ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕЩЕЙ РОДА DERMACENTOR (ACARI; IXODIDAE) НА ЕСТЕСТВЕННУЮ ВСТРЕЧАЕМОСТЬ ВОЗБУДИТЕЛЯ ТУЛЯРЕМИИ В УСЛОВИЯХ ЦЕНТРАЛЬНОГО ПРЕДКАВКАЗЬЯ

Лазаренко Е. В.; Гнусарева О. А.; Шапошникова Л. И.; Дубянский В. М.

Научная статья

УДК 619:576.895.421:579.841.95

сЫ: 10.31016/1998-8435-2021-15-4-29-35

исследования клещей рода Dermacentor (Асам; ixodidae) на естественную встречаемость возбудителя туляремии в условиях Центрального Предкавказья

1 2- 3 4 Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей благополучия человека, Ставрополь, Россия

1 lazarenko-eva@vail.ru, https://orciC.org/0000-0002-1748-9696

2 gnusarevao@mail.ru, https://orciC.org/0000-0002-9044-1808

3 mila.nikova.72@mail.ru, https://orciC.org/0000-0002-3207-6742

4 Cvmplagua@gmail.com

Цель исследований: оценка естественной встречаемости Francisella tularensis в клещах рода Dermacentor; выяснение связи физиологического возраста и зараженности клещей возбудителем туляремии.

Материалы и методы. За период с 2015 по 2019 гг. на зараженность туляремией исследовано 8449 экз. Dermacentor marginatus (916 пулов), 8674 экз. D. reticulatus (705 пулов) и 109 экз. D. niveus (40 пулов). Для оценки зависимости обнаружения возбудителя туляремии в клещах разного физиологического возраста нами за период с 2016 по 2019 гг. исследовано 2440 экз. D. marginatus (360 пулов) и 3349 экз. D. reticulatus (412 пулов). Исследования на зараженность иксодовых клещей возбудителем туляремии проводили в лаборатории природно-очаговых инфекций Ставропольского противочумного института. Пулы иксодовых клещей исследовали на наличие ДНК возбудителя туляремии с использованием наборов реагентов для выявления ДНК Francisella tularensis методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени.

Результаты и обсуждение. Зараженность клещей возбудителем туляремии в Центральном Предкавказье в разные годы колеблется в пределах 0,044-1,127% у D. marginatus и 0,035-1,455% у D. reticulatus. В наибольшем количестве F. tularensis выделяли от клещей III физиологического возраста. Для клещей D. reticulatus не выявлено статистически значимой зависимости обнаружения возбудителя туляремии от физиологического возраста.

Ключевые слова: иксодовые клещи, Dermacentor reticulatus, Dermacentor marginatus, Francisella tularensis, туляремия, зараженность, физиологический возраст

Прозрачность финансовой деятельности: никто из авторов не имеет финансовой заинтересованности в представленных материалах или методах.

Конфликт интересов отсутствует

Для цитирования: Лазаренко Е. В., Гнусарева О. А., Шапошникова Л. И., Дубянский В. М. Исследования клещей рода Dermacentor (Acari; Ixodidae) на естественную встречаемость возбудителя туляремии в условиях Центрального Предкавказья // Российский паразитологический журнал. 2021. Т. 15. № 4. С. 29-35. https://doi.org/10.31016/1998-8435-2021-15-4-29-35

Евгения Владимировна Лазаренко 1, Ольга Александровна Гнусарева 2, Людмила Ивановна Шапошникова 3, Владимир Маркович Дубянский 4

4

Аннотация

Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License. The content is available under Creative Commons Attribution 4.0 License.

Original article

studies of ticks of the genus Dermacentor (Acari; ixodidae) on the natural occurrence of tularemia pathogen in the conditions of the Central pre-Caucasian region

Evgeniya v. Lazarenko 1, Olga A. Gnusareva2, Ludmila I. Shaposhnikova 3,

Vladimir M. Dubyansky 4

i, 2, 3, 4 Stavropol Anti-Plague Research Institute of the Federal Service for Surveillance on Consumer Rights Protection and Human Wellbeing, Stavropol, Russia

1 lazarenko-eva@vail.ru, https://orcid.org/0000-0002-1748-9696

2 gnusarevao@mail.ru, https://orcid.org/0000-0002-9044-1808

3 mila.nikova.72@mail.ru, https://orcid.org/0000-0002-3207-6742

4 dvmplagua@gmail.com

Abstract

The purpose of the research is the assessment of the Francisella tularensis occurrence in nature in ticks of the genus Dermacentor; understanding the physiological age in terms of tick infection with tularemia pathogen.

Materials and methods. For the period from 2015 to 2019, we examined 8449 specimens of Dermacentormarginatus (916 pools), 8674 specimens of D. reticulatus (705 pools), and 109 specimens of D. niveus (40 pools) for tularemia infection. To assess the dependence of tularemia pathogen found in ticks of different physiological ages, we examined 2440 specimens of D. marginatus (360 pools), and 3349 specimens of D. reticulatus (412 pools) for the period from 2016 to 2019. Studies of ixodid ticks infected with tularemia pathogen were performed by the Natural Focal Infection Laboratory of the Stavropol Anti-Plague Institute. Pools of ixodid ticks were examined for the pathogen DNA of tularemia using reagent kits for identifying Francisella tularensis DNA by polymerase chain reaction with fluorescence hybridization of results recorded in real time.

Results and discussion. The infection rate of the tularemia pathogen in ticks in the Central Pre-Caucasian region ranged from 0.044-1.127% in D. marginatus and 0.035-1.455% in D. reticulatus in different years. The greatest number of F. tularensis was isolated from the III physiological age ticks. For D. reticulatus ticks, no statistically significant dependence of the detected tularemia pathogen on physiological age was found.

Keywords: ixodid ticks, Dermacentor reticulatus, Dermacentor marginatus, Francisella tularensis, tularemia, infection rate, physiological age

Financial Disclosure: none of the authors has financial interest in the submitted materials or methods. There is no conflict of interests

For citation: Lazarenko E. V., Gnusareva O. A., Shaposhnikova L. I., Dubyansky V. M. Studies of ticks of the genus Dermacentor (Acari; Ixodidae) on the natural occurrence of tularemia pathogen in the conditions of the Central Pre-Caucasian region. Rossiyskiy parazitologicheskiy zhurnal = Russian Journal of Parasitology. 2021; 15 (4): 29-35. (In Russ.).

https://doi.org/10.31016/1998-8435-2021-15-4-29-35

Введение

Клещи рода Dermacentor Koch, 1844 на территории Центрального Предкавказья представлены тремя видами. Обычными и распространенными являются Dermacentor reticulatus (Fabricius, 1894) и D. marginatus (Sulzer, 1776).

Наибольшей численности эти виды достигают в лесостепной зоне. Обитают в различного типа степях, луговых и кустарниковых биотопах, приопушечных пространствах, лесополосах. Обитание третьего вида - D. niveus Neumann, 1897 известно только в восточной

части рассматриваемой территории (Терско-Кумское междуречье). Это наиболее редкий и малоизученный вид рода.

Широкое распространение на территории Центрального Предкавказья, высокая численность и длительный период активности имаго указывают на большое эпидемиологическое значение клещей рода БегшасепЮг. Представителям рода отводится ведущая роль в очагах туляремии на изучаемой территории.

Туляремия - актуальное инфекционное заболевание для региона. Активность природного очага туляремии на данной территории подтверждена выделением штаммов возбудителя туляремии из иксодовых клещей, мелких млекопитающих и воды открытых водоемов. Трансмиссивный тип заболевания людей в общей структуре заболеваемости составляет 2,0% [2].

Показатель физиологического возраста (ФВ) является важным критерием состояния природных популяций иксодовых клещей и имеет важное эпидемиологическое значение. С физиологическим возрастом иксодовых клещей связаны их жизнеспособность, активность, агрессивность. Особое значение имеет связь между возрастом клещей и их восприимчивостью к патогенам [4, 6].

Цель работы - оценка естественной встречаемости Е Ш1агет1$ в клещах рода БегшасепЮг; выяснение связи физиологического возраста и зараженности клещей возбудителем туляремии.

Материалы и методы

В период с 2015 по 2019 гг. на зараженность туляремией исследовано 8449 экз. В. та^таШв, из которых сформировано 916 пулов, 8674 экз. В. ШкиШш (705 пулов) и 109 экз. В. туеив (40 пулов).

Для оценки зависимости обнаружения возбудителя туляремии в клещах разного физиологического возраста нами за 2016-2019 гг. исследовано 2440 экз. В. та^таШв (360 пулов), 3349 экз. В. ШкиШш (412 пулов).

Исследования на зараженность иксодовых клещей возбудителем туляремии проводили в лаборатории природно-очаговых инфекций Ставропольского противочумного института в соответствии с нормативно-методическими документами [МУ 3.1.2007-05; МУК 4.2.293911]. Пулы иксодовых клещей исследовали методом ПЦР на наличие ДНК возбудителя

туляремии с использованием наборов реагентов для выявления ДНК Francisella tularensis методом полимеразной цепной реакции с гибридизационно-флуоресцентным учетом результатов в режиме реального времени (Ген F. tularensis - РГФ) (производства ФКУЗ РосНИПЧИ «Микроб», Саратов). Выделение ДНК проводили с использованием набора реагентов «Рибо-Преп» (производства ФБУН ЦНИИЭ Роспотребнадзора, Москва).

Процент зараженных клещей в популяции (Х) рассчитывали по формуле Беклемишева:

где log N - десятичный логарифм общего числа исследований; log no - десятичный логарифм числа исследований, давших отрицательный результат; m - число эктопаразитов в пробе (пробах).

Статистическую обработку данных проводили с использованием Statistica 10.0, анализ таблиц сопряжённости - с использованием критерия х2 (Chi-square, хи-квадрат) с поправкой Йейтса, если хотя бы одна частота была меньше 10 c последующей проверкой связи искомой переменной относительно других категорий.

Визуальную оценку возраста осуществляли, используя признаки, предложенные И. В. Разумовой [3]: полноту тела, внешний вид кутикулы (морщинистость, цвет), просматрива-емость сквозь кутикулу отдельных внутренних органов.

По внешним признакам отобраны наиболее различающиеся по физиологическому возрасту особи. Выделены три возрастные группы: молодые (II физиологический возраст), зрелые (III физиологический возраст) и старые (IV физиологический возраст). Для определения состояния клещей использовали световой бинокулярный микроскоп МБС-10.

Результаты и обсуждение

В 2015 г. исследовано 1912 экз. клещей В. marginatus и 2863 экз. клещей В. reticulatus, из которых составлено 229 и 230 проб соответственно. ДНК возбудителя туляремии обнаружена в восьми пробах В. marginatus и в одной пробе В. reticulatus. Число зараженных проб составило 3,49 и 0,43% соответственно.

В 2016 г. исследовано 702 экз. О. та^таШв, 1104 экз. О. ШкиШш и 59 экз. О. тугие. ДНК возбудителя туляремии обнаружена в шести пробах О. та^таШв (6,97%), в восьми пробах О. ШкиШш (11,76%) и в двух пробах О. тугие (11,76%).

В 2017 г. из исследованных 233 проб клещей О. та^таШв и 179 проб О. ШкиШш ДНК возбудителя туляремии обнаружена соответственно в 29 (12,45%) и 24 (13,40%) пробах.

В 2018 г. на наличие ДНК Е Ы1аггт1$ исследовано 2253 экз. О. та^таШв (263 пробы), 1775 экз. О. ШкиШш (228 проб) и 44 экз. О. тугие (18 проб). Положительные ре-

зультаты получены в одной пробе (0,38%) из клещей О. та^таШз и в семи пробах (2,63%) из клещей О. ШкиШш. Пробы, составленные из клещей О. тугие, не дали положительных результатов.

В 2019 г. исследовано 818 экз. клещей О. та^таШв (105 проб), из которых пять (4,7%) дали положительный результат. Из 1149 экз. клещей О. ШкиШш (154 пробы), две (1,3%) дали положительный результат. При исследовании 6 экз. клещей О. тугш (пять проб) положительных результатов не получено.

Данные по изучению зараженности иксо-довых клещей приведены в табл. 1.

Таблица 1 [Table 1]

Зараженность иксодовых клещей рода Dermacentor возбудителем туляремии в природной популяции в 2015-2019 гг. [Infection of Ixodid ticks of the genus Dermacentor with tularemia pathogen in the natural population in 2015-2019]

Год исследований [Year of research] Процент зараженности клещей [Tick infection percentage]

D. marginatus D.reticulatus D. niveus

2015 0,428 0,035 -

2016 0,882 0,773 3,683

2017 1,127 1,455 -

2018 0,044 0 0

2019 0,632 0,176 0

Зараженность клещей неодинакова в различных ландшафтных зонах. Наибольшее число положительных результатов получено от голодных клещей, собранных с растительности в лесостепной ландшафтной зоне -32,8% О. та^таШв и 31,6% О. ШкиШш (от общего числа положительных результатов, полученных от голодных клещей). В предгорной ландшафтной зоне больше положительных проб получено от клещей О. тгйсиЫЫв

- 15,8%. От О. та^шаШв установлено девять положительных проб, что составило 11,8%. В степной ландшафтной зоне положительные результаты получены только от О. та^таШз

- 6,6%. В полупустынной ландшафтной зоне одну положительную пробу (1,3%) дали клещи О. ШкиШш.

Результаты изучения зависимости частоты естественной встречаемости возбудителя туляремии от физиологического возраста иксо-дид в течение четырех (2016-2019 гг.) сезонов активности приведены в табл. 2.

При исследовании иксодовых клещей воз-

будителя туляремии преимущественно выделяли от клещей D. marginatus. Этот вид в природных условиях тесно связан в своем развитии с грызунами. Возбудитель туляремии передается клещами D. marginatus транс-фазово, что обеспечивает его длительное сохранение в природном очаге.

Наши исследования указывают на достоверную связь между физиологическим возрастом клещей D. marginatus и выявляемо-стью возбудителя туляремии в них. Значение хи-квадрата Пирсона для вида D. marginatus равно 23,60153 при числе степеней свободы df = 2 и уровне значимости Р = 0,00001. Также имеется достоверно выраженная связь более редкого обнаружения зараженных клещей II физиологического возраста по сравнению с экземплярами III (Р = 0,00000) и IV (Р = 0,000003) физиологического возраста.

Не обнаружено разницы в зараженности клещей вида D. reticulatus в зависимости от физиологического возраста. Значение хи-квадрата Пирсона для данного вида равно

■Q

¿3

ш к

г

ф

л

m О m Ф

s т s г ш Z ш X

и ш а

m О m

О ^

о £ и Ф т

s ^

о г о s m S

о t—

о z

m ш

а

^

iНе можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.

С

Ï? <3

с

ф

о

ш а

о ф и с

Ф

(Л ф

^

а

ф

ф w ш

о

с

ф

I

О s

с с

I?

с

ф г

К

s

X

ш m о

Ч

ф г

и

О

тз

3

л

m Ф

а.

ф ос

л ч-« о « îrt <а с R 3 « О I ! г о 0) -С <о О экз. 1159 1875 1Л № 3349 m 1282 4 5 2439

Ä S СЛ 'S« £ С л» ¡и л В -0 S t- w ° s S? ^ ^ MS « .2 s ü i £ it i И M(Î 3 £ 2,36 4,45 0,93 7,73 1,48 6,85 2,91 11,23

Svi—i « S * ;; "■s ^ 0) V ® c" töO s ^ CT s « .2 se .a ¡a frliSg ^ ~ 1 ë 2 « 3 £ 32,25 51,54 8,48 92,27 M 22,66 45,72 19,39 88,77

a n ® чн S « й ° «s-* <u H i .ii ji ■H S R П й £S £ s i « Л £ «"l-S § is § ¡5 S £ F экз. 1080 1726 4 со 2 3090 7 5 1115 3 4 2165

Физиологический возраст [Physiological age] ö И Итого [Total] Ö Итого [Total]

3,447288 при числе степеней свободы df = 2 и уровне значимости Р = 0,17841.

Заключение

Результаты наших исследований показали, что зараженность клещей возбудителем туляремии в природных популяциях Центрального Предкавказья колеблется по годам. Максимальный процент зараженных клещей в популяции наблюдали в 2017 г. - 1,127 у D. marginatus и 1,455 - у D. reticulatus, минимальный процент в 2018 г. - 0,044 у D. marginatus. Возбудитель туляремии в клещах D. reticulatus в 2018 г. не обнаружен. Положительные результаты от клещей D. niveus за время исследования были получены только в 2016 г. (3,683%).

Зараженность клещей неодинакова по различным ландшафтным зонам. Наибольшее число положительных результатов получено от голодных клещей, собранных с растительности в лесостепной ландшафтной зоне, наименьшее - в полупустынной ландшафтной зоне.

При изучении естественной зараженности клещей D. marginatus возбудителем туляремии в зависимости от их физиологического возраста в наибольшем проценте случаев (и в наибольшем количестве) F. tularensis выделяли от клещей III физиологического возраста.

Для клещей D. reticulatus не выявлено статистически значимой зависимости обнаружения возбудителя туляремии от физиологического возраста.

Согласно данным некоторых исследователей [1, 5], зараженность патогенами увеличивает двигательную активность и усиливает реакцию на прокормителя у клещей III физиологического возраста. В связи с этим, они выступают как более активные переносчики патогенов, чем клещи других физиологических возрастов.

Таким образом, в Центральном Предкавказье из клещей рода Dermacentor наиболее успешными переносчиками возбудителя туляремии являются иксо-довые клещи D. marginatus III физиологического возраста.

список источников

1. Алексеев А. Н. Система клещ - возбудитель и её эмерджентные свойства. СПб.: изд-во РАН, 1993. 204 с.

2. Зайцев А. А., Гнусарева О. А., Агапитов Д. С., Остапович В. В., Котенев Е. С. Эпидемические типы заболевания людей туляремией на территории Ставропольского края в период эпидемических проявлений различной интенсивности 2003-2017 гг. // Здоровье населения и среда обитания. Ставрополь, 2018. С. 153-158.

3. Разумова И. В. Определение физиологического возраста живых иксодовых клещей // Медицинская паразитология и паразитарные болезни. 2001. Т 3. С. 16-22.

4. Разумова И. В., Алексеев А. Н. Влияние физиологического возраста клещей Dermacentor marginatus (Ixodidae) на их заражение и проникновение вируса клещевого энцефалита в слюну // Паразитология. 1991. Т. 25. Вып. 2. С. 147-155.

5. Семенкова Л. О., Буренкова Л. А., Лопатина Ю. В., Наумов Р. Л. Зараженность боррелия-ми Borrelia burgdorferi s.l. и поведение клещей Ixodes ricinus различного физиологического возраста (Московская область) // Материалы IV Всероссийского Съезда Паразитологическо-го общества при РАН «Паразитология в XXI веке - проблемы, методы, решения». Санкт-Петербург, 2008. Т. 3. С. 131-135.

6. Uspensky I. Physiological age of ixodid ticks: aspects of its determination and application. J. Med. Entomol. 1995; 32. 751-764.

Статья поступила в редакцию 14.05.2021; принята к публикации 15.10.2021

Об авторах:

Лазаренко Евгения Владимировна, Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора (355005, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15), Ставрополь, Россия, биолог лаборатории медицинской паразитологии, ОРСЮ Ю: 0000-0002-1748-9696, lazarenko-eva@vail.ru

Гнусарева Ольга Александровна, Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора (355005, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15), Ставрополь, Россия, биолог лаборатории медицинской паразитологии, ОРСЮ Ю: 00000002-9044-1808, gnusarevao@mail.ru

Шапошникова Людмила Ивановна, Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора (355005, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15), Ставрополь, Россия, кандидат биологических наук, ОРСЮ Ю: 0000-0002-3207-6742, mila.nikova.72@mail.ru

Дубянский Владимир Маркович, Ставропольский противочумный институт Роспотребнадзора (355005, г. Ставрополь, ул. Советская, 13-15), Ставрополь, Россия, доктор биологических наук, dvmplagua@gmail.com

Вклад соавторов:

Лазаренко Е. В. - критический анализ материалов, обзор исследований по проблеме. Гнасарева О. А. - идентификация возбудителя туляремии в полевом материале. Шапошникова Л. И. - критический анализ материалов, обзор исследований по проблеме. Дубянский В. М. - научное руководство, критический анализ материалов и формирование выводов.

Авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

References

1. Alekseev A. N. The tick-pathogen system and its emergent properties. SPb.: Publishing House of the Russian Academy of Sciences, 1993; 204. (In Russ.)

2. Zaytsev A. A., Gnusareva O. A., Agapitov D. S., Ostapovich V. V., Kotenev E. S. Epidemic types of tularemia in humans in the Stavropol Territory during the period of epidemic process manifestations of varying intensity in 2003-2017. Zdorovye naseleniya i sreda obitaniya = Public health and habitat. Stavropol, 2018; 153-158. (In Russ.)

3. Razumova I. V. Physiological age determination of live ixodid ticks. Meditsinskaya parazitologiya i parazitarnyye bolezni = Medical parasitology and parasitic diseases. 2001; 3. 16-22. (In Russ.)

4. Razumova I. V., Alekseev A. N. Influence of the physiological age of Dermacentor marginatus

(Ixodidae) ticks on their infection and penetration of the tick-borne encephalitis virus into saliva. Parazitologiya = Parasitology. 1991; 25 (2): 147-155. (In Russ.)

5. Semenkova L. O., Burenkova L. A., Lopatina Yu. V., Naumov R. L. Borrelia infection of Borrelia burgdorferi s.l. and behavior of Ixodes ricinus ticks of various physiological age (Moscow Region). Materialy IV Vserossiyskogo S'yezda Parazitologicheskogo obshchestva pri RAN «Parazitologiya v XXI veke - problemy, metody, resheniya» = Materials of the IV All-Russian Congress of the Parasitological Society of the Russian Academy of Sciences "Parasitology in the XXI century - issues, methods, and solutions". St. Petersburg, 2008; 3. 131-135. (In Russ.)

6. Uspensky I. Physiological age of ixodid ticks: aspects of its determination and application. J. Med. Entomol. 1995; 32. 751-764.

The article was submitted 14.05.2021; accepted for publication 15.10.2021

About the authors:

Lazarenko Evgenia V., Stavropol Anti-Plague Institute of Rospotrebnadzor (355005, Stavropol, Sovetskaya st., 13-15), Stavropol, Russia, biologist of the laboratory of medical parasitology, ORCID ID: 0000-0002-1748-9696, lazarenko-eva@vail.ru Zubairova Madina M., Stavropol Anti-Plague Institute of Rospotrebnadzor (355005, Stavropol, Sovetskaya st., 13-15), Stavropol, Russia, biologist of the laboratory of medical parasitology, ORCID ID: 0000-0002-9044-1808, gnusarevao@mail.ru Karsakov Nadyrsoltan T., Stavropol Anti-Plague Institute of Rospotrebnadzor (355005, Stavropol, Sovetskaya st., 13-15), Stavropol, Russia, Candidate of Biological Sciences, ORCID ID: 0000-0002-3207-6742, mila.nikova.72@mail.ru Dubyansky Vladimir M., Stavropol Anti-Plague Institute of Rospotrebnadzor (355005, Stavropol, Sovetskaya st., 13-15), Stavropol, Russia, Doctor of Biological Sciences, dvmplagua@gmail.com

Contribution of co-authors:

Lazarenko Evgenia V. - critical analysis of materials, review of research on the problem.

Zubairova Madina M. - identification of the causative agent of tularemia in the left material.

Karsakov Nadyrsoltan T. - critical analysis of materials, review of research on the problem.

Dubyansky Vladimir M. - scientific leadership, critical analysis of materials and the formation of conclusions.

All authors have read and approved the final manuscript.

Аннотация научной статьи по ветеринарным наукам, автор научной работы — Лазаренко Е. В., Гнусарева О. А., Шапошникова Л. И., Дубянский В. М.

Похожие темы научных работ по ветеринарным наукам , автор научной работы — Лазаренко Е. В., Гнусарева О. А., Шапошникова Л. И., Дубянский В. М.

STUDIES OF TICKS OF THE GENUS DERMACENTOR (ACARI; IXODIDAE) ON THE NATURAL OCCURRENCE OF TULAREMIA PATHOGEN IN THE CONDITIONS OF THE CENTRAL PRE-CAUCASIAN REGION