную и разнообразную систему, образующую важное биологическое звено в обеспечении и укреплении здоровья, нормализации и коррекции микробиома хозяина. Это определяет необходимую целесообразность конструирования микробных консорциумов, включающих пробиотические бактерии с разными механизмами биологической активности, в том числе, метаболитного синтеза.

Кефир на российском рынке является единственным кисломолочным продуктом, который производится в промышленных масштабах на кефирной грибковой закваске, представляющей спонтанное биологическое сообщество микроорганизмов разных по совместимости и антагонистической активности таксономических групп. Это микробное сообщество активно проявляет свойства самовозникновения и самоорганизации, при этом является хорошим объектом для создания пробиотическо-го поликомпонентного биопрепарата.

Учитывая выраженный пробиотический потенциал и метаболитную активность пропио-новокислых бактерий, мы предположили создание биохимически активного микробного консорциума с высокими пробиотическими свойствами на основе синергизма микроорганизмов кефирной закваски и пропионовых бактерий.

Цель работы: изучить совместимость микрофлоры закваски кефирных грибков и Ргорюп1Ьас(ег1итКеидепгеюЫ1 Б^85 и подобрать их оптимальное соотношение.

МЕТОДЫ

Экспериментальные исследования были проведены на кафедре «Технология молочных продуктов. Товароведение и экспертиза товаров», в проблемно-исследовательской лаборатории ВСГУТУ. Объектами исследования служили штамм пропионовокислых бактерий Propionibacteriumfreudenreichii Б^85, полученный из Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов ФГУП ГосНИИ «Генетика», активированный биотехническим методом, разработанным в ВосточноСибирском государственном университете

технологии и управления; закваска кефирная грибковая ОСТ 10-02-02-487.

Количественный учет клеток пропионовокислых бактерий в биомассе изучали и определяли методом предельных разведений на питательной среде ГМС или ГМК-1 по ТУ 10-02-02-789-192-95 «Гидролизатно-молочная среда для количественного учета бифидобак-терий и пропионовокислые бактерии». Идентификацию тест-культур проводили при совместном культивировании методом ингиби-рования пропионовокислых бактерий антибиотиком тетрациклином. Количество клеток молочнокислых бактерий находили методом предельных разведений по ГОСТ 10444.11-89.

Для количественного определения летучих жирных кислот применяли метод газожидкостной хроматографии, исследование проводили на чешском хроматографе с пламенно-ионизационным детектором. Данный метод основан на получении летучих жирных кислот из продукта перегонкой, при дальнейшем их концентрировании и превращении в метиловые эфиры (этерификация была проведена в присутствии олеума в термостате при температуре 30-40 °С в течение 2 часов).

Витамин В12 в биомассе определяли спектрофотометрическим методом, который заключается в отделении, промывании клеток пропионовокислых бактерий, и переводе ко-баламинов в водный раствор путем гидролиза. Далее полученный раствор-гидролизат экспонировали на свету для превращения кобаламинов в оксикобаламины и определяли показатель оптической плотности при фиксированной длине волны 530 нм. Оптическая плотность раствора-гидролизата соответствует содержанию кобаламина.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Первостепенной задачей являются исследования, направленные на изучение биотехнологических и пробиотических свойств штамма Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 [16].

В ходе проведения экспериментов было установлено, что штамм Propionibacterium-freudenreichii Sh-85 имеет выраженную биохимическую активность, что наглядно подтверждается непродолжительной ферментацией.

Наблюдается высокая антимутагенная активность штамма Propionibacterium-freudenreichii Sh-85 в отношении мутагенеза, эффективно индуцируемого азидом натрия, которая коррелирует с активностью биосинтеза антиокислительных ферментов каталазы и супероксидизмутазы.

Высокая адгезивность исследуемого штамма доказывает его способность прикрепляться к эпителиальным клеткам стенок кишечника человека, что повышает его выживаемость в агрессивных и неблагоприятных условиях желудочно-кишечного тракта. Штамм Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 проявляет хорошую адаптацию к низким значениям активной кислотности и повышенному содержанию желчных кислот, определена высокая устойчивость штамма к соли.

Доказано, что штамм Propionibacterium-freudenreichii Sh-85 имеет высокий экзополи-сахаридный потенциал и синтезирует достаточно большое количество гемсодержащего витамина В12, что в перспективе позволит обогатить состав молочных биопродуктов и усилить их функциональное экзометаболит-ное действие [17].

В дальнейшем по методу Романовича были испытаны на антагонизм культуры пропионовокислых бактерий и закваски кефирных грибков.

Важно отметить, что в течение непродолжительного времени (2-3 часов) в растворе не наблюдалось изменения окраски метиленового синего. Постепенное обесцвечивание в растворе метиленового синего одновременно с тест-контролем, то есть без пропионовых культур, наблюдали по истечении 4-4,5 часов. Полное обесцвечивание в растворе через 8-10 часов доказывает отсутствие микробного антагонизма между тест-культурами кефирной закваски и пропионово-кислыми бактериями. Экспериментально установлено, что культуры могут быть применены для создания пробиотического консорциума.

Следующим этапом исследования предстояло изучить влияние производственного штамма пропионовокислых бактерий на развитие и активность микрофлоры кефирной грибковой закваски (таблица 1).

Из таблицы 1 видно, что производственный штамм Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 активно стимулируют рост микроорганизмов закваски кефирных грибков. Возможно, это связано с тем, что микрофлора кефирных грибков использует для своего развития определенные метабиотические факторы роста, в частности витамины группы В, продуцируемые пропионовокислыми бактериями. Выраженный активный рост пропионовокис-лых бактерий в микробном консорциуме кефирных грибков наглядно свидетельствует о симбиотических взаимоотношениях тест-культур.

Таблица 1 - Рост штамма Propionibacteriumlreudenreichii Sh-85 в растворах культуральной жидкости Table 1 - Growth of Propionibacterium freudenreichii Sh-85 strain in culture fluid solutions

Тест-культуры и их сочетания Логарифм клеток Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 в различных разведениях, к.о.е./см3

1:4 1:8 1:16

Кефирная закваска 108 109 109

Штамм Ргор'юпЬа^ег'ит-freudenreiоhii Б^вБ и закваска кефирных грибков в комбинации 1:1 107 109 109

Штамм Ргор'юп'Ьа^ег'ит-freudenreiоhii Б^вБ и кефирная закваска в комбинации 1:0,8 109 109 109

Штамм Рюр'юПЬа^епит-freudenreiоhii Б^вБ и кефирная закваска в комбинации 1:0,5 108 109 109

+ + + + - активный микробный рост + + + - нормальный микробный рост

Для управления биохимическими и микробиологическими процессами культивирования и получения заквасочных культур с высокими биотехнологическими свойствами целесообразно комплексно учитывать не только воздействие отдельных видов заквасочных культур друг на друга, но и их оптимальное комбинирование [17].

При сравнительном изучении органолеп-тических, биохимических и микробиологиче-

ских свойств определённых комбинаций заквасочных культур наблюдали различные эффекты метаболической и пробиотической активности микробных консорциумов (таблица 2). В качестве тест-контроля использовали закваску кефирных грибов. Культивирование консорциумов проводили при температуре 30 °С, оптимальной для роста культуры РгорюпЬао(епитКеидепгеюЬИ БЬ-вБ.

Контролируемый показатель Свойства консорциума при различном сочетании тест-культур кефирной грибковой закваски и Prоpionibaоteriumfrеudenreiоhii Б^вБ

Варианты консорциума

1:1 1:0,8 1:0,5 Контроль

1 2 3 4 5

Однородная, Однородная, Жидкая, Однород-

Внешний вид и консистенция нежная, сметанооб-разная в меру вязкая однородная ная, с нарушенным сгустком

Кисломолоч- Вкус и запах Выраженный Кисломо-

ный, чистые, кисло- кисломолоч- лочный,

Вкус и запах освежающий, молочные ный, излишне освежаю-

мягкий «кефирный», слегка острый щий, острый

Цвет Молочно-белый

Продолжительность ферментации, ч 5,5-6,0 6,5-7,0 7,0-7,5 10-12

Титруемая кислотность, °Т 72±2 76±2 78±2 85±2

Активная кислотность, рН 4,83±0,02 4,75±0,02 4,75±0,02 4,35±0,02

Содержание витамина В12, мкг/л 57,64 34,7 26,3 0,40

Таблица 2 - Свойства консорциумов при различном соотношении культур Table 2 - Properties of consortia with different crop ratios

Продолжение таблицы 2 / Table 2 continued

1 2 3 4 5

Количество летучих жирных кислот, мл 0,1 н №ОН 1,0 0,8 0,6 0,5

Наличие диацетила + + + +

Наличие ацетоина + + + +

Содержание углекислого газа, мм 10 8 6 5

Количество Ргор'юпЬэ^е-пит^еидепге'юЬИ Б^вБ, к.о.е./см3 5х109 2х109 1х109 -

Количество молочнокислых микроорганизмов, к.о.е./см3 109 109 109 109

Согласно данным таблицы 2, микробный консорциум с сочетанием тест-культур 1:1 отличается однородной, нежной, в меру плотной консистенцией, мягким освежающим кисломолочным вкусом, имеет максимальное количество клеток пробиотических культур и витамина В12. Необходимо отметить непродолжительное время ферментации (5,5-6) часов данного варианта консорциума, что свидетельствует о проявлении высокой биохимической активности.

Варианты консорциумов, в которых преобладает кефирная грибная закваска, имеют более высокий уровень кислотности и продолжительное время ферментации. Необходимо отметить, что уменьшение количественного содержания пропионовокислых бактерий в микробных консорциумах обеспечивает минимальный синтез витамина В12.

В дальнейшем определяли в консорциуме количество клеток культур пропионовокислых и молочнокислых при хранении (рисунок 1).

Рисунок 1 - Изменение титра жизнеспособных клеток культур при хранении Figure 1 - Titer change of viable culture cells during storage

По полученным результатам сделан вывод, что в течение 30 суток хранения при температуре (6±2) °С количество жизнеспособных микробных клеток пробиотических культур находится на высоком уровне: 109к.о.е./см3 -пропионовокислых бактерий, 108к.о.е./см3 - молочнокислых микроорганизмов. Было установлено, что в консорциуме за этот период кислотность повышается незначительно, прирост со-

ставляет 10°Т. Наблюдается уменьшение количества клеток на 35-е сутки до 108к.о.е./см3. Из представленных данных отслеживается, что комбинированная закваска обладает длительным сроком хранения, показан высокий уровень накопления микробных клеток пробиоти-ческих культур, по всей видимости, благодаря синтезу молочнокислыми и пропионовокислы-ми бактериями антимикробных веществ.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

ОБСУЖДЕНИЕ

Анализ результатов проведенных исследований свидетельствует об активном росте культуры Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 в микробном консорциуме кефирной закваски и метаболитическом потенциале микроорганизмов, что доказывает наличие симбиотической связи между тест-микроорганизмами.

Динамика накопления клеток пробиоти-ческих культур к концу ферментации во всех тестируемых консорциумах достигает значительного уровня и составляет 109к.о. е./см3, что свидетельствует о достаточно высокой плотности популяции и оптимальном сбалансированном росте тест-культур в пробиотиче-ском консорциуме.

Таким образом, наибольшее количество жизнеспособных клеток пробиотических культур 109к.о.е./см3 и синтезируемого кобалами-на 57,64 мкг/л установили в образце с соотношением культур пропионовокислых бактерий и закваски кефирных грибков 1:1. Данный консорциум имеет хорошие органолептиче-ские характеристики и гарантированный срок хранения 30 суток.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Совокупный экспериментальный анализ пробиотического штамма Propionibacterium-freudenreichii Sh-85 наглядно свидетельствует о его ценных биологических и технологических свойствах, что позволит использовать его при производстве ферментируемых молочных биопродуктов.

При изучении совместимости микроорганизмов экспериментально доказано отсутствие явлений антагонизма и взаимной конкуренции между штаммом пропионовокислых бактерий Propionibacteriumfreudenreichii Sh-85 и микрофлорой кефирной закваски.

На основании изученных биотехнологических свойств и метаболитической активности тестируемых культур подобрано наиболее оптимальное сочетание заквасочных культур в микробном консорциуме, позволяющее в полной мере раскрыть их технологический и пробиотический потенциал.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Шендеров Б.А., Синица А.В., Захарченко М.М. Метабиотики: вчера, сегодня, завтра. Санкт-Петербург : Крафт, 2017. 79 с.

2. Олескин А. В., Шендеров Б. А. Пробиотики, пси-хобиотики и метабиотики: проблемы и перспективы // Физическая и реабилитационная медицина, медицинская реабилитация. 2020. 2(3). с. 233-243.

3. D0l:https://doi.org/10.36425/rehab25811. URL: https://cyberleninka.ru/article/n/probiotiki-psihobiotiki-i-metabiotiki-problemy-i-perspektivy (дата обращения: 07.12.2022).

4. O'Mahony S.M., Clarke G., Borre Y.E., et al. (2014). Serotonin, tryptophan metabolism and the brain-gut-microbiome axis. Behav Brain Res, (277), Р. 32-48. doi: 10.1016/j.bbr.2014.07.027.

5. Butel M.-J. Probiotics, gut microbiota and health, Medecineet // Maladies Infectieuses. 2014. №1 (44), Р. 1-8. DOI: 10.1016/j.medmal.2013.10.002.

6. Parvez S., Malik K.A., Kang S. Ah and Kim H.-Y. Probiotics and their fermented food products are beneficial for health // The Society for Applied Microbiology, Journal of Applied Microbiology. № 100(6). 2006. Р. 1171-1185. doi: 10.1111/ j.1365-2672.2006.02963.X.

7. Тихомирова Н.А. Современное состояние и перспективы развития продуктов функционального назначения // Молочная промышленность. 2009. № 7. С. 5-8.

8. Решетник Е.И. Влияние компонентного состава на пищевую и биологическую ценность комбинированного продукта / Е.И. Решетник, Е.А. Уточкина // Вестник ВСГУТУ. 2013. № 2(41). С. 63-67. - EDN PZDKZB.

9. Харитонов Д.В., Харитонова И.В., Просеков А.Ю. Разработка концепции создания синбиотиков и синбио-тических молочных продуктов // Техника и технология пищевых производств. 2013. № 4. С. 91-94.

10. Патент № 2704857 Российская Федерация, Штамм лактобактерий Lactobacillusplantarum - ВКПМ - В-13052 продуцент молочной кислоты и антибиотических веществ и компонент закваски для производства пробио-тических продуктов / Цугкиев Б.Г., Рамонова Э.В., Соловьева Ю.В., Хозиев А.М., Кабисов Р.Г., Цугкиева И.Б., Петрукович А.Г., Ханикаев Д.Н., Абаева А.А.; Заявка 2018139600 от 08.11.2018. Опубл. 31.10.2019. Бюл. № 31.

11. Блинкова Л.П. Бактериоцины: критерии, классификация, свойства, методы выявления // Микробиология. 2003. № 3. С. 109-113.

12. Hong H.A., Due H.le, Cutting S.M. The use bacterial spore formers as probiotics // FEMS Microbiol. Rev. 2005. Vol. 4. P. 813-835.D0I: 10.1016/j.femsre.2004.12.001.

13. Stein T. Bacillus subtilis antibiotics: structures, syntheses and cell death // Mol. Microbiol. Ibid. 2005. Vol. 4. P. 845-857.doi: 10.1111/j.1365-2958.2005.04587.x.

14. Abdel-Mawgoud A.M., Aboulwafa M.M., Has-souna N.A. Optimization of surfactin production by Bacillus subtilis isolate BS5 // Appl. Biochem. Biotechnol. 2008. № 3. P. 305-325.

15. Jamil B., Hasan F., Hameed A. Isolation of Bacillus subtilis MH-4 from soil and its potential of polypeptidic antibiotic production // Pak. J. Pharm. Sci. 2007. Vol. 1. P. 26-31.

16. Muhammad S.A., Ahmad S., Hameed A. Antibiotic production by thermophilic Bacillus specie SAT 4 // Pak. J. Pharm. Sci. 2009. Vol. 3. P. 339-345.

17. Boiarineva I.V., Zambalova N.A., Khamagaeva I.S. Technological aspects of innovative milk-based bioproducts. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science // Earth Environ. Sci. 1052 (2022) 012069. on 24.08.2022 at 05:02. Р. 1-9.doi:10.1088/1755-1315/1052/1 /012069.

18. Бояринева И.В. Теоретические и практические аспекты создания инновационных биопродуктов для функционального питания с использованием консорциума молочнокислых и пропионовокислых бактерий; авто-реф. дис. ... д-ра техн. наук: 05.18.04. Улан-Удэ. 2020. 36 с.

Информация об авторах

И. В. Бояринева - д.т.н, профессор базовой кафедры «Биоэкономики и продовольственной безопасности» Инновационного технологического центра Передовой инженерной школы «Института

биотехнологий, биоинженерии и пищевых систем», Дальневосточный федеральный университет.

И. С. Хамагаева - д.т.н, профессор, кафедра «Технология продуктов животного происхождения», Восточно-Сибирский государственный университет технологий и управления.

В. Д. Степочкина - аспирант базовой кафедры «Биоэкономики и продовольственной безопасности» Инновационного технологического центра Передовой инженерной школы «Института биотехно-логий, биоинженерии и пищевых систем», Дальневосточный федеральный университет.

В. И. Бобченко - кандидат технических наук, доцент базовой кафедры «Биоэкономики и продовольственной безопасности» Инновационного технологического центра Передовой инженерной школы «Института биотехнологий, биоинженерии и пищевых систем», Дальневосточный федеральный университет.

REFERENCES

1. Shenderov, B.A., Sinitsa, A.V. & Zakharchen-ko, M.M. (2017). Metabiotics: yesterday, today, tomorrow. St. Petersburg: Kraft. (In Russ.).

2. Oleskin, A.V. & Shenderov, B.A. (2020). Probiot-ics, prebiotics and metabiotics: problems and prospects // Physical and rehabilitation medicine, medical rehabilitation. 2(3). 233-243. DOI:http://doi.org/10.36425/rehab25811. Retrieved from https://cyberleninka.ru/article/n/probiotiki-psihobiotiki-i-metabiotiki-problemy-i-perspektivy. (In Russ.).

3. O'Mahony, S.M., Clarke, G., Borre, Y.E. & et. al. (2014). Serotonin, tryptophan metabolism and the brain-gut-microbiome axis. Behav Brain Res. 32-48. doi: 10.1016/j.bbr.2014.07.027.

4. Butel, M.-J. (2014). Probiotics, gut microbiota and health, Medecineet ' Maladies Infectieuses, 1(44). 1-8. DOI: 10.1016/j.medmal.2013.10.002.

5. Parvez, S., Malik, K.A., Kang, S. Ah and Kim H.-Y. (2006). Probiotics and their fermented food products are beneficial for health. The Society for Applied Microbiology, Journal of Applied Microbiology. 100(б). 1171-1185. doi: 10.1111/ j.1365-2672.2006.02963.x.

6. Tikhomirova, N.A. (2009). The current state and prospects of development of functional products. Dairy industry. (7). 5-8. (In Russ.).

7. Reshetnik, E.I. & Utochkina, E.A. (2013). Influence of the component composition on the nutritional and biological value of the combined product. Bulletin of VSGUTU. 2(41). 63-67. EDN PZDKZB.(In Russ.).

8. Kharitonov, D.V. Kharitonova, I.V. & Prosekov, A.Yu. (2013). Development of the concept of creating synbiotics and synbiotic dairy products. Technique and technology of food production. (4). 91-94. (In Russ.).

9. Tsugkiev, B.G., Ramonova, E.V., Soloviev, Yu.V., Khoziev, A.M., Kabisov, R.G., Tsugkieva, I.B., Petruko-vich, A.G., Khanikaev, D.N. & Abaeva, A.A. (2019). Lactobacillus plantarum lactobacillus strain - VKPM - B-13052 producer of lactic acid and antibiotic substances and a component of starter culture for the production of probiotic products. Pat. 2704857. Russian Federation. Publ. of 310kt2019. (In Russ.).

10. Blinkova, L.P. (2003). Bacteriocins : criteria, classification, properties, methods of detection. Microbiology. (3). 109-113. (In Russ.).

11. Hong, H.A., Due, H.le. & Cutting, S.M. (2005). The use bacterial spore formers as probiotics. FEMS Microbiol. Rev. (4). 813-835.DOI: 10.1016/j.femsre.2004.12.001.

12. Stein, T. (2005). Bacillus subtilis antibiotics: structures, syntheses and cell death. Mol. Microbiol. Ibid. (4). 845857. doi: 10.1111/j.1365-2958.2005.04587.x.

13. Abdel-Mawgoud, A.M., Aboulwafa, M.M. & Has-souna, N.A. (2008). Optimization of surfactin production by Bacillus subtilis isolate BS5. Appl. Biochem. Biotechnol. (3). 305-325.doi: 10.1007/s12010-008-8155-x.

14. Jamil, B., Hasan, F. & Hameed, A. (2007). Isolation of Bacillus subtilis MH-4 from soil and its potential of polypeptidic antibiotic production. Pak. J. Pharm. Sci. (1). 26-31.

15. Muhammad, S.A., Ahmad, S. & Hameed, A. (2009). Antibiotic production by thermophilic Bacillus specie SAT 4. Pak. J. Pharm. Sci. (3). 339-345.

16. Boiarineva, I.V., Zambalova, N.A. & Khama-gaeva, I.S. (2022). Technological aspects of innovative milk-based bioproducts. IOP Conference Series: Earth and Environmental Science. Earth Environ. Sci. 1052 012069. on 24.08.2022 at 05:02. 1-9. doi:10.1088/1755-1315/1052/1/012069.

17. Boyarineva, I.V. (2020). Theoretical and practical aspects of creating innovative bioproducts for functional nutrition using a consortium of lactic acid and propionic acid bacteria. Doctor 's thesis. Ulan-Ude. (In Russ.).

Information about the authors

I. V. Boyarineva - Doctorof Technical Sciences, professor of the «Basic Department of Bioeconomics and Food Security» of the Innovative Technological Center of the Advanced Engineering School of the «Institute of Biotechnology, Bioengineering and Food Systems», Federal State Autonomous educational institution of higher education «Far Eastern Federal University».

I.S. Khamagaeva - Doctor of Technical Sciences, Professor, Department of "Technology of animal products", East Siberian State Technological University of Technology and Management.

V.D. Stepochkina - post-graduate student of the «Basic Department of Bioeconomics and Food Securi-ty» of the «Innovative Technological Center of the Advanced Engineering School of the «Institute of Biotechnology, Bioengineering and Food Systems», Federal State Autonomous educational institution of higher education «Far Eastern Federal University».

V.I. Bobchenko - Candidate of Technical Sciences, Associate Professor of the «Basic Department of Bioeconomics and Food Security» of the «Innovative Technological Center of the Advanced Engineering School of the Institute of Biotechnology, Bioengineering and Food Systems», Federal State Autonomous educational institution of higher education «Far Eastern Federal University».

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов. The authors declare that there is no conflict of interest.

Статья поступила в редакцию 20.01.2023; одобрена после рецензирования 13.03.2023; принята к публикации 21.03.2023.

The article was received by the editorial board on 20 Jan 2023; approved after editing on 13 Mar 2023; accepted for publication on 21 Mar 2023.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.