CC BY
19
Список литературы
1. Catarina, P. R. Nanoencapsulation I. Methods for preperetion of drug-loaded polymaeric nanoparticles / P. R. Catarina, J. Ronald et al. // Nanomedicine : Nanotechnology, Biology and Medicine. - Vol. 2, № 1. - P. 8-21.
2. Patil, R. R. Engineered nanocarriers of doxorubicin : a current update / R. R. Patil, S. A. Guhagarkar, P. V. Devarajan // Crit. Rev. Ther. Drug Carrier Syst. - 2008. - Vol. 25, № 1. - P. 1-61.
3. Urva, S. R. Sensitive high performance liquid chromatographic assay for assessment of doxorubicin pharmacokinetics in mouse plasma and tissues / S. R. Urva, B. S. Shin, V. C. Yang, J. P. Balthasar // Journal of Chromatography B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci. - 2009. - № 15. - P. 837-841.
Дубовик Екатерина Геннадьевна, магистр, инженер отдела биохимии, Московский НИИ медицинской экологии, Россия, 117149, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8, ДА тел.: 8-909-159-22-33, e-mail: E.G.Dubovik@yandex.ru.
Рябцева Мария Сергеевна, аспирант, отдел биохимии, Всероссийский научно-исследовательский центр молекулярной диагностики и лечения, Россия, 117149, г. Москва, Симферопольский бульвар., д. 8, тел.: 8-926148-21-28, e-mail: infantes@yandex.ru.
Годованный Артем Валерьевич, специалист, ветеринарный врач, отдел токсикологии, Всероссийский научно-исследовательский центр молекулярной диагностики и лечения, Россия, 117149, г. Москва, Симферопольский бульвар, д. 8, 117149; тел.: 89262662702, e-mail: artem.god@gmail.com.
Северин Сергей Евгеньевич, доктор химических наук, член-корр. РАМН, профессор, заведующий кафедрой биологической химии ГБОУ ВПО «Первый Московский государственный медицинский университет им. И.М. Сеченова» Минздравсоцразвития России, Россия, 119992, г. Москва, ул. Трубецкая, д. 8, стр. 1, тел.: (499) 246-70-26, e-mail: rektorat@mma.ru.
УДК 616.155.294.017.1:616.411-008.1-07
© Д.А. Дьяконов, Н.С. Федоровская, Н.А. Тимина, Н.А. Федоровская, 2012
Д.А. Дьяконов, Н.С. Федоровская, Н.А. Тимина, Н.А. Федоровская
ИЗМЕНЕНИЯ КРАСНОЙ ПУЛЬПЫ СЕЛЕЗЕНКИ У БОЛЬНЫХ ИММУННОЙ ТРОМБОЦИТОПЕНИЕЙ
В ЗАВИСИМОСТИ ОТ ДЛИТЕЛЬНОСТИ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО ПРОЦЕССА
ФГБУН «Кировский НИИ гематологии и переливания крови ФМБА России», г. Киров
Изучены гистологические и иммуногистохимические особенности структуры красной пульпы селезенки у больных ИТП в зависимости от фазы течения патологического процесса. Выявленные изменения архитектоники сосудистого рисунка наиболее были выражены в группе с хроническим течением патологического процесса и могут служить дополнительными критериями мониторинга течения данного заболевания.
Ключевые слова: иммунная тромбоцитопения, селезенка, красная пульпа.
D.A. Diakonov, N.S. Fedorovskaya, N.A. Timina, N.A. Fedorovskaya
RED PULP SPLEEN CHANGES IN IMMUNE THROMBOCYTOPENIA PATIENTS SUBJECT TO DURATION OF PATHOLOGICAL PROCESS
The histological and immunohistochemical features of the spleen's red pulp in patients with immune thrombocytopenia (ITP) have been studied depending on the phase of the disease. The changes in the venous sinuses structure were more expressed in patients with chronic ITP and this can be an additional criterion to monitor the disease.
Keywords: immune thrombocytopenia, spleen, red pulp.
Процессы деструкции сенсибилизированных иммуноглобулинами тромбоцитов путем опосредованного Fc-рецепторами их фагоцитоза макрофагами при иммунной тромбоцитопении (ИТП) происходят в селезенке [1, 2]. Тем не менее, изменения, возникающие в лимфоидном органе в процессе течения болезни, до сих пор изучены недостаточно [3]. Более того, в доступной литературе не встретилось данных относительно исследования селезенки в зависимости от длительности заболевания.
Цель: проанализировать гистологические и иммуногистохимические особенности структуры красной пульпы селезенки у больных ИТП в зависимости от фазы течения заболевания.
Материалы и методы. Выполнено морфологическое и морфометрическое исследование гистологических препаратов селезенки у 38 пациентов. Из общего количества обследуемых 11 имели впервые выявленную, 13 персистирующую и 14 хроническую ИТП. До операции все пациенты принимали глюкокортикостероидные гормоны в дозе 1-2 мг/кг массы тела. Сравнительный анализ осуществляли с образцами селезенки, взятыми от 20 лиц, скончавшихся скоропостижно и не имевших в анамнезе заболеваний системы крови. Для гистологического исследования послеоперационных селезенок окраски гематоксилином и эозином, а также азур-11-оэзином осуществлялись общепринятыми способами. Иммуногистохимическое окрашивание проводилось с антителами CD20, CD79-a, CD3, CD4, CD68, MPO, FVIII, и системой визуализации EnVISION, PEROXIDASE (DAB) «Dako» в рабочих разведениях. Оценка результатов выполнялась с использованием светового микроскопа со встроенной фото- и видеокамерой с помощью программного обеспечения анализа изображений Im-ageScope Color, версии М.
Для статистической обработки результатов применялась программа SPSS for Windows Version 17.0. Достоверность различий между показателями в сравниваемых группах оценивали с использованием непараметрических двусторонних критериев Краскела-Уоллеса, Манна-Уитни и учетом поправки Бонферо-ни при множественных сравнениях. Различия считали статистически значимыми при уровне р < 0,05.
Результаты исследования. При морфометрическом исследовании площади красной пульпы выявлено уменьшение ее размеров у лиц с хронической ИТП по сравнению с нормальными значениями: 78,9 % (73,8-84,3) и 84,3 % (84,2-90,2), соответственно, при р = 0,007. У больных же с впервые выявленной и персистирующей фазой заболевания статистически значимых различий данных показателей установлено не было.
Экспрессия Factor VIII определялась преимущественно в маргинальной зоне и вдоль синусов красной пульпы у всех обследуемых с ИТП. Данные изменения отличались от группы сравнения, где положительная реакция наблюдалась в большей части в пульпарных тяжах красной пульпы и вдоль синусов. Вместе с тем, были выявлены изменения стенок венозных синусов. Так, у пациентов с впервые выявленной ИТП установлено умеренное их утолщение и отек стромы. При персистирующей фазе патологического процесса изменения сосудов носили более выраженный характер, в единичных случаях отмечалось заполнение их просвета ядросодержащими клетками кроветворной ткани. Наиболее существенные изменения были установлены у лиц с хронической ИТП - отек стромы, а также утолщение и огрубение стенки венозных синусов сочетались со значительной их деформацией (извитость структуры, расширение просвета, синусы становились более мелкими). Более того, количество синусов в поле зрения достоверно увеличивалось и составляло: 17,3 (15,2-19,4) при впервые выявленной ИТП; 21,6 (17,2-22,8) у лиц с персистирующей формой и 27,4 (19,2-34,6) у больных с хронической фазой, в отличие от группы сравнения, где среднее содержание было 12,5 (10,5-15,0).
Красная пульпа всех пациентов с ИТП была клеточной. В большом количестве встречались макрофаги (CD68), расположенные вдоль синусов, гранулоциты (MPO). У части лиц выявлялись клетки типа липофагов или «пенистых» гистиоцитов. Т- и В-клетки в красной пульпе встречались в небольшом количестве. Изменений по содержанию количества липофагов, а также Т- и В-лимфоцитов в зависимости от длительности патологического процесса и проведенного лечения до спленэктомии выявить не удалось.
Выводы. Полученные данные отражают нарушения архитектоники красной пульпы селезенки в зависимости от фазы ИТП. Изменения сосудистого рисунка, выявленные у всех больных, наиболее были выражены в группе с хроническим течением патологического процесса. Все это может служить дополнительным критерием мониторинга течения данного заболевания.
Список литературы
1. Масчан, А. А. Современные подходы диагностики и лечения первичной иммунной тромбо-цитопении (по итогам совещания совета экспертов) / А. А. Масчан, Л. Г. Ковалева, А. Г. Румянцев и др. // Вопросы гематологии/онкологии и иммунологии в педиатрии. - 2010. - Т. 9, № 4. - С. 5-14.
2. Руководство по гематологии : в 3 т. / под ред. А. И. Воробьева. - 3-е изд., перераб. и доп. -М. : Ньюдиамед, 2005. - Т. 3. - 416 с.
3. Stasi, R. The stingy bone marrow and the wasteful peripheral blood : a tale of two ITPs / R. Stasi // Blood. - 2011. - Vol. 117. - P. 5553-5554.
Дьяконов Дмитрий Андреевич, кандидат медицинских наук, научный сотрудник лаборатории патоморфологии крови ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России», Россия, 610027, г. Киров, ул. Красноармейская, д. 72, тел.: (8332) 67-37-38, е-шаИ: DiakonovDA@Rambler.ru.
Федоровская Надежда Станиславовна, кандидат медицинских наук, руководитель лаборатории патоморфологии крови ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России», Россия, 610027, г. Киров, ул. Красноармейская, д. 72, тел.: (8332) 37-24-76.
Тимина Наталья Александровна, заочный аспирант лаборатории патоморфологии крови, ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России», Россия, 610027, г. Киров, ул. Красноармейская, д. 72, тел.: 8 (8332) 37-24-76.
Федоровская Нина Афанасьевна, доктор медицинских наук, профессор, ведущий научный сотрудник гематологической клиники ФГБУН «Кировский научно-исследовательский институт гематологии и переливания крови ФМБА России», Россия, 610027, г. Киров, ул. Красноармейская, д. 72, тел.: 8 (8332) 37-24-76, е-шаП: fednadst@mail.ru.
УДК 577.151.642; 577.152.278 © Е.И. Ерлыкина, Т.Ф. Сергеева, Е.И. Демина, 2012
Е.И. Ерлыкина, Т.Ф. Сергеева, Е.И. Демина
АКТИВНОСТЬ ОКИСЛИТЕЛЬНЫХ ПРОЦЕССОВ И СОСТОЯНИЕ КОМПЛЕКСА ГЕКСОКИНАЗА-КРЕАТИНКИНАЗА ПРИ АДАПТАЦИИ К ДЕФИЦИТУ КИСЛОРОДА
ГБОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» Минздравсоцразвития России,
г. Н. Новгород
Изучены активность окислительных реакций и каталитические свойства митохондриальной креатинкиназы и гексокиназы при гипоксии мозга и краткосрочном гипобарическом прекондиционировании. Для животных с ишемией мозга после 4-дневного режима гипобарического прекондиционирования установлен рост активности креатинкиназы (КК) и гексокиназы (ГК), снижение интенсивности свободнорадикального окисления по сравнению с 30-минутной ишемией. Следовательно, данный режим прекондиционирования стабилизирует мембранные структуры клеток мозга, что создает условия для оптимальной работы мембраносвязанных ферментов.
Ключевые слова: гипоксия, окисление, гексокиназа, креатинкиназа.
E.I. Erlykina, T.F. Sergeeva, E.I. Demina
THE ACTIVITY OF FREE-RADICAL REACTIONS AND THE STATE OF CREATINE KINASE-HEXOKINASE COMPLEX UNDER ADAPTATION
TO OXYGEN DEFICIENCY
The activity of free-radical reactions and catalytic properties of mitochondrial creatine kinase and hexokinase were studied in hypoxia and in short-term hypobaric preconditioning. The increase in the activity of creatinkynase and hexoky-nase, the decrease of the free-radical reaction intensity in comparison with 30 minutes ischemia was revealed in animals with cerebral ischemia after 4-days hypobaric preconditioning. Thus, short-term hypobaric preconditioning stabilizes membrane structures of nerve cells. It creates optimal conditions for functioning of membrane-bound enzymes.
Key words: hypoxia, oxidation, hexokinase, creatine kinase.
Участие типовых патологических процессов - стресса и гипоксии - в патогенезе различных заболеваний ставит перед современной медициной проблему повышения толерантности организма к подобным повреждающим факторам. В основе действия этих факторов может быть активация окислительных процессов, включая свободнорадикальное окисление (СРО). Одним из эффективных способов коррекции являются адаптационные тренировки с помощью периодического изменения уровня кислорода при гипобарической гипоксии. Ранее было показано, что интервальное гипоксическое пре-кондиционирование приводит к изменениям в функционировании ключевых ферментов энергетического обмена и способствует формированию резистентности мозга к гипоксии [1, 2, 3].
Цель: изучить активность окислительных реакций и каталитических свойств креатинкиназы (КК) и гексокиназы (ГК) при гипоксии мозга и краткосрочном гипобарическом прекондиционировании.
Материалы и методы. Эксперименты проводились на белых беспородных крысах-самцах массой 180-200 г. Животные были разделены на четыре группы: интактные животные (n = 36); ише-
