Изучение активности ферментов антиоксидантной системы в клетках лекарственно-устойчивых штаммов лейкоза p-388 мышей Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»



МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ» 59

Э.В. Носова12, Т.Н. Липунова2, В.Н. Чарушин12 ФТОРСОДЕРЖАЩИЕ ПРОИЗВОДНЫЕ ХИНАЗОЛИНА КАК ПЕРСПЕКТИВНЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ АГЕНТЫ

1Уральский федеральный университет им. первого Президента России Б.Н. Ельцина, Екатеринбург, Россия; 2Институт органического синтеза им. И.Я. Постовского УрО РАН, Екатеринбург, Россия

Введение. В последние годы в ряду производных хина-золина выявлено значительное количество соединений, обладающих противоопухолевой активностью. Наиболее известные препараты ряда ариламинохиназолинов - гефи-тиниб, эрлотиниб, лапатиниб, вандетаниб - прочно вошли в медицинскую практику и успешно применяются при лечении ряда опухолей.

Цель исследования — синтез новых фторсодержащих производных 4-ариламинохиназолинов, исследование противоопухолевой активности полициклических хиназо-линов.

Материалы и методы. Активность бензимидазо [1,2-a] пиразоло- [1,5-с] хиназолинов изучена в Национальном институте рака (г. Бетесда, штат Мэриленд, США) на культурах 60 линий раковых клеток 9 групп (лейкемия, рак легких, рак толстого кишечника, рак CNS, меланома, рак яичников, рак почек, рак предстательной железы, рак молочной железы), а также в Исследовательском технологическом институте Sumsung (Корея) на 3 линиях раковых клеток: А549 (рак легких), SKOV-3 (рак яичников) и SK-MEL-2 (меланома) при 4 различных концентрациях (0,01, 0,1, 1 и 10 мг/мл).

Результаты. Показано, что увеличение количества атомов фтора в бензольных фрагментах, а также замещение атома фтора в положении 6 на остаток 1-метилпиперазина приводят к возрастанию противоопухолевой активности. Введение в бензимидазольный фрагмент атомов брома способствует снижению активности. Этиловый эфир 6-(4-метил-1-пиперазинил) — 5,7-дифторбензимидазо [1,2-a] пиразоло [1,5-с] хиназолин-3-карбоновой кислоты при концентрации 1 мг/мл превосходит адриамицин в отношении 2 линий клеток. Взаимодействием 2-метилтио-6,7,8-трифторхиназолин-4 (3Н) — она, полученного на основе тетрафторбензоилхлорида и S-метилизотиомочевины, с хлорокисью фосфора и последующим замещением атома хлора ариламином синтезированы новые производные 4-ариламинохиназолина. Структура соединений подтверждена спектральными методами.

Заключение. Найден удобный синтетический подход к новым производным 4-ариламинохиназолина — аналогов противоопухолевых агентов гефитиниб и лапатиниб. Исследована противоопухолевая активность фторсодержа-щих бензимидазо [1,2-a] пиразоло- [1,5-с] хиназолинов, показана взаимосвязь структуры и биологической активности.

О.А. Омельчук, Л.Н. Лысенкова, Л.Г. Деженкова,

A.Е. Щекотихин

ПОИСК ПРОИЗВОДНЫХ ОЛИГОМИЦИНА, СЕЛЕКТИВНО ИНГИБИРУЮЩИХ ОПУХОЛЕВЫЙ РОСТ

ФГБНУ«НИИНА им. Г.Ф. Гаузе», Москва, Россия

Введение. Макролидный антибиотик олигомицин А ингибирует F0F1АТФ-синтазу, связываясь с F0 субъединицей, блокирует транспорт протонов и нарушает энергетический обмен. Олигомицин А действует на ряд прокариотов и эукариотические клетки, в том числе и на опухолевые клетки млекопитающих.

Цель исследования — поиск новых производных оли-гомицина А, способных селективно ингибировать рост опухолевых клеток.

Материалы и методы. Для получения новых полусинтетических производных олигомицина А разработаны 2 новых способа модификации 33-ОН-группы его боковой цепи. Этерификацией олигомицина НСООН получено 33-О-формильное производное. Ацилированием олигомицина метзизхлоридом с последующим окислением 33-О-мезилолигомицина А по методу Корнблюма синтезирован 33-дегидроолигомицин А. Сравнительное исследование активности олигомицина и его новых производных выполнено на клетках миелоидного лейкоза человека К562, а также первичных фибробластов человека (МТТ-тест).

Результаты. Олигомицин-33-формиат и 33-дегидроо-лигомицин А более активны в отношении клеток К-562 по сравнению с олигомицином А. Цитотоксичность новых производных в отношении неопухолевых клеток (первичных фибробластов человека) снижена в 2 раза по сравнению с исходным антибиотиком.

Заключение. Найденные методы модификации 33-ОН-группы олигомицина А повышают селективность ингиби-рования роста опухолевых клеток.

Работа выполнена при финансовой поддержке РНФ (№ 15-15-00141).

B. С. Павлов12, Т.Р. Криворотова3, А.А. Балакина2, Т.А. Раевская2, С.А. Гончарова2, А.А. Терентьев1,2 ИЗУЧЕНИЕ АКТИВНОСТИ ФЕРМЕНТОВ АНТИОКСИДАНТНОЙ СИСТЕМЫ В КЛЕТКАХ ЛЕКАРСТВЕННО-УСТОЙЧИВЫХ ШТАММОВ ЛЕЙКОЗА P-388 МЫШЕЙ

1МГУ им. М.В. Ломоносова, Москва, Россия;

2ФГБУНИнститут проблем химической физики РАН,

Черноголовка, Московская область, Россия;

ФГБОУ ВО «Ивановский государственный университет»,

Иваново, Россия

Введение. Одной из проблем в терапии онкологических заболеваний является развитие лекарственной устойчивости (ЛУ) и множественной лекарственной устойчивости (МЛУ) опухолей. Механизмы возникновения ЛУ, а также подходы к преодолению ЛУ могут быть связаны с изменением регуляции антиоксидантной системы. Изучение функционирования антиоксидантной системы (АОС) опухолевых клеток и ее роли в механизмах развития резистентности к противоопухолевым агентам — важная

Спецвыпуск/ том 16 / 2017

РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ

60 МАТЕРИАЛЫ КОНФЕРЕНЦИИ «ОТЕЧЕСТВЕННЫЕ ПРОТИВООПУХОЛЕВЫЕ ПРЕПАРАТЫ»

актуальная задача для создания новых лекарственных пре- что расширяет терапевтические возможности данного ви-паратов. да консервативной противоопухолевой терапии. Цель исследования — изучить активность супероксид- Цель исследования — изучить общетоксические свой-дисмутазы и каталазы в клетках ЛУ штаммов лейкоза Р-388 ства Бактериосенса при его однократном и многократном мышей в норме и при действии противоопухолевых соеди- введении мелким грызунам и кроликам. нений. Материалы и методы. При изучении Бактериосенса Материалы и методы. Активность ферментов изучали оценивали гемолитический потенциал препарата (in vitro) на ряде ЛУ штаммов лейкоза Р-388 мышей: Р-388/руб, и его влияние на свертываемость нестабилизированной Р-388/цф, P-388/cPt, резистентных к рубомицину, цикло- крови крыс (ex vivo). «Острую» токсичность исследовали фосфану и цисплатину соответственно, при этом штамм на мышах-гибридах F1 (CBA х C57Bl/6j) и неинбредных Р-388/руб обладает генотипом и фенотипом МЛУ. Актив- крысах, самцах и самках, при однократном внутривенном ность супероксиддисмутазы определяли по ингибирова- и внутрибрюшинном введении препарата, а «хроническую» нию фотохимического восстановления нитросинего тетра- токсичность — на неинбредных крысах (самцах и самках) золия. Метод определения активности каталазы основан и кроликах породы «Советская шиншилла» (самцах) на образовании формальдегида из метилового спирта при многократном (в течение 14 дней) внутривенном вве-в присутствии пероксида водорода с последующим окра- дении препарата. Оценивали гибель животных от токсич-шиванием продукта реакции красителем пурпалд. ности, сроки гибели, клиническую картину интоксикации, Результаты. Показано, что все исследованные штаммы а также влияние Бактериосенса на состояние внутренних существенно не различались по активности супероксид- органов и систем организма с использованием физиологи-дисмутазы и каталазы. Введение животным с ЛУ штамма- ческих, клинико-лабораторных и патологоанатомических ми препаратов, к которым резистентны опухолевые клет- методов исследования, включая гистологические методы. ки, не вызывало значительных изменений в активности Результаты. Препарат Бактериосенс в концентрации ферментов АОС. Введение животным со штаммом 0,005 мг/мл не приводил к изменению времени свертыва-P-388/cPt терапевтической дозы доксорубицина индуци- ния крови животных и не оказывал гемолитического дей-ровало снижение активности каталазы и супероксиддис- ствия. При увеличении концентрации препарата в 10 и 100 мутазы по сравнению с контролем. Аналогичный результат раз наблюдали (в виде тенденции) увеличение времени получен на штамме Р-388/руб при введении терапевтиче- свертывания крови крыс в 1,3 и 1,6 раза соответственно. ских доз циклофосфана. Бактериосенс в концентрации 0,5 мг/мл обладал умерен-Заключение. Использование на ЛУ штаммах соедине- ной гемолитической активностью in vitro. Однократное ний, к которым выработана устойчивость, не оказывало («острая» токсичность) внутривенное и внутрибрюшинное значительного влияния на АОС клеток. Применение сое- введение Бактериосенса мышам и крысам (самцам и сам-динений, не являющихся индукторами ЛУ, сопровожда- кам) в дозах от 1,3 до 50,0 мг/кг (превышали расчетную лось снижением активности ферментов АОС. Выявленное эквитерапевтическую дозу для человека (ЭТДчеловек) в 6,5— снижение активности ферментов при действии противоо- 250 раз) удовлетворительно перенесено животными: гибель пухолевых препаратов может приводить к накоплению от токсичности и внешние клинические проявления ин-активных форм кислорода в опухолевых клетках и окисли- токсикации отсутствовали. Многократное («хроническая» тельному стрессу. токсичность) применение Бактериосенса в дозах от 18,2 до 72,8 мг/кг (у крыс) и от 8,3 до 33 мг/кг (у кроликов), пре-А.А. Панкратов1, Т.Н. Андреева1, Е.А. Плотникова1, вышающих ЭТД в 91—364 раза и в 41—165 раз соответ-Н.Б. Морозова1, М.С. Воронцова1, И.Б. Меркулова2, ственно, не приводило к гибели животных. Препарат Т.В. Абрамова2, Н.Н. Старкова3, В.Н. Калиниченко3, во всех дозах не оказывал выраженного токсического дей-Р.И. Якубовская1 ствия на кровь, печень, органы ЖКТ, ЦНС, коагуляцион-ДОКЛИНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ОБЩЕТОКСИЧЕСКИХ ный гемостаз, углеводный и липидный обмен у животных. СВОЙСТВ НОВОГО ОТЕЧЕСТВЕННОГО Только у 20 % крыс наблюдались полностью обратимые ФОТОСЕНСИБИЛИЗАТОРА слабо выраженные деструктивные изменения в почках ДЛЯ ФОТОДИНАМИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ при использовании препарата в максимальной дозе, рав-ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ НОВООБРАЗОВАНИЙ - ной 72,8 мг/кг. ПРЕПАРАТА БАКТЕРИОСЕНС Заключение. Бактериосенс при однократном и много-1МНИОИ им. П.А. Герцена — филиал ФГБУ «НМИРЦ» кратном применении в широком диапазоне исследуемых Минздрава России, Москва, Россия; доз (превышающих расчетную ЭТДчеловек в 6,5—364 раза) ФГБУ«РОНЦим. Н.Н. Блохина» Минздрава России, не оказывал выраженного токсического действия на мы-Москва, Россия; шей, крыс и кроликов, которое лимитировало бы дальней-3ФГУП «ГНЦ «НИОПИК», Москва, Россия шее доклиническое изучение данного лекарственного Введение. В ФГУП «ГНЦ «НИОПИК» синтезирована средства. субстанция и разработана лекарственная форма препарата нового поколения для фотодинамической терапии (ФДТ) злокачественных новообразований на основе синтетического тетрогидропорфирина, поглощающего в длинноволновой области спектра (747 нм), — препарат Бактериосенс,

Спецвыпуск / том 16 / 2017 РОССИЙСКИЙ БИОТЕРАПЕВТИЧЕСКИЙ ЖУРНАЛ