Научная статья на тему 'Изменение электрокинетических свойств эритроцитов при их консервации'

Изменение электрокинетических свойств эритроцитов при их консервации Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

CC BY
436
64
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Журнал
Гематология и трансфузиология
WOS
Scopus
ВАК
CAS
RSCI
PubMed
Ключевые слова
ЭЛЕКТРОФОРЕТИЧЕСКАЯ ПОДВИЖНОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ / МОРФОЛОГИЯ ЭРИТРОЦИТОВ / ЭРИТРОЦИТАРНЫЕ МИКРОВЕЗИКУЛЫ / КОНСЕРВАЦИЯ ЭРИТРОЦИТОВ / ELECTROPHORETIC MOBILITY OF ERYTHROCYTES / ERYTHROCYTE MORPHOLOGY / ERYTHROCYTIC MICROVESICLES / ERYTHROCYTE PRESERVATION

Аннотация научной статьи по фундаментальной медицине, автор научной работы — Левин Григорий Яковлевич, Сухарева Е. Г.

Цель исследования изучение влияния консервации эритроцитов на электрофоретическую подвижность (ЭФП) и морфологию красных клеток крови. Эритроциты выделяли из крови 30 доноров, заготовленной в консерванте ЦФДА-1. ЭФП изучали с помощью светового микроскопа в специальной камере, в которую помещали Ag/AgCl-электроды. Морфологию эритроцитов изучали с помощью светового микроскопа Primo Star («Carl Zeiss», Германия). Микровезикулы (МВ) выделяли из суспензии эритроцитов с помощью ультрацентрифугирования при 100 000 g. Установлено, что при консервации эритроцитов происходит значительное снижение их ЭФП. Одной из важных причин этого является образование МВ, связанное, в том числе, с диск-сферической трансформацией эритроцитов: развивается выраженный анизоцитоз и пойкилоцитоз. Более быстрое и значительное изменение этих процессов происходит в предварительно отмытых эритроцитах, несмотря на то, что они также хранились в консервирующем растворе. Чем сильнее и быстрее происходят морфологические изменения эритроцитов, тем более выражено снижение их ЭФП и образование МВ.

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Похожие темы научных работ по фундаментальной медицине , автор научной работы — Левин Григорий Яковлевич, Сухарева Е. Г.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.

Changes in erythrocyte electrokinetic characteristics after their preservation

The effects of erythrocyte preservation on their electrophoretic mobility (EPM) and morphology were studied. Erythrocytes were isolated from the blood, collected in CPDA-1 preserving agent, in 30 donors. Electrophoretic mobility was studied under a microscope in a special box with Ag/AgCl electrodes. The morphology of erythrocytes was studied under a Primo Star microscope (Carl Zeiss, Germany). The microvesicles (MV) were isolated from erythrocyte suspension by ultracentrifugation at 100 000 g. The erythrocyte EPM reduced significantly after preservation. One of the causes of this reduction was MV formation, caused, among other things, by disk-spheric transformation of erythrocytes marked anisocytosis and poikilocytosis. These processes were more rapid in pre-washed erythrocytes, despite their storage in the same preserving solution. More intense and rapid morphological changes in erythrocytes were associated with greater reduction of their EPM and formation of MV.

Текст научной работы на тему «Изменение электрокинетических свойств эритроцитов при их консервации»

содержание ретикулоцитов было максимальным на второй неделе госпитализации и составило 65 ± 9%. У больных гемофилией с группой крови AB(IV) показатели эритроцитов и гемоглобина были наибольшими при поступлении и увеличивались уже ко второй неделе госпитализации.

Обсуждение

Полученные результаты свидетельствуют о разном гемопоэтическом потенциале у здоровых лиц при O(I) - AB(IV) группах крови, что подтверждается неодинаковым содержанием плазменного эритро-поэтина, разной антигенной структурой эритроцитов, разной концентрацией гемоглобина в одном эритроците. Известно, что МСНС - стабильный, генетически детерминированный показатель, связанный со структурой клетки [7].

О неодинаковом гемопоэтическом потенциале, ассоциированном с АВО-групповой принадлежностью крови, у больных гемофилией свидетельствовали разные сроки восстановления клеточного состава крови на фоне стандартной терапии, соответствующей содержанию дефицитного фактора свертывания. Статистически подтверждена связь развития постгеморрагической анемии различной степени тяжести с АВО-групповой принадлежностью крови. Результаты проведенных исследований позволят формировать группы повышенного риска тяжелых анемизирующих кровотечений, что откроет перспективы индивидуализировать систему вторичной профилактики и лечения геморрагического синдрома у больных гемофилией.

Выводы

1. У здоровых лиц с разной АВО-групповой принадлежностью крови выявлены антигенные и морфологические особенности эритроцитов, разное содержание плазменного эритропоэтина, что свидетельствует о неодинаковом эритропоэтическом потенциале.

2. При геморрагиях у больных гемофилией риск развития анемии ассоциирован с группой крови по системе АВО: при О(1)-группе крови высок риск развития тяжелой анемии на фоне желудочно-кишечных кровотечений, А(И)-группа крови является фактором риска развития анемии с затяжным течением,

О КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015 УДК 615.387.014.4.015.44

при В(Ш)-группе крови имеется риск легкой анемии. У больных гемофилией с АВ(ГУ)-группой крови анемии диагностированы в единичных случаях.

ЛИТЕРАТУРА [ R E F E R E N C E S ]

1. Косякова Ю.А., Давыдкин И.Л., Степанова Т.Ю., Куртов И.В., Кудинова Н.А. Оценка синдрома анемии при гемофилии. Вестник РУДН. 2010; 4: 258-60.

[Kosyakova Yu.A., Davydkin I.L., Stepanova T.Yu., Kurtov I.V., Kudi-nova N.A. Anemia syndrome assessment at hemophilia. Vestnik RUFP. 2010; 4: 258-60]. (in Russian)

2. Гильмиярова Ф.Н., Радомская В.М., Гергель Н.И., Гусякова О.А., Сидорова И.Ф. Группы крови: биологическая вариабельность клеточного состава и метаболизма в норме и патологии. М.: Известия; 2007.

[Gilmiyarova F.N., Radomskaya V.M., Gergel N.I., Gusyakova O.A., Sidoro-va I.F. Blood types: biological variability of cell-like .structure and a metabolism in norm and pathology. Moscow: Izvestiya; 2007]. (in Russian)

3. Гусякова О.А., Зубова И.А., Гильмиярова Ф.Н. Биологическая вариабельность основных гемостазиологических показателей, ассоциированная с групповой АВО-принадлежностью. В кн.: Давыдкин И.Л., Кондурцев В.А., Бобылев С.А. Основы клинической гемостазиологии. Самара: Офорт; 2009: 96-124.

[Gusyakova O.A., Zubova I.A., Gilmiyarova F.N. The biological variability of the main indexes of a hemostasis associated with blood types of system of ABO. In: Davydkin I.L., Kondurtsev V.A., Bobylev S.A. Bases of a clinical gemostaziology. Samara: Ofort; 2009: 96-124]. (in Russian)

4. Андреев Ю.Н., Баркаган З.С., Буевич Е.И., Вдовин В.В., Воробьёв А.И., Воробьёв П.А. и др. Национальные стандарты Российской Федерации. Протоколы ведения больных: Болезнь Виллебранда (ГОСТ Р 52600.1-2008). Гемофилия (Г0СТР52600.3-2008). М.: НЬЮДИАМЕД, 2009.

[Andreev Yu.N., Barkagan Z.S., Buevich E.I., Vdovin V.V., Vorobiov A.I., Vorobiov P.A., et al. National standards of the Russian Federation. Protocols of maintaining patients: Angiohemophilia (State standard specification P 52600.1-2008). Hemophilia (State standard specification P52600.3-2008). Moscow: NYUDIAMED; 2009]. (in Russian)

5. Покровский В.И., Брико Н.И., ред. Общая эпидемиология с основами доказательной медицины. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2008.

[Pokrovskiy V.I., Briko N.I., eds. The common epidemiology with fundamentals of evidential medicine. Moscow: GEOTAR-Media; 2008]. (in Russian)

6. Павлов А.Д., Морщакова Е.Ф., Румянцев А.Г. Эритропоэз, эритропоэтин, железо. Молекулярные и клинические аспекты. М.: ГЭОТАР-Медиа; 2011.

[Pavlov A.D., Morshchakova E.F., Rumyantsev A.G. Erythrogenesis, erythropoetin, iron. Molecular and clinical aspects. Moscow: GEOTAR-Media; 2011]. (in Russian)

7. Антонов В.С., Богомолова Н.В., Волков А.С. Автоматизация гематологического анализа. Интерпретация показателей гемограммы. Саратов: изд-во Саратовского медицинского университета; 2008.

[Antonov V.S., Bogomolova N.V., Volkov A.S. Automation of the hematological analysis. Interpretation of indexes of a hemogram. Saratov: Saratov State Medical University; 2008]. (in Russian)

Поступила 12.04.13 Received 12.04.14

ИЗМЕНЕНИЕ ЭЛЕКТРОКИНЕТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ ЭРИТРОЦИТОВ ПРИ ИХ КОНСЕРВАЦИИ

Левин Г.Я., Сухарева Е.Г.

ФГБУ Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии Минздрава России,

603155, г. Нижний Новгород, Россия

Резюме. Цель исследования - изучение влияния консервации эритроцитов на электрофоре-тическую подвижность (ЭФП) и морфологию красных клеток крови. Эритроциты выделяли из крови 30 доноров, заготовленной в консерванте ЦФДА-1. ЭФП изучали с помощью светового микроскопа в специальной камере, в которую помещали Ag/AgCl-электроды. Морфологию эритроцитов изучали с помощью светового микроскопа Primo Star («Carl Zeiss», Германия). Микровезикулы (МВ) выделяли из суспензии эритроцитов с помощью ультрацентрифугирования при 100 000 g. Установлено, что при консервации эритроцитов происходит значительное снижение их ЭФП. Одной из важных причин этого является образование МВ, связанное, в том числе, с диск-сферической трансформацией эритроцитов: развивается выраженный анизоцитоз и пойкилоцитоз. Более быстрое и значительное изменение этих процессов

происходит в предварительно отмытых эритроцитах, несмотря на то, что они также хранились в консервирующем растворе. Чем сильнее и быстрее происходят морфологические изменения эритроцитов, тем более выражено снижение их ЭФП и образование МВ.

Ключевые слова: электрофоретическая подвижность эритроцитов; морфология эритроцитов; эритроцитарные микровезикулы; консервация эритроцитов.

Для цитирования: Гематология и трансфузиология. 2015; 60 (1): 21-24.

CHANGES IN ERYTHROCYTE ELECTROKINETIC CHARACTERISTICS AFTER THEIR PRESERVATION

Levin G.Ya., Sukhareva E.G.

Nizhny Novgorod Institute of Traumatology and Orthopedics, Nizhny Novgorod, Russia.

S u m m a r y. The effects of erythrocyte preservation on their electrophoretic mobility (EPM) and morphology were studied. Erythrocytes were isolated from the blood, collected in CPDA-1 preserving agent, in 30 donors. Electrophoretic mobility was studied under a microscope in a special box with Ag/AgCl electrodes. The morphology of erythrocytes was studied under a Primo Star microscope (Carl Zeiss, Germany). The microvesi-cles (MV) were isolated from erythrocyte suspension by ultracentrifugation at 100 000 g. The erythrocyte EPM reduced significantly after preservation. One of the causes of this reduction was MV formation, caused, among other things, by disk-spheric transformation of erythrocytes - marked anisocytosis and poikilocytosis. These processes were more rapid in pre-washed erythrocytes, despite their storage in the same preserving solution. More intense and rapid morphological changes in erythrocytes were associated with greater reduction of their EPM and formation of MV.

Key words: electrophoretic mobility of erythrocytes; erythrocyte morphology; erythrocytic microvesicles; erythrocyte preservation.

Citation: Gematologiya i transfuziologiya. 2015; 60 (1): 21-24.

Биологическое состояние мембраны эритроцитов напрямую связано с поверхностным зарядом, о наличии которого можно судить по электрофоретической подвижности (ЭФП) [1]. Снижение отрицательного заряда, и, как следствие, ЭФП, изменяют, в частности, способность эритроцитов к агрегации, которая в значительной степени определяет реологические свойства крови и состояние микроциркуляции [2]. Установлены выраженные изменения электрофо-ретической подвижности эритроцитов (ЭФПЭ) при многих патологических состояниях [3]. Кроме того, ЭФПЭ уменьшается при старении клеток, в процессе которого изменяются структура и химические свойства мембраны. Значительные изменения физико-химических свойств эритроцитов происходят при их консервации: ухудшается их деформируемость, увеличивается концентрация гликированного гемоглобина, уменьшается взаимодействие между плазматической мембраной и цитоскелетом, что приводит к потере части мембраны за счет образования микровезикул (МВ) [4]. Вопрос о связи этих изменений с ЭФПЭ остается мало изученным.

Цель настоящего исследования - изучение взаимосвязи между ЭФП, морфологией эритроцитов и процессом образования эритроцитарных МВ.

Материал и методы

Эритроциты выделяли из крови 30 здоровых доноров. Кровь заготавливали в растворе гемоконсерванта

Для корреспонденции:

Левин Григорий Яковлевич, доктор мед. наук, профессор, руководитель отделения гравитационной хирургии и гемодиализа ФГБУ Нижегородский научно-исследовательский институт травматологии и ортопедии Минздрава России,

Адрес: 603155, Нижний Новгород, ул. Верхневолжская набережная, д. 18/1.

Телефон: +7(831) 436-21-80 E-mail: levin@unn.ac.ru

Corresponding author:

Levin Grigory, MD, PhD, DSc, prof. (levin@unn.ac.ru).

ЦФДА-1 («Green Cross Medical Corp.», Республика Корея) в соотношении 4:1, центрифугировали в течение 7 мин при 300 g, удаляли обогащенную тромбоцитами плазму, оставшуюся кровь центрифугировали в течение 20 мин при 2500g, отбирали оставшуюся плазму, удаляли лейко-цитарно-тромбоцитарную пленку. Эритроцитарную массу разделяли на 2 части. В первую часть (неотмытые эритроциты) добавляли гемоконсервант в соотношении 4:1 и хранили при температуре 4оС в течение 7, 14, 21 и 28 сут. Вторую часть эритроцитарной массы трижды отмывали раствором 0,9% натрия хлорида (центрифугировали при 2585g в течение 20 мин). Затем в нее также добавляли ге-моконсервант (4:1) и хранили в тех же условиях (отмытые эритроциты).

На 7, 14, 21, 28-е сутки хранения исследовали ЭФП и морфологию эритроцитов.

Суспензию эритроцитов (0,1%) помещали в трис-НС1 буфер (рН 7,4). При исследовании образец суспензии (опытный, контрольный) в объеме 40 мкл помещали в рабочую камеру оптической кюветы на предметном столике микроскопа, в которую помещали Ag/AgCl-электроды. Наблюдение за движением клеток вели при температуре 25оС и силе тока 8 мА через микроскоп, измеряя время прохождения клеткой расстояния 10 мкм. Фиксировали перемещение 10 клеток. Вычисляли среднее значение. Величину ЭФПЭ определяли по формуле: U = S/TH, где S - расстояние, на которое перемещалась клетка, Т - время перемещения клетки на расстояние S; Н - градиент потенциала. Величину градиента потенциала определяли по формуле: Н = I/gx, где I - сила тока, g - поперечное сечение камеры, x - удельная электропроводимость среды.

Морфологию эритроцитов определяли на микроскопе ("Karl Zeiss", Германия). В поле зрения светового микроскопа подсчитывали 100 клеток в 3 параллельных пробах. Изменение формы эритроцитов (количество дискоцитов, эхино-цитов, стоматоцитов, сфероцитов) в процессе хранения выражали в процентах от общего числа подсчитанных клеток.

На 7, 14, 21, 28-е сутки хранения выделяли эритроци-тарные МВ по методу E. Dey-Hazra и соавт. [5]. Затем МВ

осаждали с помощью ультрацентрифугирования на центрифуге Sorvall MX 150 Micro-Ultracentrifuge ("Thermo Scientific", США) при 100 000 g в течение 60 мин [6], осадок растворяли в трис-НС1 буфере.

Результаты исследований обработаны с использованием методов непараметрической статистики (критерий парных сравнений Вилкоксона и коэффициента ранговой корреляции Спирмена) при помощи пакета прикладных программ Statistica 6.0.

Результаты

ЭФПЭ значительно снижалась уже к 7-м суткам консервации, причем более значительно в предварительно отмытых эритроцитах, хранившихся в консерванте (табл. 1). В дальнейшем ЭФПЭ оставалась на низком уровне, хотя к 14-м суткам консервации в неотмытых эритроцитах она статистически значимо повышалась, а затем опять существенно снижалась по отношению к контролю. К 21-м суткам консервации она становилась в 2,5 раза ниже исходного уровня, причем разница в ЭФП отмытых и неотмытых эритроцитов практически нивелировалась. Для подтверждения роли консервации эритроцитов в их ЭФП проведены исследования, в которых отмытые эритроциты хранились сутки без консерванта. При этом ЭФП снижалась более значительно (в среднем в 1,8 раза), чем при хранении в консервирующем растворе.

При исследовании изменения морфологии эритроцитов установлено, что в процессе консервации прогрессивно уменьшалось количество дискоци-тов, нарастало количество сфероцитов, эхиноцитов и в меньшей степени - стоматоцитов (табл. 2). Уже спустя неделю консервации развивался выраженный анизоцитоз. При небольших сроках консервации диск-сферическая трансформация эритроцитов была значительно более выражена в отмытых красных клетках крови, чем в контроле (p < 0,05). В поздние сроки (к 21-м суткам хранения) морфология отмытых и неотмытых эритроцитов практически сравнивалась (p > 0,05, при сравнении процента содержания дискоцитов, эхиноцитов, стоматоцитов и сферо-цитов в отмытой и неотмытой пробах).

Таким образом, при консервации эритроцитов развивались выраженные анизоцитоз и пойкилоцитоз клеток, что сопровождалось значительным снижением ЭФПЭ. Более быстрое и значительное изменение этих процессов происходило в предварительно отмытых эритроцитах, несмотря на то, что они также хранились в консервирующем растворе. Можно пола-

Таблица 1

Изменение ЭФП эритроцитов в процессе консервации (контроль 7,79 ± 0,075 мкм-см/В-с)

Время консервации, сут ЭФП отмытых эритроцитов, мкм-см/В-с ЭФП не отмытых эритроцитов, мкм-см/В-с

7-е 2,93 ± 0,100* 3,61 ± 0,117*

14-е 3,3 ± 0,035* 10,7 ± 0,083*

21-е 3,31 ± 0,118* 3,21 ± 0,097*

28-е 5,75 ± 0,126* 3,35 ± 0,093*

Примечание. Здесь и в табл. 2: * - р < 0,05 - статистически значимые различия показателей в сравнении с контролем, критерий Вилкоксона.

гать, что это связано с повреждением эритроцитов в процессе многократного центрифугирования.

Одной из важных причин снижения ЭФПЭ и диск-сферической трансформации эритроцитов является образование МВ в процессе консервации. Мы установили, что количество МВ, выделенных из отмытых эритроцитов на 7-е сутки консервации в 2,7 раза превышало их количество по сравнению с 1-ми сутками консервации, из неотмытых эритроцитов — в 2 раза. Отмечена высокая корреляционная зависимость между повышением количества МВ, выделенных в процессе консервации, и снижением количества дискоцитов как в отмытых, так и в неот-мытых эритроцитах (Я = -0,9; p = 0,037 и Я = -0,94; p = 0,005), а также между количеством МВ и числом сфероцитов (Я = 0,94; p = 0,005 в отмытых и Я = 0,95; p = 0,005 в неотмытых эритроцитах).

Обсуждение

Значительное увеличение везикуляции при хранении эритроцитов отмечено в ряде исследований [7, 8]. Известно также, что изменение формы эритроцитов коррелирует с изменением трансмембранного потенциала клеток [9]. При образовании эхиноцитов на мембране эритроцитов происходит перераспределение отрицательного заряда, образуются дискретные области с сильным отрицательным зарядом [10]. Именно эти области «отсекаются» при образовании МВ, которые и несут на себе отрицательный заряд. В процессе консервации происходит и перераспределение фосфолипидов мембраны: отрицательно заряженный фосфатидилсерин переходит как на внешний слой мембраны [11, 12], так и на мембраны МВ. В связи с тем, что количество образующихся в процессе консервации МВ в неотмытых эритроцитах ниже, чем в предварительно отмытых, отрицательно

Таблица 2

Изменение морфологии эритроцитов в процессе консервации

Время консерва- Отмытые эритроциты Неотмытые эритроциты

ции, сут дискоциты, % эхиноциты, % стоматоциты, % сфероциты, % дискоциты, % эхиноциты,% стоматоциты, % сфероциты,%

Контроль 93 ± 2,12 2 ± 0,65 3 ± 0,71 2 ± 0,83 93 ± 2,12 2 ± 0,65 3 ± 0,71 2 ± 0,83

7-е 42 ± 2,14* 45 ± 2,12* 9 ± 0,57* 4 ± 0,48 63 ± 2,35* 21 ± 1,8* 12 ± 1,41* 4 ± 1,03

14-е 38 ± 1,08* 43 ± 1,65* 8 ± 0,63* 11 ± 1,22* 41 ± 3,2* 38 ± 3,11* 14 ± 0,96* 7 ± 0,63*

21-е 39 ± 3,12* 36 ± 3,22* 13 ± 2,29* 12 ± 1,89* 40 ± 2,61* 35 ± 0,85* 16 ± 2,66* 9 ± 0,65*

28-е 21 ± 1,8*, ** 49 ± 1 19*, ** 3 ± 1,11** 27 ± 0,65*, ** 29 ± 0,65* 41 ± 0,91* 18 ± 0,71* 12 ± 0,29*

Примечание. ** -р < 0,05 - статистически значимые различия показателей в сравнении неотмытых и отмытых эритроцитов, критерий Вилкоксона.

заряженный фосфатидилсерин может накапливаться на внешней стороне мембраны и обусловливать увеличение ЭФП на 14-е сутки консервации неотмытых эритроцитов. В более поздних сроках консервации процесс везикуляции в неотмытых эритроцитах значительно усиливается, что и является, по-видимому, причиной падения их ЭФП.

Таким образом, при консервации эритроцитов происходит значительное снижение их ЭФП. Одной из важных причин этого является образование МВ, связанное, в том числе, с диск-сферической трансформацией эритроцитов. В свою очередь, усиление везикуляции эритроцитов приводит к образованию сфероцитов. Чем сильнее и быстрее происходят морфологические изменения эритроцитов, тем более выражено снижение их ЭФП и образование МВ.

ЛИТЕРАТУРА [REFERENCES]

1. Козинец Г.И., Попова О.В., Будник М.И., Шмаров Д.А., Погорелов В.М., Проценко Д.Д. и др. Электрический заряд клеток крови. М.: Практическая медицина; 2007.

[Kozinets G.I., Popova O.V., Budnik M.I., Shmarov D.A., Pogorelov V.M., Protsenko D.D., eds. Electric charge of blood cells. Moscow: Prakticheskaya meditsina; 2007]. (in Russian)

2. Левин Г.Я., Шереметьев Ю.А. Роль N-ацетилнейраминовой кислоты и отрицательного заряда эритроцитов в их агрегации. Проблемы гематологии и переливания крови. 1981; 6: 6-8.

[Levin G.Ya., Sheremet'ev Yu.A. The role of the N-acetylneuraminic acid and the negative charge of erythrocytes in the process of erythrocytes aggregation. Problemy gematologii i perelivaniya krovi. 1981; 6: 6-8]. (in Russian)

3. Dobrzynska Г., Szachowicz-Petelska B., Skrzydlewska E., Figaszewski Z.A. Protective effect of green tea on electric prop-

O КОЛЛЕКТИВ АВТОРОВ, 2015

УДК 618.3-06:616.151.5]:575.174.015.3]-084

erties of rat erythrocytes membrane during ethanol intoxication. J. Environmental Biol. 2006; 27(2): 161-6.

4. Kriebardis A.G., Antonelou M.H., Stamoulis K.E., Economou-Pe-tersen E., Margaritis L.H., Papassideri I.S. Progressive oxidation of cytoskeletal proteins and accumulation of denatured hemoglobin in stored red cells. J. Cell Mol. Med. 2007; 11(1): 148-55.

5. Dey-Hazra E., Hartel B., Kirsch T., Woywodt A., Lovric S., Haller H., et al. Detection of circulating microparticles by flow cytometry: influence of centrifugation, filtration of buffer, and freezing. Vasc. Health Risk Manag. 2010; 6: 1125-33. doi: 10.2147/VHRM.S13236.

6. Chung S.M., Bae O.N., Lim K.M., Noh J.Y., Lee M.Y., Jung Y.S., et al. Lysophosphatidic acid induces thrombogenic activity through phosphatidylserine exposure and procoagulant microvesicle generation in human erythrocytes. Arterioscler Thromb. Vasc Biol. 2007; 27(2): 414-21.

7. Lawrie A.S, Albanyan A., Cardigan R.A., Mackie I.J., Harrison P. Microparticle sizing by dynamic light scattering in freshfrozen plasma. Vox Sang. 2009; 96(3): 206-12.

8. Rubin О., Crettaz D., Tissot J.-D., Lion N. Microparticles in stored red blood cells: submicron clotting bombs? Blood Trans-fus. 2010; 8(3): 31-8.

9 Hartmann J., Glaser R. The influence of chlorpromazine on the potential-induced shapes-change of human erythrocytes. Biosci. Rep. 1994; 11(4): 213-21.

10. Marikovsky Y. The cytoskeleton in ATP-depended erythrocytes6 the effects of shape transformation. Mech. Ageing Dev. 1996; 86(2): 137-44.

11. Bosman G.J., Werre J.M., Willekens F.L., Novotny V.M. Eryth-rocyte ageing in vivo and in vitro: structural aspects and implications for transfusion. Transfus. Med. 2008; 18(6): 335-47. doi: 10.1111/j.1365-3148.2008.00892.x.

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

12. Lhermusier T., Chap H., Payrastre B. Platelet membrane phos-pholipid asymmetry: from the characterization of a scramblase activity to the identification of an essential protein mutated in Scott syndrome. J. Thromb. Haemost. 2011; 9(10): 1883-91. doi: 10.1111/j.1538-7836.2011.04478.x.

Поступила 27.06.14 Received 27.06.14

ПРОФИЛАКТИКА АКУШЕРСКИХ ОСЛОЖНЕНИЙ, АССОЦИИРОВАННЫХ С ПОЛИМОРФИЗМАМИ ГЕНОВ ТРОМБОФИЛИИ

Шифман Е.М.1, Баринов С.В.2, Долгих В.Т.2, Медянникова И.В.2, Блауман С.И.3

1ФГБОУ ВПО Российский университет дружбы народов Минобрнауки РФ, г. Москва; 2ГБОУ ВПО Омская государственная медицинская академия Минздрава РФ, г. Омск;3БУЗОО Клинический родильный дом № 6, г. Омск

Резюме. У 343 беременных с акушерскими осложнениями изучали структуру полимофизмов генов тромбофилии и коагуляционные нарушения системы гемостаза в IIIтриместре по даннымлабораторно-инструментального исследования. Результаты проведенного исследования позволяют с большой долей вероятности предположить, что аллельный вариант 677Т гена MTHFR и 4в/5в-полиморфизм гена PA1-1 вносят значительный вклад в развитие преэклампсии в исследуемой популяции и могут быть учтены при разработке патогенетически обоснованных мер профилактики гестационных осложнений. При изменениях в гемостазиологических тестах у пациенток с акушерскими осложнениями для диагностики гестационной коагулопатии рекомендована тромбоэластография. Необходимость коррекции гемостазиологических нарушений определяется на основании параметров образующегося сгустка (чувствительность 80%, специфичность 82%). Беременным с акушерскими осложнениями на фоне полиморфизмов генов тромбофилии показана патогенетически обоснованная коррекция гемостазиологических нарушений: назначение низкомолекулярного гепарина и/или ацетилсалициловой кислоты в комплексе с фолиевой кислотой, витаминами группы В.

Ключевые слова: акушерские осложнения; гемостаз; наследственная тромбофилия; тромбо-эластография.

Для цитирования: Гематология и трансфузиология. 2015; 60 (1): 24-28.

PREVENTION OF OBSTETRIC COMPLICATIONS ASSOCIATED WITH THROMBOPHILIA GENE POLYMORPHISMS

Shifman E.M.1, BarinovS.V.2, Dolgikh V.T.2, Medyannikova IV.2, Blauman S.I.3

1Russian University of Peoples' Friendship, 117198, Moscow, Russia; Omsk State Medical Academy, 644043, Omsk, Russia;

3Clinical Maternity Hospital No 6,644112, Omsk, Russia

Summary. The structure of thrombophilia gene polymorphisms and disorders in the haemostasis are studied in 343 patients with obstetrical complications (main group) during the third trimester of the pregnancy. We revealed an important contribution of MTHFR gene allele variant 677T and of PA1-1 gene 4G/5G

i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.