CC BY
127
Холт, Н. Крига, П. Снита, Дж. Стейли, С. Уилльямса // Москва «Мир» 1997, том 1, с 46-47 4. В.А. Исаков Хеликобактериоз // М.: ИД Медпрактика-М, 2003, 412 с. 5. Лабутина Н.В. Этиологическая роль Helicobacter spp. в желудочно-кишечной патологии собак и кошек // Н.В. Лабутина, А.В. Чернов // Ветеринарный доктор № 3 2010, с 2-3 6. Fox J.G. Local immune response in Helicobacter pylori infected cats and identification of H. pylori in saliva, gastric fluid and feces. / Fox J.G., Perkins S., Yan L., et al // Immunology, 1996, 88:400.
7.http://www.sciencenews.org/view/generic/id/74653/title/Suspect_bacterium_ may_trigger_Parkinson%E2%80%99s.
БАКТЕРИИ РОДА HELICOBACTER У ЖИВОТНЫХ
Нургалиев Ф.М., Нургалиев Р.М., Госманов Р.Г., Сергеев М.А.
Резюме
В статье дано представление о микробиологии возбудителя хеликобактериоза и представлены результаты серологического мониторинга на наличие антител к возбудителю H. pylori среди крупного рогатого скота, свиней и собак в условиях хозяйств.
BACTERIA OF THE GENUS HELICOBACTER ANIMALS
Nurgaliev F.M, Nyrgaliev R.M., Gosmanov R.G., Sergeev M.A.
Summary
The article gives an idea of microbiology helicobacteriosis pathogen and the results of serological monitoring for the presence of antibodies to H. pylori in cattle, pigs and dogs in households.
УДК 615.076:615.33
ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ДОКСИЦИКЛИНА И ФЛОРФЕНИКОЛА
Панфилова М.Н. - к.в.н., с.н.с., Жукова Н.Н. - к.х.н., с.н.с., Сазонов А.А. - к.х.н., Казакова Е.С. - к.б.н., с.н.с., Касьян И.А. - н.с., *Портенко С.А. - к.б.н., н.с.
ЗАО «Нита-Фарм», г. Саратов *ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб», г. Саратов
Ключевые слова: антибактериальные препараты (АБП),
минимальная подавляющая концентрация (МПК), доксициклин, флорфеникол, тест-штаммы микроорганизмов.
Key words: antibacterial drugs (ABD), the minimum inhibitory concentration (MIC), doxycycline, Horfem^^, test strains of microorganisms.
Известно, что с ростом количества антибактериальных препаратов одновременно увеличивается количество возбудителей, устойчивых к антибиотикам. Наиболее приемлемый и целесообразный метод, повышающий эффективность химиотерапии при бактериальных инфекциях и позволяющий замедлить развитие резистентности у микроорганизмов, — рациональное применение сочетаний антимикробных средств.
При использовании антибиотиков и других химиотерапевтических лекарственных средств на практике важно определять чувствительность к ним клинически значимых микроорганизмов и устанавливать возможность синергетического действия для комплексных антибактериальных препаратов.
Материалы и методы. Целью проведенных исследований было установление минимальной подавляющей концентрации (МПК) инъекционных антибиотических препаратов разных классов, произведенных ЗАО «Нита-Фарм» и применяемых для лечения заболеваний ЖКТ и дыхательной системы сельскохозяйственных животных.
Были изучены три препарата, представляющие 2 основных класса антибиотиков - тетрациклины и амфиниколы:
• «Доксилокс», содержащий 200 мг/мл доксициклина (класс
тетрациклинов) в качестве действующего вещества;
• «Флорокс», содержащий 300 мг/мл флорфеникола (класс
амфиниколов) в качестве действующего вещества;
• «Флоридокс» - комплексный препарат, содержащий 50 мг/мл
доксициклина и 100 мг/мл флорфеникола.
Испытания антимикробной активности препаратов изучали in vitro на 10 штаммах микроорганизмов: Escherichia coli ATCC 25922, Escherichia coli О 151 «Крым» 60888, Klebsiella pneumoniae 8172, Proteus mirabilis Сиднеев 46, Salmonella typhimurium 20, Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853, Streptococcus pyogenes 163, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Bacillus cereus 687, Clostridium novyi 198.
Работу проводили в ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб» Роспотребнадзора г. Саратова общепринятыми методами [1-3]. Для определения
минимальной подавляющей концентрации использовали метод серийных разведений в жидкой питательной среде.
Для приготовления суспензий тест-штаммов использовали чистые суточные культуры микроорганизмов, выросшие на плотных питательных средах. Отбирали несколько однотипных, четко изолированных колоний с неселективных плотных питательных сред. Петлей переносили
незначительное количество материала с верхушек колоний в пробирку со стерильным питательным бульоном, доводя плотность суспензии точно до 0,5 по стандарту Мак-Фарланда, что соответствует концентрации 1,5 х 10 КОЕ/мл.
Для приготовления рабочих разведений препаратов из основных растворов использовали стерильную дистиллированную воду.
Для инокуляции использовали суспензию микробных клеток, эквивалентную 0,5 по стандарту Мак-Фарланда, разведенную в 100 раз питательным бульоном - 106 КОЕ/мл.
Результаты учитывали визуально в проходящем свете по определению наличия роста культур тест-штаммов в опытных и контрольных пробирках. МПК определяли по наименьшей концентрации АБП, которая подавляла видимый рост микроорганизма.
Результаты исследований и обсуждение. Сравнительное изучение методом серийных разведений в жидкой питательной среде
антимикробной активности монопрепаратов «Доксилокс», «Флорокс» и комплексного препарата «Флоридокс» к 10 штаммам микроорганизмов позволили установить минимальные подавляющие концентрации действующих веществ, входящих в состав исследованных препаратов. Полученные результаты определения МПК представлены в таблице. Значения концентраций действующих веществ в препарате «Флоридокс» обозначены в виде дроби, где числитель - концентрация доксициклина, а знаменатель - концентрация флорфеникола.
В результате изучения чувствительности тест-штаммов
микроорганизмов к препарату «Доксилокс» была установлена достаточно высокая эффективность этого препарата как в отношении
грамотрицательной, так и в отношении грамположительной микрофлоры.
Наибольшую чувствительность среди грамотрицательных штаммов показали штаммы Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae и Salmonella, typhimurium, для которых величина МПК составила 6,25 мкг/мл, 6,25 мкг/мл и 12,5 мкг/мл соответственно.
Все исследованные представители грамположительной микрофлоры проявили большую чувствительность к действию препарата «Доксилокс» по сравнению с грамотрицательными штаммами. Так, были получены значения МПК для Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus и Clostridium novyi 0,195 мкг/мл, 0,39 мкг/мл, 0,049 мкг/мл и 0,097 мкг/мл соответственно.
Изучение чувствительности тест-штаммов микроорганизмов к препарату «Флорокс» показало несколько меньшую эффективность этого препарата по сравнению с «Доксилоксом» как в отношении грамотрицательной, так и в отношении грамположительной микрофлоры. Наибольшую устойчивость к препарату «Флорокс» показал штамм Pseudomonas aeruginosa, МПК - 100,0 мкг/мл.
Показатели МПК исследуемых антибактериальных препаратов к тест-
штаммам
№ п/п Род, вид микроорганизма Номер штамма Показатели МПК (мкг/мл)
Доксициклин («Доксилокс») Флорфеникол («Флорокс») Доксициклин/ Флорфеникол («Флоридокс»)
1 Escherichia coli АТСС 25922 6,25 6,25 3,125/6,25
2 Escherichia coli 0 151 «Крым» 60888 50,0 12,5 25,5/50,0
3 Klebsiella pneumoniae 8172 6,25 6,25 3,125/6,25
4 Proteus mirabilis Сиднеев 46 50,0 25,0 12,5/25,0
5 Salmonella typhimurium 20 12,5 25,0 12,5/25,0
6 Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853 50,0 100,0 50,0/100,0
7 Streptococcus pyogenes 163 0,195 1,56 0,097/0,195
8 Staphylococcus aureus АТСС 25923 0,39 6,25 0,39/0,78
9 Bacillus cereus 687 0,049 6,25 0,097/0,195
10 Clostridium novyi 198 0,097 12,5 0,012/0,024
Наиболее чувствительным к монопрепарату на основе флорфеникола показал себя штамм Streptococcus pyogenes. Рост культуры отмечался только в концентрации препарата 0,78 мкг/мл и ниже. МПК Флорокса для Streptococcus pyogenes составила 1,5 мкг/мл.
Действие комплексного препарата «Флоридокс» в отношении таких тест-штаммов грамотрицательных микроорганизмов как Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae более эффективно по сравнению с монопрепаратом «Доксилокс», что подтверждается снижением МПК доксициклина в 2 раза. Еще более высокая эффективность препарата «Флоридокс» отмечалась в отношении Proteus mirabilis (снижение МПК доксициклина в 4 раза). Полученные данные показывают потенцирование доксициклина в комплексном препарате.
При сравнении показателей МПК монопрепарата «Флорокс» и комплексного препарата «Флоридокс» в отношении грамположительной микрофлоры установили, что величина МПК флорфеникола в комплексном препарате для штамма Staphylococcus aureus была ниже в восемь раз (0,78 мкг/мл) МПК флорфеникола в монопрепарате, что свидетельствует о потенцировании флорфеникола в комплексном препарате.
В процессе исследования выявлено синергетическое действие досициклина и флорфеникола в комплексном препарате «Флоридокс» в
отношении двух штаммов - Streptococcus pyogenes и Clostridium novyi. Значения МПК комплексного препарата было ниже значений МПК монопрепаратов «Доксилокс» и «Флорокс» и составило 0,097/0,195 и 0,012/0,024 мкг/мл соответственно.
Выводы. 1. Установлено, что грамположительные микроорганизмы Streptococcus pyogenes, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, Clostridium novyi отличаются более высокой чувствительностью к препаратам «Доксилокс», «Флорокс» и «Флоридокс» по сравнению с изученными грамотрицательными штаммами. 2. Отмечено потенцирование
доксициклина в отношении тест-штаммов Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae и Proteus mirabilis и потенцирование флорфеникола к штамму Staphylococcus aureus в комплексном препарате «Флоридокс». 3. Выявлено синергетическое действие досициклина и флорфеникола в комплексном препарате «Флоридокс» в отношении штаммов Streptococcus pyogenes и Clostridium novyi.
ЛИТЕРАТУРА: 1. Меньшиков В.В. Методики клинических
лабораторных исследований. З.М.: Лабора, 2009. Т. 3, С. 879.
2. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. МУК 4.2.1890-04. М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2004, С. 53. 3. Методы контроля бактериологических питательных сред. МУК 4.2.2316-08.М.: Федеральный центр гигиены и эпидемиологии Роспотребнадзора; 2008, С. 51.
ИЗУЧЕНИЕ АНТИМИКРОБНОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ НА ОСНОВЕ ДОКСИЦИКЛИНА И ФЛОРФЕНИКОЛА
Панфилова М.Н., Жукова Н.Н., Сазонов А.А.,
Казакова Е.С., Касьян И.А., Портенко С.А.
Резюме
В статье представлены результаты сравнительного изучения антимикробной активности и синергетического действия препаратов на основе доксициклина и флорфеникола по отношению к 10 штаммам микроорганизмов.
ANTIMICROBIAL PREPARATION ACTIVITY INVESTIGATION ON THE BASIS OF DOXYCYCLENE AND PHLORPHENICOLE
Panfilova M.N., Zhukova N.N., Sazonov A.A., Kazakova Ye.S., Kasyan I.A.,
Portenko S.A.
Summary
In article results of comparative studying of antimicrobic activity and synergistic actions of preparations on the basis of doxycycline and florfenicole in relation to 10 strains microorganisms are presented.
