CC BY
42
DOI: 10.24411/0235-2451-2019-10913 УДК 612.015.3:636.3+636.3.087.72/.73
Изменение направленности межуточного обмена у овец под влиянием антиоксиданта и органического йода*
Р. А. РЫКОВ, Н. В. БОГОЛЮБОВА, Ю. П. ФОМИЧЕВ
Федеральный научный центр животноводства - ВИЖ имени академика Л.К. Эрнста, пос. Дубровицы, 60, Подольский р-н, Московская обл., 142132, Российская Федерация
Резюме. Исследования проводили с целью изучения особенностей межуточного обмена у овец при использовании в их питании антиоксиданта дигидрокверцетина и органического йода для разработки способа физиолого-биохимического регулирования процессов в организме животных. Работу выполняли на фистулированных овцах в возрасте двух лет (n = 6) методом групп-периодов. В первый опытный период животным к основному рациону добавляли кормовую смесь 1, состоящую из антиоксиданта - дигидрокверцетина (ДКВ) в форме кормовой добавки Экостимул-2 по 100 мг/гол в сутки, органического йода (OJ) в форме кормовой добавки Прост по 1,05 мг/гол в сутки и сухих размолотых солодовых ростков в качестве наполнителя. Во второй - овцам давали смесь 2, состоящую только из дКв по 100 мг/гол в сутки и наполнителя. В период получения животными антиоксиданта в сочетании с OJ произошло повышение концентрации общего белка в сыворотке крови из-за увеличения глобулиновой фракции; снижение содержания триглицеридов и билирубина, а также активности АЛТ. При потреблении животными ДКВ во втором опытном периоде в сыворотке крови уменьшилась концентрация глобулинов, при одновременном увеличении альбуминовой фракции, что привело к снижению общего белка. Введение в корм антиоксиданта повлияло на снижение концентрации триглицеридов (p < 0,001) и билирубина (p < 0,001), а также активности АЛТ и АСТ, что свидетельствует о положительном влиянии на функции печени и сердечно-сосудистой системы. Введение в рацион ДКВ и OJ и ДКВ отдельно способствовало повышению содержания эритроцитов в крови, по отношению к контрольному периоду, на 13,9 % и 16,5 % и уровня гематокрита на 5,38 % и 6,82 %, при этом количество лейкоцитов снизилось на 22,7 % и 27,0 % соответственно. Ключевые слова: овцы, обменные процессы, гематология, дигидрокверцитин, органический йод.
Сведения об авторах: Р. А. Рыков, старший научный сотрудник (e-mail: [email protected]); Н. В. Боголюбова, кандидат биологических наук, заведующий отделом (e-mail: [email protected]); Ю. П. Фомичев, главный научный сотрудник, заведующий лабораторией.
Для цитирования: Рыков Р. А., Боголюбова Н. В., Фомичев Ю. П. Изменение направленности межуточного обмена у овец под влиянием антиоксиданта и органического йода // Достижения науки и техники АПК. 2019. Т. 33. № 9. С. 61-64. DOI: 10.24411/0235-2451-2019-10913.
*Работа выполнена при финансовой поддержке фундаментальных научных исследований МИНОБРНАУКИ России, номер государственного учета НИОКТРАААА-А18-1180215901367.
Change in the Direction of Interstitial Metabolism in Sheep under the Influence of Antioxidants and Organic Iodine
R. A. Rykov, N. V. Bogolyubova, Yu. P. Fomichev
Federal Scientific Center of Animal Husbandry - L. K. Ernst All-Russian Research Institute of Animal Husbandry, pos. Dubrovitsy, 60, Podol'skii r-n, Moskovskaya obl., 142132, Russian Federation
Abstract. A series of studies was conducted to investigate peculiarities of interstitial metabolism in sheep when adding an antioxidant - dihydroquercetin (DHQ) - and organic iodine (OI) to their diet. The main objective was to develop a method of physiological and biochemical regulation of life processes in animals. The work was performed on fistulated sheep aged two years (n = 6) by the method of group and periods. In the first experimental period, the animals' diet was supplemented with feed mixture 1, consisting of DHQ in the form of a feed supplement Ecostimul-2 at a dose of 100 mg/head per day, organic iodine (OI) in the form of a feed additive Prost at a dose of 1.05 mg/head per day and dry malt sprouts as a filler. In the second experimental period, the sheep were given feed mixture 2, consisting exclusively of DHQ at a dose of 100 mg/head per day and a filler. During the period, when the animals received DHQ in combination with OI, we observed an increase in the concentration of total protein in the blood serum due to an increase in the globulin fraction, a decrease in the content of triglycerides and bilirubin, as well as a decrease in the ALT activity. When animals consumed DHQ in the second experimental period, the concentration of globulins in the blood serum decreased, while the albumin fraction increased, which led to a decrease in the total protein. The introduction of DHQ into the feed resulted in a decrease in the concentration of triglycerides (p < 0.001) and bilirubin (p < 0.001), as well as the activity of ALT and AST, which indicates the positive effect of DHQ on the liver and cardiovascular system functions. In comparison with the control period, the introduction of DHQ in combination with OI and DHQ separately contributed to an increase in the content of red blood cells by 13.9% and 16.5%, an increase in the hematocrit level by 5.38% and 6.82%, while the number of leukocytes decreased by 22.7% and 27.0%, respectively. Keywords: sheep; metabolic processes; hematology; dihydroquercytin; organic iodine.
Author Details: R. A. Rykov, senior research fellow (e-mail: [email protected]); N. V. Bogolyubova, Cand. Sc. (Biol.), head of division (email: [email protected]); Yu.P. Fomichev, chief research fellow, head of laboratory.
For citation: Rykov R. A., Bogolyubova N. V., Fomichev Yu. P. Change in the Direction of Interstitial Metabolism in Sheep under the Influence of Antioxidants and Organic Iodine. Dostizheniya nauki i tekhniki APK. 2019. Vol. 33. No. 9. Pp. 61-64 (in Russ.). DOI: 10.24411/0235-2451-2019-10913.
Современное животноводство характеризуется высоким уровнем интенсивности производства, вследствие чего организм животных испытывает большие функциональные нагрузки. При этом изменяются его адаптивные способности к внешним раздражителям, которые нередко становятся стрессовыми. Один из важнейших факторов, влияющих на продуктивность и состояние естествен-
ной резистентности организма животных, - уровень обеспеченности рационов основными питательными, минеральными и биологически активными веществами [1, 2].
Многочисленными исследованиями доказано, что включение в рационы биологически активных веществ благоприятно влияет на продуктивность животных и усиливает резистентность организма.
По данным некоторых авторов [3], хронический комплексный дефицит биологически активных веществ сопровождается снижением интенсивности и нарушением процессов обмена веществ, возникают морфологические и функциональные изменения, снижается естественная резистентность и защита организма. Поэтому создание и применение комплекса биологически активных веществ, действие которых направлено на повышение продуктивности и резистентности организма животных, актуально и заслуживает особого внимания [4].
Эталонным и эффективным антиоксидантом признан флаваноид дигидрокверцетин (ДКВ), извлекаемый из комлевой части лиственницы Даурской (Ьаг1х дтвНпИ йаЬиг'юа Шгв2), который широко применяют в медицине и пищевой промышленности. Дигидрокверцетин - природный витамин Р, который невозможно произвести синтетическим путем. При включении в рационы этот антиоксидант способен оказывать положительное полифункциональное воздействие на организм, повышая его адаптивность и жизнеспособность, а также функциональность органов и систем организма на клеточном уровне [5, 6]. Введение ДКВ в рацион сельскохозяйственных животных оказывает положительный терапевтический эффект при иммунодефицитном состоянии, нарушении функционального состояния печени и др., которые, как правило, появляются вследствие воздействия на организм неблагоприятных факторов среды и технологий, неадекватных физиологии сельскохозяйственных животных [7, 8].
В питании животных используют различные йодсодержащие препараты, среди которых наиболее перспективны органические соединения как наиболее устойчивые формы. Проведение исследований по изучению эффективности их применения в составе комплексных добавок в животноводстве актуально и перспективно. Йод участвует в синтезе фагоцитов и гормона тироксина, недостаток его ведет за собой нарушение обмена веществ, изменения в хромосомах. С участием этого элемента в организме происходят окислительные процессы, а его дефицит приводит к нарушениям адаптационных механизмов в организме, развитию хронических заболеваний.
Цель исследований - изучение особенностей межуточного обмена у овец при использовании в их питании антиоксиданта дигидрокверцетина и органического йода для разработки способа физиолого-биохимического регулирования процессов в организме животных.
Условия, материалы и методы. Исследования проведены в условиях физиологического двора ФНЦ им. Л. К. Эрнста в 2018 г. методом групп-периодов на шести фи-стулированных овцах в возрасте двух лет, три из которых романовской породы, три - гибриды романовской породы с архаром. В контрольный период животные ежедневно
получали основной рацион (ОР), состоящий из 1,5 кг сена, 0,4 кг концентратов, общей питательностью 13,2 МДж обменной энергии (ОЭ) (1,32 энергетических кормовых единиц (ЭКЕ)) с содержанием 180 г протеина, 40 г жира, 380 г клетчатки, безазотистых экстрактивных веществ (БЭВ) и минерального пре-микса. В первый опытный период овцам к ОР добавляли дигидрокверцетин по 100 мг/гол в сутки и органический йод (OJ) по 1,05 мг/гол в сутки, а во второй - ДКВ по 100 мг/гол в сутки. Продолжительность каждого периода составляла 14 дней. Биологически активные вещества давали в форме смесей. Смесь 1 состояла из наполнителя (сухие размолотые солодовые ростки), кормовых добавок Экостимул-2 (ДКВ 80 %) и Прост, а смесь 2 - из наполнителя и Экостимула-2. Смеси добавляли в концентраты по 10 г/гол в сутки.
В конце каждого периода пункцией яремной вены отбирали образцы крови для изучения межуточного обмена и морфо-гематологических показателей. Забор крови осуществляли в пробирки для клинических исследований сыворотки с активатором образования сгустка (Greiner BioOne, Австрия). Определение содержания биохимических показателей в сыворотке крови проводили на автоматическом биохимическом анализаторе ChemWell (Awareness Technology, США) с использованием реактивов фирм Analyticon Biotechnologies AG (Германия) и Spinreact (Испания). Из показателей белкового обмена определяли содержание общего белка (биуретовым методом), альбумина (колориметрическим методом), мочевины (ферментативным колориметрическим методом по Бертелоту), креатини-на (кинетическим методом Яффе), активность аланина-минотрансферазы (АЛТ) и аспартатаминотрансферазы (АСТ) (УФ-кинетическим методом). Из параметров углеводного обмена устанавливали содержание глюкозы (ферментативным глюкозоксидазным методом); липидного обмена - содержание общего холестерина и триглицеридов (ферментативно-колориметрическим методом (GPO-PAP)). Минеральный обмен изучали по следующим показателям: содержание кальция (О-крезолфталеиновым комплексоновым методом), фосфора, магния, железа (все - колориметрическим методом), хлоридов (колориметрическим методом с использованием тиоцианата), активность щелочной фосфатазы (кинетическим методом). Кроме того, определяли гематологические показатели (содержание лейкоцитов, эритроцитов, гемоглобина и гематокрит) на анализаторе ABC VET (Horiba ABZ, Франция).
Таблица 1. Показатели белкового и углеводно-липидного обмена в организме овец,М ± m
Показатель
Период
контрольный I опытный 7 1 опытный 2
Общий белок, г/л 70,33 ± 1,25
Альбумин, г/л 29,53 ± 0,61
Глобулин, г/л 40,80 ± 0,93
Альбумино-глобулиновое
соотношение (А/Г) 0,72
Мочевина, мМоль/л 7,34 ± 0,39
Креатинин, мкМоль/л 53,90 ± 4,77
Глюкоза, мМоль/л 4,42 ± 0,14
Триглицериды, мМоль/л 0,67 ± 0,05
Холестерин, мМоль/л 2,15 ± 0,10
Билирубин общий, мкМоль/л 13,11 ± 0,98
АЛТ, МЕ/л 22,40 ± 1,76
АСТ, МЕ/л 76,52 ± 2,12
72,26 ± 1,46 29,18 ± 0,94 43,08 ± 1,32
0,67 7,15 ± 1,00 56,35 ± 4,08 4,07 ± 0,18 0,56 ± 0,02 1,98 ± 0,14 8,80 ± 0,30**
17.30 ± 0,52
77.31 ± 4,70
67,89 ± 3,51 33,89 ± 2,36 34,00 ± 4,86
0,99 6,37 ± 0,98 72,05 ± 8,73 4,06 ± 0,16 0,33 ± 0,02***
1,72 ± 0,28 5,52 ± 0,33*** 18,54 ± 0,70 63,19 ± 1,17
* p < 0,01, ***p < 0,001
Числовой материал исследований обработан биометрически с использованием ^критерия Стюдента. Результаты считали достоверными при уровне значимости р < 0,05.
Результаты и обсуждение. Применяемые биологически активные вещества оказали положительное влияние на показатели белково-углеводного, липидного и минерального обмена, а также на функциональное состояние печени овец.
В сыворотке крови овец, получавших дополнительно к основному рациону ДКВ и ОJ, содержание альбуминов было на уровне контрольного периода. При этом концентрация общего белка недостоверно возрастала на 2,7 % из-за увеличения глобулиновой фракции (табл. 1).
Использование только ДКВ привело к недостоверному снижению содержания общего белка и глобулинов в сыворотке крови. При этом было отмечено некоторое увеличение концентрации альбуминовой фракции, что свидетельствует о положительном влиянии изучаемого фактора кормления на состояние белкового обмена в организме животных. Соотношение альбуминов к глобулинам (А/Г) в крови овец в этот период составило 0,99, что было на 0,27 и 0,32 выше, чем в контрольный и первый опытный период соответственно.
Таблица 2. Показатели минерального обмена в организме овец, М ± m
Показатель Период
контрольный опытный 1 опытный 2
Са, мМоль/л Р, мМоль/л Отношение Са:Р:Мg Мg, мМоль/л Fe, мкМоль/л Хлориды, мМоль/л 2,53 ± 0,14 2,16 ± 0,44 1,0 : 0,85 : 0,62 1,59 ± 0,02 28,80 ± 2,80 105,20 ± 1,42 2,64 ± 0,14 2,54 ± 0,21 1,0 : 0,82 : 0,61 1,62 ± 0,02 25,79 ± 1,57 104,40 ± 0,97 2,43 ± 0,25 1,52 ± 0,17 1,0 : 0,62 : 0,32 0,80 ± 0,11 23,66 ± 1,34 94,72 ± 5,77
Уровень мочевины в сыворотке крови овец, получавших в составе рациона ДКВ отдельно и в сочетании с органическим йодом, был недостоверно ниже, по сравнению с контрольным периодом, на 2,4 и 13,2 % соответственно, но все же находился выше нормы (3,3...5,8 ммоль/л [9]). Этот факт может свидетельствовать об усилении ее вовлечения в ассимиляционные процессы под действием кормовых факторов.
Креатинин служит важным показателем азотистого обмена и принимает активное участие в энергетическом обмене во всех тканях. Его концентрация в крови напрямую зависит от мышечной массы и степени экскреции с мочой. Недостоверное повышение креатинина в опытных периодах до 56,35 и 72,05 мкМоль/л, возможно, было связано с увеличением интенсивности энергетического обмена в организме овец. Этим так же можно объяснить уменьшение содержания глюкозы в сыворотке крови у животных в опытные периоды до 4,07 и 4,06 мМоль/л, при 4,42 мМоль/л в контрольном варианте.
Холестерин - это жироподобное вещество, образующееся в печени и находящееся во всех клетках тела, необходимое для формирования клеточных и митохондриальных мембран, стероидных гормонов. Высокий уровень холестерина - один из главных факторов риска сердечно-сосудистых заболеваний [10]. В своих исследованиях мы наблюдали тенденцию к снижению концентрации холестерина в сыворотке крови животных в первый опытный период на 7,9 %, а во второй - на 20 %, по сравнению с контрольным. Это может указывать на
более высокий уровень его использования организмом и вовлечения в биосинтетические процессы.
Было отмечено значительное и достоверное снижение концентрации билирубина, который в организме животных образуется из биливердина - продукта распада гема, в сыворотке крови овец в первый опытный период на 32,9 % (p < 0,01), во второй - на 57,9 % (p < 0,001). Аналогичные изменения отмечены и в содержании триглицеридов, снижение концентрации которых, по сравнению с контрольным периодом, составило соответственно 16,5 % и 66,4 %.
Активность АЛТ в организме овец во время получения антиоксиданта отдельно и в сочетании с йодом была недостоверно ниже, чем в контрольный период, что в сочетании с уменьшением концентрации холестерина и билирубина может свидетельствовать об улучшении функциональной деятельности печени у подопытных животных.
Активность АСТ в сыворотке крови отражает состояние сердечно-сосудистой системы. Во второй опытный период отмечена тенденция к снижению активности АСТ до 63,19 МЕ/л, а при скармливании ДКВ в сочетании с органической формой йода - к повышению до 77,31 МЕ/л, что может быть связано с действием йода на состояние обменных процессов через гормоны щитовидной железы.
Содержание в сыворотке крови овец кальция, фосфора и магния было в пределах физиологической нормы в течение всего исследования. Однако во второй опытный период под действием ДКВ их содержание уменьшилось до нижнего референтного значения нормы. В результате чего изменилось и соотношение этих минеральных элементов, которое по отношению к кальцию составило 1,0 : 0,62 :0,32 по сравнению с 1,0 : 0,85 : 0,62 соответственно Са : Р : Мд в контрольный период (табл. 2). Это может быть связано со снижением резорбции указанных элементов из костной ткани под действием антиоксиданта.
Под влиянием биологически активных веществ, вводимых в состав рационов подопытных животных, уменьшалась концентрация железа и хлоридов в сыворотке крови, с 28,80 мкМоль/л в контрольный период до 23,66 мкМоль/л во второй опытный для железа и с 105,2 до 94,72 мМоль/л соответственно для хлоридов.
В контрольный период у овец наблюдали лейкоцитоз, который выразился в превышении физиоло-
Рисунок. Морфо-гематологические показатели крови овец: ■ - контрольный; □ - опытный 1; ■ - опытный 2.
гической нормы (6...11 х 109) более, чем в 2 раза, что могло быть следствием физиологического стресса и повышенной активности надпочечников. Включение в рацион овец ДКВ совместно с органическим йодом и отдельно оказало положительное влияние на морфо-гематологические показатели крови, свидетельствующее об улучшении клинического здоровья овец (см. рисунок). Под действием биологически активных веществ количество лейкоцитов в первый опытный период снизилось на 22,7 %, а во второй - на 27,0 % по отношению к контрольному. Количество эритроцитов повысилось на 13,9 и 16,5 %, соответственно. При этом концентрация гемоглобина в крови овец всех групп существенно не различалась и составляла 116,7...119,8 г/л.
Обращает на себя внимание величина показателя гематокрита, которая была достоверно выше у овец, получавших в составе рационов ДКВ отдельно и в сочетании с органическим йодом. Так, в контрольный период она составляла 42,06 %, что на 5,38 % (р < 0,01) и 6,82 % (р < 0,01) меньше, чем в 1 и 2 опытные, соответственно.
Выводы. Включение в рацион овец дигидрок-верцетина отдельно и в сочетании с органическим
йодом оказало выраженное влияние на межуточный обмен в соответствии с биологическими свойствами, что характеризует их как важные функциональные добавки к рационам направленного действия. Так, при скармливании овцам ДКВ отмечено усиление азотистого обмена в организме, что проявлялось в повышении концентрации альбуминов, соотношения А/Г (на 0,27 единиц), снижении уровня мочевины (на 13,2 %), по сравнению с контрольным периодом. Увеличение содержания креатинина в опытных периодах до 56,35 и 72,05 мкМоль/л, возможно, было связано с повышением энергетического обмена в организме овец. Снижение концентрации холестерина на 7,9.20,0 % при использовании в питании животных антиоксиданта ДКВ отдельно и в сочетании с органической формой йода свидетельствует об усилении липидного обмена в организме овец.
Полученные результаты дают основания для проведения дальнейших исследований по разработке способа регуляции и улучшения пищеварительных и обменных процессов в организме жвачных животных с применением в питании анти-оксидантов и йода.
Литература.
1. Алиев А. А. Обмен веществ у жвачных животных. М.: НИЦ «Инженер», 1997. 419 с.
2. Стресс и адаптация сельскохозяйственных животных в условиях индустриальных технологий / Ф. И. Фурдуй, Е. И. Штирбу, Ф. А. Струтинский др. Кишинев; Штиинца, 1992. 223 с.
3. Фомичев Ю. П. Флавоноид дигидрокверцетин в питании человека и животных, сохранности сельскохозяйственной продукции // Эффективное животноводство. 2018. № 4. С.58-60.
4. Antioxidative and antimicrobial effects of some natural extracts in lard/S. Sekretar, S. Schmidt, M. Vajdak6 et al.// Czech Journal of Food Sciences. 2018. Vol. 22. P. 215-218.
5. Дигидрокварцетин и арабиногалактан - природные биорегуляторы в жизнедеятельности человека и животных, в растениеводстве и пищевой промышленности: монография / Ю. П. Фомичев, Л. А. Никанова, В. И. Дорошкин и др. М.: Научная библиотека, 2017. 702 с.
6. Synthesis and antioxidant and cytotoxic activity of new dihydroquercetin derivatives / V. V. Knyazev, V. S. Rogovskii, E. D. Sveshnikova, et al. // Pharmaceutical Chemistry Journal. 2018. Vol. 52 (3). P. 205-208.
7. Фомичев Ю. П., Никонова Л. А., Торшков А. А. Природные кормовые добавки «Экостимул» и «Арабиногалактан» в экологии, продуктивном использовании животных и птицы в комбикормовой промышленности: практическое наставление. Дубровицы: ВИЖ, 2010. 76 с.
8. Никанова Л. А. Применение антиоксиданта-дигидрокверцетина в кормлении поросят-отъемышей // Российский журнал проблемы ветеринарной санитарии, гигиены и экологии. 2017. № 3 (23). С. 78-82.
9. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии: справочное издание / И. П. Кондрахин, Н. В. Курилов, А. Г. Малахов и др. М.: Агропромиздат, 1985. 287 с.
10. Cardiovascular disease risk reduction by raising HDL cholesterol - current therapies and future opportunities / K. M. Ali, A. Wonnerth, K. Huber, et al. // British Journal of Pharmacology. 2012. Vol. 167. Is. 6. P. 1177-1194.
References
1. AlievAA. Obmen veshchestv u zhvachnykh zhivotnykh [Metabolism in ruminants]. Moscow: NITs "Inzhener"; 1997. 419 p. Russian.
2. Furdui FI, Shtirbu EI, Strutinskii FA, et al. Stress i adaptatsiya sel'skokhozyaistvennykh zhivotnykh v usloviyakh industrial'nykh tekhnologii [Stress and adaptation of farm animals under conditions of industrial technology]. Kishinev: Shtiintsa; 1992. 223 p. Russian.
3. Fomichev YuP. [Flavonoid dihydroquercetin in human and animal nutrition, the safety of agricultural products]. Effektivnoe zhivotnovodstvo. 2018;4:58-60. Russian.
4. Sekretar S, Schmidt S, Vajdak M, et al. Antioxidative and antimicrobial effects of some natural extracts in lard. Czech Journal of Food Sciences. 2018;22:215-8.
5. Fomichev YuP, Nikanova LA, Doroshkin VI, et al. Digidrokvartsetin i arabinogalaktan - prirodnye bioregulyatory v zhiznedeyatel'nosti cheloveka i zhivotnykh, vrastenievodstve i pishchevoi promyshlennosti [Dihydroquarcetin and arabinogalactan are natural bioregulators in the life of humans and animals, in crop production and the food industry]. Moscow: Nauchnaya biblioteka; 2017. 702 p. Russian.
6. Knyazev VV, Rogovskii VS, Sveshnikova ED, et al. Synthesis and antioxidant and cytotoxic activity of new dihydroquercetin derivatives. Pharmaceutical Chemistry Journal. 2018;52(3):205-8.
7. Fomichev YuP, Nikonova LA, Torshkov AA. Prirodnye kormovye dobavki «Ekostimul» i «Arabinogalaktan» v ekologii, produktivnom ispol'zovanii zhivotnykh i ptitsy v kombikormovoi promyshlennosti: prakticheskoe nastavlenie [Natural feed additives Ecostimul and Arabinogalactan in ecology, productive use of animals and poultry in the feed industry: practical instruction]. Dubrovitsy (Russia): VIZh; 2010. 76 p. Russian.
8. Nikanova LA. [The use of the antioxidant dihydroquercetin in feeding weaned piglets]. Rossiiskii zhurnal problemy veterinarnoi sanitarii, gigieny i ekologii. 2017;23(3):78-82. Russian.
9. Kondrakhin IP, Kurilov NV, Malakhov AG, et al. Klinicheskaya laboratornaya diagnostika v veterinarii [Clinical laboratory diagnostics in veterinary medicine]. Moscow: Agropromizdat; 1985. 287 p. Russian.
10. Ali KM, Wonnerth A, Huber K, et al. Cardiovascular disease risk reduction by raising HDL cholesterol - current therapies and future opportunities. British Journal of Pharmacology. 2012;167(6):1177-94.
