CC BY
17
Summary
CLINICAL CHARACTERISTICS OF HIV-INFECTION COURSE AND CONCOMITANT ENDOTHELIAL DYSFUNCTION. Melenko S.R.
Key words: HIV-infection/ AIDS, endothelial dysfunction, thrombomodulin, E-selectin, von Willebrand factor, dipyridamole.
The inspection of 127 patients with HIV-infection / AIDS enables to find out this pathology is accompanied with substantial grows of thrombomodulin, E-selectin and von Willebrand factor, which indicates HIV-induced damage of vascular wall. As the immunodeficiency progress the concentration of all above mentioned indices reliably grows. The 3-month symptomatic therapy does not influence on the state of endothelium. Incorporating of dipyridamole into antiretroviral therapy of considerably promotes the endothelial state: the levels of thrombomodulin, E-selectin, von Willebrand factor in the II clinical stage of HIV-infection become normal, and at III-IV stages this reliable decreases though does not reach the parameter typical for healthy persons.
УДК 616.37- 002-036.11 Ниточко О.И.
ИЗМЕНЕНИЕ ИНТЕРЛЕЙКИН-1 - ПРОДУЦИРУЮЩЕЙ ФУНКЦИИ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С ПРОФЕССИОНАЛЬНЫМ АЛЛЕРГОДЕРМАТОЗОМ
Одесский национальный медицинский университет
Уровень продукции интерлейкина-1 (ИЛ-1) мононуклеарными клетками у пациентов с профессиональным контактным дерматитом, вызванным солями хрома был существенно (в 3,8 раз) выше, чем у практически здоровых. Включение в комплекс лечебных мероприятий липоевой кислоты и пентоксифиллина сопровождалось снижением стимулируемых бактериальным липопо-лисахаридом ИЛ-1 - зависимой реакции бласттрансформации лимфоцитов и редукцией клинических проявлений заболевания. Данные изменения были существенно более выраженными, чем в условиях традиционного лечения.
Ключевые слова: аллергический профессиональный контактный пентоксифиллин
В патогенезе профессионального дерматита, вызванного контактом с солями хрома важная роль принадлежит увеличению продукции про-воспалительных цитокинов, в частности, интер-лейкина-1 (ИЛ-1) [3, 7]. ИЛ-1 представляет собой семейство цитокинов, опосредующих широкий спектр изменений в организме при развитии воспалительного процесса и продуцируется моноцитами и макрофагами [1, 7]. Поэтому важным является исследование функционального состояния клеток-продуцентов ИЛ-1 у пациентов с профессиональным контактным дерматитом. Ранее данный вопрос у рабочих прецизионного машиностроительного производства не исследовался.
Целью данной работы было определение уровня продукции мононокулерными клетками ИЛ-1 в крови у работников прецизионного машиностроительного производства, у которых был диагностирован аллергический контактный дерматит, вызванный соединениями хрома. Дополнительной задачей работы было исследование ИЛ-1- продуцирующей активности системы мононуклеаров в условиях включения в комплекс лечебных мероприятий альфа-липоевой кислоты и пентоксифиллина (ПТФ). Данные препараты оказывают трапевтическое действие за счет повышения антиоксидантного потенциала тканей, а также снижения продукции провос-палительных цитокинов [4, 5, 6].
Материалы и методы исследования
В исследовании наблюдали 27 рабочих ма-
дерматит, соли хрома, цитокины, альфа-липоевая кислота,
шиностроительного прецизионного предприятия «Микрон», которым в комплекс лечебных мероприятий включали альфа - липоевую кислоту и ПТФ. При этом применяли пентоксифиллин («Sigma», США) (5- 10 внутривенных инфузий из расчета 0,1- 0,2 г на одну инфузию), а также препараты липоевой кислоты «ASTA Medica AG», Германия из расчета 0,01- 0,02 г в сутки.
Традиционное лечение в отдельной группе пациентов проводили с применением десенсе-билизирующей, а также дезинтоксикационной терапии с обязательным устранением пациентов от контакта с аллергеном.
Стаж работы на предприятии составил не менее 3,5 лет и в среднем составил 11,3+2,1 года. У всех пациентов был поставлен диагноз аллергического контактного дерматита, индуцированного солями хрома. Пациенты были заняты на участках гальванизации, машиносбороч-ного и юстировочного цехов, а также использовали в технологическом процессе цемент. Стаж работы на предприятии составил в среднем 14,5+2,7 года. Средний возраст пациентов составил 47,8+3,4 года.
Группой контроля служили 25 рабочих завода, у которых также диагностировали контактный аллергический дерматит и которым осуществляли традиционное лечение. Кроме того, 27 инженерно- технических работника завода, которые относились к категории практически здоровых, составили группу сравнения. Обе группы не отличались от основной группы по показателю возраста.
В1СНПК ВДНЗУ «Украгнсъка медична стоматологгчна академ1я»
Методика определения ИЛ-1 осуществлялась по [1, 2] с некоторыми модификациями и заключалась в выделении мононуклеарных клеток из крови в градиенте плотности фиколл-верографин. Для разделения прилипающих и неприлипающих клеток суспензию мононуклеа-ров с концентрацией 2х106 на 1 мл среды RPMI=1640 с 10% инактивированной АВ (IV) сыворотки разливали по 0,2 мл в лунки пластиковых плоскодонных планшет и культивировали в течение 45 мин при 37о С и 5% содержании СО2. Собирали неприлипшие клетки (93,5% лимфоцитов) и хранили при 4о С до использования. Прилипшие клетки (более 90% моноцитов) осторожно промывали несколько раз средой 199. Во все лунки добавляли по 0,1 мл среды RPMI-1640 содержащей 0,1% полиэтиленгликоля (ПЭГ-6000 "Serva", Германия) и 50 мкг/мл гента-мицина. Клетки активировались липополисаха-ридом (ЛПС) E. coli 055 ("Serva", Германия) импульсным методом. Для этого в часть лунок с моноцитами вносили по 0,02 (20 мкг/мл) ЛПС, в другие- 0,02 мл среды RPMI-1640 и инкубировали при 37о С и 5% содержании СО2 в течение различных интервалов времени (0,5 и 1,5) [1]. По окончании культивирования отсасывали всю жидкость и лунки с клетками промывали средой 199. Затем к монослою моноцитов добавляли по 0,2 мл неприлипших клеток (лимфоцитов) с концентрацией 2х106 /мл среды РМ -1640 с 20 мМ глутамина, 10% инактивированной АВ (IV) сыворотки и 50 мкг/мл гентамицина. В клеточную смесь, состоящую из активированных или ин-тактных моноцитов и лимфоцитов добавляли субоптимальную дозу (1мкг/мл) фитогемагглю-тинина (ФГА, "Серва", Германия) в объеме 0,02 мл. Планшеты помещали в термостат при 37o С с 5% СО2 и культивировали в течение 72 ч. После окончания реакции бласттрансформации лимфоцитов (РБТЛ) готовили мазок клеток, в которых морфологически определяли бластные клетки. Активность ИЛ-1 выражали индексом стимуляции пролиферации лимфоцитов (ИСПЛ) и определяли по формуле: ИСПЛ= О/К, где О-процент бластных клеток в пробах, содержащих моноциты, актииврованные ЛПС импульсным методом, и ФГА- стимулированные лимфоциты; К- относительное число бластных клеток в пробах содержащих неактивированные (интактные) моноциты и ФГА- стимулированные лимфоциты. Иммунологические исследования осуществляли на первые и 7-е сутки с момента начала лечебных мероприятий.
Полученные результаты обрабатывали статистически с использованием общепринятых в медико- биологических исследованиях критериев оценки различий между группами.
Результаты исследования и их обсуждение
Изучение ИСПЛ в группе пациентов с традиционным лечением показало, что к концу первых суток с начала лечения уже при длительности
инкубации с ЛПС в течение 0,5 ч отмечалась выраженная тенденция к стимуляции РБТЛ у пациенток - число бластных клеток составило 27,2+ 3,2%, а в группе сравнения- 21,3+ 3,3% (P>0,05) (Рис. 1, А). Увеличение продолжительности инкубации до 1,5 ч имело своим следствием возрастание ИСПЛ в 3,8 раза - число бластных клеток у пациентов составило 229,3+ 18,9%, в то время как у практически здоровых -61,0+ 4,5% (P<0,05). Определение данного показателя на 7-й день с момента начала традиционного лечения показало, что ИСПЛ в этот период также оставался весьма высоким - 2,6 (у пациентов число бластных клеток составило 155,3+ 12,1 и у практически здоровых- 59,4+ 5,3% (P<0,05) .
В группе пациентов с применением разработанного лечения (альфа- липоевая кислота+ ПТФ) обнаружено, что к концу первых суток с момента начала лечения, при продолжительности инкубирования моноцитов, обработанных ЛПС, в течении 0,5 ч не отмечалось влияния на РБТЛ иммунокомпетентных клеток: количество бластных клеток составило в контроле (активированные моноциты практически здоровых)-18,8+ 3,2% и у пациентов с аллергическим контактным дерматитом - 21,2+ 2,7% (P>0,05) (Рис. 1, Б). Продолжительность инкубации с ЛПС в течение 1,5 ч вызывало отчетливую способность усиливать пролиферацию лимфоцитов в ответ на субоптимальную дозу ФГА, что проявлялось увеличением показателя ИСПЛ в среднем до 2,2 - возрастанием числа бластных клеток до 128,5+ 11,8 в сравнении с 54,5+ 4,8 в контроле (практически здоровые) (P<0,05). На 7-й день с момента начала лечения наблюдалось снижение индекса ИСПЛ- до 1.2 -при этом число бластных клеток у пациенток составило 68,2+ 5,5%, а в контроле- 56,4+ 4,7% (P>0,05) (Рис. 1, Б).
По оси ординат- I - и II- первые сутки с момента начала лечения, длительность инкубации соответственно - 0,5 и 1,5 ч III- 7-е сутки с начала лечения, длительность инкубации - 1,5 ч. РЛ-разработанное лечение и ТЛ- традиционное лечение.
#-P<0,05 в сравнении с соответствующим показателем в группе наблюдения (ANOVA+ Newman- Keuls тест).
Таким образом, проведенные исследования показали, что в условиях развития контактного аллергического дерматита у рабочих, контактирующих с солями хрома, у пациентов наблюдается возрастание продукции ИЛ-1 моноцитами крови. Данный эффект проявляется выраженным увеличением продукции цитокина до начала лечения, что соответствует ранее представленным данным [5], свидетельствующим о важном патогенетическом значении ИЛ-1 в формировании профессиональных аллергических дерматитов в ответ на действие соединений металлов. Важным является тот момент, что ранее
речь шла об идентификации воспалительных изменений кожи как источника цитокинов. Полученные в настоящем исследовании данные свидетельствуют о том, что профессиональный контактный аллергический дерматит возможно рассматривать как системный процесс гипер-
продукции цитокинов, в котором принимают участие мононуклаерные клетки крови, поскольку их инкубация с ЛПС сопровождается активированием ИЛ-1 зависимых изменений со стороны лимфоцитов [3].
300 250 200 150 100 50 0
Е-ТЛ;
контроль
Рис. 1. Изменения ИЛ- 1-продуцирующей активности мононуклеарных клеток в различных условиях лечения аллергического контактного дерматита. Обозначения: по оси абсцисс - чимло бластных клеток в % по отношению к общему числу мононуклеарных клеток, принятому за 100%.
Благоприятная динамика со стороны исследуемых иммунологических показателей, а также клинических проявлений аллергического дерматита в условиях применения разработанного лечения, включающего применение альфа- липоевой кислоты и ПТФ связана с некоторым снижением содержания ИЛ-1 в плазме крови, в то время как у пациентов, получавшим традиционное лечение, подобный эффект был выражен в значительно меньшей степени.
Приведенные данные свидетельствуют о противовоспалительном и противоаллергическом характере влияний комплексного лечения с применением альфа- липоевой кислоты и ПТФ, которое может быть реализовано посредством снижения продукции цитокинов и, в частности ИЛ-1, мононуклеарными клетками. Поэтому применение в комплексе лечебных мероприятий альфа-липоевой кислоты и ПТФ возможно рекомендовать при профессиональных аллергических дерматитах, вызванных не только соединениями хрома, но и солями других металлов, которые сегодня широко применяются в условиях машиностроительного производства.
Можно также полагать, что применение разработанного лечебного комплекса представляется перспективным в контексте разработки методов лечения заболеваний, в патогенезе которых имеет значение повышенная продукция ци-токинов.
Выводы:
1. Развитие аллергического дерматита, вызванного контактом рабочих с солями хрома в условиях машиностроительного производства, связаны с высокой способностью мононуклеарных клеток продуцировать ИЛ-1.
2. Применение в комплексе лечебных мероприятий альфа- липоевой кислоты и пентоксифиллина обеспечивает повышение эффективности лечения, обеспечивает снижение активности мононуклеарной системы в отношении продукции ИЛ-1.
Литература
1. Адаменко Г.П. Метод определения интерлейкина- i в культуре лимфоцитов и активированных импульсным способом моноцитов крови человека l Г.П. Адаменко ll Лаб. дело. - 1990. - № 5. - С. 42-45.
2. Адаменко Г.П. Клинико- лабораторная оценка цитокинов при воспалительных заболеваниях кожи l Г.П.Адаменко, В.М.Козин ll Вестник дерматологии и венерологии. - 1993. - №3. - С.11-15.
3. Иванов О.Л. Аллергический контактный дерматит и ассоциированные аллергодерматозы: современные представления об этиологии, патогенезе и диагностике / О.Л.Иванов, А.Н.Львов, Е.С.Феденко, С.С.Землякова // Российский журнал кожных и венерических болезней. - 2010. - № 4. - С. 47-5i.
4. Дьяченко Ю.Ю. Современные аспекты фармакотерапии аллер-годерматозов l Ю.Ю.Дьяченко ll Новая аптека. - 2011. - № 6. -С.87-89.
5. Clark S.C. Management of occupational dermatitis l S.C.Clark, M.J.Zirwas ll Dermatol. Clin. - 2009. - V.27, №3. - P. 365-383.
6. Meiners I. Pentoxyphylline and propentophylline are inhibitors of TNF-alpha release in monocytes activated by advanced glycation endproducts l I. Meiners, S. Hauschildt, K. Nieber, G. Munch // J. Neural. Transm. - 2004. - V. 111, №3. - C.441-447.
7. Pellegrino M. Tumor necrosis factor-alpha and interleukin-1 beta. Two possible mediators of allergic inflammation l M. Pellegrino, B. Minervini ll Minerva Pediatr. - 1996. - V.48, №7-8. - P.309-312.
HidП¡К ВДНЗУ «Украгнська медична сгпомагпологгчна академ1я»
Реферат
ИЗМЕНЕНИЕ ИНТЕРЛЕЙКИН-1 - ПРОДУЦИРУЮЩЕЙ ФУНКЦИИ МОНОНУКЛЕАРНЫХ КЛЕТОК КРОВИ ПАЦИЕНТОВ С ПРОФЕССИОНАЛЬНЫМ АЛЛЕРГОДЕРМАТОЗОМ Ниточко О.И.
Ключевые слова: аллергический профессиональный контактный дерматит, соли хрома, цитокины, альфа-липоевая кислота, пентоксифиллин.
Уровень продукции интерлейкина-1 (ИЛ-1) мононуклеарными клетками у пациентов с профессиональным контактным дерматитом, вызванным солями хрома, был существенно (в 3,8 раз) выше, чем у практически здоровых. Включение в комплекс лечебных мероприятий липоевой кислоты и пенток-сифиллина сопровождалось снижением стимулируемых бактериальным липополисахаридом ИЛ-1 -зависимой реакции бласттрансформации лимфоцитов и редукцией клинических проявлений заболевания. Данные изменения были существенно более выраженными, чем в условиях традиционного лечения.
Summary
PECULIARITIES OF BLOOD MONONUCLEAR CELLS INTERLEUKIN-1-PRODUCTION IN PATIENTS WITH OCCUPATIONAL ALLERGIC DERMATOSIS Nitochko O.I.
Key words: allergic occupational contact dermatitis, chromium salts, cytokines, alpha-lipoic acid, pentoxiphyllin.
The level of interleukin-1 (IL-1) production by blood mononuclears in patients with professional contact dermatitis caused by chromium salts was substantially (in 3,8 times) increased when compared with healthy control. Administration of lipoic acid and pentoxiphyllin resulted in pronounced decrease of bacterial ly-popolysacharide stimulated IL-1 which might be seen as depended reaction of lymphocytes blast transformation along with the lessening of clinical manifestations of the disease. These changes were more manifested in comparison with that one observed in patients treated conventionally.
УДК: 616.379-008.64.8-036.22-8 Орлик О.С.
ЗВ'ЯЗОК М1Ж СУДИННИМИ ТА НЕВРОЛОГ1ЧНИМИ УСКЛАДНЕННЯМИ ЦУКРОВОГО Д1АБЕТУ
Нацюнальна медична акаде1^я пюлядипломноТ ocBi™ iM. П.Л.Шупика, кафедра дiабетолоп'', м.Кш'в
У cmammi представлен результаты вивчення взаемозв язку м1ж ступенем тяжкост{ д1абетич-ног полтейропатп i наявтстю у пацieнтiв мтро-i макросудинних ускладнень (дiабетичноi не-фро-i ретинопатп, тфаркту мюкарда та тсульту). Нами були обстежет 1510 хворих на цук-ровий дiабет (ЦД), що проходили лтування в 62 медичних центрах всiх регютв Украгни. Кри-терiем подшу груп з'явилася стутнь вираженостi неврологiчних симптомiв за шкалою NSS (Neurological Symptoms Score). Пащенти з тдексом до 5 балiв за шкалою NSS мали легку стутнь ДПН, у хворих з показниками вiд 5 до 10 балiв мала мкце середня стутнь вираженост1 ДПН, в той же час пащенти з показником понад 10 балiв за шкалою NSS склали групу з най-важчою ДПН. В результатi дослiдження був встановлений статистично значуща звязок мiж ступенем прояву дiабетичноi полтейропатп i наявтстю у пацiентiв судинних ускладнень, таких як дiабетична нефро-i ретинопатiя, тфаркт мюкарда та тсульт.
Ключовi слова: полЫейропа™, ретинопа™, нефропа™, Ыфаркт мюкарда, Ысульт.
Вступ
Цукровий дiабет — це важке хрошчне захво-рювання, що характеризуемся порушенням уах вифв обмшу речовин, та, насамперед, вуглево-дного. Цукровий дiабет (ЦД) широко розповсю-джений в уах кражах св^у. За даними ВОЗ, у свт нараховуеться бтьш ыж 250 млн хворих на ЦД. У Сполучених Штатах Америки та кра'нах бвропи розповсюдженють цього захворювання становить 5-6% та мае прогресивну тенденцш до подальшого зростання, особливо це стосу-еться вкових груп старших за 40 рош. Згщно даним 2002 року, ЦД був вщнесений до шести головних причин смертност в США. В УкраМ на офщшному облку , за даними МОЗ, знаходиться бтьш 1,2 мтьйона хворих на ЦД. Пщраховано, що серед жителiв розвинених кра'н кожен з 12
людей старших 65 рош страждае на ЦД [2,7].
Дiабетична полшейропа™ (ДПН)- найбтьш розповсюджене ускладнення ЦД, яке характеризуемся вираженим больовим синдромом, про-гресуючою загибеллю нервових волокон, що призводить до втрати чутливост та ранньо''' ш-валщизаци па^енлв [4].
У багатьох ендокринолопчних центрах св^у проводились дослщження чинниш, що призво-дять до розвитку ДПН [6,8]. Проаналiзовано роль у цьому процеа вку хворих, тривалост ЦД, показниш артерiального тиску, рiвня загального холестерину, триглiцеридiв, вживання алкоголю, куршня тютюну, наявност шших супутшх пато-логш та ускладнень ЦД [5]. Проте на нашу думку, недолками проведених дослщжень е вщсут-нють единих критерпв дiагностики ДПН i невелик когорти обстежених хворих, що i послужило
